Gli amfenicoli sono batteriostatici ad eccezione dell'Haemophilus influenzae, meningococco e streptococco sui quali ha un effetto battericida. L'attività è data dalla formazione di un legame irreversibile con la subunità ribosomiale 50S del complesso batterico 70S. Tale legame comporta l’inibizione dell’attività transpeptidasica, con impossibilità di trasferire il legame peptidico dal t-RNA al peptide in formazione. La sintesi proteica risulta quindi impossibile.