La perdita del ritmo circadiano e l'aumento del C24 sono le anomalie più frequenti in pazienti con incidentaloma. Il C24 si è dimostrato l'unico marker biochimico di eccesso di GC correlato con l'IR e l'alterato OGTT, con alcuni caratteri della SM e con maggior prevalenza di rischio CV (se maggiore di 5.4 µg/dl). Tale valore potrebbe essere usato come cut-off per l'SCS. Nello studio Papanicolaou et al sono stati misurati i livelli di cortisolemia al nadir (24.00) ed allo zenit (06.00-08.00). In questo studio una cortisolemia a mezzanotte maggiore di 7.5 µg/dl identifica correttamente il 96% dei pazienti con CS, distinguendoli dalle SCS. Tuttavia la C24 è gravata da una specificità incerta, dovuta alla mancanza di numerosi gruppi di controllo ed al tasso di falsi positivi, e da elevati costi richiesti dall'ospedalizzazione dei pazienti. La C24 appare particolarmente utile nei casi in cui i test biochimici appaiono discordanti con la clinica: in essi un valore normale di questo test, in presenza di alterati test biochimici ed in assenza di riscontri clinici, suggerisce la presenza di SCS.