Per avere la certezza che una cellula staminale sia tale è necessario seguirne la differenziazione non soltanto da un punto di vista morfologico ma soprattutto da un punto di vista immunofenotipico.Poiché Goldberg ha sottolineato il fatto che non esiste una sola proteina specifica per l'odontoblasta maturo ma ne occorre la presenza contemporanea di quattro (DSP, DPP, DMP1 e Nestina), essendo disponibili anticorpi commerciali per tutte tranne che per DSP, si è resa necessaria la sintesi di un anticorpo monoclonale contro quest'ultima.L'anticorpo ottenuto attraverso la nostra sperimentazione dovrà ancora essere ulteriormente caratterizzato testandolo su estratti proteici di tessuto umano e confrontato con l'anticorpo policlonale sintetizzato da Larry Fisher.L'interesse della nostra ricerca, una volta dimostrata la positività dei risultati, risiede pertanto nella possibilità di avere un mezzo più sensibile e più specifico in grado di localizzare la DSP, anche se presente in quantità molto ridotte.L'odontoiatria rigenerativa è un nuovo campo che cerca di applicare i concetti dell'ingegneria tissutale alla gestione dei tessuti orali andati perduti, utilizzando vari tipi di cellule staminali, fattori di crescita ed impalcature. Queste strategie sono state utilizzate anche per cercare di rigenerare un complesso pulpo dentinale: i risultati promettenti ottenuti su modelli animali da molti ricercatori 57 , insieme agli studi che dimostrano la capacità rigenerativa della polpa umana, costituiscono passi positivi verso i trattamenti rigenerativi applicati sull'uomo.L'ingegneria tissutale consiste di tre componenti chiave: le cellule staminali, le molecole segnale e un'impalcatura o una matrice extracellulare. Inoltre i tessuti in crescita richiedono 57  un'adeguata vascolarizzazione in grado di assicurare la presenza di uno spazio fisico intatto in cui i tessuti in crescita possano espandersi.La matrice extracellulare gioca un ruolo essenziale nella differenziazione degli odontoblasti e guida la riparazione dentinale. Tuttavia, la capacità rigenerativa della matrice potrebbe essere compromessa nelle aree danneggiate e potrebbe richiedere una matrice sostitutiva tale da determinare la migrazione e la differenziazione delle cellule staminali. Sono state utilizzate delle impalcature sintetiche 58 e le interazioni tra le cellule della polpa dentaria e le matrici extracellulari hanno indotto la differenziazione delle cellule staminali in odontoblasti.Nonostante i meccanismi esatti che portano alla differenziazione odontoblastica non siano stati determinati, la presenza di molecole bioattive insolubili sembra importante per la differenziazione cellulare e i risultati sono promettenti per le future applicazioni dell'ingegneria tissutale.È inoltre essenziale comprendere le caratteristiche biomeccaniche dell'ambiente del tessuto che deve essere rigenerato: innanzitutto per fornire al tessuto le adeguate proprietà funzionali 59 , in secondo luogo per determinare come il comportamento delle cellule venga influenzato dai cambiamenti avvenuti nel microambiente meccanico e come un comportamento cellulare desiderato possa essere indotto attraverso una specifica manipolazione delle proprietà fisiche del tessuto 60 .Dato che non è possibile riprodurre perfettamente la struttura e le proprietà fisiche di un tessuto per mezzo di un costrutto ingegneristico, l'ingegneria tissutale dovrà concentrarsi sull'identificazione delle proprietà biomeccaniche specifiche dei tessuti nativi 61 . I costrutti ingegneristici dovranno essere esposti a forze meccaniche in vivo e i si dovrà determinare l'impatto che queste forze fisiche avranno sulla funzione delle cellule all'interno 58 Bohl KS et al 1998, J Biomater Sci Polym Ed. Dobie K et al 2002, Connect Tissue Res. 59 Guilak F et al 2002, Ann N Y Acad Sci. 60 Estes BT et al 2004, Curr Top Dev Biol. 61 Guilak F et al 2002, Ann N Y Acad Sci.dell'impalcatura, sulla sua composizione e sulla sua integrazione a lungo termine con i tessuti nativi circostanti 62 .In ultimo luogo si spera che un miglioramento nella conoscenza delle caratteristiche meccaniche permetta di utilizzare i fattori fisici per incrementare la rigenerazione tissutale in vitro e in vivo.Ulteriori ricerche sono necessarie per migliorare la conoscenza degli aspetti molecolari e meccanici del comportamento cellulare durante i processi di sviluppo e di rigenerazione: quando essi saranno chiariti l'ingegneria dei tessuti e degli organi potrà essere una realtà clinica.La sintesi di un anticorpo monoclonale diretto contro DSP risulta quindi rispondere a questa esigenza e si situa sulla via di collaborazione sempre più stretta tra l'odontoiatria e l'ingegneria tissutale, che può essere a buon diritto considerata la forma più evoluta e biologica della protesi dentaria. 62 Srisuwan T et al 2006, Periodontol 2000.