Citochine Si ritiene che le metastasi di tipo osteolitico, presenti prevalentemente nei pazienti affetti da tumore della mammella o da mieloma, siano causati dai cosiddetti fattori capaci di attivare gli osteoclasti (OAF "Osteoclast-Activating Factors").Il più noto degli OAF è il PTHrP (Parathyroid-hormone-related Peptide).PTHrP è stato purificato da cellule di carcinoma polmonare, mammario e renale e presenta un 70% di omologia con i primi 13 aminoacidi del paratormone (PTH) (51). E' stato possibile dimostrare che le cellule di tumore della mammella, nelle lesioni metastatiche, producono PTHrP e che la produzione di questa molecola è regolata dal microambiente nel quale le cellule metastatiche si vengono a trovare, essendo la produzione maggiore nelle metastasi ossee piuttosto che in quelle non ossee (52). Il PTHrP stimola la differenziazione e l'attivazione degli osteoclasti attraverso la produzione di un ligando, noto come RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor-kB Ligand), che si lega al proprio recettore specifico (RANK), espresso dagli osteoclasti, attivandolo (53). Il fattore RANKL è prodotto dalle cellule dello stroma midollare e dagli osteoblasti, è indispensabile nella formazione dell' osteoclastogenesi ed appartiene alla famiglia del gene TNF (54)(55).Tale ligando è noto anche col termine TRANCE (Osteoclast Differentation Inducing Factor). L'attività di RANKL, a sua volta, è sottoposta all'azione di controllo da parte della Osteoprotegerina (OPG) che, legandosi a RANKL, ne impedisce l'interazione con il recettore RANK presente sugli osteoclasti.OPG, che è membro della superfamiglia dei TNF, è prodotto da molti tipi di cellule e blocca gli stadi di fusione e di differenziazione (più che la fase proliferativa) nell'osteoclastogenesi (57).Gli osteoclasti, una volta attivati, danno il via al processo di riassorbimento osseo attraverso la produzione di proteasi, che digeriscono la matrice organica proteica, e di secrezioni acide, che Uno dei meccanismi più noti, coinvolge l'endotelina-1, una citochina la cui concentrazione plasmatica è fortemente aumentata nel siero di pazienti con tumore della prostata e o con metastasi di tipo osteoblastico. L'endotelina-1 è un fattore di crescita che stimola la formazione e l'attivazione degli osteoblasti.La sua attività è inibita dall' antagonista del recettore dell'endotelina-A che, in vivo, è in grado di inibire la proliferazione degli osteoblasti e la formazione di metastasi ossee.L'attività degli osteoblasti è, inoltre, stimolata da diversi membri della famiglia del TGF-ß ed in particolare dal TGF-ß-2 (75), da numerose Bone Morphogenetic Proteins (BMPs), quali le BMP2, BMP3, BMP4 e BMP6 ( 76), e dall'FGF (77).Anche diverse proteasi e i loro attivatori sono coinvolti nei processi di attivazione degli osteoblasti. Ad esempio l'iperespressione dell'uPA (Urokinase Type plasminogen Activator) induce, in modelli sperimentali di ratto, la formazione di metastasi ossee.Il frammento amino-terminale dell' uPA avrebbe, in particolare, capacità mitogene per gli osteoblasti, mentre quello carbossiterminale sarebbe in grado di mediare le capacità invasive delle cellule tumorali e l'attivazione di diversi altri fattori di crescita (78).L' uPA è coinvolto nella fibrinolisi e, in virtù della sua attività proteolitica, interviene nella degradazione della matrice extracellulare, facilitando l'invasione da parte della cellule tumorali. L'uPA viene sintetizzata da un precursore (pro-uPA) come molecola ad alto perso molecolare (HMW-uPA) dotata di attività proteolitica. Un ulteriore clivaggio da parte di metalloproteasi divide l'HMW-uPA in una molecola a basso peso molecolare (LMW-uPA) dotata ancora di attività proteolitica e nell'ATF (frammento amino-terminale dell'u-PA); quest'ultimo possiede un "growth factor domain" (GFD) fondamentale per l'attivazione della proliferazione degli osteoblasti (79).In aggiunta, la "Latent TGF-ß binding protein", che blocca l'attività del TGF-ß, possiede alcuni siti di clivaggio sensibili alla plasmina.Si può quindi ipotizzare che, attraverso l'attivazione della plasmina, l'uPA prevenga l'inibizione sul TGF-ß.  (84).