In questo tipo di analisi è misurata la quantità di zucchero (glucosio) presente nel sangue (glicemia) prima di bere una bevanda a base di lattosio, o un bicchiere di latte da circa mezzo litro, e due ore dopo averla ingerita: se la quantità di zucchero non aumenta dopo aver bevuto il lattosio o il latte, è probabile che sia presente un’intolleranza.  In condizioni normali, infatti, l'enzima lattasi scinde il lattosio in glucosio e galattosio e, per questo, il valore del glucosio nel sangue aumenta. Quando ciò non avviene l’enzima potrebbe essere poco o per nulla attivo.