L'emolisi può essere causata da meccanismi biochimici, immunologici, fisici e chimici: durante le trasfusioni l'emolisi complemento dipendente è causata da anticorpi verso i principali antigeni presenti nel sangue. In vivo l'emoglobina libera si lega alla aptoglobina e viene eliminata dal torrente circolatorio, come nel caso della anemia emolitica; quindi l'aptoglobina di riduce in caso di processi emolitici intravasali. La riduzione dell'aptoglobina allora permette di stimare il grado di emolisi in vivo, ad eccezione delle deficienze neonatali di aptoglobina.Anche un aumento della concentrazione della bilirubina indiretta e dei reticolociti rappresenta un tipico segnale di emolisi in vivo.Nell'emolisi in vitro, oltre all'emoglobina libera nel plasma, aumentano anche tutti i costituenti degli eritrociti: potassio, LDH, AST, mentre la concentrazione dell'aptoglobina in questa tipologia di campioni emolizzati rimane immutata. A questo proposito occorre segnalare che differenti metodi immunochimici per l'aptoglobina presentano performance diverse nel discriminare i complessi emoglobina/aptoglobina dall'aptoglobina libera.I costituenti rilasciati dalle cellule possono interferire con la misura dello specifico analita in modo diretto o indiretto (46,47,51,53,57). L'adenilato chinasi rilasciata dagli eritrociti può portare ad un aumento dell'attività della creatinchinasi e della CK-MB, l'attività pseudoperossidasica della emoglobina libera è responsabile della interferenza nella metodica della bilirubina di Jendrassik e Grof inibendo la formazione del diazocomnposto. 