La neutralizzazione dell'antigene può essere dimostrata inoculando il preparato, ottenuto mescolando l'antigene con il siero (immune o in esame), in animali da esperimento o in colture cellulari e osservando la comparsa o meno della malattia o degli effetti citopatici. La comparsa della malattia è indice di negatività della reazione, contrariamente la mancanza di malattia è indice di positività.