Il gruppo in studio ha incluso un totale di 82 pazienti, di cui 63 donne (76,83%) e 19 uomini (23,17%); l età media al momento dell esecuzione del prelievo citologico è di 46 anni (46,36) (età minima: 16; età massima: 81).In tutti i pazienti inclusi nello studio, è stata valutata la funzionalità tiroidea, che è risultata nella norma in 77 su 82 casi. Tre su 82 pazienti hanno un quadro clinicolaboratoristico di ipotiroidismo e in due su 82 pazienti, i dosaggi ormonali evidenziano un TSH ai limiti inferiori della norma con normali valori di ormoni tiroidei (fT3, fT4).Sono stati eseguiti i dosaggi della tireoglobulina in 35 pazienti e degli anticorpi antitireoperossidasi (anti-TPO) e anti-tireoglobulina umana (anti-HTG) in 27 pazienti; la tireoglobulina ha valori sopra alla norma in 3 casi, mentre gli anticorpi anti-TPO e anti-HGT sono risultati entro i limiti di normalità in tutti i casi.La calcitonina è stata dosata in 14 pazienti, ed in tutti è risultata nella norma (< 10 pg/ml).  La concordanza inter-osservatore dopo l osservazione dei preparati in E&E, tra tre osservatori (BG, PD, AS), espressa come K di Cohen-Fleiss 49 , è risultata essere del 47,8%, e tale concordanza è statisticamente significativa (p<0,005).Inoltre, è stata calcolata la concordanza tra 2 osservatori (BG, AS) nell attribuzione del Tir dopo l osservazione dei preparati di immunoistochimica (IIC) per Emerina: in questo caso, la concordanza (anche qui espressa come K di Cohen-Fleiss) è risultata essere del 52,5% (p<0,005).I casi risultati discordanti dopo una prima valutazione (sia dei preparati in E&E, sia dei preparati di IIC) sono stati rivalutati dai tre osservatori insieme, i quali hanno discusso i motivi del disaccordo fino a trovare una concordanza diagnostica (espressa nel valore definito come Tir post-consensus ).Successivamente, abbiamo confrontato, per ogni caso, il valore di Tir riferito al preparato colorato con E&E, il valore di Tir conclusivo (dato dopo aver preso visione dell E&E e dei preparati in IIC per l Emerina e dopo aver discusso tra i vari osservatori i casi in cui vi era discordanza nell attribuzione del Tir) e il referto istologico relativo alla lesione che era stata precedentemente sottoposta a agoaspirato.Effettuata una prima analisi dei dati, abbiamo schematizzato i risultati ottenuti in questo modo: La casistica comprende 14 casi definiti all analisi citologica tradizionale (in E&E) come Tir 4: di questi 14 casi, 6 sono stati confermati come Tir 4 dopo aver analizzato i preparati colorati per l Emerina; di questi 6 casi, 1 è definito come struma all esame istologico, 3 come carcinoma papillifero (di cui 2 della varietà follicolare), 1 come carcinoma scarsamente differenziato e 1 come carcinoma ben differenziato, non altrimenti specificato (WDC-NOS) . Gli altri 8 casi su 14 sono stati spostati nella categoria Tir 4 dopo la colorazione per l Emerina: tutti questi casi sono risultati carcinoma papillifero (7 casi della variante follicolare).La casistica comprende anche 3 casi definiti con la colorazione in E&E come Tir 5: tutti e 3 questi casi sono stati confermati Tir 5 dopo la colorazione per l Emerina e sono risultati carcinoma papillifero classico all esame istologico.Infine, la casistica comprende 8 casi di Tir 2 all E&E: di questi casi, 6 sono stati confermati Tir 2 dopo la colorazione per l Emerina, mentre 2 sono diventati Tir 3. Tutte e 8 le lesioni sono risultate struma dopo l esame istologico.Una volta ottenuti questi risultati, abbiamo effettuato il calcolo del Chi