L' origine molecolare del colangiocarcinoma rimane ancora parzialmente sconosciuta, tuttavia sembrano validi i principi elencati di seguito 86 .Diversi fattori possono facilitare la progressione dell' infiammazione cronica in trasformazione neoplastica, passando attraverso la displasia biliare 87 88 . Le citochine proinfiammatorie come l' IL-6, ad esempio, attive nei pazienti con colangiti ricorrenti dovute a calcolosi intraepatica, possono indurre l'espressione dell' enzima iNOS a livello dei colangiociti; questo genera la molecola bioreattiva NO 89 90 91 che successivamente assieme a RNOS può direttamente inibire la riparazione enzimatica del DNA e bloccare l'apoptosi attraverso la via di nitrosilazione delle caspasi 92 . Questi eventi molecolari cellulari permettono un accumulo di danno a livello del DNA fino alla formazione di multiple mutazioni responsabili dello sviluppo di neoplasie maligne 93 .L' accumulo di alterazioni a livello dei geni implicati nel processo di carcinogenesi porta ad una disregolazione del ciclo cellulare e ad una continua proliferazione cellulare 94 .Numerosi sono i geni danneggiati nella colangiocarcinogenesi intraepatica.P16: il pathway p16/ciclina D1/Rb è uno dei più importanti regolatori del ciclo cellulare in molti differenti tipi di cancro 95 . Il gene p16 ha una funzione tumore soppressiva attraverso il legame e l' inattivazione della ciclina dipendente dalle chinasi 4 e 6 96 . Ishikawa et al. 97 riportarono che l' espressione della proteina p16 è ridotta nella neoplasia papillare intraduttale ( considerata lesione precursore del colangiocarcinoma ) dei fegati con epatolitiasi, in seguito ad ipermetilazione del promotore di p16. Interessante come tale ipermetilazione sia stata poi osservata in vari cancri, incluso il colangiocarcinoma intraepatico 98 99 100 101 .Cicloossigenasi-2 ( COX-2 ): recentemente, numerosi reports attestano che la COX-2 è overespressa in diversi tumori umani, incluso il colangiocarcinoma intraepatico, e che giochi un importante ruolo nella carcinogenesi 102 103 104 105 106 107 .L' analisi di Endo et al. 108 mostrò che COX-2 è iperespressa in più alta percentuale a livello dei dotti biliari iperplastici di largo diametro ( > 1000 micron) rispetto a quelli di medio diametro ( 500-1000 micron ). Ciò concorda infatti con l' evidenza che i colangiocarcinomi umani siano più comuni all' interno dei dotti biliari di maggiori dimensioni 109 .Da un punto di vista farmacologico, un inibitore della COX-2 ( etodolac ) è un agente che può proteggere non solo da episodi cronici recidivanti di colangite ma anche dal colangiocarcinoma intraepatico in topi con coledocodigiunostomia 110 .Prostaglandina ( PG ) E2: è aumentata nei processi infiammatori in seguito ad un aumento dell' attività di COX-2 111 . Inoltre, PGE-2 è correlata allo sviluppo e alla progressione del cancro attraverso i suoi effetti anti-apoptotici, proangiogenetici e la soppressione dell' attività di adesione cellulare 112 113 114 . Shoda et al. 115 riportarono che PGE-2, così come l' espressione dei sottotipi recettoriali ( EP 2-4) per PGE-2, sono significativamente in maggiore concentrazione nei pezzi operatori di dotti biliari, patologici e non, provenienti da pazienti con epatolitiasi. Interessante come con l' uso di analisi funzionali nelle cellule con adenocarcinoma biliare, sia stato scoperto che un agonista selettivo per EP 4 causi un aumento di sintesi di DNA dose dipendente, mentre un suo antagonista selettivo sopprima la proliferazione cellulare indotta da PGE-2 ( esso inoltre ha la capacità di eliminare o comunque ridurre le lesioni precancerose nei dotti biliari conseguenti a colangiti croniche proliferative associate ad epatolitiasi ).C-met: questa molecola gioca un ruolo importante nella progressione neoplastica di molti tumori, incluso il colangiocarcinoma 116 117 118 . Il protooncogene c-met codifica per il recettore tirosino kinasico transmembrana per il fattore di crescita epatocitario. Kokuryo et al., attraverso l' utilizzo dello screening array per il cDNA 119 , trovarono che l' iperespressione di c-met sia più frequentemente osservabile nei lobi epatici di pazienti con epatolitiasi; ciò suggerisce che c-met possa giocare un importante ruolo a livello dell' epitelio biliare umano occupando un precoce gradino della colangiocarcinogenesi intraepatica.CDX2: recentemente, alcuni studi hanno dimostrato che CDX2 copra un importante ruolo nei cancri umani come gene tumore soppressore 120 121 122 . Esso è un gene homeobox, che regola la proliferazione e differenziazione cellulare dell' epitelio intestinale 123 . Un' anormale espressione di CDX2 è correlata all'iperespressione dell' apomucina 2 ( MUC2 ), che gioca un importante ruolo nella carcinogenesi dei dotti biliari ed è altamente espressa nel cancro dei dotti biliari producente mucina. Ciò suggerisce che la contemporanea regolazione di CDX2 e MUC2 sia coinvolta nello sviluppo del colangiocarcinoma intraepatico associato ad epatolitiasi attraverso la metaplasia intestinale CDX2 dipendente.Helicobacter species: recentemente, ceppi di Helicobacter bile-resistenti sono stati isolati nella bile, a livello tissutale dell' albero biliare e del fegato 124 125 .Kuroki et al. 126 riportarono che l' indice di proliferazione nucleare cellulare dei dotti biliari nei tratti affetti da epatolitiasi è significativamente più alto nei pazienti Helicobacter pylori-positivi.Tuttavia, il preciso meccanismo molecolare di questo agente microbiologico nel processo di carcinogenesi rimane non chiaro.c-erB-2 127 : il protooncogene c-erB-2, localizzato sul braccio lungo del cromosoma 17, loci 21-22, codifica per una glicoproteina del peso molecolare di 185 KDa con dominio tirosino-kinasico, che è altamente omologa al recettore per il fattore di crescita dell' epidermide 128 129 130 . L' amplificazione e l' iperespressione di questo oncogene è stato riportato in molti carcinomi umani, inclusi quelli della mammella, dello stomaco, della vescica, dell' ovaio, della prostata, dell' endometrio e di alcuni tumori neuroendocrini, quali i carcinoidi ed il tumore della tiroide 131 132 133 134 135 136 137 138 .Attraverso metodo immunoistochimico, Terada et al. rilevarono l' espressione di c-erbB-2 in elementi iperplastici dell' epitelio biliare in corso di litiasi intraepatica. Tale scoperta suggerisce che un' espressione aberrante di c-erbB-2 è correlata alla proliferazione dei dotti biliari intraepatici in corso di epatolitiasi.