I plasmidi e la linea cellulare 293TT usati per la produzione degli pseudovirioni sono stati gentilmente concessi da John Schiller (National Cancer Institute, Bethesda, Maryland, USA) eMartin Müller (German Cancer Research Center, Heildelberg,Germany).La generazione degli pseudovirioni viene compiuta eseguendo i passaggi sperimentali qui di seguito riportati.Crescita delle cellule (giorno 0): 18 milioni di cellule 293TT vengono piastrate in fiasche T-150 in un volume finale di 30 ml di terreno (DMEM con il 10% siero, 1% di glutamax, 1% di aminoacidi non essenziali).  Raccolta dell'estratto crudo di pseudovirioni (giorno 3): a partire dalle due fiasche si procede alla raccolta delle cellule infettate e del surnatante. Le cellule vengono centrifugate a 1000 rpm per 5-10 minuti, lavate in 10 ml di DPBS e successivamente risospese in D-PBS supplementato con un'aggiunta di 9.5 mM di MgCl2; il pellet cellulare si trasferisce in un eppendorf siliconata da 1.5 ml e si procede alla lisi cellulare e maturazione degli pseudovirioni per 24 ore a 37˚C al fine di ottenere l'estratto crudo di pseudovirioni.