Nel 2005, dopo numerosi studi su linee cellulari, modelli animali, e cellule midollari di pazienti policitemici, è stato individuato il ruolo fondamentale della via di segnalazione JAK-STAT nell'ematopoiesi con la scoperta di una mutazione puntiforme acquisita di JAK2V617F che si riscontrava con alta frequenza nelle malattie mieloproliferative croniche ed in particolare nei pazienti BCR-ABL negativi (39,40) . Il gene JAK2 è stato localizzato sul cromosoma 9 p24 ed è stato clonato la prima volta nel 1989 dalla libreria di cDNA di una linea cellulare ematopoietica murina.Sono state identificate quattro differenti janus chinasi, tutte cruciali per la normale ematopoiesi: JAK1, JAK2 e TYK2, espresse ubiquitariamente, e JAK3, espressa solo dalle cellule ematopoietiche. JAK2 si è dimostrata quella con il ruolo predominante poiché mediatore essenziale nella segnalazione di citochine di tipo1 come EPO, Granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) e TPO (41)(42)(43)(44) . Le Janus chinasi posseggono due domini simmetrici, JH1 e JH2 (prendono infatti il nome dal dio romano Giano, sempre dipinto con 2 facce). JH1, situato vicino al C terminale della proteina, possiede sia la funzione chinasica sia i residui tirosinici fosforilati durante l'attivazione, mentre JH2, il dominio immediatamente adiacente, funge da regolatore (ed è privo di attività fosforilante) (45)(46) . Quando il ligando si unisce al suo recettore si verifica un cambiamento nella conformazione di quest'ultimo che fa si che due proteine JAK2 si trovino abbastanza vicine da fosforilarsi reciprocamente. Questa fosforilazione attiva le JAK2 a tirosin-chinasi e permette loro di fosforilare il dominio citoplasmatico del recettore delle citochine tipo1, originando un sito di legame per il reclutamento dei trasduttori di segnale STAT, a loro volta attivati per fosforilazione da JAK2 (47) . Le proteine STAT attivate formano quindi dei dimeri che traslocano nel nucleo dove agiscono come fattori trascrizionali per i geni bersaglio. L'intero processo è strettamente regolato su molti livelli ed è la via fondamentale di segnalazione di numerose citochine tra cui EPO, growth Questa mutazione è presente in eterozigosi nel 95% delle policitemie vere, nel 50% delle trombocitemie essenziali e delle mielofibrosi primarie, mentre in omozigosi nel 3% delle PV, nel 4% delle TE e nel 6-18% delle MPF. Inoltre è stata riscontrata, anche se con frequenza minore, in alcune forme non classiche di disordine mieloproliferativo, come nel 20% delle leucemie mieloidi croniche atipiche, nel 20% di alcune forme mieloproliferative (compresa l'anemia refrattaria con sideroblasti ad anello e trombocitosi), nel 5% delle leucemie mielo-monocitiche croniche, in meno del 5% delle leucemie mieloidi acute e delle sindromi mielodisplastiche, e raramente anche in alcune forme di mastocitosi sistemica (49,50) . JAK2V617F induce il fenotipo della PV nei modelli murini: eritrocitosi ma non trombocitosi, bassi livelli serici di eritropoietina, splenomegalia, ematopoiesi extramidollare, agranulocitosi, iperplasia megacariocitaria e, in fase terminale, fibrosi del midollo osseo ed anemia (51)(52)(53) . L'allele mutato si può anche trovare espresso in omozigosi come risultato di una ricombinazione mitotica. Sembrerebbe che ciò correli con maggiori livelli di emoglobina alla diagnosi, maggior incidenza di prurito e maggior rischio di trasformazione fibrotica (54) . Da uno studio condotto su pazienti con PV (di cui 67,8% con JAK2 mutato in eterozigosi e 32,2% in omozigosi) e con TE (di cui 40,2% wild type, 57,6% eterozigoti e 2,2% omozigoti), è emerso che l'omozigosi si associa anche a una minore conta piastrinica, a una maggiore incidenza di splenomegalia, nonché a dimensioni spleniche maggiori e all'indicazione alla chemioterapia. Non si sono invece evidenziate differenze nell'incidenza di eventi trombotici maggiori o minori (55) .È stato anche osservato come l'espressione di JAK2V617F sia quantitativamente differente nelle diverse forme proliferative: bassa nel fenotipo TE, intermedia nelle PV e maggiore nella MMF (57)(58)(59) . Questo lascerebbe ipotizzare che siano i livelli di espressione della mutazione di JAK2 a determinare il fenotipo patologico e suggerirebbe la possibile evoluzione da TE a PV, fino a MMF (49)(50)(51)(52)(53)(54)(55)(56) . Nel 2007, è stato scoperto un gruppo di altre mutazioni dell'esone 12 di JAK2 che sarebbe teoricamente riscontrabile in tutti i pazienti JAK2V617F negativi affetti da policitemia vera (3% di tutte le PV) (60,61) . Queste mutazioni si traducono in una proliferazione EPO -indipendente / EPO -ipersensibile nelle linee cellulari che esprimono il recettore per l'eritropoietina, e nell'attivazione costitutiva della linea di segnalazione di JAK-STAT (62) .Tutti i casi positivi riscontrati presentavano la mutazione in eterozigosi e solo in un piccolo numero di cellule periferiche. Numerose cellule mutate sono invece state trovate nelle cellule midollari o in quelle delle colonie eritroidi EPO -indipendenti, motivo forse della tardiva identificazione rispetto alla mutazione JAK2V617F (62) . Scott et al. (62) hanno descritto 4 mutazioni dell'esone 12: F337-K539delinsL, H538QK539L, K539L e N542-E543del. Sono tutte situate nella regione che unisce i domini SH2 e JH2. I pazienti con queste mutazioni, se paragonati a quelli con la JAK2V617F, hanno un numero minore di piastrine e leucociti e valori più elevati di emoglobina.Più recentemente un gruppo italiano (63) ha scoperto una nuova delezione sull'esone 12, in pazienti giovani con PV esordita con trombosi portale e mesenterica e sindrome di Budd-Chiari.Vi è ancora il dubbio se la mutazione di JAK2 sia l'unica causa alla base della PV o sia un evento secondario ad altre anomalie molecolari: a favore della prima ipotesi vi sarebbe il diverso fenotipo (TE; PV; MMF) correlato alla diversa espressione quantitativa dell'allele mutato; a favore della seconda invece studi (Kralovics et al. (64) ) che dimostrano come i livelli di espressione di JAK2 possano variare dallo 0 al 95% nella popolazione clonale di granulociti di un paziente affetto, e come la popolazione clonale nei pazienti con evoluzione in LAM sia solo per metà JAK2 mutata: le cellule prive di mutazione sono dunque un clone indipendente o esprimono la mutazione ancestrale (49) ? Rimane ancora da chiarire.