La diagnosi di FC si fonda sull'esistenza di un quadro clinico compatibile, oppure sulla presenza di una familiarità, associate alla positività del test del sudore. Le mutazioni che causano FC devono soddisfare almeno uno dei seguenti criteri: alterazione della sequenza CFTR che influenzi la sintesi e la funzione della proteina; introduzione di un segnale di stop prematuro, come l'inserzione, la delezione o la mutazione non senso; alterazione dei siti di splicing dell'introne; la creazione di una nuova sequenza di amminoacidi che abitualmente non si presenta nei geni CFTR normali dello stesso gruppo etnico del paziente.L'analisi delle mutazioni mostra un'elevata specificità per confermare la diagnosi di FC, mentre la sensibilità è bassa. Questo perché un gran numero di mutazioni (>1000) sono note causare FC, ma solo una minoranza di queste sono presenti nei pannelli commerciali disponibili, dove l'incorporazione delle 40 mutazioni più frequenti permette di rilevare oltre il 90% di individui affetti in molte popolazioni.Pochi Centri di riferimento però hanno a disposizione pannelli con un maggior numero di mutazioni, eseguendo il sequenziamento genetico per la diagnosi dei casi più atipici. L'analisi completa della sequenza, invece, può sì rilevare la maggior parte delle mutazioni CFTR, ma potrebbe inoltre svelare polimorfismi e nuove mutazioni di importanza, ancora ad oggi sconosciute [68].Le indicazioni per l'esecuzione di un test genetico sono: il partner di un soggetto, portatore o portatrice della mutazione FC, che intendano avere figli per sapere se è portatore della mutazione di FC. chi ha parenti con FC o parenti portatori del gene CFTR, perché ha maggiori probabilità rispetto alla popolazione generale di essere portatore del gene CFTR. diagnosi di presenza di malattia: questo succede quando si identifica nel corredo genetico della persona due mutazioni del gene CFTR invece che una sola.Questo test non è però da usare come primo test per la diagnosi: è utile per conferma, ma il primo test per la diagnosi è quello del sudore.Un metodo utile nel riconoscere individui affetti da FC è la misurazione della differenza di potenziale transepiteliale nasale (NPD) [69].Esiste una differenza di potenziale elettrico, tra la superficie di un epitelio del nostro corpo e il tessuto sottostante, da cui dipendono gli spostamenti di elettroliti, dove vediamo coinvolti principalmente gli elettroliti (soprattutto Cle Na + ) che si trovano a livello tissutale.Le alterazioni del trasporto ionico nell'epitelio respiratorio di pazienti con FC sono associate ad un'alterata differenza del potenziale nasale (NPD). La DIAGNOSI PRENATALE è indicata e dà un risultato sicuro solo nelle coppie di portatori del gene della FC, che hanno un rischio elevato di avere un bambino con FC (25% di rischio ad ogni gravidanza). Si esegue attraverso prelievo di villo coriale (villocentesi) in decima settimana di gravidanza, sul quale viene applicato il test genetico per FC (analisi delle mutazioni del gene CFTR di cui sono portatori i genitori). Se non ci sono ragioni particolari di sospetto, non è opportuno eseguire il test per FC sul feto, perché non fornisce risultati sicuri nel caso di coppie che non siano sicuramente portatrici.Il precoce riconoscimento clinico della FC, in base alle manifestazioni cliniche, risulta difficoltoso perché la maggior parte dei sintomi sono aspecifici.I bambini colpiti da FC inizialmente capita che ricevano una diagnosi errata, di allergie alimentari, celiachia, asma, o bronchite. L'età media della diagnosi clinica, sulla base di segni e sintomi, diversi dall'ileo da meconio, è di 14,5 mesi rispetto a 0,2 mesi per ileo da meconio e 0,5 mesi per lo screening neonatale.Lo SCREENING NEONATALE, che si esegue oggi nella maggior parte delle regioni italiane, si basa sulla misurazione del tripsinogeno immunoreattivo (IRT) in gocce di sangue prelevate dal tallone dei neonati nei primi giorni di vita, raccolte su carta bibula (assorbente). La stessa goccia di sangue viene utilizzata anche per la diagnosi neonatale di altre malattie genetiche. I neonati affetti da FC presentano valori elevati di tripsinogeno nel siero, espressione di una sofferenza pancreatica presente anche in assenza di insufficienza secretiva. E' un test semplice, ma con sensibilità e specificità non ottimali. Per ridurre i falsi positivi, se il "test della goccia" fosse risultato positivo, si ricorre ad una seconda determinazione a 20 -30 giorni di vita (IRT/IRT) oppure si effettua un'iniziale analisi della goccia di sangue per un gruppo specifico di mutazioni del gene CFTR (IRT/DNA) [71].La positività allo screening, quindi, non è sufficiente per porre diagnosi di FC, ma rappresenta un'importante spia di aumentato rischio per il bambino di FC: la conferma diagnostica richiederà ovviamente il test del sudore [72]. Diversi studi hanno dimostrato che lo screening neonatale per la FC, determinando così la possibilità di iniziare precocemente il trattamento e la necessaria supplementazione di vitamine, porta a migliori risultati nutrizionali e ci sono inoltre dati che supportano l'ipotesi che l'aumento della crescita nell'infanzia a seguito di screening neonatale consegua con un miglioramento della funzione polmonare, nel corso della vita [73].In Italia quasi tutte le Regioni hanno reso obbligatorio lo screening per la FC, ma ancora oggi vengono utilizzati protocolli differenti nelle diverse regioni. Manca ancora in Sardegna e solo di recente è stato introdotto in Puglia e in Basilicata. In Piemonte è presente dal 2000.Nella valutazione diagnostica iniziale, sono utilizzati altri TEST COMPLEMENTARI, che contribuiscono al raggiungimento della diagnosi, a valutare la gravità della malattia, e a pianificare specifici approcci terapeutici.Essi includono la valutazione della funzione pancreatica, della funzione polmonare, dei seni paranasali, dell'esame microbiologico su espettorato e del sistema genito-urinario maschile (screening per azoospermia ostruttiva).Altri test diagnostici, in fase di studio, sono la misura della corrente intestinale (ICM), la differenza di potenziale elettrico a livello delle ghiandole sudoripare e la misurazione dell'espressione di CFTR a livello dei leucociti ed eritrociti umani, che potrebbero risultare utili nella diagnostica delle forme dubbie o in quei casi in cui tutti i criteri diagnostici previsti dalle attuali linee guida per la diagnosi non vengano soddisfatti [74] [75] [76] [77].