L'anticorpo è prodotto in una sospensione di cellule di mammifero (ovaio del criceto cinese) su terreno di coltura. In fase preclinica sono stati condotti diversi studi farmacologici volti ad indagare il legame e la cross-reattività dell'Alemtuzumab con i normali tessuti umani, inclusi studi speciali sulla reattività dell'anticorpo monoclonale con la cute umana e con i tessuti del sistema riproduttivo maschile. [47] [48] [49] Molteplici studi hanno dimostrato che l'Alemtuzumab si lega principalmente ai linfociti T e B, ai monociti ed alle cellule dendritiche ed, in misura minore, anche alle cellule NK, ai macrofagi, ad una sottopopolazione di granulociti ed ai timociti [380] [48] [50], ma non danneggia né le cellule staminali ematopoietiche, né quelle progenitrici. [164] Sono stati condotti studi aggiuntivi sulla reattività dell'Alemtuzumab con il sangue periferico umano e le cellule del midollo osseo e studi che valutano la capacità di legame dell'anticorpo con le cellule leucemiche ed i linfociti maligni: l'Alemtuzumab lega il 100% delle cellule leucemiche nella LLC, il 94% di quelle linfomatose nel NHL ed il 79% delle cellule leucemiche nella leucemia linfocitica acuta. [178] [406] [198] Il legame dell'Alemtuzumab è stato osservato anche nel tessuto linfoide e a livello del sistema reticoloendoteliale, nel tratto riproduttivo maschile e a livello cutaneo. Questi dati avvalorano la selettività d'azione di tale anticorpo, il quale lega con alta affinità l'antigene CD52 ed induce rapida e quasi completa deplezione delle cellule che lo esprimono. Questo è probabilmente il più importante meccanismo d'azione terapeutico dell'Alemtuzumab.Nonostante sia stata dimostrata la capacità dell'Alemtuzumab di indurre l'apoptosi caspasiindipendente delle cellule B-linfoidi in vitro [436], non è chiaro fino a che punto questa citotossicità diretta sia rilevante per il suo effetto in vivo. [514] Dagli ultimi studi emerge che il danno cellulare indotto da Alemtuzumab sia frutto di due meccanismi distinti [187]: ADCC: gli anticorpi monoclonali legati al CD52 vengono riconosciuti soprattutto dai neutrofili e dalle NK, i quali ne provocano lisi mediante rilascio di enzimi e proteine distruttive nei confronti delle membrane cellulari; CDC: l'anticorpo legato al CD52 recluta i fattori del complesso (C5b, C6, C7, C8 e poi numerose molecole di C9), i quali creano pori in membrana cellulare e provocano morte della cellula.La via anticorpo-dipendente sembra essere quella maggiormente attivata nei modelli murini [196], mentre nell'uomo un importante ruolo è quello svolto dalla via complemento dipendente. [501] [380] Fig. 27 L'Alemtuzumab lega l'antigene CD52 e causa la lisi cellulare attraverso due meccanismi: la citolisi mediata da anticorpo e la citolisi mediata da complemento.(Havrdova E et al, Ther Adv Neurol Disord. 2015 Jan)