Un tipo di immunoterapia stimolante è la cosiddetta immunoterapia adottiva; consiste nella somministrazione di cellule immunologicamente competenti dotate di attività antitumorale derivanti dai tessuti dell'organismo (Fig. 1.4). Viene praticata tramite il prelievo di leucociti del soggetto malato (PBMC) che vengono prima stimolati in vitro per 72 ore con interleuchina 2, successivamente vengono messi a contatto con le cellule tumorali mediante le cellule dendritiche mature (mDC) in modo da favorire la maturazione di cellule in grado di distruggere le cellule neoplastiche. Queste cellule vengono appunto denominate LAK (Lymphokine Activated Killers, cellule killer attivate da linfochina). Le sperimentazioni effettuate con tale metodica hanno fornito risultati incoraggianti, ma non ancora totalmente convincenti. Le tipologie di tumore sulle quali attualmente viene sperimentata questa tecnica sono il melanoma 70 e il tumore del rene 69 . Da qualche anno sono in corso studi di natura preclinica per valutare l'efficacia dell'immunoterapia anche nel trattamento di alcuni tipi di sarcoma, in particolare l'osteosarcomi e il sarcoma di Ewing.  Il trattamento di una neoplasia prevede, nella maggior parte dei casi, un approccio multidisciplinare in cui la chirurgia ha lo scopo principale di eliminare la massa tumorale, mentre la chemioterapia e la radioterapia cercano soprattutto di eliminare le cellule residue agendo sulla loro continua proliferazione; non vi è però una specificità di azione nei confronti delle cellule tumorali.Le terapie più innovative invece sfruttano il sistema immunitario umano come meccanismo effettore. Il tumore però deriva da cellule del nostro organismo ed il fatto che abbia potuto svilupparsi dimostra che il nostro sistema immunitario non lo riconosce come estraneo e non costruisce contro di esso una risposta efficace.I meccanismi effettori del sistema immunitario sono quindi potenzialmente in grado di distruggere in maniera selettiva le cellule tumorali e di causare in questo modo pochissimi effetti collaterali, ma necessitano di essere attivati in maniera specifica.L'utilizzo dell'immunoterapia come strumento antitumorale vuole appunto studiare dei metodi che permettano di raggiungere in maniera molto selettiva uno specifico bersaglio e di attivare di seguito il sistema immunitario, cosa che avviene principalmente grazie all'utilizzo degli anticorpi. Non tutti gli anticorpi però sono in grado di raggiungere un soddisfacente effetto terapeutico. Molto spesso questo può derivare da un'insufficiente concentrazione degli antigeni presenti sulla cellula tumorale che non permette agli anticorpi di riconoscere selettivamente il bersaglio 73 .Pertanto risulta essenziale effettuare un targeting specifico affinché anticorpi di cui le funzioni possono essere strettamente correlate e sinergiche, riescano a raggiungere la medesima cellula tumorale e ad esplicare in quella sede il loro effetto terapeutico.L'immunoterapia nell'osteosarcoma 74,75 I sarcomi rappresentano un gruppo eterogeneo di neoplasie sia dal punto di vista istologico sia dal punto di vista del comportamento clinico 76 . Recenti studi hanno dimostrato come l'immunoterapia sia efficace nel trattamento dei sarcomi, tuttavia non è ancora entrata a far parte della pratica clinica 77 . In relazione ai diversi targets terapeutici esistono diversi approcci immunoterapici:Immunomodulazione non specifica: consiste in un trattamento che ha lo scopo di indurre un'immunità "antitumorale" senza esporre il paziente a bersagli molecolari.• Interleuchina 2 (IL-2) 78 : è un mediatore della risposta immune cellulo-mediata la cui azione si esplica attraverso l'attivazione dei linfociti T (CD 3+) e delle cellule NK. L'IL-2 normalmente viene prodotta dai linfociti T (soprattutto CD 4+) attivati da uno stimolo antigenico. La sua attivazione avviene mediante il recettore dell'IL-2 presente sui linfociti T attivati, la cui espressione aumenta in presenza di IL-2.L'espansione clonale dei linfociti T viene quindi promossa dal loop autocrino dell'IL-2. Uno studio randomizzato in cui l'IL-2 veniva somministrata ad una popolazione pediatrica costituita da 4 pazienti affetti da osteosarcoma e 2 pazienti affetti da sarcoma di Ewing, ha riportato risultati incoraggianti, poichè due pazienti con osteosarcoma hanno mostrato una risposta completa al trattamento 79 .