La rolitetraciclina è stata utilizzata nel trattamento della brucellosi, delle infezioni delle alte vie respiratorie e delle sinusiti e delle infezioni polmonari. In letteratura se ne segnala l'uso anche in alcune infezioni veneree tra cui la gonorrea, in infezioni intestinali comprendenti appendiciti perforate ed ascessi appendicolari ed anche nelle infezioni ossee. Il farmaco ha inoltre trovato impiego nelle infezioni biliari.