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  她出生於貝納文特的巴利亞多利德,主要是在馬德里皇家城堡長大的。 她是奧地利國王腓力三世和他的妻子瑪格麗特的長女。 擁有西班牙和葡萄牙公主(因為她的父親是葡萄牙和西班牙的國王)和奧地利大公夫人的頭銜。 儘管出生在西班牙,但被稱為奧地利的安妮,因為西班牙的統治者屬於奧地利眾議院的高階分支,後來被稱為奧地利哈布斯堡王朝(在19世紀之前,這種稱呼並不常見。)

  1615年她與同為14歲的法國國王路易十三結婚。她父親給了她五十萬元的嫁妝和許多漂亮的珠寶,這次婚姻帶有政治婚姻性質,婚後夫婦二人都很不快樂,而從1620年開始兩人實際上處於分居狀態。路易十三最主要的權臣、紅衣主教黎塞留懷疑安妮對法國的作用。由於安妮的西班牙出身和她哈布斯堡王朝成員的身份,黎塞留一直擔心她對法蘭西背叛。黎塞留在多次反對路易十三的叛亂髮生後都指控奧地利的安妮是陰謀策劃者的同謀,然而這從未被有效地證實。  1643年路易十三去世,其後安妮承擔起為自己年幼的兒子、未來的“太陽王”路易十四攝政的艱鉅任務。她把內政和外交大權都交給了黎塞留指定的繼承人馬薩林。在馬薩林堅強的領導下,路易十四的王權壓倒了法國最後一批企圖與王室分庭抗禮的貴族。安妮與馬薩林作為路易十四的攝政和保護人,成功地鎮壓了1648年～1653年的投石黨運動,迫使包括孔代親王路易二世在內的大貴族變成國王溫順的臣屬。奧地利的安妮攝政時期的重要性在於,它為路易十四的君主專制奠定了基礎。  1661年,馬薩林去世,路易十四開始親政。奧地利的安妮退出了政治生活,在修道院中度過了餘年。一直有傳言說安妮曾與馬薩林祕密結婚。1666年1月20日,安妮在巴黎去世。她的兒子路易十四稱王太后即她的母親不僅是一位偉大的王后,也足以進入最偉大國王的行列。死因是乳腺癌。她的心遺贈給了聖寵谷修道院。

  在法國作家大仲馬的著名小說《三劍客》中描寫了奧地利的安妮的形象。
安娜·瑪麗亞·莫莉西婭·德·哈布斯堡(,1601年-9月22日-1666年-1月20日),又稱奧地利的安妮(),西班牙公主和奧地利哈布斯堡王朝大公夫人,是路易十三的妻子,1643年至1651年她的兒子路易十四少年時期的法國攝政王。 在她攝政期間,儒勒·馬紮然擔任法國首席部長。 對她那個時代的法國宮廷生活的描述強調了她與丈夫之間艱難的婚姻關係,她與兒子路易十四(Louis XIV)的親密關係,以及她對兒子對侄女和兒媳瑪利亞 · 特蕾莎(Maria Theresa)婚姻不忠的反對。她是17世紀歐洲最著名的女性之一。