Per analizzare la diffusione batterica nel modello murino di sepsi addominale, è stata indagata la concentrazione di microrganismi patogeni nel liquido di lavaggio peritoneale, nella milza, nel fegato, nel polmone e nel lavaggio broncoalveolare.Gli animali sono stati sacrificati come descritto nel paragrafo precedente a 18 ore da CLP o sham.Il lavaggio peritoneale è stato eseguito come precedentemente descritto.Il liquido di lavaggio è stato poi diluito con diluizioni seriate, posto in coltura su terreno al sangue Trypticase Soy Agar + 5% sangue di montone e incubato a 37°C.Le CFU sono state analizzate dopo 24 ore ed i risultati sono stati espressi come logaritmo del numero di CFU presenti.La diffusione batterica è stata indagata anche a livello della milza, del fegato, del polmone: il fegato e il polmone prima di venire isolati sono stati lavati con 5 mL di soluzione salina sterile contenente 1mM di ETDA. Dopo il prelievo, tutti gli organi sono stati lavati con soluzione salina sterile e omogenati in 5 mL di soluzione salina sterile contenente 1mM di ETDA. L'omogenato è stato poi diluito con diluizioni seriate, posto in coltura su terreno al sangue Trypticase Soy Agar + 5% sangue di montone e incubato a 37°C.Le CFU sono state analizzate dopo 24 ore e i risultati sono stati espressi come numero di CFU per organo.Il lavaggio broncoalveolare è stato eseguito mediante il posizionamento di un tubo endotracheale da 18-gauge, attraverso il quale ogni polmone è stato lavato per due volte con 1 mL di NaCl 0.15 M. 73 Il BAL è stato diluito con diluizioni seriate, posto in coltura su Trypticase Soy Agar + 5% sangue di montone e incubato a 37°C.Le CFU sono state analizzate dopo 24 ore e i risultati sono stati espressi come numero di CFU per mL di BAL.Il supernatante, ottenuto mediante la centrifugazione del campione del lavaggio broncoalveolare, è stato congelato in azoto liquido, per essere usato in analisi future.