Tra le forme secondarie il LES rappresenta la patologia alla quale gli anticorpi antifosfolipidi sono maggiormente associati. (131) Per ciò che riguarda la prevalenza di tale sindrome, i dati sono spesso discordanti in quanto i vari metodi per definire la positività anticorpale non sono standardizzati e vengono quindi spesso utilizzati valori di cut-off differenti.Considerando le prevalenze riscontrate da più studi si può stimare che nella popolazione ostetrica normale la frequenza della sindrome è approssimativamente pari al 2-5%; tra le donne con storia di aborti ricorrenti il valore si colloca intorno al 20-40%, mentre nelle pazienti infertili si aggira intorno al 15-53%. ( 132) La frequenza degli APA raggiunge circa il 37% nelle donne affette da LES. (131,133) Negli anni sono state descritte molte classi di APA, ma il Lupus anticoagulante (LAC) e gli anticorpi anticardiolipina (ACA) sono stati studiati in maggiore dettaglio e hanno dimostrato maggiore rilevanza clinica.Il LAC è un'immunoglobulina, normalmente IgG o IgM, che interferisce con i fosfolipidi a carica negativa e determina un prolungamento della coagulazione in vitro. Per tale motivo viene definita appunto con il termine di "anticoagulante".Questa nomenclatura però appare inappropriata per due diverse ragioni. Sebbene infatti in vitro funga da anticoagulante, in vivo invece agisce come procoagulante ed infatti i soggetti presentanti valori elevati di LAC sono maggiormente a rischio di episodi trombotici. In seconda istanza, la presenza del LAC è riscontrata anche il soggetti senza il LES. (131) Anche gli ACA sono autoanticorpi (IgG o IgM) diretti contro i fosfolipidi a carica negativa. La cardiolipina rappresenta appunto il primo fosfolipide a carica negativa riscontrato a livello mitocondriale. Negli anni 80 numerosi autori hanno successivamente dimostrato l'esistenza di altri fosfolipidi a carica negativa quali la fosfatidilserina e la fosfatidiletanolamina.Nel 1990 tre gruppi indipendenti hanno evidenziato che gli ACA non si legano direttamente ai fosfolipidi, ma necessitano di un cofattore proteico plasmatico identificato nella β2 glicoproteinaI (β2GPI).( 133) Successivi studi hanno dimostrato anche l'esistenza di altri cofattori quali l'annesina V, la proteina C e la protrombina. (134) Tali cofattori devono essere immobilizzati su una superficie a carica negativa per poter diventare antigenici per gli anticorpi antifosfolipidi; questo legame infatti determina un cambiamento conformazionale del cofattore e nuovi epitopi si rendono così disponibili per il legame agli APA.In vivo la β2GPI si lega alla fosfatidilserina. Questo fosfolipide normalmente non è presente a livello della superficie esterna delle membrane cellulari endoteliali e quindi non è disponibile per l'interazione con il cofattore. Tuttavia, quando vi è un danno o un'attivazione cellulare o durante un processo apoptotico, la fosfatidilserina viene traslocata sulla superficie esterna della membrana cellulare, viene esposta al flusso sanguigno e si rende possibile il legame con la β2GPI. Pertanto, durante il percorso di tre tentativi di IVF proposti alla coppia, il numero massimo di embrioni totali trasferibili corrisponde a 9. La definizione sopra citata non è quindi applicabile in modo completo per le pazienti prese in esame in questo studio.I criteri di inclusione per il gruppo dei casi sono risultati i seguenti (tabella8):• età ≤ 40 anni;• 2 o più tentativi di fecondazione assistita falliti;• Trasferimento di almeno 2 embrioni di buona qualità (score 0, 1, 2)* per ogni tentativo;• Storia di sterilità e/o di infertilità da almeno 1 anno;• Assenza di figli nati vivi;• Mappa cromosomica parentale normale;• Assenza di disordini tromboembolici noti;• Assenza di patologie concomitanti, tranne in un caso: una paziente era affetta Le cause di infertilità che avevano orientato verso i tentativi di IVF erano le seguenti (tabella 9):• fattore maschile: 8 casi su 16 (50%)• sterilità inspiegata: 6 casi su 16 (37.5%)• endometriosi: 2 casi su 16 (12.5%)Le pazienti, nel momento del loro primo tentativo di IVF, avevano un'età compresa tra i 27 e i 37 anni e il loro BMI rientrava in un range tra 19 e 25.Solamente una paziente si presentava in sovrappeso con un BMI pari a 28.Nessuna paziente era fumatrice né aveva in corso terapia ormonale. Tutte le pazienti avevano completato i tentativi IVF da almeno 6 mesi.Nel gruppo di 14 pazienti, seguite presso il Servizio di Ginecologia La presenza di anticorpi antifosfolipidi non è stata rilevata nelle pazienti con storia di RIF, tranne in un singolo caso. La paziente in questione è però affetta da LES.L'APCR acquisita è presente in 2 soli casi su 30 pazienti valutati (6.66%) e in entrambe le donne è associata alla mutazione del fattore V di Leiden.Il deficit di proteina C e di AT III non è emerso nelle pazienti con storia di fallimenti ripetuti di impianto. La prevalenza dei difetti congeniti di proteina C e AT III nella popolazione generale è molto bassa, rispettivamente 0.33% e 0.02-0.1% e nella nostra popolazione di controllo non è stata determinata.In un numero piuttosto consistente di pazienti, pari a 7 donne su 16 (43.75%), sono stati riscontrati difetti trombofilici combinati. In particolare, 4 pazienti presentano un deficit della proteina S associato ad una mutazione in eterozigosi dell' MTHFR, in 2 pazienti si sono evidenziati una mutazione in omozigosi dell'MTHFR e un concomitante deficit della proteina S e in una sola donna si è riscontrata una mutazione in eterozigosi del fattore II, una mutazione in eterozigosi dell'MTHFR, un deficit della proteina S e la presenza del LAC.(tabella 12)