Per investigare se l'abnorme localizzazione citoplasmatica di FoxO3a nei pazienti all'esordio abolisca anche la sua funzione di fattore trascrizionale, abbiamo effettuato il saggio EMSA (electrophoretic mobility shift assay) e uno studio di RTQ-PCR su un gene target direttamente regolato da FoxO3a, Spred1.L' EMSA, volto a valutare la capacità di legame alla sequenza consenso di DNA del fattore trascrizionale, ha confermato l'assenza del complesso FoxO3a-DNA nel lisato nucleare di 15 pazienti affetti da LMC alla diagnosi (Fig. 4). La rilocalizzazione nel nucleo di FoxO3a, osservata a seguito del raggiungimento della remissione citogenetica o dopo incubazione in vitro con Imatinib, determina nuovamente la formazione del complesso e quindi la riacquistata capacità di legame di FoxO3a al DNA (dati non mostrati).Lo studio di espressione dell'mRNA del gene target di Fox03a, Spred1 (Fig. 5), ha invece evidenziato una significativa correlazione tra risposta clinica e localizzazione di FoxO3a; esso infatti non è individuabile alla diagnosi (valore principale 2-DDCt= 0,001±0,09) quando FoxO3a risulta completamente delocalizzato e inattivo nel citoplasma, ma raggiunge valori di espressione paragonabili a quelli rilevati nel range di normalità durante la remissione (valore principale 2-DDCt= 1,2±1,8).