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  於歌劇開始前,兩情相悅的西班牙王子Don Carlo及法國公主Elisabeth正在計劃著他們的婚事,這個時候王子Don Carlo被父王Philip II傳召。(這一幕就是在4幕版本中被刪去的楓丹白露(Fontainebleau)場景,亦即是5幕版本的第1幕。)

  

  在San Juste修道院內,一眾僧侶為帝王Charles V的亡靈祈禱。他的王孫Don Carlo這個時候進入,因為他的愛人要與他的父王結婚,心中感到痛苦。一個貌似先王的僧侶藉上帝之名給予Don Carlo安慰。Don Carlo的友人Rodrigo(Posa的侯爵)剛剛從受壓制的佛蘭德斯(Flanders)回來。他為當地正在受苦的人民前來向親王請求援助。Don Carlo向他透露他深愛Elisabeth。Rodrigo鼓勵他離開西班牙,前往佛蘭德斯。一眾王室成員步入。

  在San Juste修道院旁的花園內,公主Eboli唱著Nei giardin di bello,關於一個摩爾國王及其一直忽略的戴著面紗的迷人妻子。Elisabeth這個時候步入,Rodrigo送上Don Carlo從法國寄來的信件。在Rodrigo的促請下,Elisabeth答應前往進見王子。這個時候,Eboli以為Don Carlo深愛著的是她自己。  Don Carlo請求Elisabeth向國王Philip要求將他自己派往佛蘭德斯,她立即答應。Don Carlo再次向她表示愛意,但Elisabeth拒絕,因為他們現在已經是繼母繼子的關係。當親王離開後,國王發現王后身邊沒有侍從,於是命令王后的侍女返回法國。國王前往Rodrigo處,但拒絕聽取有關援助佛蘭德斯的要求。雖然如此,國王信任Rodrigo,並忠告他小心異端裁判所的法官(inquisitor)。

  

  Don Carlo收到一張似乎是Elisabeth的字條,請他深夜在王后的花園相見。但字條其實是Eboli所寫。當晚,Don Carlo向她表示愛意(Don Carlo以為她是Elisabeth),Eboli感到十分高興,但後來她驚覺原來Don Carlo以為自己是王后Elisabeth,Don Carlo愛的是王后,而不是自己。這個時候Rodrigo來到,Eboli威脅會將Don Carlo和Elisabeth之間的戀情告知國王。Rodrigo請Don Carlo相信他,把任何政治敏感的檔案交託給他保管。

  被異端裁判所判罪的僧侶被帶到刑場準備燒死,在另一邊,國王和王后的加冕儀式正在進行。Don Carlo及法蘭德斯代表前來打斷加冕儀式,促請國王放過那些僧侶。但在異端裁判所法官的慫恿下,國王下令將他們逮捕。Don Carlo阻止他們前行,並且拔劍抵抗國王。在沒有人敢上前制服他之制,Rodrigo上前要求Don Carlo把劍交給他,Don Carlo投降。國王冊封Rodrigo為公爵。而異端裁判所的判決開始。

  

  國王Philip哀嘆著Elisabeth原來從來沒有愛過他(歌曲:Ella giammai m'amo)。異端裁判所的人員步入。國王問道他是否應該將自己的兒子賜死?異端裁判官迴應說上帝亦將自己的兒子犧牲了。國王忿怒地說Rodrigo才是異端裁判所真正想剷除的目標。Elisabeth進入,查問有關她遺失了的首飾盒。國王Philip在飾盒內發現Don Carlo的肖像,並譴責Elisabeth不忠。Eboli和Rodrigo進入,Eboli對Elisabeth感到歉疚,不單是因為她愛上了Don Carlo,而且她自己亦曾經是Philip的情婦。Elisabeth給Eboli兩個選擇:一是離開國家,二是進入進入修道院。Eboli決心要營救Don Carlo(歌曲:O don fatale)。

  Don Carlo在獄中,Rodrigo告訴他將會得救,但他自己則受到之前Don Carlo交託給他的檔案所牽連,難逃一死。隨即,Rodrigo被異端裁判所的殺手暗殺。Rodrigo臨死前告訴Don Carlo,Elisabeth會在明天於San Juste修道院與他相見。國王Philip來到,釋放他的兒子。Don Carlo抵抗國王。由Eboli 煸動,起來支援親王的暴亂群眾威脅國王。異端裁判所人員隨即將他們制服了。

  在San Juste修道院,Elisabeth在先王Charles V的墓前祈禱(歌曲:Tu che le vanità)。Elisabeth 即將辭世,Don Carlo必須順從他的命運。Don Carlo這時候出現,向Elisabeth作最後道別。國王及異端裁判官到達,國王將會把他的兒子交給異端裁判所。這個時候,在先王Charles V的墓裡,走出了一個僧侶,帶領Don Carlo逃到安全的地方。 故事大綱的英文原文由Simon Holledge撰寫,刊載於Opera japonica,英文原文已獲授權轉載於英文維基。此為中文翻譯版本。

  法文原版為5幕,義大利文版為5幕及4幕版本。
《唐·卡洛》(法語:、義大利語:)是一部5幕歌劇,由威爾第作曲,法文劇本由Camille du Locle及Joseph Méry編寫,改編自席勒的戲劇《西班牙王子唐·卡洛斯》(Don Carlos, Infant von Spanien),而這一版本於1867年3月11日在巴黎歌劇院(Opéra)首演。