La presenza dell'infezione da CMV è stata ricercata nel siero dei pazienti durante il followup post-trapianto. Per determinarne la positività si è ricercata la presenza dell'antigene precoce del CMV (EA CMV) nel plasma dei pazienti tramite una metodica di immunoflorescenza.E' stato prelevato una provetta di sangue eparinato, che dopo l'aggiunta di destrano è stata incubata a 37° per 30 minuti e successivamente centrifugata, per ottenere la separazione dei glanuglociti. Aggiungendo 2 ml di NaCl allo 0,2%, si è attesa la lisi dei globuli rossi, che stata ripetuta successivamente per una seconda volta. A questo punto i granulociti sono stati contati in camera di Burker (per il conteggio è stata utilizzata una diluizione 1:5-20 μl di sospensore cellulare più 80 μ di Blu Tripano). Per la conta si utilizzano 16 quadrati in diagonale e il numero ottenuto si moltiplica per 5 x 25 x 10^4, ottenendo cosi' il numero di cellule per ml. Si è poi risospeso il pellet con la quantità di PBS 1% FCS. Sono stati riportati successivamente tutti i campioni ad una concentrazione di 2 milioni per ml, sono stati prelevati 0,5 ml e sono stati citocentrifugati 100 μl di sospensione cellulare. Lasciati asciugare sotto cappa per 5 minuti, fissati, impermeabilizzati e sottoposti ad altri 2 lavaggi con PBS. Lasciati asciugare sotto cappa si è proceduto con l'immuno-fluorescenza. Per fare ciò sono stati aggiunti sul vetrino 40 μl di Anticorpo primario (mAB anti-IEA di CMV della BIOTEST) diluito 1:20 con albumina 1% in PBS. Il tutto è stato incubato per 30 minuti a 37°C in camera umida nel termostato, sono stati eseguiti 3 lavaggi con PBS 1 x e uno con acqua bidistillata. Lasciati asciugare i vetrini sotto cappa per 5 minuti, è stata aggiunto il coniugato fluorescinato anti-IgG di topo diluito 1:100 in PBS più Blu Evans. Il tutto è stato nuovamente incubato per 30 minuti a 37°C in camera umida nel termostato, sono stati eseguiti 3 lavaggi con PBS 1 x e uno con acqua bidistillata lasciati asciugare i vetrini sotto cappa per 5 minuti; il risultato è stato letto al microscopio a fluorescenza.