Se il siero contiene anticorpi specifici, questi anticorpi si legano all'allergene formando un complesso IgE-allergene. Anticorpi anti-IgE umane radiomarcati vengono aggiunti al complesso IgE-allergene, con gli allergeni già associati al materiale insolubile. Gli anticorpi anti IgE umane non legati vengono lavati via. La quantità di radioattività è a questo punto proporzionale al contenuto nel siero di IgE specifiche per quell'allergene.