Viene quindi eseguita una biopsia in microlaringoscopia, in narcosi, per poter provvedere all'analisi istopatologica del tessuto neoformatosi.La biopsia della lesione primitiva deve essere condotta con tecnica incisionale, evitando di alterare le caratteristiche della lesione, in particolare sui suoi margini per fornire così al patologo tessuto vitale e significativo e consentire lo studio del passaggio tra tessuto sano e patologico. Nei tumori iniziali la biopsia può altresì essere di tipo escissionale, a scopo diagnostico e terapeutico.Un agoaspirato linfonodale sotto guida ecografica risulta invece utile quando si è in presenza di adenopatia a sede primitiva ignota. implica la sua asportazione oppure una biopsia tale da consentire la determinazione della più alta categoria pT; la valutazione patologica dei linfonodi regionali (pN) richiede la rimozione e l'esame di un numero sufficiente di linfonodi, variabile a seconda del tipo di linfoadenectomia.