Una delle questioni più dibattute nell'ambito del carcinoma del distretto orofaringeo è rappresentata dalla difficoltà di interpretare correttamente le lesioni precancerose e di attribuire loro un rischio di progressione. L'aspetto più controverso sta proprio nel valutare quelle alterazioni istologiche e citologiche che si associano maggiormente allo sviluppo del carcinoma infiltrante. Da qui è nato il grande interesse, soprattutto negli ultimi anni, di studiare le principali vie che sono alla base della patogenesi di questo tumore, in modo da poter identificare precocemente quelle alterazioni a maggior rischio di progressione.Inoltre, la combinazione dei dati epidemiologici, istologici, immunoistochimici e di genetica molecolare ha permesso una nuova suddivisione significativa del classico HNSCC in due sottotipi con caratteristiche proprie, sotto il profilo sia terapeutico sia prognostico. Il primo gruppo comprende HNSCC con pattern cheratosico, tipici di uomini di una certa età, forti fumatori e bevitori, p53 positivi, HPV negativi, caratterizzati da un decorso aggressivo, una bassa radiosensibilità e presenza di cancerizzazione di campo. Il secondo gruppo comprende HNSCC non cheratinizzanti, HPV positivi e p53 negativi, comprendenti una fascia d'età più giovane sempre di sesso maschile, non fumatori né bevitori, con una buona risposta alla radioterapia ed una prognosi migliore (Cardesa e Nadal 2011).L'obiettivo della presente tesi è basato pertanto sulla forte necessità di individuare quali vie molecolari partecipino alla progressione del carcinoma del cavo orale ed orofaringeo, con particolare riferimento al confronto tra le forme HPV correlate e non. Lo studio di tali vie molecolari di progressione è inoltre prerequisito per l'identificazione di marcatori aggiuntivi alla sola indagine morfologica in grado di definire precocemente il rischio di evoluzione delle lesioni precancerose in forme invasive, soprattutto considerando il fatto che il tempo richiesto per la progressione neoplastica e la recidiva sono piuttosto lunghi. L' approccio di classificare le lesioni neoplastiche non solo in base alla sede anatomica ma anche in base all'identificazione di un fenotipo biomolecolare è sempre più attuale in patologia oncologica, anche se ancora poco applicato nelle neoplasie epiteliali del distretto testa-collo.Un primo punto nel presente studio è stato caratterizzare da un punto di vista clinico patologico due sottogruppi di carcinomi del distretto orofaringeo in base alla presenza o meno di coesistente infezione da HPV. I nostri dati dimostrano, in una casistica non selezionata, che il carcinoma HPV correlato rappresenta circa un quarto dei casi nel totale, con una significativa maggiore associazione nei casi dell'orofaringe, sede in cui raggiunge quasi il 50%. Come già noto in letteratura, il ceppo virale che si associa maggiormente al carcinoma è rappresentato da HPV 16.Correlando la presenza di HPV con alcune caratteristiche clinico-patologiche si è confermato quanto già descritto in letteratura, ovvero una presenza nei casi HPV correlati di una prevalenza di [90] sesso maschile, della minor frequenza di abitudine al fumo e di una maggiore frequenza di positività linfonodale. Nonostante la più frequente presenza di metastasi linfonodali alla diagnosi, le forme di carcinoma HPV correlato hanno mostrato significativamente un maggiore tempo di progressione tra la displasia ed il carcinoma, ed un maggiore tempo tra la prima diagnosi di carcinoma e l'eventuale sviluppo di recidive.Per quanto riguarda invece l'analisi dei bio-marcatori selezionati, ci si è soffermati sulla descrizione dell'andamento della espressione nel corso della progressione tumorale, analizzando campioni di lesioni precancerose con vario grado di displasia e carcinomi infiltranti a vario grado di Infine, bassi livelli di p53 sono stati correlati con livelli considerevolmente più elevati di HER2/Neu, Sox2, Ki67, pSTAT3 nelle lesioni SIN, e con Ifi16 nelle lesioni carcinomatose, riflettendo la dinamica molecolare delle lesioni HPV positive. Tale risultato è in linea con l'attività anti-apoptotica di HER2/Neu, ed è anche compatibile con la scoperta secondo cui il silenziamento di p53 permette l'incremento del segnale mediato da Sox2, ovvero il segnale di riprogrammazione In conclusione i risultati della presente tesi dimostrano che:-i carcinomi del cavo orale e dell'orofaringe HPV-correlati, mostrano differenze clinico-patologiche significative, suggerendo un valore clinico e diagnostico alla determinazione ed alla tipizzazione di HPV nei carcinomi di questo distretto;-le vie patogenetiche dei carcinomi HPV-correlati sono specifiche, esistendo una peculiare e precoce up-regolazione di HER2/Neu, pSTAT3 e Ifi16 in queste lesioni; inoltre, Ifi16ha mostrato una espressione elevata nel carcinomi HPV correlati, inversamente proporzionale con l'espressione di Sox2 e con il tasso di proliferazione;-il ruolo di pSTAT3 nei carcinomi di questo distretto sembra essere mediato da fattori indipendenti dai recettori di EGF, e pSTAT3 ha mostrato una forte correlazione con l'espressione di Ifi16, con un ipotetico effetto sinergico sul controllo dei meccanismi di crescita cellulare e apoptotici; queste osservazioni non solo sono importanti per comprendere i meccanismi patogenetici specifici dei carcinomi del distretto orofaringeo in correlazione con la presenza o meno di HPV, ma sono anche propedeutiche allo sviluppo di strategie terapeutiche mirate a inibire i mediatori molecolari attivi in modo predominante in queste neoplasie, quali HER2/Neu e pSTAT3.[93]