Iniziamo con la frammentazione del materiale in cubetti di 3 mm di lato, per i motivi sopra enunciati; eseguiamo in seguito l'anestesia del topo, di tipo gassoso, che impiega l'isoflurano e induce l'effetto in pochi minuti. Dopo aver eseguito la depilazione sulla porzione inferiore del dorso del topo, a livello della quale verrà impiantato il tumore, effettuiamo un'incisione longitudinale a livello dorsale di circa 5 mm; sollevando con una pinza il lembo laterale di cute a livello dell'incisione e aiutandoci con forbici a punta curva, scolliamo la cute dal sottocute, fino ad ottenere una tasca sufficientemente ampia, atta ad accogliere il pezzo tumorale. Preleviamo il frammento, mantenuto fino a quel momento nel terreno di coltura arricchito di antibiotici e bicarbonato, e lo immergiamo nel Matrigel. Dopo qualche secondo lo estraiamo e lo inseriamo, sollevando un lembo di cute con una pinza, nella tasca neo formata; all'interno della stessa aggiungiamo ancora piccoli quantitativi di antibiotici e Matrigel. Concludiamo la procedura chiudendo la ferita con colla chirurgica.Ogni tumore, derivante da un singolo paziente, viene impiantato in due topi, sia per aumentare le probabilità di attecchimento che per valutare l'eterogeneità della neoplasia originaria nel senso che, in caso di comportamento tumorale simile nei due topi-sia in termini di risposta alla terapia sia dal punto di vista genetico-si deduce che la neoplasia è omogenea e, viceversa, un comportamento differente nei due animali indica una neoplasia iniziale eterogenea.Con la metodica di raccolta del materiale e la procedura di impianto descritti, abbiamo raggiunto un tasso di attecchimento del 92%, con una mortalità operatoria prossima allo 0%. Sul totale di 83 campioni tumorali a disposizione, di 77 conosciamo se l'attecchimento si è verificato, mentre degli altri non è ancora possibile stabilirlo, essendo trascorso un intervallo di tempo troppo breve dall'impianto per poterne valutare il successo. Considerando quindi i 77 campioni tumorali attualmente effettivi, l'attecchimento si è verificato in 71 casi, mentre è fallito nei 6 rimanenti. Nell'ottica di valutare una possibile correlazione tra mancato attecchimento e variabili cliniche che possano incidere sul successo della procedura, abbiamo ipotizzato che il trattamento chemioterapico neoadiuvante, con l'induzione di effetti citotossici e necrotici, potesse compromettere la vitalità del pezzo prelevato e quindi contribuire al fallimento. In realtà, solo uno dei 6 soggetti ha eseguito cicli di CT prima della resezione epatica; questi dati, quindi, indicano che non esiste una forte correlazione tra successo dell'attecchimento e trattamento chemioterapico subito dal fegato e quindi che la causa dei fallimenti non è da imputarsi alla terapia citotossica neoadiuvante.Gli ottimi risultati ottenuti sia in termini di attecchimento che di mortalità operatoria sono una chiara conferma della bontà del metodo utilizzato, che risulta quindi efficace nel realizzare impianti di tumore umano, e in particolare di metastasi epatiche, nel topo, aprendo la strada a numerose potenziali applicazioni sia in termini di ricerca oncologica di base che di progetti a orientamento traslazionale.