La sera precedente far partire in 10 ml di terreno LB + ampicillina la colonia batterica desiderata.Preparare, in una beuta da 1 litro, 500 ml di LB ed autoclavare insieme ad altre 2 beute da 1 litro pulite.Il giorno stesso prelevare 5 ml della coltura over night e diluirla (1:100) nel terreno (500 ml) precedentemente scaldato in termostato a 37°C.Dividere la coltura diluita nelle 3 beute da 1 litro e incubare a 37°C per 2-3 ore.Controllare la crescita batterica allo spettrofotometro in modo tale che la OD a 600 nm sia 0.5-0.6.Riunire la coltura in una beuta e aggiungere l'IPTG alla concentrazione di 0.1 mM.Ridividere nelle tre beute ed incubare con stirrer per 1,5 ore a temperatura ambiente.Prendere 2 bottiglie da 250 ml per centrifuga, metterle in ghiaccio e riempirle con la coltura. Trattenere 500 µl da trattare con il metodo normale dell'induzione.Centrifugare a 6000 rpm per 15 ' a 4°C.Eliminare il surnatante e risospendere il pellet con 10 ml di PBS + 1% TRITON X-100 in ciascuna bottiglia, per un totale di 20 ml di lisato cellulare.Trasferire il contenuto in un falcon da 50 ml tenuto in ghiaccio.Sonicare per 5 colpi da 15'' a velocità 4.Centrifugare a 3000 rpm per 20'.Dividere il pellet dal surnatante e risospendere anch'esso con 20 ml di PBS + 1% TRITON X-100.Prelevare un'aliquota di 50 µl per controllare su gel SDS-PAGE al 10% e congelare il resto a -20°C.