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  格瑞那達選手基拉尼·詹姆斯在2012年倫敦奧運該專案上為該國奪得奧運首金,他這一年狀態良好,以44米08的成績排名該專案年度世界第二,僅次於美國選手拉肖恩·梅里特的43秒97,梅里特也是這一年內唯一一位在奧運前跑進44秒大關的選手。南非選手韋德·範·尼凱克該專案世界排名第三,同時也在2015年世錦賽上擊敗過詹姆斯,三位選手將在此次比賽中向金牌發起衝擊。波札那選手巴博洛基·特貝以及千里達及托巴哥選手Machel Cedenio也具備爭奪獎牌的實力。  詹姆斯在預賽中跑出44秒93的成績,這一成績在預賽所有選手中排名第一位,Cedenio則以44秒98的成績位列第二,除此之外沒有選手在預賽中跑進45秒大關。  在半決賽第一組中,詹姆斯跑出了44秒02的個人賽季最好成績,在之後的第二組中,Cedenio獲得小組第一,範·尼凱克以小組第二的身份晉級,第三組中,詹姆斯的隊友Bralon Taplin也以小組頭名順利晉級。  在決賽中,詹姆斯、梅里特和範·尼凱克分列第六道、第五道和第八道,三人在出發後位列前三位,在第一個轉彎過後,範·尼凱克領先其他選手2米左右。梅里特位列第二名,而詹姆斯則在轉彎期間縮小了與梅里特的差距。在最後階段,範·尼凱克加快了速度並將其他選手甩開,而詹姆斯則反超梅里特升至第二。最終,範·尼凱克以43秒03衝過終點,這一成績打破了美國選手邁克爾·約翰遜在17年前創造的世界紀錄,詹姆斯以0.73秒之差收穫銀牌,無緣衛冕,梅里特以43秒85收穫銅牌。

  以下是比賽開始前的世界紀錄、奧運紀錄、2016年最好成績以及各大洲紀錄:  以下是比賽期間重新整理的紀錄:  以下是比賽期間重新整理的國家紀錄:

  

  晉級規則:每組前三名(Q)以及這之外所有選手當中成績最好的前三名(q)晉級下一輪。

  晉級規則:每組前兩名(Q)以及這之外所有選手當中成績最好的前兩名(q)晉級決賽。
2016年夏季奧林匹克運動會田徑男子400米比賽於2016年8月12日至14日在巴西里約熱內盧阿維蘭熱奧林匹克體育場舉行。