Händelsen ägde rum på tåglinjen mellan Dunblane och Edinburgh den 14 juni kl. 10:30.
Brittiska transportpolisen sa att vakten ombord skreks och svor på aggressivt innan han spottade på av en passagerare.
Mannen beskrevs som gammal omkring 20 år gammal, av mager byggnad, med kort blont hår och en skotsk accent.
Han hade en grön kamouflagejacka, svarta smala jeans och tränare.
Polisen ber om information efter att en man spottat på en tågvakt efter en tvist om ett tågkort.