1) COLTURALI (emocolture da CVC +/-emocolture da sangue periferico)• Simultanee emocolture quantitative da accesso centrale e periferico (95) : non è sufficiente ottenere una positività per lo stesso microorganismo dalle emocolture da CVC e da sangue periferico, ma è necessario che la conta di CFU prodotta dalla coltura di sangue prelevato dal CVC sia superiore rispetto a quella derivante dall'emocoltura periferica. In letteratura si trovano studi che hanno testato diversi cut-off per stabilire di quanto deve essere maggiore tale conta (sono stati testati multipli compresi dai 2 ai 10); la IDSA ha accettato un valore intermedio pari a 5, per cui in definitiva tale indagine risulta positiva quando la coltura dal CVC produce una conta di CFU che è almeno 5 volte superiore rispetto alla coltura da sangue periferico.Una recente meta-analisi (96) ha dimostrato che questa è la più accurata metodica per la diagnosi di sepsi CVC correlate, presentando una sensibilità del 93% ed una specificità compresa tra il 97% ed il 100%.Nonostante gli ottimi risultati non viene tuttavia impiegata di routine per la sua complessità ed il costo elevato (richiede infatti l'uso di macchine automatiche (isolator) per il conteggio delle colonie). E' inoltre difficile ottenere delle emocolture periferiche nei bambini, sia per la ridotta disponibilità di vene che li contraddistingue sia per la scarsa compliance. E' importante ricordare che per l'emocoltura dal CVC il sangue deve essere prelevato da tutti i lumi del catetere.• Emocoltura quantitativa da CVC (95): in assenza di un campione periferico anche una singola coltura quantitativa permette di fare diagnosi di sepsi CVC correlata quando la conta di CFU è maggiore o uguale a 100 CFU/ml. La meta-analisi già citata (96) riporta per tale tecnica una sensibilità dell'86% ed una specificità del 96%.• Differenza temporale nella positivizzazione delle emocolture o differential time to positivity (DTP) (97) : tale indagine prevede di eseguire simultanee emocolture, questa volta qualitative, dall'accesso centrale e da uno periferico e di confrontarne il tempo di positivizzazione, cioè il tempo che impiegano a divenire positive.Il razionale di tale metodica deriva da alcuni studi in vitro che hanno dimostrato una relazione lineare fra la concentrazione di microrganismi presenti sulla superficie interna del catetere e il tempo necessario per la positivizzazione dell'emocoltura.Numerosi studi hanno dimostrato che la diagnosi di sepsi CVC correlata è stabilita quando la coltura dal CVC diventa positiva almeno 2 ore prima rispetto alla coltura da sangue periferico. La stessa meta-analisi prima citata (96) riporta per questa tecnica una sensibilità del 90% ed una specificità solo dell'72% (studi precedenti riportano valori più elevati).Si tratta di un metodo rapido, semplice ed economico che può essere effettuato come esame di routine in tutti gli ospedali, prestando particolare attenzione ad interpretare il risultato quando il tempo di positivizzazione è molto dilatato per evitare falsi positivi.• Emocolture qualitative da accesso centrale e in contemporanea da vena periferica (98): rappresenta la tecnica più utilizzata in quanto facilmente eseguibile in tutti gli ospedali.Considerate separatamente le due metodiche sono caratterizzate da una differente accuratezza (l'emocoltura da CVC presenta un valore predittivo positivo e negativo rispettivamente del 63% e del 99%, mentre quella da vena periferica del 73% e del 98%).L'indagine viene considerata diagnostica in caso di positività dell'emocoltura da CVC associata a negatività dell'emocoltura periferica ed è caratterizzata da una sensibilità del 91% ed una specificità dell'86%.In realtà nei bambini il più delle volte ci si limita ad eseguire solo l'emocoltura da CVC per evitare la puntura periferica, percepita in modo traumatico dal piccolo paziente.Si ricorda che per i normali saprofiti della cute sono sempre richieste due emocolture positive per escludere una contaminazione.