Oltre alle specie reattive dell'ossigeno, anche altre classi di molecole, come le specie reattive dell'azoto (RNS), sono fonte di radicali liberi. In modo simile ai ROS, anche le RNS sono implicate nella patogenesi di molteplici patologie:disordini neuro-degenerativi 86 , ipertensione 87 , diabete mellito 88 , patologie cardio-vascolari 89 e polmonari 90 . Recentemente, esse sono state considerate rilevanti anche nell'eziopatogenesi del glaucoma . Le RNS hanno come capostipite l'ossido nitrico (NO•), una molecola relativamente poco tossica, con importanti funzioni in quasi tutti i tessuti, in primis come potente vasodilatatore capace anche di inibire l'aggregazione e l'adesione piastrinica. Sopratutto in condizioni di elevato stress ossidativo 92 e di una eccessiva produzione di NO, come in corso di infiammazione tissutale, l'ossido nitrico può avere un duplice ruolo presentando un'azione protettiva o, al contrario, un'azione fortemente citotossica 93 ;. L'ossido nitrico, o monossido d'azoto, è prodotto in vivo a partire da L-arginina e ossigeno per azione dell'enzima NO-sintasi (NOS), di cui esistono tre diverse isoforme : la NOS endoteliale (eNOS), la NOS neuronale (nNOS) e la NOS indicibile in corso d'infiammazione (iNOS). Quest'ultima è responsabile della produzione di ingenti quantità di ossido nitrico ed è espressa da macrofagi ed altre cellule attivate nel corso della risposta infiammatoria tramite diverse vie di trasduzione del segnale, tra cui quella di NF-kB 93 .L'ossido nitrico agisce come mediatore intracellulare e vasodilatatore, grazie alla sua capacità di penetrare facilmente le membrane biologiche non solo per la sua natura gassosa, ma anche perché privo di carica elettrica. In qualità di radicale libero, presenta una bassa reattività rispetto ad altre molecole radicaliche, a meno che venga ossidato o reagisca con specie reattive dell'ossigeno a formare RNS come il perossinitrito (ONOO-) o il diossido d'azoto (•NO2). Questi possono innescare processi di perossidazione similmente ai ROS e per questa ragione sono estremamente temibili. Inoltre, sono molecole molto affini per i tioli e la S-nitrosazione può alterare la conformazione di una proteina, rendendola inattiva o alterandone comunque la funzione. Il perossinitrito (ONOO-), uno dei radicali più tossici in assoluto, si genera in presenza di un eccesso di ossido nitrico, il quale può reagire con i ROS, quali l'anione superossido, rilasciato per esempio dalle membrane mitocondriali, responsabili della respirazione cellulare. È un composto estremamente instabile, capace di agire come sia come agente ossidante che nitrosante, perpetuando un danno a lipidi, proteine ed acidi nucleici anche senza catalizzatori metallici. Nelle cellule, può alterare la capacità di trasduzione dei segnali, la funzionalità dei citocromi, l'organizzazione del citoscheletro, l'attività catalitica di diversi enzimi quali la SOD, l'aconitasi, la glutatione perossidasi, sempre interagendo con i gruppi tiolici ed aromatici presenti. Dal momento che l'ossido nitrico e la maggior parte delle altre specie reattive dell'azoto sono rapidamente degradate in condizioni di aerobiosi, e quindi non misurabili, per valutare la presenza di questi composti si può ricorrere alla misura di derivati più stabili dell'ossido nitrico, come il nitrito (NO2-). Questa molecola rappresenta un utile marcatore di stress nitrosativo presente nel campione in analisi che può essere misurato mediante la reazione di Griess 94 .