Esistono diversi metodi diretti e indiretti per misurare lo stress ossidativo. I metodi utilizzati nel nostro studio per la valutazione dello stress ossidativo sono le LDL ossidate e gli F2-Isoprostani.Le LDL ossidate sono fortemente correlate alla disfunzione endoteliale (214). Gli F2-isoprostani sono composti simil-prostaglandine formati in vivo dalla perossidazione dell'acido arachidonico catalizzata dai radicali liberi (218,219).Gli F2-isoprostani si ritrovano nei tessuti dell'organismo in forma esterificata e nei liquidi biologici, come il plasma e le urine, in forma libera. Quello maggiormente misurato è l'isoprostaglandinaF2 Oltre a costituire una misura diretta dello stress ossidativo in vivo, alcuni isoprostani presentano una potente attività vasocostrittrice, modulano l'aggregazione piastrinica e stimolano la proliferazione delle cellule muscolari lisce.Gli F2 isoprostani possono essere determinati con l'uso della gas cromatografia con diluizione stabile dell'isotopo in massa spettrometria ione negativo ionizzante. Benché sia un metodo costoso e indaginoso, costituisce un metodo estremamente specifico e sensibile. Attualmente sono disponibili in commercio dei kit che utilizzano la metodica di dosaggio immunoenzimatica (ELISA). Il problema principale della metodica ELISA è che possono essere presenti nei liquidi biologici delle sostanze che interferiscono col dosaggio immunologico. I campioni biologici devono essere purificati utilizzando una cromatografia a strato sottile e delle colonne di C18 e silicio. Recentemente, Proudfoot ed i suoi collaboratori hanno valutato la correlazione fra i due metodi, l'ELISA e la gas cromatografia/spettrometria di massa (GC/MS). I livelli di F2isoprostano nei campioni di urine delle 24 ore di 14 soggetti maschi sono stati determinati utilizzando i metodi ELISA e GC/MS, benché la correlazione fosse significativa, era scarsa (P<0,02). Questo studio dimostra che la determinazione degli F2 isoprostani col metodo ELISA e GC/MS non sono equivalenti. 