Il plasmide unico, all'interno del quale sono presenti ambedue le sequenze specifiche BCR-ABL e ABL a concentrazioni note di 10 5 , 10 4 , 10 3 , 10 2 copie, è utilizzato per la costruzione delle curve standard per il calcolo del numero di copie assolute dei campioni in esame.La PCR è stata condotta sul medesimo strumento utilizzato per l'analisi di routine.Per verificare il livello di sensibilità dell'intero sistema, sono state preventivamente analizzate con la stessa metodologia quantitativa modificata anche delle diluzioni scalari di RNA estratto dalla linea cellulare K562, BCR-ABL+, e dell'RNA di un paziente Ph+ con presenza del riarrangiamento specifico BCR-ABL.Inoltre è stato estratto e testato l'RNA anche di 14 soggetti normali, senza la presenza del trascritto ibrido BCR-ABL al fine di stabilire una sorta di "valore soglia" del sistema delle rQ-PCR.