Hälso talesman Andy Burnham sade koalitionen hade skapat köer utanför praxis och omdirigerade människor till A&E.
Tory Health Secretary Jeremy Hunt sa att Labours siffror var fel och att out-of-times omslaget förlängdes.
Lib Dems sade också att Labours siffror - som erhölls genom en parlamentsfråga - var föråldrade.
Burnham tillkännagav analysen när hans parti presenterade en ny affisch, som omarbetar de konservativas "Labour is not working" bild från 1979 genom att skildra en enorm kö utanför ett väntrum med titeln: "Doktorn kan inte se dig nu."
Burnham sade: "I dag, över hela landet, kommer människor att möta frustrationen av att gå med i en kö för att se sin GP - på vissa platser raderna kommer att gå ut genom operationsdörren. Efter fem år av David Cameron, patienter vid hundratals operationer kan inte längre få en GP-tid när de behöver en. "
I andra valutvecklingar:
Denna fråga omfattar NHS-finansiering, tillgång till allmän sjukvård och social omsorg, särskilt äldre personer.
Politisk vägledning: Var parterna befinner sig
Labour har lovat 2,5 miljarder pund att betala för 8 000 fler allmänläkare, vilket garanterar utnämningar inom 48 timmar. Burnham sade att den senaste labourregeringen hade infört ett system med förlängd arbetstid som 2009 finansierade 77 % av operationerna för att öppna kvällar och helger.
Svaret från Commons tydde på att koalitionen hade minskat den förlängda tillgångsfinansieringen i England från 3,01 pund per patient till 1,90 pund per patient, vilket innebär att 72 % av operationerna fram till 2013/14 erbjöd förlängda timmar enligt programmet, en minskning med 590 pund enligt Labours tolkning.
Men hälsominister Jeremy Hunt sa att Labours siffror var fel, eftersom de inte tog hänsyn till premiärministerns Challenge Fund, som omfattar 1100 praktiker och hjälper 7,5 miljoner patienter att se en GP på kvällarna och på helgerna.
"Vi utökar detta system till att omfatta över 1.400 ytterligare metoder, hjälpa 10 miljoner extra människor vid denna tid nästa år," sade han, tillade att en konservativ regering skulle leverera "en verkligt sju-dagars NHS".
Pilotprojekt som finansieras av denna fond omfattar de testmetoder som t.ex. användning av teknik, hälsoappar och som ger tillgång till tjänster via videosamtal, e-post eller telefon.
Hunt skyllde på Labours "katastrofartade" omförhandling av NHS-kontraktet för allmänläkare 2004 för att det skapade problemet, som de konservativa säger "betyder att 90 % av de allmänpraktiserande läkarna slutade ge vård utanför arbetstid".
Lib Dems pekade också på en 50 miljoner pund GP Access Fund, som de säger hjälpte 1 147 metoder att förlänga sina timmar förra året.
Partival talesman Lord Scriven sade: "De liberala demokraterna är det enda parti som är redo att förbinda sig att spendera £ 8 miljarder extra NHS säger att det behöver överleva."
Samtidigt har Lib Dem-ledaren Nick Clegg redogjort för hur ett ingripande mot skattesmitare - och en ökad skatt på aktieägarnas utdelningar - skulle finansiera en ökning av den personliga ersättningen till 12 500 pund.
Partiet vill öka den punkt där människor börjar betala inkomstskatt till £11 000 nästa år, sedan till £12 500 till 2020.
Efter att ha tillbringat en stor del av måndagen med att kämpa mot de konservativa för att få äran för den höjning av tröskeln till 10 600 pund som hade kommit in över en natt fortsatte Clegg sitt angrepp på sina tidigare koalitionspartner.
"De liberala demokraterna har en plan för att ge ytterligare skattesänkningar till människor med låga och medelhöga inkomster genom att be lite mer från de rikaste", sade han.
"De konservativa... vill ge skattesänkningar till de rikaste genom att ta från de fattigaste. Det är skillnaden och det är valet som folk har fått när det gäller skattesänkningar vid detta val."
En ökning av det personliga bidraget till 1 000 pund skulle ge 27 miljoner människor en skattesänkning på 80 pund och innebära att 376 000 människor helt och hållet slipper skatt, däribland 157 000 pensionärer.
Både de konservativa och Lib Dems vill höja tröskeln till 2 500 pund, men Lib Dems säger att de skulle genomföra åtgärden på 1 miljard pund "mycket snabbare".
Premiärminister David Camerons fokus ligger på att attackera Labour, när han ger sig ut på en rundtur i hemländerna.
Han började i Skottland innan han besökte Nordirland, Wales och England och sade att han framförde ett enkelt budskap: " Vi har en månad på oss att rädda Storbritannien från [Ed Milibands] skuldberg; en månad på oss för att rädda Storbritannien från sina straffavgifter; en månad på oss för att rädda Storbritannien och brittiska familjer från hans anti-business och anti-aspirationsagenda.
"Med varje dag som går blir valet i det här valet tydligare och tydligare. Valet är inte bara ett val mellan partier, det är ett val mellan två olika typer av Storbritannien. En som lever inom sina tillgångar - eller en som lägger mer skuld på våra barn."
Prenumerera på BBC Val 2015 nyhetsbrev för att få en runda upp av dagens kampanj nyheter skickas till din inkorg varje vardag eftermiddag.
Siffror tyder på nästan 600 färre GP operationer i England öppna på kvällar och helger än tidigare 2010, Labour har hävdat.