In seguito si effettuano diluizioni (fino a 1 parte su un miliardo) e si procede con la metodologia del "doppio" come precauzione da eventuali incidenti: poi su piastra si va a saggiare la presenza di Escherichia coli o di altri Enterobatteri, grazie all'utilizzo di un'ansa di platino appositamente sterilizzata con becco di Bunsen.