Le analisi di laboratorio consistono nell'identificazione del batterio nelle lesioni (noduli e papule) mediante microscopia o metodiche di biologia molecolare e nella ricerca nel sangue degli anticorpi, diretti contro antigeni specifici (test treponemici TPHA, TPPA) e non specifici (test non treponemici VDRL o RPR). La presenza degli anticorpi specifici in assenza di manifestazioni suggerisce un’infezione contratta in passato o in fase latente.