Knudson suggerì che due "colpi" (da cui la denominazione "ipotesi dei due colpi") al DNA fossero necessari per provocare il cancro. Nei bambini con retinoblastoma ereditario era stata ereditata la prima mutazione in quello che poi è stato identificato come gene "RB1", mentre la seconda mutazione risultava acquisita successivamente. Nel retinoblastoma non ereditario, invece, dovevano avvenire ben due mutazioni "de novo", o "colpi", prima che si potesse sviluppare un tumore: da ciò derivava l'età mediamente più tardiva di insorgenza rispetto al tumore nella forma ereditaria.