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  延續第三集的劇情,T病毒爆發後的四年。本來是由安布雷拉公司研製出來對抗神經性疾病與延遲衰老的病毒,但是卻發現它的副作用是復活人類的死細胞並將他的宿主變成嗜殺成性的喪屍。這個病毒席捲全球,不斷進化的喪屍捕獵剩下為數不多的倖存者,將地球變成了一個恐怖世界。  艾莉絲帶著自己的克隆人來到日本的安布雷拉公司的大本營,將所有人都解決,唯獨威斯卡逃脫,用炸彈殺死了所有克隆人,並且將艾莉絲的超能力“回收”。但在打鬥的過程中沒人控制飛機,導致飛機撞上山峰爆炸,艾莉絲倖存下來。  幾個月後,T病毒更大蔓延,導致艾莉絲得面對更多喪屍,同時要帶領所有倖存者尋找庇護。經過東京毀滅性的一戰後,艾莉絲駕駛小型飛機遠赴阿拉斯加州的城市艾凱迪亞,在這片世上唯一一處未被變種病毒蹂躪的荒原上搜尋生還者,卻看不見人影,正當艾莉絲絕望的時候,有人突然襲擊她。艾莉絲打暈她之後,才發現原來是昔日的好友克萊兒。身上還掛著一個類似蜘蛛的控制器,艾莉絲覺得不妥就毀了它。克萊兒醒來後,艾莉絲詢問她事因,發現她離奇地記憶全失。艾莉絲帶著克萊兒前往頹垣敗瓦的洛杉磯尋找倖存者,在洛杉磯的監獄裡發現等待救援的倖存者。經過調查後得知,艾凱迪亞是一艘船。克萊兒依稀記得曾經有人接應他們,但始終想不起為什麼只剩下她一人。不久之後,艾莉絲在準備沐浴時,發現監獄地板已經被喪屍打出一個地底通道,監獄不再是安全的。於是眾人決定前往艾凱迪亞船上調查,想起在被困在監獄的牢籠裡的神祕男人說有辦法逃離這裡,但倖存者的首領盧瑟認定他是危險人物所以遲遲不放他出來,但為了逃離這裡,艾莉絲將他放了出來。才發現原來他是克萊兒的哥哥克里斯·瑞德菲爾。曾是一個軍隊的首領,到洛杉磯是被人襲擊,醒來後就被困在監獄的牢籠裡。  克里斯帶他們去監獄裡的地下武器庫獲得槍械後,眾人想啟動軍人留下的坦克車,卻發現部分器件未安裝。牆門外突然出現生化武器—巨斧神打破了他們的防衛,沒辦法之下,艾莉絲等人唯有從監獄裡的沖澡房,曾被喪屍入侵的洞穴逃脫。在最後關頭,盧瑟被喪屍圍著。失去聯絡,艾莉絲唯有帶著克萊兒兄妹兩人到艾凱迪亞船上,發現船上有上千人的名單卻看不見所有人的蹤影。三人進行調查時,竟發現有保護傘公司的標誌,原來一切都是保護傘公司的陰謀,他們向外公佈這裡沒受感染,是因為他們需要引倖存者前來,然後用他們的身體來研究生化武器。唯獨克萊兒勉強逃脫,但已喪失記憶。  艾莉絲三人來到底部,看見所有倖存者都被困著,並且把他們都洗腦,令他們喪失記憶。艾莉絲釋放倖存者的時候發現尾部有大量的血跡,艾莉絲覺得保護傘公司不僅僅只是研究人體這麼簡單,於是她走進更深的房間,發現完好無損的威斯卡。威斯卡告訴艾莉絲,在東京墜機時,威斯卡受了重傷,臨死之際,是T病毒令他復原,但其病毒令他成為怪物,還嘗試控制著自己,必須要吸收人類的DNA來維持自己的意識,這也是就船上沒有什麼人的原因,不是被吃掉就是逃離了。並且引誘唯一和T病毒完美融合的艾莉絲前往艾凱迪亞船,就是為了吸取她的DNA。艾莉絲等人極力反抗,不料威斯卡擁有了強大的再生能力,成為不死的怪物,逃脫之際還想用炸彈毀了艾凱迪亞船。卻被艾莉絲掉包,把彈核放進威斯卡的飛機上。炸彈啟動後,威斯卡隨著自己的陷阱爆炸。  最後,艾莉絲等人決定履行這艘船的原意,接納更多的倖存者。正當以為一些都結束的時候,艾莉絲之前的好友—吉兒·範倫婷帶領一群由人工智慧電腦—紅後的軍人前往艾凱迪亞船想毀了它。而吉兒的身上也有掛著曾經嘗試控制克萊兒,導致她喪失理智和記憶的控制器。
2010年的3D科幻動作恐怖電影,是《惡靈古堡3:大滅絕》的續集,由保羅·安德森創作並執導。本片是改編自電子遊戲生化危機的系列電影中的第四部,也是系列中第一部3D格式發行的電影。