La presenza di autoanticorpi anti-insule pancreatiche è stato ricercato nel siero dei pazienti prima e dopo il trapianto. Inoltre è stata ricercata la loro positività all' infezione da CMV e si è cercato di stabilire un' eventuale correlazione tra questa e la riattivazione dell' autoimmunità.Per determinare i livelli dei GADA nel siero del paziente è stato utilizzato il metodo radioimmunometrico (kit commercializzato dalla ditta Pantec-Torino). In breve, l' antigene GAD ricombinante umano, altamente purificato, marcato con I-125 viene usato come tracciante. Viene usato in eccesso e si lega agli anticorpi anti-GAD presenti nel siero.Tramite l' addizione di proteina A (Staphylococcus Aureus) che si lega alla frazione Fc degli anticorpi, si formano complessi tipo sandwich. Questa fase solida facilita la separazione della frazione legata, tramite centrifugazione. Dopo la rimozione del surnatante, che contiene il tracciante libero, tramite aspirazione, si misura la radioattività del precipitato con gamma-corner. Il dosaggio viene effettuato nel laboratorio RIA. La concentrazione degli anticorpi anti-GAD nel siero viene calcolata sulla base del tracciante legato in modo specifico nel precipitato. Il segnale radioattivo della frazione legata è direttamente proporzionale alla concentrazione degli anticorpi. La concentrazione degli anti-GAD nei campioni dei pazienti risulta direttamente calcolata per estrapolazione dei valori della curva standard ed è espressa in unità arbitrarie.Lo stesso metodo radioimmunometrico è stato utilizzato per la determinazione degli anticorpi anti-IA2 nel siero dei pazienti. La curva standard è però misurata con un range compreso tra 0.1 e 50 U/ml, tramite 5 calibratori. Anche in tale caso, la concentrazione degli anticorpi è calcolata per estrapolazione dai valori della curva ed espressa in unità arbitrarie.La presenza degli ICA nel siero, è valutata tramite tecnica di immunofluorescenza indiretta su sezioni di pancreas (umano, gruppo 0, fattore Rh-) che sono state tagliate con il criostato e conservate a -80°C, nel congelatore.Le sezioni, tagliate ad uno spessore di 5 micrometri circa, sono state fissate in acetone per 2-3 minuti e poi congelate a -20°C. Tali sezioni vengono poi scongelate, reidratate con PBS ed incubate con 500 μl del siero del paziente e/o di controllo (puro o diluito). I vetrini sono poi lavati in PBS e incubati per 30 min al buio a temperatura ambiente con 50 μl di Ab secondario di coniglio (anti IgG umane) coniugato con fluorescina isotiocianato (FITC) diluito 1:20 in PBS. I vetrini, dopo essere stati lavati, sono stati letti al microscopio a fluorescenza. Si attribuisce il titolo anticorpale, in base al numero di diluizioni scalari (1:2 1:4 1:8 ecc.) positive e facendo riferimento ad una curva standard allestita a partire da concentrazione nota, fornito dall' università di Gainesville, Florida. I risultati sono espressi in unità internazionali : unità JDF (Juvenile Diabetes Fondation). I valori di positività sono quindi non continui : 5,10,20 U-JDF, eccetera.