La piridossina viene trasformata in piridossale e/o piridossamina che una volta fosforilate costituiscono la forma biologicamente attiva della vitamina B6 (vedi piridossalfosfato), funzionando come coenzimi. Le reazioni in cui queste due sostanze sono coinvolte riguardano sia il metabolismo degli amminoacidi sia quello di vari altri composti. Il coenzima si lega covalentemente all'apoenzima formando una base di Schiff con il gruppo amminico di una lisina che viene sostituito da quello del substrato, in una reazione che porta alla liberazione di un protone da parte del carbonio α. Questa struttura viene poi stabilizzata per delocalizzazione degli elettroni nell'ambito dell'iperstruttura. Il gruppo amminico viene invece utilizzato per diverse vie metaboliche a seconda dell'enzima coinvolto nella reazione. La vitamina B6 trova così coinvolgimento in diverse vie, tra cui: