Par har dekorerat Ponte Milviobron på Tibern med lås i flera år.
De är avsedda att symbolisera hjärtats låsning, inspirerad av en berättelse som beskrivs i en roman.
Stadsfullmäktige sade rost från låsen, som hänger av kedjor, skadar tyget på bron.
Seden är inspirerad av en bok av författare Federico Moccia där ett par placera ett cykellås runt en lyktstolpe och kasta nyckeln i Tibern.
Gesten var avsedd att symbolisera det par som för evigt låste sina hjärtan tillsammans.
Det tog fart och klungor av hänglås kan hittas nära andra landmärken i andra italienska städer.
Det är inte första gången myndigheterna har klivit in för att bryta isär låsen.
Förra året startade rådet en omgång hänglås efter klagomål från invånarna om att det motsvarade vandalism.
2007 införde Roms dåvarande borgmästare 50 euro (40 pund) böter för par som fann hänglås fästa vid bron.
BBC:s Romkorrespondent, Alan Johnston, säger att många människor i Rom gillar sedvänjan, och författaren bakom trenden har sagt att låsen borde lämnas ensamma.
Tusentals "kärleks hänglås" på en romersk bro tas bort med bultsaxar för att skydda den antika strukturen.