Questa tecnica permette l'inserimento di un plasmide nel batterio ospite. Vengono utilizzate cellule batteriche di E. Coli del ceppo TG1 rese competenti col metodo del CaCl 2 .Procedura:Aggiungere ai batteri competenti 8 µl delle ligations e lasciare il ghiaccio 20'.Preparare 1 ml di terreno LB senza ampicillina e scaldarlo in bagnetto a 37°C.Portare i batteri a 42°C e lasciarli 90''. Lo shock termico crea piccoli fori nelle membrane attraverso i quali il vettore penetra nei batteri.Mettere 1ml di terreno preriscaldato nei batteri e lasciarli crescere a 37°C per 60'.Tutte le operazioni vanno fatte in sterilità ed è necessario l'utilizzo del bunsen.Piastrare i batteri su una piastra con ampicillina: si preparano 3 piastre rispettivamente con 15 µl, 150 µl e il rimanente.Si lasciano le piastre over night a 37°C.