• mCD14 (CD14 di membrana), in forma di glicoproteina di membrana, composta da una testa proteica ed una coda ancorata alla membrana cellulare attraverso un glicosilfosfatidilinositolo;• sCD14 (CD14 solubile), in forma solubile, derivante dallo "shedding" ovvero dal taglio della forma mCD14 (p.m. 48KDa) ad opera di proteasi specifiche. mCD14 è intensamente espresso sui monociti e sui macrofagi e moderatamente sui neutrofili polinucleati del sangue periferico; è inoltre presente sui fagociti pleurici, sulle cellule reticolari dendritiche, nonché sulle cellule della linea mielomonocitaria. L'espressione è debole sui linfociti B ed assente dai linfociti T e dalle cellule NK, dagli eritrociti e dalle piastrine. sCD14 invece è secreto dai monociti e dalle cellule epatiche ed è sufficiente già in minime concentrazioni ad assicurare una risposta immunitaria adeguata anche da parte di quelle cellule che non esprimono il CD14 di membrana come per esempio le cellule endoteliali e le cellule epiteliali [2].La principale funzione di mCD14 è quella di co--recettore assieme al Toll--like receptor 4 (TLR 4) ed a MD2 per l'identificazione del lipopolisaccaride batterico (LPS), componente dei Gram negativi, e del peptidoglicano dei Gram positivi. Il LPS è considerato il principale ligando di questa proteina e l'affinità del legame aumenta di centinaia di volte in presenza della proteina legante il LPS, lipopolysaccharide binding protein (LBP). I recettori di tipo Toll sono una classe di recettori a singolo segmento trans membrana caratterizzanti le cellule dell'immunità innata che riconoscono motivi molecolari stereotipati, comuni a numerosi microrganismi patogeni. Essi, quando sono attivati, scatenano, attraverso diverse vie di segnalazione intracellulare, una risposta di tipo infiammatorio con conseguente produzione di citochine [3] [4] (Figura 1).Le ghiandole salivari maggiori secernono costitutivamente sCD14 nella saliva: il sCD14 salivare può mediare l'attivazione delle cellule epiteliali intestinali che non esprimono la forma di membrana attraverso il TLR--4 in presenza di LPS batterico e promuove l'invasione delle cellule epiteliali orali da parte dell' Aggregatibacter actinomycetemcomitans, aumentando di conseguenza la produzione di IL--8 [5] [6] [7].Tale evidenza suggerisce che il sCD14 umano potrebbe anche giocare un ruolo importante all'interno del meccanismo di immunità innata nel cavo orale.Figura 1 E' ampiamente riconosciuto che l'infiammazione e l'infezione, sia da sola sia quale causa scatenante di quest'ultima, giochino un ruolo determinante nell' eziopatogenesi delle cardiopatie ischemiche (IHD). Si pensa, infatti, che le cellule del sistema immunitario siano coinvolte in vari aspetti riguardanti le IHD; come la ritenzione di lipoproteine e lo sviluppo delle placche ateromasiche e la conseguente rottura delle stesse. Allo stesso tempo è stato riportato che l'infezione in sé possa essere un fattore di attivazione delle placche e di progressione dell'aterosclerosi [8].Le malattie cardiovascolari (CVD) sono la principale causa di morte e di ospedalizzazione in quasi tutti gli Stati d'Europa. Nell'Unione Europea (EU) il 46% delle donne e il 39% degli uomini muoiono a causa della CVD. All'interno del gruppo delle CVD, le cardiopatie ischemiche da sole sono la principale causa di morte nell'EU, contando circa 744,000 decessi all'anno: muoiono per queste malattie circa un uomo su sei (17%) e più di una donna su sette (16%) [9]. Studi epidemiologici hanno dimostrato che le IHD sono evitabili in larga misura attraverso l'individuazione dei soggetti ad alto rischio (CISS). I convenzionali fattori di rischio per l'aterosclerosi e le varie forme di coronaropatia, come l'ipertensione, il diabete, il sesso, le condizioni