Le cellule erano seminate in multiwell da 96 e trattate per 72 ore con VPA (0.5, 1, 1.5, 3 mM) e per 48 ore con LBH (0, 5, 10, 25, 50, 100, 200 nM ). Al termine del trattamento, l'apoptosi era valutata utilizzando il kit Cell Death Detection ELISA PLUS (Roche, Basel, Switzerland). In breve, le cellule sono state trattate con 200 µl di tampone lisante e incubate a temperatura ambiente per 30 minuti. Al termine, 20 µl del surnatante, contenente la frazione citoplasmatica, è stato trasferito nella piastra fornita dal kit, i cui pozzetti sono rivestiti con streptavidina. Successivamente 80 µl di reagente contenente l'anticorpo anti-istone (marcato con biotina) e quello anti-DNA (coniugato con la perossidasi) sono stati aggiunti. La piastra è stata quindi lasciata in incubazione per 2 ore, a temperatura ambiente, in rotazione continua.Durante tale periodo, l'anticorpo anti-istone si legava alla componente istonica dei nucleosomi e, al tempo stesso, coniugava l'immunocomplesso con la streptavidina attraverso la sua biotinilazione. Al termine dell'incubazione, la soluzione veniva aspirata dai pozzetti ed erano eseguiti tre lavaggi per eliminare gli anticorpi non legati; terminati i lavaggi venivano aggiunti 100 µl di substrato della perossidasi. Si procedeva, quindi, ad un'ulteriore incubazione per 10-20 minuti, per permettere il legame della perossidasi con il suo substrato, con conseguente sviluppo di una Per chiarire ulteriormente il meccanismo alla base della ridotta vitalità cellulare, osservata nelle diverse linee di tumore della tiroide dopo trattamento con VPA ed LBH589, si è proceduto alla valutazione del ciclo cellulare e dell'induzione di apoptosi.  Si sono ottenuti risultati sia in vitro che in vivo anche su cellule di carcinoma prostatico in termini di effetto anti-proliferativo, anti-angiogenetico e di acetilazione istonica .