Abbiamo scelto le metastasi epatiche da tumore del colon retto come malattia modello su cui validare tale metodo ed il Cetuximab come farmaco da valutare.La scelta della patologia è dettata innanzitutto dalla rilevanza della malattia metastatica, evoluzione che interessa il 50-60% dei pazienti con neoplasia del colon retto, su cui spesso le possibilità di interventi curativi, come la chirurgia, non sono applicabili.L'introduzione di terapie targeted nel contesto di malattia non operabile sarebbe quindi di grande importanza terapeutica. In secondo luogo l'elevata frequenza con cui le metastasi epatiche si presentano ci consente di avere a disposizione un numero rilevante di campioni tumorali che vanno a costituire la coorte in esame, e quindi di condurre lo studio in tempi relativamente brevi e di arrivare a risultati statisticamente significativi.Infine la scelta delle secondarietà epatiche è motivata da un'altra interessante applicazione del farmaco a bersaglio molecolare nella pratica clinica, nel senso che le metastasi epatiche rappresentano un campo in cui è possibile pensare di impiegare le terapie targeted come trattamento adiuvante dopo la resezione epatica, a fronte dell'elevato rischio di recidiva delle secondarietà anche dopo una resezione radicale. La procedura adottata prevede varie fasi. La prima si svolge in sala operatoria ad opera dello strumentista che, a fine intervento, raccoglie il pezzo operatorio fresco e, sempre in condizioni di sterilità, lo pone in un sacchetto sterile il quale viene inserito all'interno di un altro sacchetto contenente ghiaccio sterile, a sua volta depositato in un contenitore. In tempi quanto più possibile rapidi, trasportiamo il materiale all'Istituto di Anatomia Patologica, dove, in condizioni prossime alla massima sterilità (uso di guanti, telini, bisturi e pinze sterili), preleviamo una parte del campione tumorale, non utile al patologo per le proprie indagini. Suddividiamo la porzione in più frammenti di forma cubica (lunghezza del lato circa 3 mm), che poniamo all'interno di tubi Falcon contenenti terreno di coltura addizionato di bicarbonato, come agente tamponante, e di una miscela antibiotica (penicillina, streptomicina, levofloxacina, fungizone) per limitare la contaminazione batterica. In seguito trasportiamo i contenitori, mantenendoli sempre in ghiaccio, allo stabulario dell'IRCC di Candiolo, dove è allestito il tavolo operatorio veterinario per l'esecuzione dell'impianto nell'animale. Con minime variazioni da un caso all'altro, l'intervallo di tempo che trascorre dall'espianto del pezzo tumorale dal paziente all'impianto nel topo è circa 2 -3 ore (Figura 6.1).