Quadrato sulla correlazione esistente tra esame citologico ed esame istologico, sia per i preparati colorati in E&E sia per quelli colorati con l'IIC.L'intensità della correlazione (espressa sotto forma di Chi Quadrato) esistente tra la gradazione dei preparati in E&E espressa sotto forma di Tir e la diagnosi istologica di quella stessa lesione risulta essere del 9,41 % con una p = 0,002; in particolare, abbiamo 32 casi di Tir 2 / Tir 3 con istologia maligna (di cui 4 WDT-UMP, 9 carcinomi follicolari, 2 carcinomi scarsamente differenziati, 17 casi di carcinoma papillifero), 33 casi di Tir 2 / Tir 3 con istologia benigna (di cui 21 strumi e 12 casi di adenoma), 16casi di Tir 4 / Tir 5 con istologia maligna (14 casi di carcinoma papillifero, 1 caso di WDC,NOS, 1 caso di carcinoma scarsamente differenziato), 1 caso di Tir 4 / Tir 5 con istologia benigna (struma).Tale dato è stato confrontato con il Chi Quadrato ottenuto calcolando la correlazione esistente tra gradazione dei preparati in IIC espressa sotto forma di Tir e diagnosi istologica di quella stessa lesione: il Chi Quadrato risulta essere del 40,7% con una p < 0,0001; in particolare, abbiamo 12 casi di Tir 2 / Tir 3 con istologia maligna (di cui 9 casi di carcinoma follicolare, 2 WDT-UMP e 1 caso di carcinoma scarsamente differenziato), 32 casi di Tir 2 / Tir 3 con istologia benigna (di cui 21 casi di struma e 11 casi di adenoma follicolare), 36 casi di Tir 4 / Tir 5 con istologia maligna (di cui 31 casi di carcinoma papillifero, 2 casi di carcinoma scarsamente differenziato, 2 casi di WDT-UMP e 1 caso di WDC-NOS), 2 casi di Tir 4 / Tir 5 con istologia benigna (1 caso di adenoma trabecolare e 1 caso di struma).Infine -infine, tutti e 3 i casi Tir 5 all'E&E vengono confermati dopo colorazione per l'Emerina.Per quel che riguarda gli altri istotipi maligni:-carcinoma scarsamente differenziato: 1 caso viene confermato Tir 3 dopo colorazione di IIC, 1 caso viene spostato dalla categoria Tir 3 alla categoria Tir 4, e 1 caso viene confermato nella categoria Tir 4;-tumore ben differenziato a incerto potenziale di malignità: 2 casi vengono confermati nella categoria Tir 3, 2 casi vengono spostati dalla categoria Tir 3 alla categoria Tir 4; con la colorazione per l Emerina nella categoria Tir 4;-carcinoma follicolare: l Emerina non è in grado di spostare nelle categorie di malignità Tir 4 / Tir 5 questi casi, che quindi vengono confermati nella categoria Tir 3 (in tutti i 9 casi)Il ruolo della colorazione per l Emerina negli istotipi benigni è stato:-struma: in 19 su 22 casi, la colorazione per l Emerina si è dimostrata in grado di confermare la diagnosi in E&E di Tir 2 (6 casi) o di Tir 3 (13 casi); in 1 caso, l Emerina ha confermato il valore di Tir 4 che era stato assegnato all E&E; in 2 casi, invece, la colorazione per l Emerina ha aumentato a Tir 3 il valore di Tir 2 dato con l E&E.-adenoma follicolare: in tutti i casi analizzati (11 casi), la colorazione per l Emerina ha confermato il valore di Tir 3 assegnato con l E&E.