La glisossepide, così come altre molecole della stessa classe (sulfaniluree) esercita la sua azione ipoglicemizzante stimolando la secrezione endogena di insulina dalle β-cellule funzionanti delle isole pancreatiche. Il meccanismo d'azione nei trattamenti a lungo termine sembra basarsi anche su altri fattori extra-pancreatici associati alle sulfaniluree, quali inibizione della produzione di glucosio da parte del fegato, oppure, a livello periferico, aumento della sensibilità dei tessuti periferici all'insulina (forse per aumento dei recettori insulinici). Il farmaco riduce inoltre la demolizione epatica dell'insulina endogena.