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  經營手電的賴瑞·戴利(Larry Daley,班·史提勒飾)事業有成後,收到「老朋友」牛仔傑迪戴亞(Jedediah,歐文·威爾森飾)求救,再度回去博物館。原來首集的美國自然歷史博物館因應時代潮流,而把這批老舊展覽品,運送到世界最大的史密森尼博物館庫存,使得新博物館原有的展覽品也隨之全數復活。賴瑞得趕在破曉前,解決問題讓博物館回覆原狀。

  有別於首集的美國自然歷史博物館,本片場景轉移至位於美國首府華盛頓特區史密森尼博物館,是全球最大的博物館群兼研究中心,主要在旗下的美國國立自然歷史博物館拍攝。史密森尼研究中心首次開放電影實景拍攝,不過必須在開放時間進行,因此拍攝過程中,得面對許多遊客現場圍觀。  此外,考量動作打鬥追逐戲不適合於館內拍攝,許多場景另外搭景而成,如博物館大廳、國家航空與太空博物館、史密森尼總部城堡和林肯紀念堂,以及館內的火箭、阿波羅太空船和萊特兄弟的古董飛機皆重新仿製。

  該片得到影評混合平均評語。電影評論網站爛番茄,基於119篇評論中43%給予正面的評價,平均得分為5.1/10。爛番茄網站裡的「頂尖影評」統計,包含來自報章雜誌、廣播電視與網路的知名影評,基於當中27篇評論,影片整體得到33%的正面評價。在Metacritic其中一個標準化評價滿分為100的影評,根據27篇總和,電影平均分數獲得44分。  儘管混合評語來自各方影評,大多數評論家稱讚艾美·亞當斯和漢克·阿扎里亞的表演。《芝加哥論壇報》的麥可菲利浦授予電影3顆星指出,“......她實為驚人——銀光幕上亮眼演出。”《娛樂週刊》的歐文·吉博曼也給此片「B+」的評分,表示“亞當斯賦予了本片豐富的生命力。”儘管《電視指南》的佩瑞·塞伯特給電影2顆星,仍表示「感謝阿扎里亞,抓取漫畫時機的大師。收納古怪角色的當他的爪牙是有趣的點,像是芝麻街的奧斯卡和達斯·維德加入他的團隊。」《好萊塢報導》的麥可·瑞奇薛芬和《紐約時報》的A.O.史考特都喜愛兩位的演出。然而,大多數的電影評論家批評其過度使用的特殊效果,斯科特·托比亞斯於《影音俱樂部》指出,這部電影是“一個令人費解的情節和為特效而特效的擁擠安排。”

  

  在法老王開啟通向冥界的門以後,他的地下士兵魚貫而出。由於法老王之門內發出巨大的光芒,走出士兵的影子方向是遠離門的。而站在與門不遠的同一直線上的拉瑞的影子,卻是朝向法老王之門,顯示出其身後有不該反映在鏡頭中的光源。
《博物館驚魂夜2》(英語:"Night at the Museum: Battle of the Smithsonian"),2009年美國冒險喜劇電影,由薛恩·李維(Shawn Levy)所執導,是2006年《博物館驚魂夜》續集電影。主要演員有班·史提勒、艾美·亞當斯、羅賓·威廉斯、歐文·威爾森、漢克·阿扎里亞、克里斯多福·蓋斯(Christopher Guest)、艾倫·恰貝(Alain Chabat)和史蒂芬·柯根(Steve Coogan)等人。