Gli esperimenti sono stati effettuati utilizzando topi appartenenti al ceppo 129/Sv; parte dei topi erano wild type per la proteina PI3K-γ (PI3K-γ +/+ ), mentre altri erano knock out per la stessa proteina (PI3K-γ -/-). Gli animali sono stati allevati presso lo stabulario del Dipartimento di Genetica dell'Università di Torino, in conformità con le linee guida internazionali di protezione degli animali e con la legislazione italiana.Gli animali sono stati anestetizzati mediante iniezione intraperitoneale di Avertin (tribromoethanol; 400 mg/kg; Sigma-Aldrich, Milwaukee, Wisconsin, USA) e poi pesati.Attraverso un accesso laparotomico mediano, lesionando il diaframma nel suo punto di inserzione sternale, è stato quindi indotto un pneumotorace iatrogeno che, facendo collassare i polmoni all'ilo, ha permesso, senza rischio di danno al Da ultimo, la parte superiore della camera è stata chiusa e la ventilazione, sempre in modalità a pressione controllata, è passata da positiva a negativa; tale pressione negativa all'interno della camera si è realizzata tramite l'effetto Venturi creato da una valvola dell'apparato. La pressione negativa ha permesso di minimizzare la formazione di edema idrostatico.La sequenza fotografica della procedura chirurgica descritta viene riportata nell'appendice, mentre la camera di ventilazione è rappresentata in FIGURA 3-1.Alcuni animali (gruppo SHAM) hanno subito la chirurgia e sono stati sacrificati senza essere sottoposti ad alcuna strategia ventilatoria. I polmoni di tali animali sono stati utilizzati come controllo negativo all'interno della metodica Western Blot e dell'istologia.