Esmond R. Long e Florence B. Seibert hanno identificato la proteina della tubercolina che funge da agente attivo . Seibert ha poi trascorso diversi anni a sviluppare metodi per separare e purificare questa proteina da Mycobacterium tuberculosis, ottenendo il derivato proteico purificato (PPD) e consentendo la creazione di un test affidabile per la tubercolosi.