Den 33-1 skott, riden av David Mullins och tränad av Mouse Morris, triumferade på Aintree i april för att bli den första nybörjaren att vinna loppet sedan 1958.
Den nioårige, som ägs av Gigginstown House Stud, har två gånger återhämtat sig från ett sprucket bäcken.
"Vi ville inte skicka honom tillbaka till Aintree med en stor vikt, det skulle inte vara rättvist," sade Gigginstowns racing manager Eddie O'Leary.
"Han försåg oss med vår första Grand National och vi glömmer honom aldrig."
BBC hästkapplöpning korrespondent Cornelius Lysaght:
"Som den första Grand National vinnare för ägaren Michael O'Leary spirande Gigginstown House Stud samt den första nybörjare jagare att vinna loppet i nästan 60 år, Rule The World har sin plats i historien.
"Även om han sprang mycket respektabelt i Punchestown efter Aintree, hade O'Leary redan antytt att, efter att ha trotsat allvarlig skada för att nå en av de stora pinnacles, han hade kanske gjort sin bit.
"Vilken säsong för Gigginstown, med framgång på Aintree, i Irish National och Cheltenham Gold Cup, men till ett pris. Regel världen har pensionerats och det finns tvivel om huruvida Gold Cup vinnare Don Cossack kommer att tävla igen."
Årets Grand National vinnare Härskaren Världen har gått i pension.