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  本屆賽事一共有 76 支球隊參與,均是來自歐洲足協中 52 個成員國(除列支敦斯登外),每國被分配的席位是根據2008年歐洲聯賽排名。  由於衛冕球隊巴塞羅拿已透過其本身於聯賽成績得到分組賽席位,所以衛冕球隊該席位未不會被佔用。因此,於歐洲聯賽排名第 13 名成員國(比利時)的聯賽冠軍球隊會直接進入分組賽,第 16 名成員國(瑞士)的聯賽冠軍球隊會晉升至外圍賽第三圈,而第 48 名及第 49 名成員國(法羅群島及盧森堡)的聯賽冠軍球隊會於外圍賽第二圈開始角逐。  以下是今屆賽事每國球隊的參賽數目:

  以下是今屆賽事每階段的席位分配:  外圍賽第一圈(4 隊)  外圍賽第二圈(34 隊)  外圍賽第三圈- 冠軍組別(20 隊)  外圍賽第三圈- 非冠軍組別(10 隊)  附加賽- 冠軍組別(10 隊)  附加賽- 非冠軍組別(10 隊)  備註:  分組賽(32 隊)

  衛冕球隊

  在新賽制下,外圍賽階段會分成兩邊戰線進行。第一邊為國內聯賽冠軍,但未能直接進入分組賽的球隊;另一邊為未能奪得國內聯賽冠軍,並未能直接進入分組賽的球隊。  在兩邊戰線中,於外圍賽第三圈落敗的球隊,可繼續參與歐洲聯賽外圍賽決賽圈階段;而於外圍賽決賽圈落敗的球隊,則可繼續參與歐洲聯賽分組賽階段。

  外圍賽第一圈會有 4 支隊伍參加。

  外圍賽第二圈會有 32 支隊伍加入,聯同 2 支外圍賽第一圈勝出隊伍,共 34 支隊伍參加。

  於這一圈,賽事會被分成兩邊戰線:分別為聯賽冠軍組別及非聯賽冠軍組別。而於這圈落敗的一方可降至歐洲聯賽附加賽階段繼續歐洲賽事。!colspan="6"|聯賽冠軍組別 !colspan="6"|非聯賽冠軍組別

  這一圈賽事會繼續分成兩邊戰線(聯賽冠軍組別及非聯賽冠軍組別)。而於這圈落敗的一方可降至歐洲聯賽分組賽階段繼續歐洲賽事。!colspan="6"|聯賽冠軍組別 !colspan="6"|非聯賽冠軍組別

  分組賽將會有 22 支隊伍加入,聯同 10 支隊(5 隊冠軍組別+5 隊非冠軍組別)附加賽勝出隊伍,共 32 支隊伍參加。32 支球隊會被分成 8 組,每組 4 隊,每隊會與同組其他球隊對賽兩次。每組首 2 名會晉身淘汰賽階段,而第 3 名會降到歐霸杯三十二強繼續比賽。  如在小組中兩隊得分相同則順次序根據以下準則定出勝方:

  

  8 組於分組賽晉級的首名和次名球隊,會以抽籤形式分成 8 組以主客雙迴圈制對賽。其中,於分組賽同組與及來自相同國家聯會的球隊,不會於這圈被抽到互相賽。首名球隊會於次回合於主場出戰。

  8 隊於十六強勝出之隊伍將進行二回合主客制對賽。首回合賽事定於2010年3月30日/31日進行,次回合賽事則定於2010年4月6日/7日進行。

  準決賽首回合賽事定於2010年4月20日/21日進行,次回合賽事則定於2010年4月27日/28日進行。

  2009–10 歐洲聯賽冠軍盃決賽在2010年5月22日於西班牙的班拿貝球場舉行。這是首次於星期六上演歐聯決賽。

  以下是本賽季的歐洲冠軍聯賽射手榜,但並不包括外圍賽階段及附加賽。
2009–10年歐洲聯賽冠軍盃是第 55 屆的歐洲聯賽冠軍盃賽事,這一屆將會採用全新的賽制。而本屆決賽會在2010年5月22日,於西班牙馬德里的伯納烏球場舉行,是皇家馬德里的主球場,亦是首次於星期六晚上舉行。另外,十六強賽事也會由以往兩週分開至四周舉行。