I prelievi bioptici dei pazienti afferenti alla I clinica Universitaria di Dermatologia sono stati esaminati secondo procedure standard al fine di effettuare la diagnosi isto-patologica e biomolecolare.In breve sono state processate sezioni ricavate da materiale in paraffina e, ove possibile, frammenti paralleli di cute inclusi in O.C.T. (10,24% w/w alcool polivinilico, 4,26% w/w glicole polietilenico, 85,50% additivi non reattivi, Sakura Finetek, CA 90504, USA) e congelati in azoto liquido. Sezioni criostatiche di 5 µm di spessore ottenute da questi campioni sono state essiccate all'aria per circa 18 ore e fissate a 4°C per 10 minuti in una miscela di cloroformio-acetone 1:1.Sulle sezioni fissate è stata eseguita la metodica per l'immunoperossidasi con i complessi streptavidina-biotina che sfrutta l'eccezionale avidità dell'avidina per la biotina (o streptavidina) attraverso un legame covalente. É stato utilizzato il kit LSAB-Plus Peroxidase K0690 (DAKO Corporation, CA). Il sistema rivelatore sfrutta il 3amino-9-etil-carbazolo (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO), che in presenza di H202 e perossidasi dà un precipitato rosso (Tabella 9).Il pannello anticorpale applicato comprende, oltre ad una serie di marcatori per identificare le popolazioni linfoidi T reattive (CD2, CD3, CD5, CD4, CD8, CD7, CD26, CD45RO, CD45RA, CD25, CD30, CD56, CD103), i macrofagi tissutali (CD11c o CD163), le cellule dendritiche dermiche (CD1a) e gli elementi in attività proliferativa (Mib-1), i seguenti marcatori atti a riconoscere le varie popolazioni B linfocitarie: CD10, CD20, CD22, CD23, CD35, CD38, bcl-2, bcl-6, Ig Kappa, Ig Lambda, IgG, IgD, IgM.