Per l'amplificazione in vitro si intende una procedura attraverso la quale cellule staminali del cancro vengono poste in coltura in particolari condizioni a partire dal contenitore in cui saranno seminate, in quanto c'è bisogno di un sistema che permetta alle cellule di crescere in sospensione senza aderire. Anche il terreno di coltura utilizzato è completamente differente da quello solitamente utilizzato in laboratorio per l'espansione normale delle cellule; infatti c'è bisogno di un terreno privo di siero, ma supplementato di alcuni fattori di crescita come quello epiteliale, fibroblastico e neuronale. Tutto questo permette infatti la crescita selettiva delle cellule staminali tumorali con fenotipo sferico.