I livelli di IL-10 ed IL-12p70 umane presenti nei surnatanti delle colture delle DC sono stati misurati mediante test "Sandwich ELISA".ELISA è l' acronimo dell' espressione inglese "Enzyme-Linked Immunosorbent Assay", un metodo di analisi immunologica utilizzato in biochimica per rilevare la presenza di un dato antigene in campioni biologici. La reazione è stata condotta secondo le seguenti seguenti fasi:1. Immissione di una soluzione dell' anticorpo primario specifico per l' antigene da individuare (IL-10 ed IL-12p70) nei pozzetti di una piastra da saggio in polistirene. Saturazione del fondo del pozzetto con l' anticorpo e lavaggio con soluzione tampone. L' anticorpo primario aderisce al fondo dei pozzetti e l' eccesso viene rimosso.2. Aggiunta dei surnatanti, dei quali viene rilevata la presenza dell' antigene, e lavaggio con soluzione tampone. Se presente, l'antigene è in grado di legarsi specificamente con l' anticorpo primario.3. Aggiunta dell' anticorpo secondario coniugato con l'enzima fosfatasi alcalina. Lavaggio con soluzione tampone.4. Aggiunta di p-nitrofenilfosfato. Questa sostanza provoca una reazione con l' enzima coniugato all' anticorpo secondario, producendo pnitrofenolo di colore giallo. Se l'antigene caratteristico è assente nel pozzetto la reazione non può avvenire.5. Aggiunta di idrossido di sodio, in grado di bloccare la reazione tra enzima fosfatasi e p-nitrofenilfosfato.6. Lettura del risultato, il quale è espressione della reazione tra enzima fosfatasi e p-nitrofenilfosfato. La reazione cromogenica o fluorogenica avvenuta sul substrato sviluppa colore o luce di fluorescenza, che sono successivamente misurabili in spettrofotometria.Lo sviluppo del colore è indicativo della presenza dell' antigene. L' intensità della colorazione, misurabile grazie allo spettrofotometro, è quantitativa, secondo una scala arbitraria di intensità costruita su una curva scalare di concentrazioni note di proteina standard. Il test è da intendersi valido se la reazione risulta positiva nel pozzetto di controllo dove è sicuramente presente l' antigene e negativa nel pozzetto di controllo dove l' antigene sicuramente non è presente.