Sottoposta a verifica sperimentale tale intuizione, Tiberio riuscì a dimostrare come l'azione terapeutica delle muffe fosse legata ad alcune sostanze presenti in esse, dotate di azione battericida e chemiotattica. Riuscì inoltre ad isolare alcune di queste sostanze ed a sperimentarne l'effetto benefico, sia "in vitro", sia "in vivo" su cavie e conigli, fino ad arrivare alla preparazione di una sostanza con effetti antibiotici. Il lavoro era consistito nel coltivare, su terreni di coltura da lui preparati, alcuni ceppi di ifomiceti, nel preparare un estratto acquoso dei singoli miceti e nello studiare la loro azione su alcuni batteri, quali il bacillo del tifo, il bacillo del carbonchio, il vibrione del colera e vari ceppi di stafilococco. Anche questi dati, rivisti dal punto di vista moderno, sono di difficile interpretazione: Tiberio lavorava su muffe molto differenti (Aspergillus etc) che non producono penicilline, e la attività antibiotica contro ceppi batterici molto eterogenei com carbonchio, colera e tifo e stafilococco pone il dubbio che si trattasse di un effetto aspecifico ed indiretto.