Le midi preparazioni permettono di estrarre dei plasmidi dalle cellule batteriche cresciute in un volume di terreno compreso tra 100 e 500 ml; a tale scopo abbiamo utilizzato il kit Plasmid Midi prep della Quiagen. I batteri vengono pellettati95° x 7' 95° x 30'' 50°-60° x 30'' 72° x 30-60" 72° x 10' 4° x  x1 x1 x30attraverso centrifugazione alla velocità di 6'000rpm utilizzando la centrifuga 3K20 della Sigma per 15 minuti alla temperatura di 4°C; il pellet batterico viene risospeso in 4 ml di buffer P1 (50 mM TrisCl pH8,0; 10 mM EDTA; 100 mg/ml RNase A). Successivamente vengono aggiunti 4 ml di buffer P2 (200 mM NaOH; 1% SDS) la cui funzione è quella di lisare le cellule in modo da liberare i plasmidi nella soluzione. Dopo aver incubato per 5 minuti a temperatura ambiente si procede all'aggiunta di 4 ml di buffer P3 (3.0 M potassio acetato a pH 5,5) freddo ed il campione viene incubato per 15 minuti alla temperatura di 4°C. L'aggiunta del buffer P3 causa la denaturazione delle proteine. Si centrifuga alla velocità di 20'000rpm (centrifuga 3K20 della Sigma) per 30 minuti alla temperatura di 4°C. Il surnatante viene raccolto ed eluito attraverso una colonna precedentemente equilibrata con 4 ml di buffer QBT (750 mM NaCl; 50 mM MOPS pH 7,0; 15% di isopropanolo e 0,15% Triton X-100). La colonnina contiene una speciale resina a scambio anionico fatta di silice associata a DEAE (dietilaminoetanolo); la presenza di una notevole carica positiva a livello dell'atomo di azoto ne permette l'interazione con le cariche negative presenti sullo scheletro di polideossiribosio del DNA. La concentrazione salina dei buffer utilizzati determina il legame del DNA al DEAE o la sua eluizione. La colonna viene lavata due volte con 10 ml di buffer QC (1,0 M NaCl; 50 mM MOPS pH 7,0; 15% di isopropanolo) in modo da eliminare i contaminanti. Il DNA viene eluito con 5 ml di buffer QF (1,25 M NaCl; 50 mM TrisCl pH 8,5 e 15% isopropanolo) e precipitato in presenza di 3,5 ml di isopropanolo. Dopo 30 minuti di centrifugazione alla velocità di 15'000rpm con la centrifuga J2HS della Beckman alla temperatura di 4°C il surnatante viene eliminato ed il pellet viene lavato con 2 ml di etanolo al 70% e centrifugato nella centrifuga J2HS della Beckman per 10 minuti alla velocità di 15'000rpm alla temperatura di 4°C. Il pellet, dopo essere stato seccato viene risospeso in un volume adeguato di acqua in base alle dimensioni del pellet stesso.