Il primo test di questo gruppo è stato il TPHA il cui antigene originale era costituito da emazie di pecora sulla cui superficie era adeso un lisato di Treponema pallidum. Esse venivano cimentate con il siero del paziente e, in caso di positività (presenza dell'anticorpo), subivano agglutinazione (macroagglutinazione) 18 .Attualmente, il test più utilizzato per la conferma dei test di screening è il TPPA, che ha sostituito il TPHA, perché, utilizzandone lo stesso principio, usa vettori sintetici: particelle di gelatina sensibilizzate con Treponema pallidum patogeno purificato 43-44-45-46 , più facili da trovare e da gestire delle emazia di pecora.Questi test diventano positivi dopo 10-14 giorni dopo la comparsa del sifiloma e 30-45 giorni dal contagio, rimangono positivi ed ad alto titolo se la lue non viene trattata. Si negativizzano raramente dopo una terapia tempestiva e rimangono indefinitivamente positivi a bassi titoli 18 .Alle diluizioni più basse alcuni campioni con titoli anticorpali molto elevati possono manifestare il fenomeno della prozona, risutando così falsamente negativi. Falsi positivi possono, invece, presentarsi in pazienti sottoposti ad iniezioni di emoderivati/preparati contenenti immunoglobuline 42-43-44-45 .Tali esami non sono usati per ottenere informazioni per la valutazione della terapia, in quanto numerosi studi hanno dimostrato che non c'è correlazione tra il titolo anticorpale e la progressione della malattia o lo stadio clinico della stessa 18 .Non vengono utilizzati per programmi di screening, perché molto cari ed operatore dipendenti, ma vengono sfruttati per confermare i test di screening. Si tratta di test quantitativi, perché utilizzano il metodo delle diluizioni progressive.