In contrasto con gli ENT, che mediano una diffusione facilitata bidirezionale, i traspor-   presenza di questo trasportatore (164). E' in grado, inoltre di trasportare ad elevata affinità l'adenosina. Ha le stesse localizzazioni enterocitarie e renali, ma è inoltre presente nelle cellule del midollo osseo emopoietico, trachea, pancreas e ghiandola mammaria.Dunque, negli epiteli assorbenti intestinale e renale, i CNTs sono localizzati sul dominio apicale (183): il sistema di trasporto attivo indotto da queste proteine, sembra seguire un gradiente prossimale-distale, con la massima efficienza nel digiuno. A livello renale, CNT1, CNT2 e CNT3 sono presenti sia sul tubulo contorto distale, che sul prossimale, suggerendo un ruolo importante nel riassorbimento delle molecole nucleosidiche, mentre CNT2 e CNT3, che trasportano anche l'adenosina, sono presenti anche a livello del glomerulo e del tubulo distale del nefrone del ratto, suggerendo un importante ruolo nella regolazione tubulare dell'adenosina.In generale, i trasportatori nucleosidici espressi a livello delle cellule epiteliali dell'intestino e del rene sono differentemente distribuiti sulle membrane cellulari, spesso con spesso con i concentrativi sul polo apicale e gli equilibrativi sul polo basolaterale. Questa disposizione permette un assorbimento/riassorbimento vettoriale dei nucleosidi contribuendo all'omeostasi delle molecole endogene e alla farmacocinetica dei derivati nucleosidici, nonché, forse, alla loro tossicità.Il tessuto epatico costituisce una eccezione a questa disposizione basale/apicale dei trasportatori nucleosidici. Gli epatociti costituiscono la maggiore fonte di nucleotidi endogeni del corpo e i migliori regolatori della loro omeostasi, svolgendo una azione tampone che da una parte preleva i nucleotidi in eccesso dalla dieta e dall'altra li distribuisce ai tessuti periferici, in parte disperdendoli nella bile. Nel fegato intatto dei topi, CNT2 è soprattutto espresso sul lato basolaterale-sinusoidale della membrana, mentre CNT1 è soprattutto apicale-canalicolare. Si tratta di un sistema di trasporto comunque polarizzato, ma differente da quello trovato negli epiteli assorbenti. Per analizzare meglio il ruolo dei trasportatori nucleosidici nella complessa architettura epatica, Govindarajan et al. (185) hanno condotto un interessante studio su CNT ed ENT utilizzando epatociti umani coltivati in vitro con una tecnica a sandwich, la quale ha permesso di mantenere la polarizzazione degli epatociti, aumentare il loro gradi di differenziazione e verificare se e come la localizzazione spaziale di ENTs e CNTs media l'utake epatico ed il trasporto vettoriale degli analoghi nucleosidici nel liquido biliare. In particolare si sono concentrati anche sulla ribavirina, essendo un farmaco solo debolmente metabolizzato a livello intracellulare. In base a questo studio, ENT1 è risultato essere il principale responsabile dell'entrata degli analoghi nucleosidici negli epatociti.L'espressione epatica di CNT1 ed ENT1 è risultata significativamente maggiore rispetto a CNT2, che è presente in misura minore ma efficace. CNT3 ed ENT2 sono risultate poco espresse.In base al modello proposto dagli autori, i trasportatori concentrativi unidirezionali espressi sulla membraana sinusoidale permettono l'entrata dei nucleosidi a livello epatico, mentre ENT1 ed ENT2 allo stesso livello mediano sia l'uptake negli epatociti che l'efflusso nel sangue. Lo stesso accade a livello della membrana canalicolare, dove i CNT permettono il re-uptake dei nucleosidi negli epatociti mentre ENT1 in particolare potrebbe mediare sia l'entrata epatocita sia l'efflusso biliare, secondo il gradiente dalle concentrazioni farmacologiche in questi due compartimenti.Il