Tutti i test diretti  per la determinazione del gruppo sanguigno (eseguiti con differenti metodiche: vetrino, piastra o micropiastra, provetta, schedine con micro colonne di gel o di microsfere, oppure con strumento automatico) si basano sul riscontro, o meno, di una reazione del sangue a contatto con due diversi tipi di siero immune contenente anticorpi anti-A o anti-B (test di agglutinazione). Ad esempio, su un vetrino sono poste due gocce di sangue: ad una di esse é aggiunta una goccia di siero "anti-A" e sull'altra una goccia di siero "anti-B". Se non si verificano reazioni, il sangue in esame appartiene al gruppo O (zero). Se si osserva la formazione di piccole masse che precipitano (agglutinazione) con il siero anti-A, il sangue è del gruppo A; se reagisce con il siero anti-B è del gruppo B; se si osserva la reazione di agglutinazione con entrambi i sieri (anti-B e anti-A), il sangue appartiene al gruppo AB.