Sulla base delle note eterogeneità di fenotipo e di funzione delle cellule endoteliali derivanti da tessuti diversi e del possibile ruolo dell'endotelio in patologie immunitarie con infiltrazione infiammatoria cronica, quali il diabete tipo 1, scopo del presente lavoro è l'isolamento, la coltura e la caratterizzazione molecolare di cellule endoteliali di isole pancreatiche umane.Si intende purificare tali cellule endoteliali ed analizzarne la morfologia, l'espressione di classici marker endoteliali, quali fattore VIII, CD31, CD105, CD146 e l'espressione di marker specifici quali l'α-1 proteinasi inibitor (API).Verrà analizzata anche l'espressione di molecole di adesione, quali ICAM-1, Eselectina, VCAM-1 e la loro modulazione da parte di stimoli quali il TNF-α.Tale analisi permetterà, in esperimenti funzionali, di esplorare il potenziale ruolo delle cellule endoteliali di isole pancreatiche nel reclutamento di cellule infiammatorie nel processo patogenetico del diabete tipo 1.Non essendo nota l'esatta localizzazione della proteina di membrana nefrina nelle isole pancreatiche, nonostante vi sia stata descritta, nel presente lavoro si intende inoltre esplorar sull'endotelio insulare, osì come la sua modulazione. La colonna, dopo essere stata lavata, è stata rimossa dal separatore magnetico e le cellule che erano rimaste attaccate ad essa, in quan rimosse con un apposito pistoncino e piastrate in due pozzetti su piastre da ventiquattro pozzetti precedentemente rivestite di ECAF.Le cellule endoteliali sono state poi ulteriormente purificate utilizzando biglie magnetiche coniugate con anticorpi anti-CD105 (Macs, Miltenyi, Biotech), mediante la stessa procedura.Le cellule endoteliali purificate sono state quindi coltivate in terreno di coltura EBM completo, in fiasche T25 (Necton Dickinson, Inghilterra) e subcoltivate ogni sette giorni circa.In esperimenti comparativi, altre due linee cellulari di endotelio sono sta utilizzate: cellule microendoteliali HMEC-1 (human microvascular endothelial cells-1) e cellule macroendoteliali HUVEC (human umbelical vein endothelial cell).  