I topi WT e KO venivano anestetizzati mediante iniezione intraperitoneale di ketamina (Pfizer, Italia), alla dose di 100 mg/kg e di xylazina (Bayer S.p.A., Milano, Italia) alla dose di 5 mg/kg.Gli animali sono stati randomizzati nel gruppo CLP o nel gruppo sham.Il gruppo CLP veniva sottoposto a legatura e perforazione del cieco, con lo scopo di indurre la sepsi (CLP surgery).La procedura consiste nell'esecuzione di un accesso laparotomico mediano di circa 2cm, sufficiente ad esporre la porzione di intestino necessaria per individuare il cieco. Si procede quindi alla legatura del cieco con un filo da sutura in seta 3-0; la legatura avviene distalmente alla valvola ileocecale per evitare di provocare un'occlusione intestinale. Il cieco viene poi punto due volte con un ago 18-gauge:una subito al di sotto della legatura e una nella porzione più distale del cieco, con la fuoriuscita di una piccola quantità di materiale fecale. Infine, il cieco viene riposizionato in addome, la fascia muscolare e la cute suturate con un filo da sutura 4-0 in nylon.Gli animali del gruppo sham erano sottoposti a laparotomia, non seguita da manipolazioni del cieco. 72 Subito dopo l'intervento e a 6 ore dalla procedura chirurgica i topi venivano trattati con 0.08 mg/kg di buprenorfina in 1.5 mL di soluzione fisiologica, mediante iniezione sottocutanea, con funzione analgesica e con lo scopo di garantire un'adeguata somministrazione di fluidi.