Abels Shipbuilders på Albion varvet på Bristols flytande hamn kommer att upphöra med handeln eftersom dess ägare går i pension.
Bristol City Council sade att det kommer att fortsätta att delvis hyra anläggningen som en reparationsanläggning.
Den sista båten "Forth Hope", satte segel på onsdag eftermiddag till Edinburgh, där det kommer att bli ett medicinskt fartyg.
Två företag Bristol Classic Boat Company och Slipway Co-operative kommer att fortsätta att bygga mindre båtar i staden.
Det råder osäkerhet om framtiden för torrdockan, och ägaren David Abels, 66, hoppas att den inte är omutvecklad eftersom den är "den sista kvar".
Abels har leasat Albion Dockyard, som har varit i drift sedan 1820, i 37 år.
Mr Abels uttryckte oro över att det skulle byggas om till bostadslägenheter och sade: "När man väl har tappat bort den är den borta. Bryggan är en viktig del av Bristol som är Bristol".
Bristol Ships Board sa att det inte längre skulle finnas en torrdocka i Bristol om Albion stängde.
Bristol City Council bekräftade att hyresavtalet hade gått ut för att lämna anbud och myndigheten samlar intresseanmälningar, bland annat en från SS Storbritannien Trust.
Robert Orrett, från Bristol City Council, sade: "Den som tar det nya hyresavtalet kommer att ha en avtalsenlig skyldighet för oss att se till att de större fartygen i hamnen som behöver underhållas fortsätter att ha en anläggning."
Inside Out West kommer att innehålla David Abels berättelse måndagen den 3 oktober. Programmet följde upp byggandet av fartyget under de senaste sex månaderna.
Den sista byggaren av stora fartyg i Bristol har stängt efter att dess sista fartyg seglat ut ur hamnen.