socio--economiche, il fumo, l'obesità, gli elevati livelli sierici di lipoproteine a bassa densità (LDL) e la predisposizione genetica, sono ormai riconosciuti dal Framingham Heart Study [ref6JOEBrita] [10] [11] [12]. Tuttavia nei pazienti giovani adulti di età inferiore a 55 anni le cardiopatie ischemiche non sono generalmente associate a questi fattori di rischio convenzionali, benché alcuni come il fumo e la familiarità sembrino giocare lo stesso un ruolo significativo [13]. Recentemente sono stati presi in esame altri fattori non convenzionali; uno di questi è la presenza degli stati d'infiammazione cronica. Esiste, infatti, sulla base di studi clinici ed epidemiologici, una forte evidenza scientifica del fatto che i markers sierici di infiammazione siano correlati allo sviluppo di infarti del miocardio (MI), talvolta con esito fatale. Tali processi infiammatori cronici sono stati considerati predittivi alla presenza di aterosclerosi (LG), e di recente le infezioni orali con esito di cronicizzazione sono state indicate come potenzialmente associabili alle coronaropatie [14] La parodontite cronica è collegata alla presenza dell'arterosclerosi e all'aumento della prevalenza e dell'incidenza delle cardiopatie ischemiche, indipendentemente dalla presenza dei fattori di rischio convenzionali [15] [16] [17] [18]. L'infezione parodontale potrebbe influire sullo sviluppo della coronaropatia per esposizione ematogena a batteri Gram positivi e Gram negativi responsabili della parodontite cronica, mediante un meccanismo di mimetismo molecolare che vedrebbe coinvolta una sequenza aminoacidica di membrana dello S. Sanguis [19] [20] [21]. Inoltre il LPS batterico, attraverso il legame con il recettore CD14 presente sulla membrana endoteliale, determina il rilascio di fattori proinfiammatori e l'esposizione di adesine coinvolte nei processi di aterogenesi e trombogenesi [22] [23]. E' stata dimostrata la presenza di DNA di Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia e Aggregatibacter actinomycetemcomitans in ateromi di pazienti affetti da aterosclerosi [24] [25] [26] [27]. La parodontite cronica induce un aumento di proteina C--reattiva (CRP) e di anticorpi IgA anti--patogeni parodontali [28]. L'aumento di CRP è stata associata ad un aumentato rischio di malattia cardiovascolare in individui inizialmente sani [29] [30]. Studi recenti hanno rilevato livelli elevati di CRP sia in pazienti con aterosclerosi coronarica sia con malattia parodontale [31] [32]. L'incremento maggiore è stato osservato per i pazienti che soffrivano di entrambe le condizioni patologiche. La positività per IgA anti--Porphiromonas gingivalis predispone all'infarto in soggetti con una storia di malattia cardiovascolare, mentre la positività per Aggregatibacter actinomycetemcomitans è associata all'incidenza d'infarto in soggetti senza una storia clinica di malattia cardiovascolare [33]. Elevati livelli anticorpali anti--patogeni parodontali sono correlati ad un'aumentata incidenza di malattia coronarica [34] [35]. La parodontite cronica è stata inoltre associata ad un aumento del livello totale di colesterolo, di trigliceridi e di LDL e ad una riduzione delle HDL [36] [37], tutti fenomeni che si accompagnano ad un aumentato rischio di formazione di placche ateromatose. Inoltre, dopo il trattamento parodontale, si osserva un incremento della concentrazione sierica di colesterolo HDL, con conseguente aumento del rapporto HDL/LDL, e riduzione dei livelli sierici di proteina C--reattiva [36].La parodontite apicale, considerata così come una risposta immunitaria di fronte alla contaminazione batterica dell'endodonto e dello spazio peri radicolare, presenta evidenti analogie con la risposta immunitaria che si sviluppa in corso di parodontite cronica [38] [39] [40] [41]. Le cellule dell'infiammazione cronica insieme ai complessi immuni, alle prostaglandine, agli enzimi idrolitici lisosomiali ed alle endotossine hanno un ruolo fondamentale nella patogenesi dell'infiammazione e del riassorbimento osseo. I patogeni presenti all'interno dello spazio endodontico, i quali sono rappresentati sostanzialmente dalle medesime specie coinvolte nelle infezioni parodontali, possono raggiungere le placche aterosclerotiche tramite un meccanismo d'infezione metastatica, oppure agire per mezzo di un meccanismo di mimetismo molecolare, così come descritto precedentemente [25] [26] [27]. In seguito alla presentazione del LPS da parte dei batteri Gram negativi è stato osservato un aumento di citochine proinfiammatorie e d'immunoglobuline nella polpa, nei tessuti periapicali e a livello sierico, in pazienti con pulpite e parodontite apicale [42] [43] [44] [45].In particolare IL--1, IL--6, GM--CSF, TNF--α, che promuovono l'attivazione di granulociti neutrofili, monociti/macrofagi, la via alternativa del complemento e l'emostasi [48] [49] [50] [51]. IL--1, GM--CSF e TNF--α incrementano inoltre la forza di legame delle LDL all'endotelio e alla muscolatura liscia vasale ed aumentano l'espressione del gene per il recettore vascolare delle LDL, favorendo l'aterosclerosi [50] [51]. IL--1 è per di più in grado di favorire la produzione di PGE2 e TXA2 amplificando la risposta infiammatoria. La presenza di lesioni infiammatorie periradicolari di origine endodontica è stata associata anche ad un incremento del livello sierico di proteina C--reattiva, come avviene per la malattia parodontale [52].Tuttavia le informazioni riguardo le manifestazioni sistemiche del processo infiammatorio periapicale rimangono controverse, sebbene alcuni lavori abbiano dimostrato, utilizzando il trattamento del sistema dei canali radicolari (RCT) come parametro di controllo, come nella popolazione dei soggetti con evidenza di lesioni peri--radicolari di origine endodontica (LEO) o di infiammazione pulpare, ci sia un aumento del rischio di sviluppare cardiopatie ischemiche [44] [47] [53].Il gene CD14 è stato proposto come un marker di suscettibilità sia per le IHD, sia per le infiammazioni croniche di origine endodontica e parodontale [54] [55] [56] [57]. Infatti, la proteina ad esso associata, dopo il legame con il LPS, media l'attivazione delle cellule infiammatorie che contribuiscono alla produzione delle citochine e degli altri mediatori dell'infiammazione. Diversi studi hanno indagato l'associazione tra il polimorfismo del promotore del gene CD14 C(--260)T e le differenti forme di malattie associate ad aterosclerosi [56] [58]. In particolare l'allele T in posizione --260, ed a volte anche quello in posizione --159, è stato proposto come un fattore di rischio per l'infarto miocardico e per l'infiammazione parodontale [59] [60]. Allo stato attuale delle conoscenze, diversi Autori suggeriscono che i fattori genetici che influenzano la reattività delle cellule infiammatorie possano giocare un ruolo rilevante nel determinare un primo esordio acuto della malattia coronarica [61] [62].L'obiettivo di questo studio è stato quello di identificare due polimorfismi del promotore del gene CD14 in posizione C(--260)T e C(--159)T, come markers di predisposizione per l'insorgenza di cardiopatia ischemica in relazione alla presenza di patologie infiammatorie croniche di origine endodontica e parodontale, confrontando un gruppo di pazienti malati esenti dai fattori di rischio convenzionali con un gruppo di controllo. Inoltre è stato analizzato il dosaggio salivare di sCD14 nei pazienti cardiopatici e nei controlli in presenza ed in assenza di malattia endodontica, parodontale e cariosa. Sono stati osservati i seguenti criteri d'inclusione: