Un nuovo kit rapido, messo a punto da un team di ricerca della Nanyang Technological University (NTU) di Singapore, è in grado di rilevare oltre il 99,5% delle migliaia di varianti del coronavirus Sars-Cov-2 finora isolate in tutto il mondo. Lo hanno annunciato gli sviluppatori, comunicando di aver già depositato un brevetto per il nuovo test per la diagnosi di Covid-19, chiamato VaNGuard (da Variant Nucleotide Guard), con l’obiettivo di ottenere l’approvazione normativa da parte delle autorità competenti e commercializzarlo in collaborazione con le aziende produttrici di strumenti diagnostici. “Le mutazioni della sequenza genetica in nuovi ceppi possono impedire la capacità di alcuni test diagnostici di rilevare il virus – ha affermato Meng How Tan, professore associato della NTS – . Pertanto abbiamo sviluppato un test robusto e sensibile, in grado di identificare il patogeno anche quando muta”. Il test, descritto nel dettaglio in uno studio pubblicato su Nature Comunications, fa uso di uno strumento di modifica genetica, noto come CRISPR, ampiamente utilizzato nell’ambito della ricerca scientifica e, più recentemente, nelle applicazioni diagnostiche. In particolare, il sistema impiegato si basa sul sistema CRISPR/CAS, ovvero è associato a un enzima denominato enAsCAS12a, una variante di CAS12a che agisce come una “forbice molecolare”. L’enzima enAnCAS12a è infatti “programmato” per riconoscere una specifica porzione del materiale genetico di Sars-Cov-2 e tagliarlo dal resto del genoma virale. Questo meccanismo è il modo in cui l’enzima “rileva” la presenza del virus. “La programmazione – indicano gli studiosi – viene eseguita da due diverse molecole, chiamate Rna-guida, progettate per riconoscere siti specifici sul genoma di Sars-Cov-2”. Queste due molecole di Rna-guida riconoscono sequenze estremamente simili tra le varianti di Sars-CoV-2 ma che sono anche uniche per il virus. “La combinazione di due o più Rna-guida con l’enzima enAsCAS12a garantisce che se uno degli Rna-guida non riesce a condurlo verso il corretto segmento del virus a causa di una mutazione, l’altro Rna-guida può ancora “salvarlo” dalla mancata corrispondenza” ha aggiunto il professor Tan, prevedendo che ogni Rna-guida, dal punto di vista computazionale, riconosca oltre il 99,5% delle migliaia di varianti di Sars-CoV-2. Quando il virus Sars-Cov-2 o una delle sue varianti è presente in un campione, l’enzima enAsCAS12a viene iperattivato e inizia a tagliare anche un ulteriore materiale genetico contenuta nella miscela di reazione, inclusa una molecola marcata con un colorante fluorescente. In risposta al taglio, questa molecola inizia a brillare e il bagliore viene identificato da un lettore di micropiastre, uno strumento di laboratorio in grado rilevare e quantificare i fotoni luminosi emessi dalla molecola. “Se il virus è presente, la molecola si illuminerà. In caso contrario, significa che il virus non è presente e le forbici molecolari non saranno iperattivate”. Per rendere più semplice l’implementazione del test, gli sviluppatori hanno integrato una speciale striscia di carta, che funziona in modo simile a un test di gravidanza, e sviluppato un’app per smartphone che facilita ulteriormente l’interpretazione del risultato, sebbene il tutto sia decisamente intuitivo. La striscia va semplicemente immersa in una provetta contenente il campione nasofaringeo e la miscela di reazione. Nel caso sia presente il virus o una sua variate, sulla striscia di carta appariranno due bande colorate. In assenza, invece, ne comparirà una sola.
Chiamato VaNGuard, è un kit rapido in grado di riconoscere oltre il 99,5% delle migliaia di varianti di Sars-Cov-2 finora isolate in tutto il mondo: funziona come un test di gravidanza, fornendo il risultato in appena 30 minuti.