In questo lavoro si sono poste le basi per lo studio clinico dell'inibizione della tirosina-cinasi Src in cellule tumorali dipendenti da un altro oncogene, nello specifico Met.Si è osservato che l'inibizione di Src compromette la tumorigenesi in vitro e in vivo, rallentando la proliferazione cellulare e aumentando l'apoptosi. Ciò non avviene quando le cellule si trovino in condizioni di benessere: l'inibizione di Src con AZD0530 in GTL-16 tenute in coltura in piastra con terreno addizionato di 10% siero fetale bovino non provoca alcuna alterazione della proliferazione cellulare (dati non mostrati). Si può quindi pensare che la via di Src diventi necessaria per la sopravvivenza cellulare quando le cellule si trovino in condizioni di stress, sia esso dovuto all'assenza di contatti cellula-matrice (saggi in soft agar) oppure alle condizioni intrinseche alla crescita tumorale (saggi di tumorigenesi in vivo).Come si può osservare dai risultati degli esperimenti svolti, in vitro si ha un effetto statisticamente significativo (p<0.05) a una concentrazione di AZD0530 tale per cui si possa pensare a un effetto specifico (<1µM), e non a una tossicità comune a qualsiasi agente chimico ad alte dosi, in tutte le linee cellulari utilizzate. Nel caso delle MKN-45 l'effetto è meno netto e anche in vivo queste cellule si sono mostrate meno responsive all'inibizione di Src. Ciò potrebbe essere dovuto a livelli di espressione di Src minori rispetto alle altre linee cellulari, e quindi a una minore dipendenza da questa via segnalatoria, oppure all'attività compensatoria di altre cinasi della famiglia, come Fyn o Lyn.Per quanto riguarda i risultati degli esperimenti in vivo, in seguito a trattamento con 50mg/kg/die di AZD0530, non si è mai ottenuto un arresto della formazione del tumore sottocute, né un aumento della latenza, ma si è sempre osservata una diminuzione della velocità di crescita, cui è conseguito un minore volume e peso finale della massa. Ciò suggerisce che l'inibizione di Src non interferisca con l'attecchimento in sede ectopica ma piuttosto con l'espansione della massa del tumore, intesa come effetto netto del bilancio tra aumentata proliferazione e ridotta apoptosi.Questo è in linea con l'osservazione che gli xenotrapianti trattati in vivo con AZD0530 mostrano un indice proliferativo più basso (valutato come positività all'antigene Ki67) e un indice apoptotico più alto (valutato come positività alla forma attiva di caspasi-3).Il fatto che si sia ottenuto un rallentamento, e non un arresto della crescita tumorale, non dovrebbe stupire, dato che si è inibito solo uno degli innumerevoli trasduttori di Met, mentre le altre vie, inalterate, erano costantemente sostenute dall'attività aberrante di Met. In particolare, la via di Ras, che sfocia in due rami, attivando la via di Raf-Mek-Erk e di PI3K-Akt, è essenziale perché Met possa portare a compimento i processi cellulari che regola e la cellula possa mantenere un fenotipo aggressivo (nostri dati non pubblicati). L'importanza di questa via nella trasduzione del segnale di recettori tirosina-cinasici è già stata dimostrata per EGFR. Infatti, mutazioni attivanti di KRAS o BRAF vanificano l'utilizzo del gefitinib nel tumore del polmone con EGFR mutato (Hirsch et al., 2006) e l'assenza di riduzione della fosforilazione di Akt in risposta a trattamento con gefitinib o erlotinib è segno di mancata risposta al trattamento (Engelman et al., 2005).Pertanto, quando si sarà appurata la sicurezza e si sarà stabilito l'intervallo terapeutico del farmaco, si potrà pensare di utilizzare AZD0530, o altri inibitori di Src (si veda "Inibitori di Src in sperimentazione clinica", pag. 58), non come terapia singola ma in combinazione con altri farmaci a bersaglio molecolare. In questo modo si potrebbe probabilmente raggirare, almeno in parte, lo sviluppo di resistenze a una singola molecola, conseguenza della fuga dalla originaria oncogene addiction, che la cellula attua mediante l'instaurarsi di una dipendenza da un nuovo oncogene. In quest'ottica, Src si presenta come ottimo bersaglio, dato che è un anello fondamentale di una rete segnalatoria che coinvolge più recettori, non solo tirosina-cinasici, ma anche recettori per gli steroidi, recettori accoppiati a proteine G, recettori per le citochine e integrine.