Per valutare le variazioni di respirazione mitocondriale è stato utilizzato il JC-1, un colorante mitocondriale che penetra nei mitocondri delle cellule viventi con una modalità dipendente dal potenziale della membrana. Il JC-1 è un colorante cationico che indica la polarizzazione mitocondriale cambiando la sua emissione fluorescente da verde (530 nm) a rosso (590 nm) nel passaggio da forma solubile citoplasmatica a forma aggregata mitocondriale. Naturalmente questa misura di potenziale viene considerata proporzionale all'attività respiratoria. Entro una settimana dal silenziamento, le cellule HaCaT sono state raccolte mediante tripsinizzazione, lavate con PBS, e incubate con JC-1 (concentrazione finale di 2 mg/mL) a 37°C per 30 minuti. Dopo il lavaggio, l'accumulo di JC-1 è stato determinato attraverso un'analisi al citofluorimetro. La quantità di JC-1 ottenuto da 10,000 cellule per campione è stata misurata a 530 nm (FL-1 fluorescenza verde) e a 590 nm (FL-2 fluorescenza rossa) usando un citometro a flusso e analizzata usando il software Cell Quest Alias. Il rapporto tra FL2 e FL1 è stato valutato per determinare il potenziale di membrana mitocondriale. 