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  該規則經常被用於餅乾等零食。支援該規則的人認為,落地五秒內有害細菌無法感染食品。例如:將糖果遞給朋友時,糖果不慎失手落地。這時,負面情緒會籠罩在周圍,若此時立刻拾起糖果,一切就會像沒有發生一樣。  五秒規則通常不適用於以下情況: 雖經多方考證,依然不知道該規則的發明者是誰。  有實驗表明,乾淨的地板是安全的(參見相關研究)。不過,五秒內細菌不會從髒地板轉移到食物上的想法是錯誤的。因為引起食品汙染的核心,不是塵埃,而是那些肉眼看不見的病菌。這兩個因素雖然在通常情況下是有關聯,但並不具有絕對關係。比如:打掃得很乾淨的醫院的地板,比起其他看起來很髒的地方,可能會有更多的細菌。

  五秒規則的流行病學研究,於2003年在伊利諾伊大學的香檳分校(University of Illinois at Urbana-Champaign,UIUC)為期7周的實習期間展開。由當時的高三實習生吉利安·克拉克(Jillian Clarke)主持進行。克拉克同期望成為博士的梅雷迪恩·艾格(Meredith Agle)一道,取樣了校園內的各種地板,並在顯微鏡下進行觀察。他們發現地板的大部分地方沒有細菌。總結眾多的研究結果,他們認為,食物落在乾燥的地板上是安全的。  不過,克拉克想要驗證在髒地板上五秒規則是否正確。在實驗室內,大腸桿菌在光滑的地板和粗糙的地板上都廣泛存在。將橡皮軟糖和餅乾在地板上放置不同的時間,然後再顯微鏡下觀察他們的表面。研究發現,所有的食品都粘上了相當數量的細菌,即便它們與地面接觸的時間少於五秒。克拉克的結果是對五秒規則的有效反證。  在該研究中,他們抽樣調查了周圍人的看法。發現56%的男性和70%的女性都知道五秒規則。其中,女性比男性更容易接受。而接受五秒規則的人認為,餅乾和糖果等食品比花椰菜和綠花椰菜等更適用於本規則。  克拉克的研究,獲得了2004年度的搞笑諾貝爾獎公共衛生獎。  但正確的版本是:細菌在第一秒時未能看到食物,第二秒時思考用什麼步伐爬上食物,第三秒時開始爬上食物。但當細菌在爬上食物中途感覺到食物正被拾起,便會立刻跳下以求生,(已爬到目的地的細菌則不會離開),所以三秒規則是正確的,這也解釋了為何有時會肚痛,有時就不會,一生這一切都是取決於細菌的意願。  2007年的一項研究表明,木頭、瓷磚和尼龍地毯上的沙門氏菌在曝露於乾燥環境下28天后依然能旺盛地繁殖。在曝露八小時後,細菌照樣能在五秒內汙染麵包和博洛尼亞臘腸。食物與瓷磚和尼龍地毯接觸長達1分鐘後,這種細菌的汙染會增加十倍。  探索頻道(Discovery Channel)的《流言終結者》("英語:MythBusters")節目曾對五秒規則進行調查。結果發現,哪怕是兩秒鐘,都足夠使得食物被汙染。

  當食物遭受汙染或令人感到不安但又想吃時,世界各國都有一些用來自我催眠、緩和氣氛的慣用句。
五秒規則或稱、五秒鐘理論、五秒不沾菌、五秒鐘定律等,是一種世界範圍內廣泛存在的迷信說法。是一種判斷掉在地上的食物是否可以食用的方法。其核心理論闡述為:如果食物掉在地上後五秒內被拾起,則該食物可以安全地食用。根據說法,這是因為細菌或任何有害物質,在五秒內是很難對物質(食物)進行滲透。也有人認為這種說法單純只是為了減少人們對食物的浪費。