Il test MTT ha mostrato che la vitalità cellulare è significativamente ridotta dopo terapia con risedronato sia in presenza che in assenza dei fattori di crescita al 21°, 25° e 30° giorno di coltura, mentre non c'è differenza nella vitalità cellulare nei controlli dopo tre mesi (Fig. 17).Nelle colture di PBMC delle pazienti dopo trattamento la vitalità cellulare è stata significativamente maggiore con l'aggiunta di fattori di crescita nei giorni 21 e 25:densità ottica a 21 giorni= 0.18±0.05 senza fattori e 0.27±0.05 con fattori, p=0.04; densità ottica a 25 giorni= 0.25±0.04 senza fattori e 0.31±0.02 con fattori, p=0.04.Figura 17: vitalità cellulare nelle pazienti prima e dopo terapia, nei controlli, e nelle pazienti dopo terapia con e senza fattori di crescita a 21, 25 e 30 giorni di coltura. La vitalità è espressa sull'asse y dalla densità ottica±SD.    Gli osteoclasti derivano da cellule precursori che appartengono alla frazione CD14+, cioè monocitaria, delle cellule mononucleate circolanti (7). Numerosi studi hanno evidenziato markers di superficie in grado di determinare la maggiore o minore differenziazione in senso pre-osteoclastico di queste cellule ( 8 È interessante notare come il RANKL ed i precursori degli osteoclasti siano predittori diretti dell'osteoclastogenesi, mentre l'OPG sia un predittore inverso.Questo riflette l'importanza del sistema di modulazione dell'osteoclastogenesi rappresentato da RANKL e OPG: mentre il primo induce la differenziazione osteoclastica, OPG ne è un potente inibitore.Nella seconda parte dello studio abbiamo analizzato osteoclastogenesi, attività osteoclastica, precursori e produzione di citochine dopo terapia con risedronato 5 mg/die per 3 mesi.Gli effetti in vivo della terapia con bisfosfonati sulla formazione di osteoclasti in colture di PBMC e sulla produzione di citochine non sono ancora chiari (58)(59)(60)(61)(62)(63)(64)(65)(66). Sono emersi dati molto interessanti sulla capacità riassorbitiva degli osteoclasti dopo terapia come mostrato dall'analisi dell'erosione della matrice in vitro. Il trattamento con riseronato, infatti, riduce la percenuale della matrice riassorbita: questo sembra dipendere sia dalla riduzione della formazione di osteoclasti sia dalla riduzione della capacità di ogni singola cellula di riassorbire matrice come mostra la minore dimensione dei pits dopo trattamento.Concludendo, questi dati dimostrano che il risedronato è in grado di ridurre l'osteoclastogenesi in colture di PBMC di donne osteoporotiche riducendo il numero di precursori circolanti (senza alterare il numero di monociti macrofagi e granulociti), il numero, l'attività e la vitalità degli osteoclasti in coltura e la produzione di citochine proosteoclastogeniche.