Le strisce di carta assorbente vengono poste nel solco per 30 secondi ad una profondità di 1 mm.L'inserimento della striscia di carta assorbente all'interno del solco gengivale può alterare la misurazione del flow rate. L'inserimento della striscia nel solco, prima che si incontri resistenza, è sufficiente ad alterare la permeabilità dell'epitelio sulculare. L'inserimento a livello dell'apertura del solco nella cavità orale, al contrario, causa il minor grado di distruzione dell'epitelio. 63 In questo studio sono stati eseguiti due prelievi sequenziali: il primo ha il vantaggio di creare minor danno all'epitelio e di facilitare la misurazione di GCF; entrambi questi vantaggi abbassano il rischio di alterare il GCF e la contaminazione con il siero. Il volume del primo prelievo è maggiore rispetto ai seguenti ma i seguenti non sono differenti fra loro. Pertanto, come è confermato in letteratura è affidabile eseguire più prelievi.  Calibrare l'analizzatore a "zero":1. Accenderlo 10 minuti prima dell'uso 2. Inserire una cartina assorbente sterile nell'analizzatore   1. Immissione di una soluzione dell'anticorpo primario, specifico per l'antigene da individuare, nei pozzetti di una apposita piastra da saggio in polistirene, saturazione del fondo del pozzetto con l'anticorpo, e lavaggio con soluzione tampone; l'anticorpo primario aderisce al fondo dei pozzetti per mezzo solitamente di gelatina di pesce e l'eccesso viene lavato via.2. Aggiunta, in soluzioni con diverse concentrazioni non note, dei campioni dei quali bisogna saggiare la presenza, o meno, dell'antigene caratteristico dell'organismo patogeno e lavaggio con soluzione tampone; l'antigene, se presente, si lega specificamente con l'anticorpo e l'eccesso viene lavato via.3. Aggiunta dell'anticorpo secondario, coniugato con un enzima (da cui il nome del test), tipicamente perossidasi o fosfatasi alcalina, e lavaggio con soluzione tampone; L'anticorpo secondario si lega selettivamente all'antigene, se presente, e l'eccesso viene lavato via. L'assenza dell'antigene specifico per l'anticorpo comporta che l'anticorpo secondario (e il relativo enzima ad esso coniugato), con il lavaggio, venga dilavato.    Per ogni sito sono stati effettuati 4 prelievi, 2 mesio-vestibolari e 2 mesiodistali sia per il dente sottoposto a forza ortodontica che per il dente utilizzato come controllo.I campioni si riferiscono a prelievi eseguiti a: t0: prima dell'applicazione della forza ortodontica t1: ad un'ora dall'applicazione della forza ortodontica t2: ad una settimana dall'applicazione della forza t3: a tre settimane dall'applicazione della forza Tali valori possono essere convertiti in microlitri mediante il software in dotazione con l'apparecchio Periotron ® 8000 (Oraflow NY).   Questa tabella rappresenta la variazione percentuale calcolata ad ogni t (t1, t2, t3) rispetto a t0. I valori utilizzati rappresentano le medie dei prelievi nel sito mesio-vestibolare e disto-vestibolare del dente sottoposto a forza ortodontica e del dente di controllo. È stata calcolata, inoltre, la media complessiva di tutti i valori.