Entro una settimana dal silenziamento del VDR, l'effetto sulla crescita nelle diverse cellule umane è stato determinato con una misurazione colorimetrica del numero di cellule mediante colorazione con cristalvioletto (cellule MCF7 e HaCaT) oppure con l'incorporazione del BrdU (fibroblasti primari). I fibroblasti primari venivano scarsamente colorati dal cristalvioletto e il rilevamento mediante spettrofotometro era inadeguato a quantificare queste cellule; pertanto, per queste cellule è stato scelto il saggio BrdU che è più sensibile. Lo stesso numero di cellule di controllo o silenziate (2000, 1000 o 500 cellule per pozzetto) è stato seminato in piastre da 96 pozzetti, e le cellule sono state coltivate per cinque giorni e poi colorate con il cristalvioletto o misurate dopo due giorni per l'incorporazione del BrdU. Alla fine di questo periodo, le cellule MCF7 e HaCaT sono state fissate per 15 minuti con la glutaraldeide all'11% e le piastre sono state lavate tre volte, asciugate all'aria, e colorate per 20 minuti con una soluzione di cristalvioletto allo 0.1%. Le piastre sono poi state ampiamente lavate e asciugate all'aria prima della solubilizzazione del colorante legatosi alle cellule con una soluzione al 10% di acido acetico. L'assorbanza è stata determinata a 595 nm. La proliferazione dei fibroblasti primari è stata valutata con il kit Cell Proliferation ELISA BrdU (Roche Applied Science, Penzberg, Germany), usato secondo le istruzioni del fornitore. Per ogni condizione sperimentale è stata fatta una media dei dati raccolti da dodici pozzetti e ogni esperimento è stato ripetuto tre volte.