Le cellule del Sertoli derivano dalle "cellule pre-Sertoli", o "sostentacolari", che sotto l'azione di TDF (fattore di determinazione testicolare), espresso dal gene SRY (sul cromosoma Y), si differenziano dai "cordoni sessuali primitivi" (nella gonade indifferenziata), trasformandoli in "cordoni seminiferi", chiusi fino alla pubertà, quando svilupperanno il lume centrale.