Nel 2002 Chen e colleghi individuarono in colture di macrofagi RAW 264.7 l'ALDH-2 come principale enzima selettivo per la denitrazione della GTN a 1,2-GDN, dopo aver effettuato uno screening su numerosi tessuti e colture cellulari (Chen et al., 2002). Il ruolo dell'enzima nell'attivazione dei nitrati organici è stato successivamente confermato con il trattamento di anelli di aorta, ottenuti da topi, ratti o conigli, con ALDH-inibitori, quali cloralio idrato, benomyl, cianammide e daidzeina (Daiber et al., 2004;Chen et al., 2006).La formazione selettiva dell'isomero 1,2-GDN, l'elevata attività (submicromolare)della GTN e la ridotta formazione di cGMP GTN-catalizzata, in presenza di inibitori dell'ALDH, hanno suggerito che questo enzima sia responsabile della bioattivazione della GTN anche in vivo. Questo è stato confermato da studi condotti su topi knock-out per l'ALDH-2, ossia animali geneticamente modificati e privati del gene codificante per l'enzima. La vasodilatazione GTN-mediata in questi animali era ridotta, mentre l'attività degli NO-donatori diretti, come il sodio nitroprussiato, non veniva influenzata. Risultati analoghi sono stati ottenuti su tessuti di origine umana codificanti per il mutante a bassa attività ALDH-2*2 (Glu487Lys) (Mackenzie et al., 2005).Dai dati raccolti è emerso che l'azione vasodilatante della GTN è caratterizzata da due fasi: la principale, detta ad alta affinità, è mediata dall'ALDH-2 ed è riscontrabile a concentrazioni terapeutiche di GTN (< 1 µM) (Di Fabio et al., 2003;De La Lande et al., 2004). Un secondo pathway, non sensibile alla tolleranza ai nitrati, all'inibizione dell'ALDH-2 o alla delezione del gene, pare essere coinvolto nella fase a bassa affinità dell'azione della GTN (Kollau et al., 2005;Huellner et al., 2008). Questo potrebbe spiegare il caratteristico aspetto bifasico della curva concentrazione/risposta della GTN (Malta, 1989), riportato in molti lavori e mai spiegato in modo soddisfacente.