Per verificare che l'inibizione di AZD0530 fosse specifica per Src, si è analizzato il livello di fosforilazione di Met in western blot.Il trattamento acuto (2 ore) con AZD0530 nelle GTL-16, anche a dosi molto alte, non influenza la fosforilazione né delle tirosine catalitiche (Tyr 1234/1235) né di quelle di ancoraggio (Tyr 1349/1356) del recettore Met (Figura 2A), indicando che l'inibitore non ha effetti off-target su di esso.Il passaggio successivo è stato quello di studiare gli aspetti molecolari dell'inibizione di Src, analizzando il livello di attivazione delle vie a valle della cinasi. Si è pertanto valutato il livello di fosforilazione di Fak e paxillina, trasduttori canonici di Src, e di Akt e Erk, dopo stimolazione acuta con AZD0530, tramite western blot.In questo esperimento, si è potuta osservare una riduzione della fosforilazione di Fak, paxillina e Akt, che si manifesta in maniera dose-dipendente (Figura 2B). Questo conferma che l'inibizione di Src blocca le vie a valle della cinasi e quindi presumibilmente i processi cellulari da essa regolati. Si è invece osservato un aumento della fosforilazione di Erk (Figura 2B). Si può spiegare questo effetto paradosso, ipotizzando che Src blocchi un feedback negativo che agisce su questa cinasi. I topi sono stati trattati tramite gavage con veicolo o con AZD0530: 10 topi con veicolo, 10 con 12.5 mg/kg/die, 8 con 25 mg/kg/die e 11 con 50 mg/kg/die di AZD0530.