Protesten från Gorcha Janamukti Morcha-partiet kräver en separat stat för nepalitalande Gorkhas.
Ett stort antal paramilitära trupper och poliser har satts in för att upprätthålla freden i bergstrakterna.
Turism och teproduktion kommer att drabbas hårdast av strejken, säger lokalbefolkningen.
Strejken började kl 06:00 Indien tid (00:30GMT) på måndag och rapporter säger att det finns lite trafik på motorvägen som förbinder Darjeeling med staden Sliguri på slätterna i norra Bengal.
Omkring ett dussin anhängare av Gorcha Janamukti Morcha (GJM) hölls efter att de satte en motorcykel och en bil i brand i Rambi-området, sade Press Trust of India nyhetsbyrån.
Stödpersoner blockerade också vägar i regionen.
Darjeelings stad var till stor del öde med turister som höll sig borta från bergen.
Enligt rapporter protesterade 1 000 GJM-anhängare i Chowkbazar med partiflaggor, medan stora sammankomster också rapporterades från Jorbungalow, Mirik och Sukhiapokhri.
Vägarna barrikaderades också av GJM i städerna Kalimpong och Kurseong.
GJM har skrivit till premiärminister Manmohan Singh och uppmanat honom att acceptera deras krav på en separat stat som de vill ha vid namn Gorkhaland.
"Vår efterfrågan på Gorkhaland är gammal och generationer av vårt folk har kämpat för det. Nu vill vi ha det eftersom vi ser ingen framtid för oss i West Bengal," sade GJM generalsekreterare Roshan Giri.
Giri sade att den kongressledda regeringen i Delhi "överväger" att skapa en ny stat i Telangana som ska huggas ut ur den södra staten Andhra Pradesh, "det var på tiden att de erkänner Gorkhaland".
"Vår efterfrågan på en separat stat är lika gammal, lika berättigad och meningsfull som en separat Telangana", tillade han.
I juni 2011 undertecknade GJM ett avtal med den indiska regeringen och regeringen i den västbengaliska staten för större självständighet.
Överenskommelsen banade väg för inrättandet av en Gorkhaland Territorial Administration (GTA), en vald organ för Darjeeling kullar.
Det är inte klart om GJM nu kommer att avsäga sig sitt ansvar att driva GTA.
West Bengal Chief Minister Mamata Banerji har sagt att hon är upprörd över den återupplivade agitation och varnade för att det kommer att "tassed på ett tufft sätt om det blev våldsamt".
Gorcha-kampanjen för en separat stat inleddes i början av 1980-talet.
Men en uppgörelse som gav dem stor autonomi ledde till att rörelsen upphörde 1988.
För fem år sedan återupptogs dock rörelsen av Gorcha hardliners som säger att självständighetsarrangemanget inte har fungerat.
En 72-timmars strejk kallad av den största Gorcha etniska gruppen i Indiens västra bengaliska staten har gett liv till ett stopp i de teproducerande Darjeeling kullarna.