As reduções iam muito bem quando, em 1637, os bandeirantes paulistas organizaram-se e formaram verdadeiros exércitos, investindo contra elas em busca de escravos para vender no território brasileiro.
A Redução de São Nicolau começou o movimento de resistência ao tratado de Madrid e que se espalhou por quase todo o Rio Grande do Sul. Para os índios Guarani essa ordem soava incompreensível por vários motivos.