En 67-åring dödförklarades vid olycksplatsen på A7, en mil norr om Stow.
Hon hade kört en Volkswagen Polo som välte efter att ha varit inblandad i en kollision med en bil klockan 16:35 på tisdagen.
Polisen sa att en 95-årig kvinna, som var en av två kvinnliga passagerare i Audin, senare dog av sina skador på ett sjukhus i Edinburgh.
En talesman för Scottish Fire and Rescue Service sa att en förare och en passagerare var fast i en av bilarna när de kom till platsen.
Han sade att de fick hjälp av en förbipasserande sjuksköterska, som gav syre till en av dödsoffren, innan sjukvårdare anlände och de skadade togs bort från fordonet.
Polisen sa att den manliga föraren av Audin och en andra passagerare i hans bil fördes till Royal Inservary i Edinburgh men de inte upprätthålla livshotande skador.
Polisen stängde vägen i sex timmar efter kraschen och har vädjat om information från vittnen.
Sergeant Brian Smith sade: " Tragiskt nog har denna händelse resulterat i två kvinnors död, och vi arbetar nu för att fastställa exakt vad som hände.
"Jag skulle vilja att alla bilister som var på A7 nära Stow igår och har information som kan hjälpa till med vår utredning kontakter polisen omedelbart."
Två kvinnor har dött efter en trafikolycka i Borders.