Il carcinoma della prostata è il più frequente tumore nel sesso maschile ed è anche uno dei tumori maggiormente studiati. Tra i protocolli terapeutici di prima linea nel trattamento dell'adenocarcinoma prostatico vi è l'ormonoterapia, basata principalmente sull'interferenza con l'asse ipotalamo-ipofisario [6]. Le problematiche principali legate a questa terapia sono rappresentate dall'individuazione dei criteri migliori di selezione dei pazienti da sottoporre a trattamento e dal riconoscimento dei meccanismi che portano all'insorgenza di resistenza alla terapia. Infatti, dopo una prima fase di riduzione della massa tumorale si assiste alla ripresa della crescita dell'adenocarcinoma, con lo sviluppo di un tumore ormono-refrattario ed un conseguente peggioramento della prognosi [5]. Nonostante siano stati fatti numerosi progressi nella comprensione dei meccanismi molecolari di questo tumore, ancora molte sono le discordanze e le incertezze in questo senso. Studi di letteratura si sono soffermati sulla ricerca dei meccanismi genetici ed epigenetici che regolano la risposta alla terapia ormonale androgeno-ablativa nelle cellule tumorali. La gran parte di questi studi è però basata su modelli in vitro di cellule di carcinoma prostatico ormono-responsivo in differenti condizioni di trattamento, modelli quindi dinamici, ma poco rappresentativi della controparte in vivo. Pochi studi hanno invece focalizzato la loro attenzione sull'analisi tessutale in pazienti sottoposti a terapia androgeno-ablativa. Nella gran parte di questi l'attenzione è stata posta sull'espressione di singole molecole implicate a vario titolo nei processi di segnale intracellulare; ne è un esempio un lavoro pubblicato dal gruppo di ricerca che ha coordinato la presente tesi sul ruolo di un fattore di trascrizione in grado di indurre in condizioni di androgeno deprivazione il fenotipo neuroendocrino [217]. Il limite di questi studi è però di affrontare il problema in modo ristretto e quindi con possibilità di interpretazione dei risultati limitata. Altri studi molto recenti hanno invece utilizzato piattaforme tecnologiche più avanzate, quali l'analisi di profili di espressione genica (gene expression profiling) o il sequenziamento di nuova generazione (next generation sequencing). Nel primo caso [255] sono stati identificati differenti profili di regolazione genica indotta dalla terapia, in tumori contenenti o meno la fusione TMPRSS2-ERG. Uno studio di sequenziamento dell'RNA [256] ha invece dimostrato come il pathway di Wnt/beta-catenina sia implicato in maniera predominante nello sviluppo del fenotipo ormono-refrattario di carcinoma prostatico. Limite comune di questi studi è peròcome conseguenza della complessità e dei costi di tali tecnologieil limitato numero di campioni analizzabili con l'impossibilità di effettuare correlazioni clinico-patologiche o studi di validazione su materiale bioptico.L'obiettivo della presente tesi è stato pertanto di unire due aspetti, ovvero lo studio di un'ampia casistica e la validazione su materiale bioptico in un'ipotesi di utilizzo dei biomarcatori selezionati in fase pre-operatoria, alla ricerca degli effetti della deprivazione androgenica sul tessuto prostatico neoplastico.Gli scopi dello studio sono stati quindi essenzialmente due:l'analisi della modulazione dell'espressione genica in condizioni di androgenodeprivazione di molecole coinvolte nella patogenesi e nella progressione tumorale del carcinoma prostatico su modelli in vivo ed in vitro;l'analisi comparativa delle stesse molecole tra materiale operatorio da prostatectomia e campione bioptico, per verificare l'attendibilità dell'analisi dei marcatori selezionati in fase pre-operatoria.Per lo studio sono stati scelti 6 geni quali biomarcatori: il prodotto genico della traslocazione TMPRSS2-ERG, SPINK-1, PDEF, il recettore degli androgeni (AR), la cromogranina A (CgA) e WNT-11. La selezione di questi geni è avvenuta dopo attenta analisi della letteratura esistente, che li vede implicati in vario modo nella patogenesi e nella progressione del carcinoma prostatico (vedi specifici capitoli nella Introduzione).