Gli esperimenti furono ripetuti su di un coniglio, un cane e altri animali con analoghi risultati. La svolta successiva, però, avvenne quando effettuarono una prova dell'anestetico sull'uomo: Koller instillò una goccia di soluzione sull'occhio del collega e Gärtner fece la stessa operazione su Koller. Poco dopo toccando l'uno la cornea dell'altro poterono testimoniare al mondo la riuscita della prima anestesia locale effettuata sull'uomo. Il 15 settembre del 1884, in occasione del congresso della società tedesca di oftalmologia, tenuto a Heidelberg, Joseph Brettauer (1835-1905), un oculista di Trieste presentò la comunicazione scientifica relativa a questa importantissima scoperta, per conto di Karl Koller che per motivi economici non poté essere presente. Solo un mese dopo il congresso lo stesso Koller presentò il suo lavoro a Vienna presso la locale società medica.