• Muramil tripeptide fosfatidiletanolamina (MTP-PE): è un analogo di sintesi della parete cellulare batterica. In uno studio randomizzato è stato osservato come il valore aggiunto dell'ifosfamide, somministrato in associazione con doxorubicina e cisplatino nel trattamento adiuvante dell'osteosarcoma, sia realmente tangibile soltanto quando questi viene dato insieme al MTP liposomiale [Children's Oncology Group's Intergroup-0133] 80 .• Interferone (IFN): è stato impiegato nel trattamento di diversi tipi di sarcoma, riportando risultati controversi. In un trial condotto dall'European and AmericanOsteosarcoma Study Group (EURAMOS 1) sono stati selezionati alcuni pazienti con osteosarcoma localizzato, che avevano avuto una buona risposta istologica al trattamento neoadiuvante e, in seguito al trattamento chirurgico, è stato impostato un trattamento adiuvante con metotrexate, cisplatino e doxorubicina a cui veniva associato o meno l'IFN a-2b peghilato.Vaccini antitumorali:il vaccino espone il paziente all'antigene tumorale per evocare una risposta immunitaria contro il tumore stesso, solitamente in associazione ad un trattamento adiuvante e solo occasionalmente in combinazione con l'immunomodulazione 81 .Nei pazienti affetti da sarcoma sono stati condotti un numero esiguo di trias utilizzando differenti vaccini. Adoptive T-Cell Therapy (ATCT):Riguarda sia l'espansione ex vivo che in vivo delle cellule effettrici in grado di aggredire il tumore. Può essere "non specifica" come nel caso del trapianto allogenico di cellule staminali emopoietiche o cytokine-induced killer; oppure "specifica" nel caso in cui vengano impiegati antigeni tumorali specifici coltivati ex vivo o creati mediante tecniche di ingegneria genetica.• ATCT Non Specifica:-Trapianto di cellule staminali allogeniche: viene considerato come un tramite per un approccio ulteriore di immunoterapia adottiva 82 . Il sistema immunitario del donatore può infatti permettere la ripetizione dell'infusione di linfociti alloimmuni, cellule T tumore-specifiche o NK/CIK dal donatore senza il rischio del rigetto.-Cellule immunitarie effettrici indotte da citochine: si tratta di linfociti citotossici effettori la cui attività citolitica non è limitata dal sistema maggiore di istocompatibilità (MHC), e che hanno la capacità di neutralizzare le cellule tumorali. Vengono generate a partire dai linfociti prelevati dal sangue periferico ed in seguito messi in coltura per cinque giorni insieme all'IL-2 83,84 .• ATCT Specifica: consiste nell'identificazione ex vivo di linfociti autologhi o allogenici con attività antitumorale.-Linfociti infiltranti il tumore (TIL): la selezione ex vivo è basata sulla loro capacità di riconoscere cellule tumorali autologhe. L'impiego dei TIL sembra essere il trattamento più efficace nei pazienti affetti da melanoma metastatico 85 . Da alcuni studi in fase precoce sembra essere emerso che i TIL sono in grado di crescere in coltura a partire dal tessuto prelevato in pazienti affetti da sarcoma dei tessuti molli 86,87 .-Linfociti T specifici per antigeni associati al tumore: i linfociti T citotossici (CTL) riconoscono ed inducono alla lisi le cellule infettate. Non appena l'antigene, in questo caso tumorale, viene fagocitato da un macrofago, si verifica la sua processazione a seguito della quale un frammento verrà esposto un frammento di antigene sulla superficie della cellula legato ad una molecola codificata dal complesso maggiore di istocompatibilità (MHC). Un linfocita T citotossico immaturo, il cui recettore (TCR) riconosce il complesso antigene-proteina MHC , si lega ad esso ed è cosi selezionato per la successiva propagazione clonale. I linfociti T citotossici immaturi si legano solo a complessi antigene-proteina MHC in cui quest'ultima appartenga al gruppo noto come Classe I (MHC-I). A seguito del legame fra TCR e Antigene-MHC si ha la liberazione, da parte del macrofago, di interleuchina 1 (IL-1), una proteina ormono-simile. Questa sostanza contribuisce a stimolare il linfocita a dividersi e differenziarsi fino a raggiungere lo stato di maturità nel quale può svolgere la sua funzione, che, nel caso del linfocita T citotossico, è quella di legarsi ad una cellula infetta che espone l'antigene ed ucciderla 88,89 .