Talaren John Kirby sade att de två tjänstemännen - som inte har namngetts - blev tillsagda att ge sig av den 17 juni.
Kirby sade att tidigare samma månad anföll en rysk polis den amerikanska diplomaten nära USA:s ambassad i Moskva.
"Åtgärden var oprovocerad", sade han. Ryssland sade diplomaten arbetade för CIA och hade vägrat att visa ID-handlingar.
Förra månaden sa amerikanska tjänstemän att trakasserier mot amerikanska diplomater av ryska säkerhets- och underrättelsetjänster var på uppgång.
Ryssland har förnekat anklagelsen.
"Den 17 juni utvisade vi två ryska tjänstemän från USA för att svara på denna attack," Mr Kirby sade på fredag.
Han sade att detta var ett svar på attacken mot den amerikanska diplomaten den 6 juni.
Övergreppet inträffade efter det att den ackrediterade amerikanske tjänstemannen hade identifierat sig för polisen, sade Kirby.
"Åtgärden var oprovocerad och den äventyrade säkerheten för vår medarbetare. Det ryska påståendet att polisen skyddade ambassaden från en oidentifierad individ är helt enkelt inte sant."
Ryssland sade tidigare i veckan att den amerikanska tjänstemannen var en CIA-agent som hade vägrat att lämna sina identitetshandlingar och slog polisen i ansiktet.
"I stället för CIA anställd, som var förklädd, som vi förstår, kunde det ha varit vem som helst - en terrorist, en extremist, en självmordsbombare," ryska utrikesministern taleskvinna Maria Zacharova sade.
Ryska medier har också släppt en video om vad de säger var bråket mellan den amerikanska diplomaten och den ryska polisen.
Förra månaden sade USA att man hade tagit upp frågan om påstådda trakasserier av amerikanska diplomater i Ryssland direkt med president Vladimir Putin.
Washington sade att problemen började för två år sedan efter det att USA - liksom EU - införde sanktioner mot Ryssland för dess annektering av Ukrainas södra Krimhalvön och dess fortsatta engagemang i konflikten i östra Ukraina.
Särskilda händelser har inte officiellt avslöjats.
Men Washington Post sa förra månaden att de inkluderade inbrott i ambassadpersonalens hem, ombyggnad av möbler och till och med döda ett husdjur i familjen.
Ryssland har inte lämnat något officiellt svar, men ett uttalande till Posten förnekade inte anklagelsen och sade att det hade förekommit provokation från USA mot ryska diplomater.
Den tidigare amerikanska ambassadören i Ryssland, Michael McFaul, berättade för tidningen att medan hans familj bodde i Moskva följdes de rutinmässigt av säkerhetstjänsten som ville att han skulle veta att de var bevakade.
USA har relegerat två ryska diplomater som svar på en attack mot en amerikansk diplomat i Moskva, säger UD.