La biopsia è la metodica che consente di giungere a una diagnosi definitiva. Le indicazioni all'esecuzione di questo esame invasivo sono: PSA ≥ 10 ng/ml o PSA compreso tra 2,5 e 10 ng/ml se in presenza di alterazione di altre indagini tra cui DRE o TRUS, l'età del paziente e l'aspettativa di vita (almeno 10 anni, in considerazione della storia naturale del tumore prostatico) e valori di PSA velocity o PSAD alterati (Boccardo F et al. 2013). Gli schemi utilizzabili per l'esecuzione della biopsia sono molteplici. Tra questi è un ottimo compromesso tra l'accuratezza diagnostica ed effetti avversi della procedura, l'esecuzione di un mapping prostatico con almeno 12 prelievi, seguendo il modello anatomico a 5 regioni (zona periferica laterale destra e sinistra, zona medio-laterale destra e sinistra, zona centrale) (Eichler K et al. 2006).