Per poter valutare il numero di ripetizioni del TAAAA all'interno del promoter del gene shbg, è stato necessario amplificare la regione di nostro interesse con una specifica PCR utilizzando i seguenti primers:-5'-GCTTGAACTCGAGAGGCAG;-3'-CAGGGCCTAAACAGTCTAGCAGT.Ciascuna reazione era preparata con DNA 5µl, 10x Buffer 5 µl, 50mM MgCl 2 , 10mM dNTP (Invitrogen, Groningen, Paesi Bassi) , 1 µl di ciascun primer, 0.25 U di Taq polimerasi (Biorad Laboratories, Segrate, Milano) in un volume finale di 50 µl. L'amplificazione era condotta secondo lo schema seguente: 1 X (95°C per 3 minuti), denaturazione iniziale; 35 X (95°C per 30 secondi, denaturazione; 62°C per 30 secondi, annealing; 72°C per 30 secondi, estensione), Tutti i campioni amplificati sono stati congelati a -20°C e progressivamente sottoposti a corsa elettroforetica su gel di poliacrilamide.