Il sistema BIACORE X (BIAcore Inc, Piscataway, NJ) consiste in un sistema semi-automatico basato sul principio della Risonanza Plasmonica di Superficie (SPR). Tale strumento consente di misurare in tempo reale le interazioni biomolecolari, con alta sensibilità ed in assenza di traccianti, ed è in grado di fornire i parametri quantitativi sia di tipo cinetico che energetico.Questa nuova tecnologia è applicabile allo studio di qualsiasi tipo d'interazione tra molecole d'interesse biologico, del tipo proteina-proteina, lipidi-proteina, acidi nucleici-proteina, o proteina con altre molecole di basso peso molecolare quali farmaci, substrati e cofattori.Il BIACORE X si basa su biosensori ottici (sensorchip) sui quali viene immobilizzato uno dei due interattori di interesse; in estrema sintesi, un biosensore è un'apparecchiatura di analisi capace di convertire una risposta biologica in un segnale elettrico. Dopo che sono state rilevate delle interazioni tra molecole, viene generato un segnale fisicamente misurabile che può poi essere amplificato da "circuiti" adiacenti oppure analizzato successivamente. Queste reazioni di legame inducono variazioni sensibili nella massa, nella temperatura, nelle proprietà ottiche o nei parametri elettro-chimici.Sfruttando questo sistema è stata analizzata la capacità della proteina capsidica L1 delle VLP di HPV-11 di legarsi all'eparina immobilizzata ad un chip BIAcore [Joyce et al, 1999]. Su questa base, noi abbiamo utilizzato questa tecnologia per valutare la capacità dei derivati di K5 di competere con l'eparina immobilizzata al sensorchip, spiazzando il legame eparina/pseudovirioni di HPV-16. A questo proposito, l'eparina è stata biotinilata e un sensorchip F1 è stato attivato con streptavidina; l'eparina biotinilata è stata fatta reagire con il sensorchip rivestito da streptavidina. Gli pseudovirioni di HPV-16, diluiti in tampone (33nM in 10mmol/L HEPES, 150mmol/L NaCl, 3.4mmol/L EDTA, 0.005% del surfactante P20, a pH7.4), sono stati iniettati per cinque minuti sulla superficie rivestita da eparina biotinilata per permettere l'associazione delle proteine capsidiche con l'eparina, e poi si è eseguito un lavaggio per permettere la dissociazione. In secondo luogo si è eseguita una preincubazione dei derivati di K5 a diverse concentrazioni con pseudovirioni e tale miscela è stata inoculata sulla superficie rivestita con eparina per studiare la loro abilità nello spiazzare il legame eparina/pseudovirione.Il segnale SPR è stato poi misurato, si è sottratto il segnale del sensorchip rivestito da streptavidina (bianco), e il valore è stato espresso in termini di unità di risonanza (RU). 