Numerose evidenze sperimentali hanno dimostrato come l'applicazione di NO fotodonatori (NODP) nel campo della terapia fotodinamica antitumorale (NOPDT) sia molto più efficiente della semplice PDT, in quanto la prima può produrre sia ROS che RNS, aumentando il potenziale citotossico. Si comprende come la combinazione di PS e NOPDT potrebbe portare, in un futuro non troppo lontano, allo sviluppo di trattamenti antitumorali più efficaci (36).Derivati del Bodipy hanno sono già stati usati contro linee cellulari di adenocarcinoma mammario (38). In particolare, in questo studio i composti sono stati testati sia in vitro che in vivo. Gli studi in vitro hanno permesso di dimostrare la localizzazione mitocondriale del composto, mentre gli studi in vivo sui topi hanno indicato una significativa inibizione della crescita tumorale (38).Da un altro recente studio (39) i composti del Bodipy sono stati applicati, in combinazione con la terapia fotodinamica, sulla linea cellulare MCF-7 di carcinoma mammario. Emerge anche in questo studio come il volume del tumore diminuisca drasticamente in seguito ad irradiamento, mentre il medesimo composto non mostri una tossicità rilevante in condizioni al buio. Derivati del Bodipy sono stati testati sulle linee cellulari di HeLa, di carcinoma della cervice uterina, e MCF-7, nonché nei modelli animali derivati (39). In tali studi si è dimostrato come la tossicità dei composti usati sia trascurabile al buio ma invece diventi significativa in condizioni di irradiamento. Sono state valutate l'effettiva diminuzione della massa tumorale e il potenziale di migrazione di tali cellule dopo l'irradiamento. Anche in questo caso si è ottenuta una risposta positiva, perché la migrazione delle cellule tumorali in vitro è stata significativamente ridotta dopo l'applicazione della terapia fotodinamica. Nei modelli in vivo, si è osservato che i topi esposti a irradiazione mostravano una diminuzione della massa tumorale, mentre i topi a cui veniva somministrato il farmaco ma non venivano fotoesposti non mostravano segni di remissione. Nei topi trattati si è inoltre svolto l'esame istopatologico che non ha rilevato la presenza di danni o lesioni infiammatorie ad altri organi quali rene, cuore, fegato, milza e polmone. Questi risultati suggeriscono che i composti del Bodipy presentano un impatto negativo trascurabile e che quindi sono biocompatibili per un eventuale applicazione futura antitumorale in vivo (40). I risultati potrebbero essere ulteriormente migliorati tramite la combinazione della terapia fotodinamica e di NODP (41).Il nostro studio è partito da queste considerazioni ed ha preso in esame vari composti del Bodipy, dal composto 1 al composto 5, i quali sono stati applicati nel trattamento di 2 linee cellulari di melanoma umano A375 e SKMEL28. Il rilascio di NO è stato misurato come nitrito nei surnatanti. In seguito ad irradiamento i composti 1 e 2 rilasciano significative quantità di nitrito, anche se il composto 1 è un produttore più efficiente del composto 2.I test condotti per valutare la citotossicità hanno evidenziato come i composti 1 e 2 non sono tossici al buio ma in condizioni di irradiazione mostrano un buon profilo di attività, particolarmente evidente nella linea A375. La tossicità osservata nel caso 1 è molto probabilmente dovuta alla tossicità di NO e non mediata da ONOO -, in quanto vi è mancanza di fotosensibilizzazione con produzione di 1 O2. Il composto 2 invece su entrambe le linee presenta una citotossicità maggiore rispetto a quella del composto 1.Dagli esperimenti effettuati sui composti di riferimento 3 e 4 è stato possibile comprendere come la citotossicità del composto 2 sia dovuta ad un'azione combinata di Nel complesso, i nostri risultati indicano che gli approcci strategici basati sul rilascio foto-regolato di NO e la sua combinazione con i ROS potrebbero portare allo sviluppo di composti antitumorali innovativi, efficaci in condizioni normossiche ed ipossiche (36). Oltre alla buona efficacia, il nostro approccio potrebbe garantire una citotossicità limitata alla zona di irradiazione (ossia al tumore), con riduzione degli effetti collaterali sui tessuti sani, che spesso limita l'efficacia del trattamento. I nostri esperimenti sono stati svolti solo in vitro ma dai lavori esaminati dalla letteratura emerge un grande ottimismo nell'ambito della terapia fotodinamica in modelli preclinici. In futuro ci proponiamo di verificare i risultati ottenuti in vitro in modelli murini di melanoma.