Il Western Blot è una tecnica ampiamente utilizzata per caratterizzare gli antigeni proteici estratti da lisato cellulare. Consiste essenzialmente in una separazione elettroforetica di proteine in SDS-PAGE in base ai rispettivi pesi molecolari.Le bande proteiche così separate vengono trasferite dal gel su un foglio di nitrocellulosa, che funge da supporto solido per l'antigene. Il trasferimento viene realizzato ponendo a contatto gel e foglio e applicando una corrente trasversale in opportuno tampone.Il filtro viene quindi eventualmente ritagliato in sottili strisce perpendicolari all'orientamento delle bande (strips), utilizzate per l'esecuzione di tests di immunoenzimatica. L'anticorpo primario si fissa, così, alle differenti bande antigeniche secondo la propria specificità.La rivelazione del complesso proteina-anticorpo primario avviene attraverso l'utilizzo di un anticorpo secondario che veicola solitamente un enzima, in grado di dare una reazione luminescente che impressiona una lastra fotografica.