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  條約共有四款,主要內容包括蘇日雙方保持和平友好關係,相互尊重對方之領土完整,不予侵犯;如果締約一方成為第三者的戰爭物件,另一方應在整個衝突過程中保持中立。本條約自雙方批准之日起生效,並保持五年有效期。如果條約雙方都未能在條約到期一年前宣佈無效,則視為自動再延長五年。  在簽約當天,蘇日兩國發表共同宣告,宣告中關於滿蒙問題雙方再次確認:蘇聯保證尊重滿洲國的領土完整和不可侵犯,日本保證尊重蒙古人民共和國的領土完整和不可侵犯。  條約在形式上,避免讓蘇軍和日軍發生直接軍事對壘。對於蘇聯,避免了在東西兩面同時受到1940年形成的軸心國對其可能的軍事進攻的威脅;對於日本,此條約的簽定,使蘇聯在中日戰爭中,由支援中國轉向中立的立場。使日本可以專心在華投入大量兵力擴大戰爭。在珍珠港事件爆發前,成為中國抗戰進入最困難時期的重要國際因素之一。日本利用蘇聯的保證,擴大了對中國、南洋的侵略。蘇日中立條約的簽訂,蘇聯逐步停止對華官方援助。 使中國至此失去了僅有的外界官方援助,陷入了孤立無援、最艱苦卓絕的階段。直到同年底珍珠港事件導致太平洋戰爭爆發,美國對日宣戰後公開援華,中國抗戰的外部國際形勢才得以緩解,走出最低谷。此外,《蘇日中立條約》的簽訂客觀上加劇了中國抗戰勢力的分裂,促使中國國內抗戰局勢的複雜化。

  1941年元旦,日本駐蘇大使建川美次提議:兩國可以訂立互不侵犯條約。因蘇聯所提出的各項條件均不能使日本同意,談判結束。1941年3月12日外相松岡洋右赴蘇訪問。3月22日,松岡一行抵達莫斯科,與蘇聯多位領導人會晤。

  

  日蘇條約簽字後第二天,國民黨中常會研討蘇日協定,會議多數意見主張應避免發表刺激性言論刺激蘇聯,但滿蒙問題應明確表態。當日中華民國外交部長王寵惠發表宣告,該宣告只針對蘇日共同宣言,而不涉及中立條約。宣告指出: 4月15日,國民黨中央宣傳部部長王世傑召集宣傳口負責人談話,要求各方言論“務極慎重,以免造成反蘇之印象”。  4月19日,蔣介石約見蘇聯駐華大使潘友新,表示:“蘇日締結此約,自表面上觀之,蘇聯已與日本妥協矣,此在餘個人固能對蘇瞭解,惟一般民眾與前方軍隊,則不免受其影響。”“吾人對於史達林先生個人之景仰,絕不因此次之條約而減少也。”

  4月15日,重慶中共《新華日報》社論「論蘇日中立條約」: 4月16日,由毛澤東起草的「中國共產黨對蘇日中立條約發表意見」: 4月27日,延安中共《解放》期刊「蘇日條約之偉大意義」:

  

  《蘇日中立條約》的簽訂,使得中國失去了蘇聯的官方援助。抗戰爆發四年以來,中國至此失去了僅有的外界官方援助,陷入了孤立無援、最艱苦卓絕的階段。直到同年底珍珠港事件導致太平洋戰爭爆發,美國停止了自1931年以來長期地對日本侵華的戰略物資援助,而改為對日宣戰、並轉而開始援華,中國抗戰的外部國際形勢才得以緩解,走出最低谷。一種觀點廣泛傳播,西方社論作者、評論家和一般知識階層幾乎普遍接受:中國共產黨根本不是真正的共產主義者,他們只是一些土地改革家而已;被歪曲有關共產黨之觀點成為美國國務院和白宮接受之教條,面對蔣介石本人所作之宣傳卻沒有什麼效果。

  日本不顧納粹德國的反對而獨自與蘇聯媾和,極大地破壞了軸心三國同盟。《蘇日中立條約》簽訂僅僅兩個月後,6月22日納粹德國在沒有通知日本的情況下就發動突襲蘇聯的巴巴羅薩行動,二戰蘇德戰場爆發。

  波茨坦會議時,出於蘇日中立條約還在有效期的理由,要求美國政府出具正式的請求蘇聯出兵攻擊日本的檔案。

  1941年夏,在德國閃電戰攻勢下蘇聯喪失大片領土接近崩潰,日本大本營推測蘇聯即將崩潰,在滿洲國增加了四個師的兵力,並令關東軍進行軍事演習,撕毀條約準備北上進攻蘇聯遠東地區。但德軍於冬天的失敗使日本放棄了北上的念頭。  1945年4月5日,蘇聯單方面宣佈不再謀求續約,並更於8月出兵攻擊日本關東軍。
《蘇日中立條約》,又稱日蘇中立條約、蘇日互不侵犯條約、日蘇互不侵犯條約(,),指蘇維埃社會主義共和國聯盟與日本帝國於第二次世界大戰期間為了互相保證戰事維持中立而於1941年4月13日所簽訂的條約,由蘇聯人民委員會主席兼外交人民委員莫洛托夫與日本外相松岡洋右在莫斯科簽署,條約有效期為五年的條約,於同年4月25日起生效。 1945年4月5日,莫洛托夫在莫斯科召見日本駐蘇大使佐藤尚武,宣佈蘇聯在《蘇日中立條約》截止後將不再謀求續約,8月日本投降前夕,蘇聯對日宣戰,並派兵進入被關東軍佔領的中國東北地區與日本北方的島嶼。