Colture cellulari e condizionamenti Per selezionare i progenitori ematopoietici ed eritroidi è stato impiegato il metodo Magnetic Cell Sorting (MACS) utilizzando MicroBread Kits (Miltenvi Biotec, Bergish Gladbach, Germania), secondo il protocollo del produttore, rispettivamente per CD34 e CD235a (glycoforin A). Brevemente, le cellule sono state risospese in una soluzione di PBS 1X con 0,5% FBS e 2mM ACD-A (200 µL per ogni 5x 10 7 cellule totali). Per ogni 5x 10 7 cellule, 50 µL di MicroBread Kits per CD34 sono stati utilizzati per la marcatura (30 minuti a 2-8°C).Successivamente si sono aggiunti 2,5-5 mL di soluzione PBS-FBS-ACD e le cellule sono state centrifugate a 300 RPM per 10 minuti. Il pellet è stato risospeso in 500 µL di soluzione PBS-FBS-ACD e le cellule sono state fatte passare attraverso una colonnina magnetica. Le cellule non marcate (CD34 -) sono state scartate, mentre le cellule CD34 + , eluite dalla colonnina MACS, sono state utilizzate per i nostri esperimenti. La stessa procedura è stata seguita anche per le cellule CD235a + utilizzando MicroBread Kits per CD235a (Glicoforina A).A seguito dell'arricchimento, è stata valutata la purezza delle popolazioni CD34 + e CD235a + isolate mediante FACS e i campioni con una purezza inferiore del 95% sono stati esclusi da ulteriori analisi.