Frequentò le scuole a Taranto, rimase orfano di padre durante l'ultimo anno di liceo a 18 anni e decise di iscriversi alla Facoltà di Medicina e Chirurgia nella più antica Università d'Italia, quella di Bologna, dove insegnavano illustri esponenti dell'arte medica come Augusto Murri. Vito Massarotti si laureò il 17 luglio 1905 (dopo il suo trasferimento da Bologna a Roma) con relatore il professor Augusto Tamburini (che ricopriva la cattedra di Psichiatria), con una tesi dal titolo "Il suicidio nella vita e nella società moderna; sua eziologia, patogenesi, sintomatologia, profilassi". Subito dopo la laurea ottenne la specializzazione in neuropsichiatria presso la "Clinica delle Malattie nervose e mentali" e divenne direttore medico della casa di cura privata denominata "Sanatorio Bellosguardo" a Roma.