Perfil de expressão de genes que codificam enzimas envolvidas na assimilação de nitrogênio em genótipos de milho doce sob estresse salino | Unipar Social
Perfil de expressão de genes que codificam enzimas envolvidas na assimilação de nitrogênio em genótipos de milho doce sob estresse salino
Resumo: O cultivo do milho doce (Zea mays L.) tem aumentando, expandindo para áreas com alto potencial para a acumulação de sais no solo ou solos irrigados com fontes hídricas contendo alto teor de sais dissolvidos. A salinidade é um dos mais importantes fatores abióticos passíveis de gerar estresse em plantas, podendo alterar o crescimento e desenvolvimento, e a absorção e transporte de nutrientes, como o nitrogênio. O objetivo deste trabalho é avaliar o metabolismo do nitrogênio em genótipos de milho doce submetidos à estresse salino com base na análise da expressão de genes que codificam as enzimas nitrato redutase e glutamina sintetase. Para isto, serão avaliados dois genótipos de milho doce durante o período de germinação das sementes e nos estágios de desenvolvimento das plântulas.
O estresse será realizado pela exposição das sementes e plântulas a diferentes concentrações de solução de NaCl (50, 75, 100, 125 e 150 mM). O controle será feito com água destilada sem NaCl. Dez dias após transferência para solução completa de Hoagland, as plântulas serão tratadas com solução de NaCl. O período de estresse salino será de 3 dias. Para a avaliação da expressão dos genes da NR e da GS, plantas de milho doce serão irrigadas, 30 dias após a semeadura, com solução de NaCl (50, 75, 100, 125 e 150mM). As análises serão feitas durante 15 dias realizando-se as coletas nos tempos 0, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 12, 15.
O grupo controle será irrigado apenas com água destilada. Ao final do experimento as folhas e raízes das plantas submetidas às mesmas condições de estresse serão coletadas e armazenadas em temperatura de -80 ºC até a extração do RNA. O cDNA será sintetizado e a expressão dos genes será avaliada por qRT-PCR em tempo real. O nível de expressão do gene endógeno Ubiquitina5 (UBQ5) será utilizado como padrão de referência. O delineamento experimental será inteiramente casualizado. Os dados serão submetidos à análise de variância (P≤0,05) e as médias serão comparadas pelo teste de Tukey (P≤0,05).