contributo percentuale dei vari trasportatori alla traslocazione dei substrati è risultato dipendente dalla partecipazione di altri trasportatori al processo, suggerendo l'esistenza di un meccanismo di coregolazione.Questo processo putativo potrebbe essere ancora più realistico per molecole, come la ribavirina, che non sono rapidamente e significativamente metabolizzate a livello intracellulare:per questo tipo di farmaci, ENT1 potrebbe mediare l'efflusso nella bile.Una volta nella bile, gli analoghi nucleosidici possono essere soggetti a due processi competitivi:1. Re-uptake da parte dei CNT;2. Discesa dell'albero biliare fino al dotto biliare.Il processo di reuptake sarà governato dall'attività funzionale relativa dei vari trasportatori nucleosidici e dalle loro concentrazioni biliari che, probabilmente alte, potrebbero satura-re i trasportatori.L'efflusso biliare degli analoghi nucleosidici è comunque dipendente dalla magnitudine del loro metabolismo cellulare: i farmaci che sono estensivamente metabolizzati dagli epatociti non vengono escreti nella bile in concentrazioni significative. I dati di questo studio suggeriscono, infine, che i trasportatori nucleosidici epatici potrebbero essere sfruttati farmacologicamente per rilasciare farmaci antivirali nel fegato in una maniera più efficiente e tessuto-specifica per ottimizzare il trattamento dell'epatite cronica di tipo C e B.Recentemente, alcune pubblicazioni correlano l'espressione di CNTs all'outcome clinico. Lo studio di Mackey et al. (186) ha riportato che i pazienti con leucemia linfocitica cronica ed elevati livelli di espressione di CNT3 sulle cellule tumorali hanno riscontrato un basso tasso di risposta farmacologica completa alla terapia a base di fludarabina, farmaco pirimidinico trasportato da CNT3, il quale è espresso sulle cellule midollari.Nello studio di Gloeckner-Hoffmann et al. (187), pazienti affetti da tumore mammario dopo chirurgia e terapia a base di ciclofosfamide, metrotrexato e 5-fluorouracile -i metaboliti del quale sono trasportati da CNT1-2-3 e anche ENT1-2 -hanno mostrato un aumentato rischio di recidiva ed un ridotto tempo libero da malattia associati alla presenza di CNT1. In questo caso CNT1 si è rivelato un indicatore di cattiva prognosi.Nello studio di Maréchal R. et al. (174) l'espressione da parte delle cellule tumorali di CNT3 ed ENT1 è stata correlata ad un significativo aumento della sopravvivenza in pazienti trattati con gemcitabina dopo resezione di adenocarcinoma pancreatico.In generale, l'espressione dei CNTs sulla membrana è significativa di un certo grado di maturazione cellulare (183). L'espressione di particolari CNT, quindi, potrebbe essere predittiva di buona prognosi, indicando un basso livello di malignità delle cellule tumorali, piuttosto che una maggiore sensibilità ai farmaci trasportati da quel CNT.Se, da una parte, il salvataggio nucleotidico può interferire con l'azione dei farmaci chemioterapici non nucleotidici, dall'altra, l'elevata espressione di un particolare trasportatore CNT può essere responsabile di tossicità se il farmaco utilizzato è substrato di quel trasportatore. Studi in vitro indicano che l'espressione cellulare di CNT1 conferisce elevata sensibilità ai derivati nucleosidici pirimidinici (188). In vivo questa elevata sensibilità potrebbe tradursi in tossicità farmacologica.Anche se in generale sembrano essere gli ENTs a giocare un ruolo maggiore nel promuovere l'azione citotossica dei derivati nucleosidici, non è tanto la presenza/assenza o la funzionalità/inibizione di un singolo trasportatore a determinare la performance terapeutica dei derivati nucleosidici, quanto, invece, il pattern d'espressione di tutti i trasportatori a livello di membrana.