Confronto con i dati precedentemente presenti in letteratura 7.1 I nostri risultati sono parzialmente in linea con quelli della letteratura precedente anche se vi sono importanti differenze.Nel lavoro di Salbach PB et al. (Salbach PB et al, 2000) la somministrazione di LMWH sottocute (dalteparina) ha portato ad un aumento della concentrazione di HGF con un picco raggiunto dopo circa un'ora e concentrazioni elevate per oltre 6 ore, non discostandosi quindi molto dai nostri risultati (il Tmax medio nel nostro campione è di 93 minuti e la concentrazione di HGF rimane elevata fino a 6 -12 ore).Nel loro studio la concentrazione di picco è risultata di circa 1750 pg/ml (+/-1 deviazione standard: 1000 -2500 pg/ml), mentre la mediana della nostra Cmax è 6412 pg/ml nelle pazienti trattate.L'AUC media nelle 24 ore (0,24h) è risultata nel loro lavoro di 12529 pg*min/ml [in ordinata: concentrazione sierica di HGF dopo una singola dose di LMWH endovena (quadratini neri) o sottocute (triangolini neri) o placebo endovena (pallinin bianchi). I risultati sono espressi come media +/-1 DS. In ascisse: tempo espresso in ore] (Salbach PB et al, 2000) Nello studio di Seidel C et al. (Seidel C et al., 1999) la somministrazione di dalteparina sodica sottocute ha provocato un aumento nella concentrazione di HGF fino ad un picco di circa 1900 pg/ml (95% CI: 1300 -2500 pg/ml) raggiunto dopo 1 ora dall'iniezione. La concentrazione di HGF è tornata ai valori basali dopo circa 6 -12 ore.La dose di LMWH somministrata era di 60 U anti-Xa/kg e anche in questo caso i livelli sierici di HGF raggiunti risultano minori rispetto a quelli osservati nella presente tesi.[livello sierico dell'HGF (linea continua) e dell'attività anti-Xa (linea tratteggiata) dopo l'iniezione sottocutanea di LMWH 60 anti-Xa U/kg. I valori rappresentati sono la media di cinque misurazioni e le barre verticali indicano la deviazione standard] (Seidel C et al., 1999) Concentrazioni simili a quelle riscontrate nelle nostre pazienti sono state ottenute con la somministrazione di LMWH per 5 giorni alla dose di 200 U anti-Xa/kg di dalteparina sodica, che corrisponde ad un dosaggio di 12000 U anti-Xa in un soggetto di 60 kg di peso. Le nostre pazienti trattate con LMWH hanno un peso medio di 61,17 kg e hanno ricevuto ciascuna 2850 U anti-Xa di nadroparina calcica.[concentrazione dell'HGF (barre bianche) e dell'attività anti-Xa (barre nere) dopo l'iniezione sottocutanea quotidiana LMWH 200 U/kg. Le misurazioni sono state effettuate prima (prime barre) e 4 ore dopo ciascuna iniezione] (Seidel C et al., 1999) La differenza nella mobilizzazione dell'HGF da parte della LMWH riscontrata paragonando i nostri risultati con quelli degli studi appena descritti non è spiegabile in modo univoco.Si possono fare diverse ipotesi, ma nessuna è al momento verificabile.L'ipotesi più attendibile considera come causa di queste differenze il diverso tipo di LMWH utilizzato nei due studi precedentemente considerati (dalteparina sodica) e nel nostro (nadroparina calcica).Anche il diverso kit utilizzato nei vari studi può essere responsabile di differenze in termini di concentrazione misurata. La dose di enoxaparina utilizzata è stata di 20 -60 mg, corrispondenti a 2000 -6000 U anti-Xa.Borawski J et al. osservano che nei loro pazienti non vi è stata alcuna differenza nella concentrazione di HGF in base al sesso od all'età, in linea con le riflessioni riportate precedentemente (Borawski J et al., 2003).Poichè questa tesi trae origine dall'osservazione che l'HGF potenzia l'apoptosi indotta da paclitaxel e cisplatino a basse dosi nelle cellule di TMEO, è interessante paragonare le concentrazioni sieriche di HGF raggiunte nelle nostre pazienti con quelle utilizzate negli studi pubblicati da Rasola A et al., Olivero M et al., Coltella N et al. e Bardella C et al.. Nel primi tre studi (Rasola A et al., 2004;Olivero M et al., 2006;Coltella N et al., 2006) sono stati utilizzati 100 ng/ml di HGF ricombinante e 50 ng/ml di HGF ricombinante umano puro per l'incubazione delle linee cellulari di TMEO esprimenti MET.Nello studio di Bardella C et al. (Bardella C et al., 2007) sono state modificate linee cellulari di TMEO tramite l'utilizzo di vettori lentivirali caricati con il transgene dell'HGF allo scopo di far loro produrre e secernere in modo costitutivo l'HGF. In questo modo sono state ottenute concentrazioni di HGF nel surnatante pari a circa 2,5 ng/ml. Iniettando queste linee cellulari di TMEO geneticamente modificate nei topi, si è visto che l'effetto sensibilizzante l'apoptosi indotta da paclitaxel e cisplatino si è mantenuto e che la concentrazione di HGF raggiunta nella frazione solubile dei tumori sviluppatisi nei topi è risultata di circa 250 ng/ml. A questa concentrazione è stato possibile ottenere il massimo effetto potenziante l'apoptosi indotta da chemioterapia insieme all'assoluta mancanza di stimolazione della crescita tumorale da parte dell'HGF in assenza dei farmaci chemioterapici.Le concentrazioni di HGF utilizzate in questi studi sono decisamente maggiori delle concentrazioni raggiunte nelle nostre pazienti (concentrazione massima mediana delle nostre pazienti trattate con LMWH: 6,412 ng/ml).Alla luce di questi dati sarà necessario, al termine della seconda fase dello studio oggetto della presente tesi, verificare in vitro ed in vivo se le concentrazioni ottenute nelle nostre pazienti mantengono l'azione potenziante la chemioterapia osservata sperimentalmente da Rasola A et al., Olivero M et al., Coltella N et  Se sarà confermata la possibilità di utilizzare la LMWH con lo scopo di potenziare l'effetto della CT a basse dosi tramite l'innalzamento dei livelli sierici di HGF, sarà possibile utilizzare l'espressione di MET nei TMEO quale nuovo fattore predittivo di risposta alla chemioterapia. Uno studio recente (Sawada K et al., 2007)  Studio farmacocinetico-clinico preliminare sulla somministrazione di eparina a basso peso molecolare e dosaggio sierico di HGF nelle pazienti affette da tumore maligno epiteliale dell'ovaio