La regolazione di pRb mediante fosforilazione è la più nota: nella fase G1 precoce pRb, nelle sue forme ipofosforilate, può legarsi ai fattori di trascrizione E2F e impedire a quest'ultimo di attivarsi attraverso la dimerizzazione con DP. In tal modo pRb riesce a reprimere efficacemente la trascrizione dei geni controllati da E2F. In seguito a stimoli proliferativi, nel corso della progressione della cellula dalla fase G1 a quella S del ciclo cellulare, pRb viene progressivamente iperfosforilato dai complessi ciclinachinasi, provocando il rilascio della proteina dal legame col fattore E2F, il quale può così attivare la trascrizione dei geni coinvolti nella sintesi del DNA e nella progressione del ciclo cellulare (Dyson et al., 1998). Lo scopo principale dell'inattivazione della famiglia RB da parte delle oncoproteine virali, quali E7, è quello di attivare la trascrizione dei geni regolatori del ciclo cellulare e della sintesi del DNA controllati da E2F, in modo da stabilire un ambiente permissivo per la replicazione virale (Helt & Galloway, 2003). La regione CR2 di E7 si lega a pRb e agli altri membri della famiglia RB (p107 e p130) attraverso il motivo di sequenza LXCXE. E7 di HPV-16 si lega preferenzialmente alle forme ipofosforilate di pRb, specifiche delle fasi G0/G1 (Dyson et al. 1992). Legando pRb nello stato ipofosforilato, E7 sequestra la proteina dal legame con i complessi dimerici E2F/DP1, col risultato di un'attivazione costitutiva dei geni controllati da E2F/DP1. Come accennato prima, l'abolizione della funzione di pRb promuove la progressione del ciclo cellulare nelle cellule epiteliali differenziate, consentendo la fase di replicazione produttiva dei geni HPV (Chellappan et al., 1992). Coerentemente con questo modello, una mutazione nel dominio LXCXE di E7 impedisce il completamento del ciclo vitale degli HPV e annulla la sua attività trasformante (Flores et al. 2000).Dati sperimentali indicano che E7 è in grado di destabilizzare pRb promuovendo la sua proteolisi attraverso un meccanismo di ubiquitinazione e degradazione proteosomale (Boyer et al., 1996). La trasformazione cellulare ad opera di E7 sembra essere strettamente correlata alla sua abilità di degradare pRb (Jones & Munger, 1997). Sembra che sia la degradazione di pRb, e non il legame a quest'ultima, necessario alla completa inattivazione della funzione di pRb (Gonzalez et al. 2001). E' interessante osservare che il dominio CR2, che contiene il sito di legame ad alta affinità per la proteina pRb, non è necessario per l'immortalizzazione dei cheratinociti umani primari infettati con l'interno genoma di HPV, suggerendo che l'interazione con pRb può essere dispensabile nel generare questo fenotipo (Jewers et al. 1992). Mutazioni nel motivo zinc finger nella regione CR3 di E7, invece, causano la completa perdita della capacità di immortalizzazione (Jewers et al. 1992).Da ciò consegue che l'inattivazione delle pocket proteins mediata da E7 non è sufficiente per giustificare la sua funzione di immortalizzazione e trasformazione cellulare. Queste osservazioni hanno indotto la ricerca di interazioni, indipendenti da pRb, che coinvolgano E7 ed altri fattori cellulari e che potrebbero risultare altrettanto necessarie ed essenziali per l'immortalizzazione cellulare (McMurray et al. 2000).[62]Le proteine E7 possono associarsi con le cicline A, E e con gli inibitori delle chinasi ciclinadipendenti (Cdk), p21CIP e p27KIP1. Dal momento che i complessi ciclica/chinasi guidano la progressione del ciclo cellulare fosforilando la proteina pRb, non sorprende che la proteina E7 agisca incrementando l'attività di queste proteine. Le proteine E7 degli HPV ad alto rischio legano direttamente i complessi ciclina A/Cdk2 mantenendo alta la loro attività chinasica (McIntyre et al. 1996). Le proteine E7 degli HPV ad alto rischio agiscono anche incrementando i livelli delle proteine ciclina A e E, mentre le proteine E7 degli HPV a basso rischio non hanno tale effetto 