Il FVIII è una glicoproteina pro-cofattore. Viene rilasciato nel flusso sanguigno dalle reti vascolari degli endoteli: glomerulari e tubolari e dalle cellule sinusoidali del fegato, . Nel sangue circolante, tale fattore è principalmente legato al fattore di von Willebrand in un complesso stabile. Dopo l'attivazione da parte della trombina (Fattore IIa), si dissocia dal complesso ed interagisce con il fattore IXa nella cascata della coagulazione. FVIII assume il ruolo di cofattore del fattore IXa nell'attivazione del fattore X, che a sua volta, con il suo cofattore fattore Va, attiva più trombina. La trombina scinde il fibrinogeno in fibrina la quale polimerizza a dare legami crociati (con il fattore XIII) in un coagulo di sangue .