L'analisi istologica è stata eseguita per indagare il danno d'organo a livello polmonare ed epatico.Per valutare la presenza dei neutrofili nel BAL, dopo aver eseguito il lavaggio broncoalveolare come precedentemente descritto ed averlo posto in centrifuga per 10 minuti a 2000g, il pellet contenente le cellule infiammatorie è stato risospeso in 200µl di Plasma-Lyte. Una porzione di questa soluzione è stata posta su vetrini cytoslide e marcata con Rapid-Chrome Kwik-Diff Staining Kit (ThermoShandon, Pittsburgh, PA, USA); la parte rimanente della soluzione è stata combinata con un ugual volume di Trypan blue, per contare le cellule vive contenute nel lavaggio broncoalveolare mediante l'utilizzo di un emocitometro su microscopio.In una coorte separata di animali non sottoposti a lavaggio broncoalveolare, il polmone sinistro è stato inflato con 1 mL di soluzione di paraformaldeide 4%(Sigma-Aldrich, Milwaukee, Wisconsin, USA) e successivamente conservato per 24 ore in paraformaldeide 4%. In modo analogo, anche il lobo epatico sinistro è stato posto in paraformaldeide 4% per 24 ore.Il parenchima di entrambi gli organi è stato sezionato, sei sezioni random sono state processate e colorate con ematossilina-eosina, un ulteriore campione di sei sezioni di parenchima epatico è stato colorato con PAS. Il danno istologico è stato valutato in cieco da un anatomopatologo e quantificato, attribuendo un punteggio da 0 a 3:0 = nessun danno 1 = danno lieve 2 = danno moderato 3 = danno severo.Per quantificare il danno polmonare si è tenuto conto dell'edema alveolare, della congestione capillare e dell'infiltrazione dei PMN; il danno epatico, invece, è stato calcolato in base all'entità dell'infiltrazione dei PMN, della congestione della vena centrale e dei sinusoidi. La media del punteggio ottenuto ha permesso di creare uno score del danno istologico. 74 