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  約翰的父親經營香料事業,是一位成功的商人。父親很希望約翰跟著他去學做生意,以後接手延續家庭的香料事業。可是,約翰對做生意實在沒有什麼興趣。約翰說千說萬,終於說服了擇善固執的父親,准許他去學習醫術,將來能夠懸壺濟世。1683年,約翰進入巴塞爾大學,主修醫科。但是,約翰打心底並不喜歡學醫。空閒的時候,他開始與他哥哥雅各布一起讀數學。後來,他們大多數的時間都用在研讀剛剛發現的微積分。在那個時代,他們不但最先地研讀與瞭解微積分,而且是最先應用微積分於各種問題的數學家。

  從巴塞爾大學畢業後,約翰遷移至日內瓦,在那裡教微分方程式。1694年,約翰與 (英語:Dorothea Falkner)共結連理。不久後,他成為格羅寧根大學的數學教授。1705年,由於岳父病重,想要與女兒共享天倫之樂。因此,約翰決定返回巴塞爾家鄉教書。在歸途中,他得到哥哥雅各布因患肺結核過世的噩耗。約翰原本去巴塞爾大學當希臘文教授的計劃,也因而有所改變。為了紀念雅各布對學術界的貢獻,巴塞爾大學聘請他繼承哥哥的數學教授職位。  在舉世矚目的牛頓-萊布尼茨辯論中,牛頓與萊布尼茨兩派人馬,因為誰是微積分的發明者的榮譽,產生了激烈地爭執 (英語:Newton-Leibniz debate)。約翰是萊布尼茨微積分的學生;他站在萊布尼茨這一邊。約翰甚至為萊布尼茨辯護;一些牛頓方法無法解答的問題,萊布尼茨的優秀方法可以給予圓滿的答案。但是,由於約翰對於牛頓的反對,以及他和笛卡兒跟隨者的合作,他大力支援笛卡兒的渦旋理論,同時又強烈地攻擊牛頓萬有引力定律。因此,牛頓理論在歐洲地廣泛接受被拖延了很久。

  雖然在約翰畢業之前,雅各布曾與約翰一起共事,畢業後不久,兩兄弟逐漸產生了一種嫉妒與競爭的關係。約翰嫉妒雅各布在大學裡崇高的位置。在大庭廣眾下或私底下,兩兄弟時常互相較勁。雅各布過世後,約翰的忌妒又轉移到丹尼爾,他的天才兒子。1738年,父子兩幾乎同時地發表了各自在流體力學的研究成果。約翰故意將自己作品的完成日期提前,使它比兒子的日期還早兩年,這樣他便能獲得優先的榮譽。

  1691年,約翰成功地解答了雅各布著名的懸鏈線問題,這使兄弟倆之間的緊張關係更猶如火上澆油。1696年,約翰提出了自己已解出的最速降線問題。在短短的兩年內,他接到五個解答,其中一個是雅各布給予的。約翰也曾經建議了一個流體永動機。

  有一段時間,伯努利被洛必達聘請為私人數學老師。伯努利簽了一紙合約。這合約給予洛必達特殊的權力,准許洛必達發表伯努利所有的研究。洛必達最先地寫成了一本的微積分教科書,其內容大多是伯努利的傑作,包括現世知名的洛必達法則。

  二年級之夢
約翰·伯努利(,1667年-7月27日-1748年-1月1日)出生於瑞士巴塞爾,是一位傑出的數學家。他是雅各布·伯努利的弟弟,丹尼爾·伯努利(伯努利定律發明者)與尼古拉二世·伯努利的父親。數學大師萊昂哈德·尤拉是他的學生。