Si aggiungono 200μl di Lysis Buffer, a 4°C e mantenuto in stagnola perché fotolabile, a ciascuna eppendorf con il pellet delle cellule dei campioni e della linea di controllo MCR; si risospende e si agita.Si lascia incubare per 30' a 4°C e si centrifuga per 20' a 13.000 rpm.Si preleva da ciascun campione il surnatante senza toccare il pellet e si trasferisce in una nuova eppendorf da 1,5 ml contrassegnata come il campione.Si prelevano 10μl da ogni lisato ottenuto e lo si trasferisce in una corrispondente eppendorf a cui si aggiungono 90μl di acqua sterile. Si aggiungono 2 ml di Working Reagent in ciascuna cuvetta e successivamente 100 μl dei campioni diluiti e degli standard della curva (per i bianchi usare acqua) e si lascia ad incubare a 37°C per 30'.Si procede alla lettura allo spettrofotometro dei Bianchi, degli standard della curva, dei campioni e si inseriscono i valori in un foglio elettronico.