La tinea nigra è facilmente diagnosticabile con un esame al microscopio ottico di squame epidermiche prelevate dalla macula colorate con ematossilina-eosina. Si notano le cellule cilindriche del lievito "H. werneckii" confinate allo strato corneo dell'epidermide, molte di esse sono in attiva gemmazione o sono bicellulari. È possibile coltivare il fungo su un apposito terreno con aggiunta di antibiotici. Le colonie compaiono dopo circa 2-3 settimane.