Completata nel 1964, tale struttura costituì una scoperta chiave nella spiegazione della traduzione da mRNA a proteine. Quella dell'alanil-tRNA fu anche la prima sequenza di RNA ad essere determinata. Utilizzando il metodo di Holley, inoltre, altri scienziati furono in grado in seguito di determinare le strutture degli altri tRNA. Pochi anni più tardi, il metodo di Holley fu modificato per poter analizzare le sequenze nucleotidiche di batteri o virus.