 Per la tecnica di sottrazione è possibile somministrare o sodio ioduro (123I) o sodio pertecnetato ( 99m  Tc) dato che entrambi questi radiofarmaci sono captati dal tessuto tiroideo funzionante. Questa immagine viene sottratta da quella del tecnezio ( 99m Tc) sestamibi, e l'immagine residua è quella del tessuto paratiroideo iperfunzionante. 