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  九五式戰鬥機在中日戰爭前已配備給駐滿州國的關東軍,中日戰爭開始後,日本海軍航空隊主打華東和華南而日本陸軍航空隊的主戰場在華北,配備九五式的日本陸航首先進駐錦州和山海關。7月11日支援陸軍地面部隊攻打天津,8月下旬進駐張家口和高陽的機場,直接威脅山西太原和大同。9月19日,日軍九五式和國軍戰機在大同相遇,日軍宣稱擊落四架中華民國空軍戰機,9月21日,日軍15架九五式和9架九三式重轟炸機一起空襲太原,國軍7架霍克II迎敵,國軍飛行員陳其光擊落了作為日機隊長的三輪寬。  10月1日,關東軍第2大隊和剛從日本本土調來的第8大隊所屬的九五式又進犯太原,日軍宣稱擊落兩架中國戰機和一架轟炸機,不過國軍否認當日有損失,12月攻下南京後,日軍九五式進駐南京大校場機場,之後以南京做基地出擊華中,包括支援徐州會戰。  1938年蘇聯志願航空隊來華參戰,其使用的SB-2轟炸機數度轟炸南京的日軍機場以除去其對華中的威脅,3月10日,3架SB-2被九五式全部擊落,3月14日在蕪湖上空一架SB-2被兩架九五式擊落,機上所有蘇聯飛行員都成為俘虜,5月11日,10架九五式低飛掃射毫州機場的5架國軍I-16(當時國軍還以為是日本海軍九六式戰鬥機)。  1938年7月,武漢會戰開始,8月21日,6架九五式偷襲武漢機場,中國空軍和蘇聯飛行員駕駛I-16緊急升空迎敵但不幸地三名中國空軍隊長陣亡,10月2日,中蘇空軍轟炸羅山地區的日軍炮兵陣地以支援田家鎮攻防戰,日軍三架九五式擊落了兩架SB-2轟炸機,第二日,7架原本要轟炸田家鎮外圍日軍船隻的SB-2轟炸機在羅山上空遇上九五式,慌張之下各自逃命(由於和護航的I-16失散),結果只有三架安全飛回衡陽機場,而機槍射手宣稱擊落了一架九五式。  10月底武漢會戰結束,日軍攻佔武漢,九五式改為負責武漢的空防,1939年發生日蘇諾門罕戰役,雖然駕駛九五式的日軍飛行員早在中國已和I-15以及I-16交過手,但明顯的參加此戰的蘇聯飛行員技術更高,九五式竟處於劣勢,之後被九七式戰鬥機取代。

  早在中國戰場時,九五式已被國軍飛行員誤以為是義大利菲雅特CR.32戰鬥機,因為兩者外表相似,而在1940年,日本軍方為了拍攝在中國戰場的宣傳電影《燃燒的天空》,把九五式改為中國國民黨青天白日徽去扮演中華民國空軍的CR.32戰鬥機,而在戰後此片竟然反客為主成為中國抗日電影《中國之怒吼》裡面中國戰機大戰日軍戰機的片段。

  當時在日本皇軍當中有另一種九五式戰鬥機,中島A4N九五式艦上戰鬥機,兩者常被混淆,因為都是在日本皇紀2595年(1935年)被採用,故都被稱為九五式。
九五式戰鬥機 (簡稱:九五戰、盟軍代號:Perry) 是日本陸軍最後的雙翼戰鬥機。1934年,中島和川崎爭奪作為日本陸軍新式戰鬥機,雖然中島的Ki-11單翼戰鬥機比川崎的Ki-10雙翼戰鬥機速度更快,但Ki-10有著更佳的格鬥和爬升效能而中標,日本陸軍把Ki-10命名為九五式戰鬥機,因為1935年是日本皇紀2595年,九五式戰鬥機可說是九二式戰鬥機的改良型,大幅減輕其重量和風阻以及採用金屬製三葉螺旋槳而成。