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  不同來源的乳糖酶催化反應的最適溫度和最適pH都有所差別,其中人體中的乳糖酶的最適pH為5.8。

  乳糖酶可以從產乳糖酶酵母("Kluyveromyces fragilis"和"Kluyveromyces lactis")以及一些真菌(如黑麴黴和米麴黴)中提取。

  乳糖酶最主要的商業用途是分解牛奶中的乳糖,以適合罹患乳糖不耐症的人群飲用。冰淇淋的生產中也要用到乳糖酶。這是因為葡萄糖和半乳糖的甜度比乳糖本身高,使用乳糖酶使得冰淇淋具有更好的口感;另一個原因是乳糖酶在冰淇淋的低溫下會結晶,而其分解產物則可以保持液態,使得冰淇淋具有光滑的質地。乳糖酶還被用於將乳清轉化為糖漿。

  在分子生物學實驗中,乳糖酶被用於對含有質粒的大腸桿菌或其他細菌進行藍白斑篩選,以獲得帶有正確質粒的克隆。
乳糖酶(英語:lactase)是屬於β-半乳糖苷酶家族的一種糖苷水解酶,它參與將屬於雙糖的乳糖(lactose)水解為兩個單糖──半乳糖(galactose)和葡萄糖(glucose)。在人體中,乳糖酶以二聚體形式大量存在於小腸的一類上皮細胞的刷狀緣(Brush border)細胞膜中。乳糖酶對於人體消化牛奶中的乳糖是必不可少的;缺乏這種酶就會導致乳糖消化不良。