Han sade i en tweet: "Jag gjorde inte, och har inte, några sådana inspelningar."
Dagarna efter att han sparkat Mr Comey i maj hade presidenten twittrat: "James Comey bättre hoppas att det inte finns några "band" av våra samtal..."
Han har varit pressad att producera banden mitt i undersökningar om påstådd rysk inblandning i valet.
House Intelligence Committee hade tidigare denna månad bett Vita huset att lämna över alla sådana inspelningar.
James Comey var chef för FBI utredningen om påstådd rysk inblandning i förra årets presidentval, och om Trump laget hade några kopplingar till Moskva, när han fick sparken den 9 maj.
Under dagarna som följde dök en rad historier upp i amerikanska tidningar med anklagelser om ett privat möte Mr Trump hade med Mr Comey i Ovala rummet i februari.
De inkluderade påståendet att presidenten hade bett herr Comey att lägga ned en utredning om avskedad nationell säkerhetsrådgivare Mike Flynn.
Det var i det sammanhanget som Trump skickade sin tweet, vilket antydde att det fanns band av samtalet.
Före kongressen tidigare denna månad bekräftade herr Comey att presidenten hade uppmanat honom att "släppa" alla möjliga åtal mot Flynn för att han ljög för federala agenter om ett samtal med den ryske ambassadören.
Han sade också att presidenten utan tvekan bad honom att försäkra sig om att han skulle vara lojal.
När han tillfrågades om han trodde att samtalet hade spelats in svarade herr Comey: "Herre, jag hoppas att det finns band."
USA: s president Donald Trump säger att han inte gjorde hemliga inspelningar av f.d. FBI-chef James Comey trots en tidigare antydan till motsatsen.