-adenoma trabecolare: la colorazione per l Emerina ha confermato il valore di Tir 4 assegnato con l E&E.La colorazione di immunoistochimica per la Galectina 3, eseguita su tutti i casi di Tir 3, ha dato esito positivo in 29 casi e negativo in 28 casi: in particolare, abbiamo 8 casi di falsi positivi (di cui 5 casi di struma e 3 casi di adenoma follicolare), 11 casi di falsi negativi (di cui 4 casi di carcinoma papillifero, variante follicolare, 5 casi di carcinoma follicolare e 2 casi di carcinoma scarsamente differenziato), 21 casi di veri positivi (di cui 4 casi di carcinoma ben differenziato a comportamento biologico incerto, 12 casi di carcinoma papillifero, variante follicolare, 1 caso di carcinoma papillifero, varietà 51 classica e 4 casi di carcinoma follicolare) ed infine 17 casi di veri negativi (di cui 8 casi di struma, 8 casi di adenoma follicolare e 1 caso di adenoma trabecolare). La sensibilità delle due colorazioni calcolata per la categoria Tir 3 sulla capacità di individuare le lesioni neoplastiche maligne risulta essere del 62,5% per l Emerina e del 65,62% per la Molto più problematico è l atteggiamento terapeutico da tenere nei confronti delle lesioni diagnosticate come proliferazioni follicolari, in cui il giudizio circa la benignità/malignità della lesione è inconclusivo o indeterminato (Tir 3) 8 . Di fronte a tale lesione, il patologo deve tenere in considerazione un ampio spettro di patologie tiroidee, dato che una formazione follicolare può essere espressione di uno struma prevalentemente microfollicolare, di un adenoma follicolare oppure, nel 20 % dei casi 9 di un carcinoma follicolare o di un CPT nella sua variante follicolare.Di conseguenza, l atteggiamento terapeutico da tenere dopo una diagnosi di lesione follicolare varia da un semplice controllo a distanza a una exeresi chirurgica con tiroidectomia totale associata o meno a linfoadenectomia laterocervicale.Di fronte ad un aspetto citologico identico o pressoché identico di neoformazione follicolare per tutte queste patologie, non esistevano, fino ad oggi, elementi in grado di differenziare morfologicamente queste lesioni.La colorazione in IIC dell Emerina, invece, si è rivelata un utile indagine diagnostica per individuare, all interno dell ampia categoria delle lesioni follicolari o Tir 3, i casi di CPT (in particolare, della variante follicolare).L Emerina è una proteina associata alla membrana nucleare interna, espressa in tutti i tessuti e la sua colorazione, con tecniche di IIC, consente di visualizzare al meglio la forma del nucleo delle cellule. In particolare, uno studio del 2008 46 condotto su un ampia casistica di lesioni tiroidee di vario tipo (carcinoma papillifero, adenoma follicolare, carcinoma follicolare, carcinoma scarsamente differenziato, tiroidite di Hashimoto, struma microfollicolare e morbo di Graves) ha dimostrato l utilità della colorazione per l Emerina nel rendere più evidenti i caratteri peculiari della morfologia nucleare nel CPT; inoltre, questo nuovo approccio ha consentito una migliore comprensione della natura di lesioni dubbie , con caratteristiche morfologiche suggestive ma non certe di CPT.Partendo da questi risultati ottenuti sull istologia, abbiamo pensato di studiare i preparati citologici delle lesioni tiroidee.La casistica qui presentata comprende vari esempi di patologia tiroidea: struma, adenoma (follicolare, trabecolare), carcinoma follicolare, carcinoma papillifero (in particolare della variante follicolare), carcinoma scarsamente differenziato, tumore ben differenziato a incerto potenziale di malignità, carcinoma ben differenziato non altrimenti specificato. Nella maggior parte dei casi (57 su un totale di 82 casi), tali lesioni si presentano come neoformazioni microfollicolari o follicolari, diagnosticate pertanto come Tir 3: è su di esse, infatti, che abbiamo scelto di focalizzare maggiormente la nostra attenzione data la difficoltà diagnostica e le conseguenze terapeutiche, molto diverse a seconda della patologia di cui le lesioni sono espressione.