Basse concentrazioni di proteine e fosfati. Di questi non esistono però dati sperimentali che ne supportino l'ipotesi. Infatti studi, che hanno utilizzato latti artificiali impoveriti di proteine e fosfati, non hanno riscontrato una significativa differenza con il latte formulato usato di norma (159) .Lactoferrina. E' la proteina presente in maggior quantità nel latte umano, mentre nel latte vaccino è presente solo in tracce. Questa può avere effetto prebiotico, anche se gli studi condotti dimostrano solo una debole positività nel favorire lo sviluppo della flora (160) .Nucleotidi. Il latte umano contiene relativamente elevate concentrazioni di nucleotidi preformati, mentre il latte vaccino ne è completamente privo. Gli studi in questo caso, non sono riusciti ancora a determinare se effettivamente i nucleotidi sono dei prebiotici o no (161) .Lattosio. E' dimostrato che, raggiungendo il colon, ha azione di stimolo per la crescita dei Bifidobatteri. Tuttavia la quantità di lattosio che riesce a raggiungere il colon indigerito è molto bassa (162) .Oligosaccaridi. Per questi esiste una letteratura abbondante che supporta il loro effetto prebiotico. Infatti già nel 1926 era stato dimostrato che l'effetto bifidogenico era dovuto alla porzione non-proteica del latte (163) . In seguito Gyorgy mise in evidenza come l'effetto prebiotico era dovuto a una mistura di oligosaccaridi (164) e infine Khun sottolineò che ad avere questa funzione sono gli oligosaccaridi conteneti N-acetil.glucosamina (165) . La rilevanza degli oligosaccaridi, quali prebiotici nel latte umano, è stata confermata da un recente studio di Coppa et al (166) .Gli oligosaccaridi hanno la caratteristica peculiare di essere formati da legami particolari fra i monosaccaridi, tali da resistere all'azione enzimatica esercitata su di loro a livello dell'intestino del neonato e del bambino. Di conseguenza, gran parte degli oligosacccaridi ingeriti con il latte materno passa indigerito per il piccolo intestino e raggiunge il colon.A questo livello gli oligosaccaridi sono utilizzati dalla microflora. Questi causando un effetto BIOMASSA, determinano lo sviluppo selettivo della flora bifidogenica. Inoltre dal processo di fermentazione batterica si producono degli acidi grassi a corta catena (acetato, propionato, butirrato) che sono utilizzati come fonte di energia per il trofismo della mucosa e per il riassorbimento dell'acqua (167;168) .Per ultimo la fermentazione degli oligosaccaridi ad opera dei batteri produce dei gas (idrogeno, diossido di carbonio, metano) che sono responsabili della distensione addominale.Gli olgosaccaridi non utilizzati a livello del colon vengono eliminati con le feci.Bisogna specificare che la composizione degli oligosaccaridi nel latte umano varia in quantità e in qualità a seconda dell'assetto genetico materno. La composizione è strettamente correlata dal set di glicosiltransferasi della ghiandola mammaria, determinate dallo stato di Lewis della madre. Nella popolazione generale esistono quindi 4 differenti tipi di nutrici. E' stato dimostrato che queste differenze però non comportano una significativa differenza nella composizione della microflora intestinale (166) .  (169) , si è cercato di mutare e rendere la microflora dei bambini, allattati con formule, più simile possibile a una microflora bifidogena.Per fare questo si sono ipotizzate tre vie possibili, mediante l'addizione del latte formulato con:1. Prebiotici sintetici 2. Probiotici