Inventários fazem referência ao cultivo do algodão, da uva, da cana-de-açúcar e de árvores frutíferas. Os marmeleiros eram muito cultivados e a marmelada, exportada para outras capitanias. Desenvolveram a criação de suínos, carneiros e ovelhas. A escassez de moedas determinou a prática do escambo, variando de ano para ano as mercadorias utilizadas nas trocas: peles de animais, algodão, mel, cera, marmelada.
Os paulistas viviam lado a lado com o índio. A falta de mulher branca favoreceu a mestiçagem, com um intenso cruzamento entre os portugueses e as mulheres nativas, ocasionando o surgimento de mamelucos, legítimos ou bastardos. A população da Vila de São Paulo era, portanto, composta de brancos, mamelucos e índios. Assim, a língua portuguesa foi trocada pelo tupi, que predominou até o final do século XVIII. O tupi era a língua geral falada por todas as camadas sociais. Há registro de casos como o do inventário do senhor Brás Esteves Leme: o juiz de órfãos precisou de um intérprete para compreender as declarações de sua filha, Luzia Esteves, "por não saber falar bem a língua portuguesa". Também o bispo de Pernambuco levou um intérprete ao encontro que teve com o bandeirante Domingos Jorge Velho, em Palmares, "porque nem falar sabe".
Do século XVI ao XVIII, os apelidos usados pelos paulistas e os nomes dados aos acidentes topográficos por onde passavam eram quase todos de origem indígena: Anhangabaú, Butantã, Ibirapuera, Guarulhos, Itu, entre outros.
Ao isolamento econômico, provocado pela não integração aos mercados consumidores, juntou-se o isolamento ocasionado pelas condições geográficas. A presença da Serra do Mar dificultava o contato entre o litoral e o planalto, fazendo com que a Vila de São Paulo se tornasse refúgio de desertores, fugitivos da justiça e estrangeiros.
Trecho da capitania de São Vicente. Ao fundo, à direita, a Vila de São Paulo, com todas as elevações que a cercavam e que contribuíam para o seu isolamento em relação ao resto da capitania e da colônia. Mapa de João Teixeira Albernaz, 1631. Domínio público, Mapoteca do Ministério das Relações Exteriores
Tanto isolamento possibilitou aos paulistas desenvolver um sentido de autonomia, liberdade e até mesmo rebeldia frente às ordens metropolitanas. Exemplos desse tipo de comportamento aparecem no caso da proibição da captura de índios, como também no episódio lendário da Aclamação de Amador Bueno. Em 1641, com a notícia da Restauração Portuguesa, os paulistas teriam declarado sua independência, aclamando Amador Bueno como "rei de São Paulo". Entretanto, Amador Bueno recusou a perigosa homenagem e refugiou-se no Convento de São Bento até convencer os habitantes da vila a permanecerem fiéis ao novo rei português, D. João IV, o Restaurador.
Essa atitude de independência dos paulistas fez com que fossem chamados por um governador-geral de gente que "não conhece nem Deus, nem Lei, nem Justiça".
O isolamento da Vila de São Paulo produziu episódios como o da Aclamação de Amador Bueno, proclamado rei de São Paulo pela população local, em 1641. Óleo sobre tela (65 x 87 cm) de Oscar Pereira da Silva, 1931. Uso amparado pela Lei 9610/98, Museu de Arte de São Paulo