Durante il processo di congelamento, la zona pellucida, o guscio dell'uovo, può essere modificata prevenendo la fecondazione. Pertanto, quando le uova vengono scongelate, un embriologo esegue una speciale procedura di fecondazione in base alla quale lo sperma viene iniettato direttamente nell'uovo con un ago piuttosto che consentire allo sperma di penetrare naturalmente posizionandolo attorno all'uovo in un piatto. Questa tecnica di iniezione è chiamata ICSI (Intracytoplasmic Sperm Injection) ed è utilizzata anche nella fecondazione in vitro.