Il test consiste nell'inoculazione intradermica sulla faccia volare dell'avambraccio di 0,1 ml di soluzione contenente una quantità di tossina difterica pari ad un cinquantesimo della dose minima letale per una cavia di 250 grammi. I soggetti che possiedono anticorpi anti tossina difterica non manifesteranno alcun sintomo mentre i soggetti privi di tali anticorpi (soggetti non immuni) manifesteranno una lesione, circoscritta alla zona di inoculazione, che consiste nella formazione di una papula evidente con possibilità di una esigua zona necrotica.