Tre tipi di test da carico orale sono stati applicati a ciascun paziente. Un carico semplice con Phe (100 mg/kg), un carico combinato con Phe (100 mg/kg) seguito dopo 3 ore da somministrazione di BH 4 (20mg/kg), seguito dopo altre 3 ore da somministrazione di Phe (100 mg/kg). La scelta di introdurre il carico semplice con Phe, ha permesso di analizzare la cinetica della fenilalaninemia in assenza di somministrazione esogena di cofattore. Avendo questo dato, è stato poi possibile confrontarlo con i risultati ottenuti mediante il carico con BH 4 .Un limite degli studi riportati in letteratura fino ad ora, è stato quello di non confrontare la discesa della fenilalanina che si ha dopo somministrazione di BH 4 con la sua discesa in assenza di cofattore. Infatti in diversi lavori (Kure, Muntau), sono stati trattati pazienti affetti dalla forma benigna di malattia, che probabilmente avrebbero comunque avuto una riduzione della Phe, anche senza la BH 4 . Inoltre, i diversi studi risultano difficilmente interpretabili, dal momento che i pazienti partono da valori di fenilalanina diversi tra loro.Lo studio oggetto di questa mia tesi di laurea depone chiaramente per la mancata efficacia della BH 4 nella PKU.L'analisi comparativa dei risultati ha infatti dimostrato inequivocabilmente che la somministrazione del cofattore non modifica la cinetica della Phe osservata con carico semplice, né induce aumento plasmatico della Tyr, vero indice di avvenuta idrossilazione della Phe.Questi dati scoraggiano quindi l'indicazione della terapia con cofattore nella PKU, già suggerita da molti Autori sulla base di studi clinici non quantitativi.