Sia i pazienti che i controlli sono stati sottoposti ad un prelievo di sangue venoso per la ricerca degli anticorpi specifici per l' Helicobacter pylori. Ciascun campione di sangue è stato repentinamente sottoposto a centrifugazione (10 min a 2500 rpm) ed il siero ottenuto è stato aliquotato e stoccato a -20°C in attesa delle ulteriori analisi. I campioni di siero dei pazienti sono stati confrontati con prelievi di controlli sani.La determinazione quantitativa degli anticorpi di tipo IgG per l'Helicobacter pylori è stata effettuata nel siero dei pazienti e dei controlli utilizzando un kit commerciale da 96 pozzetti basato sul metodo ELISA. I pozzetti delle micropiastre contengono una fase solida con antigeni specifici dell'Helicobacter pylori. Gli anticorpi specifici contenuti nel siero dei campioni , se presenti, si legano agli antigeni immobilizzati nei pozzetti. Il complesso antigene-anticorpo viene riconosciuto da anticorpi anti-IgG umani coniugati con l'enzima perossidasico (perossidasi di rafano) e vengono evidenziati da una reazione colorimetrica dopo l'aggiunta di un substrato (TMB tetrametilbenzidina). L'intensità di questa colorazione è direttamente proporzionale alla quantità di anticorpi specifici per il Helicobacter pylori di classe IgG presenti nel campione. Il blocco della reazione enzimatica con acido solforico causa un viraggio di colore dal blu al giallo che viene rilevato mediante la lettura fotometrica per l'ELISA ad una lunghezza d'onda di 450 nm. La conversione degli OD (densità ottica) in UA/ml è stata effettuata mediante opportuni calcoli basati sulla costruzione di una curva di regressione estrapolata utilizzando opportuni controlli positivi di antigene a concentrazioni note (forniti con il kit) e controlli negativi.