Questa struttura conferisce ai bisfosfonati una resistenza all'idrolisi enzimatica da parte delle pirofosfatasi e li rende metabolicamente stabili. All'atomo di carbonio possono essere legati tramite legame covalente atomi di carbonio, sulfuri, ossigeno e gruppi nitrogeno conferendo alla molecola grande variabilità sia strutturale che in termini di potenza antiriassorbitiva. impediscono la sintesi dello squalene dal mevalonato. Bloccando questa via metabolica viene meno la produzione di colesterolo e lipidi isoprenoidi come isopentenil difosfato, farnesil difosfato e geranilgeranil difosfato necessari per la prenilazione di piccole GTPasi. Questo condurrebbe ad una regressione apoptotica cellulare (42).Gli aminobisfosfonati inibiscono la attività di sintesi del farnesilpirofosfato (Fig. 14) impedendo così la prenilazione di proteine G necessarie per la funzione riassorbitiva degli osteoclasti; l'inibizione di questa via porta all'accumulo di molecole (in particolare l'IPP) capaci di comportarsi da antigeni attivanti il TCR γδ.  patologia (47,48,49).Il meccanismo alla base di queste manifestazioni è stato solo parzialmente compreso e pare essere associato con la liberazione di citochine in particolare TNF-α e IL-6.Inizialmente si riteneva che la fonte di tali citochine fossero i monociti-macrofagi; è stato suggerito che potrebbero essere proprio i linfociti T γδ le cellule che, stimolate dai composti derivati dal blocco enzimatico indotto dagli aminobisfosfonati, liberano tali citochine (43).In particolare studi in vitro hanno dimostrato come gli aminobisfosfonati aggiunti a colture di PBMC siano in grado di attivare esclusivamente la sottopopolazione di linfociti T γδ che esprimono la catena Vγ9 del TCR (43,44,49).Queste cellule Vγ9 + risultano la fonte sia del TNFα che dell'IL-6 prodotte in risposta all'aggiunta al medium di aminobisfosfonati.Hewitt (43) ha dimostrato che gli aminobisfosfonati, ma non i non aminobisfosfonati, inducono una rapida ed abbondante produzione di TNFα da linfociti periferici T γδ in vitro: questo effetto è più marcato per il risedronato rispetto al pamidronato e all'etidronato, mentre non avviene in presenza di clodronato.Gli aminobisfosfonati stimolano la produzione di TNFα dai PBMC umani in vitro, ma la deplezione di linfociti T γδ porta all'arresto della produzione di TNFα in risposta allo stimolo fornito dagli aminobisfosfonati, questo dato confermerebbe il ruolo dei linfociti T γδ nella produzione di citochine proinfiammatorie mediata dai BSP.E' possibile che i monociti/macrofagi siano attivati in un secondo tempo da queste stesse citochine. Questo effetto potrebbe portare indirettamente ad un incremento della produzione citochinica nelle colture di PBMC in cui vengono aggiunti aminobisfosfonati.E' stato inoltre dimostrato che le statine, inibendo l'enzima idrossi-metil-glutarilcoenzima A riduttasi, sono in grado di bloccare l'attivazione dei linfociti T γδ indotta dagli aminobisfosfonati (50).Questo dato potrebbe suggerire che la somministrazione di statine prima del trattamento con amino bisfosfonati, potrebbe inibire la risposta di fase acuta; sono però necessari studi clinici specifici per suffragare tale ipotesi.Alcuni recenti reports (41,44,49) hanno dimostrato che gli aminobisfosfonati sono in grado di attivare i linfociti T γδ in vitro o direttamente in vivo.In particolare Kunzmann (46) ha riscontrato in 4 su 10 pazienti, che avevano ricevuto 60 o 90 mg di pamidronato in infusione endovenosa, una reazione di fase acuta; in questi 4 pazienti è stato dimostrato un significativo incremento dei linfociti T γδ circolanti misurati a 1 e 3 settimane dall'infusione del farmaco.Hewitt ha osservato come la produzione di IL-6 da parte dei linfociti T γδ indotta dagli aminobisfosfonati, si verificasse solo in uno dei tre donatori mentre in tutti e tre i donatori si verificava un incremento della sintesi di TNFα.Gli autori di questi lavori concludono considerando come solo una minoranza dei pazienti trattata con aminobisfosfonati per via endovenosa soffra di una risposta di fase acuta ed è perciò ipotizzabile che questo rifletta una particolare capacità sintetica di IL-6 da parte dei linfociti T γδ presente solo in alcuni individui esposti agli aminobisfosfonati.Questi dati evidenziano come gli aminobisfosfonati siano in grado di stimolare la sintesi citochinica in vitro da parte dei linfociti T γδ e, se somministrati per via endovenosa, di attivare i linfociti T γδ in vivo e di incrementare la loro produzione citochinica inducendo una reazione di fase acuta che clinicamente si manifesta nella flu-like syndrome.Visti i dati presenti in letteratura ci è sembrato interessante valutare se gli aminobisfosfonati, in particolare l'alendronato (ALN), siano in grado di incrementare il numero o attivare i linfociti T γδ circolanti quando somministrato per os a dosaggi clinicamente rilevanti (70 mg alla settimana). d) Da ultimo ho inteso esaminare l'effetto dell'ALN sui precursori degli osteoclasti circolanti nel sangue periferico considerando i dati relativi ad altri aminobisfosfonati capaci di ridurre, se somministrati per os nella cura dell'osteoporosi postmenopausale, il numero di precursori osteoclastici circolanti.