Ancora Gli studi successivi hanno sicuramente confermato il ruolo degli Eph nella motilità delle cellule tumorali, nonché nel promuovere l'angiogenesi, una funzione ormai classicamente imputata a questi recettori. Uno fra i moltissimi esempi è il comportamento dell'EphA2 nel carcinoma della mammella, in cui il recettore, tramite RhoA, destabilizza le giunzioni aderenti e promuove una migrazione ameboide delle cellule [53]. Sempre per ribadire l'estrema complessità di questo sistema, e per approfondire il profilo dell'EphA3, è interessante notare come invece l'EphA3 sia espresso in alcuni rabdomiosarcomi, dove inibisce la motilità cellulare (sia se solamente iperespresso sia se stimolato con le efrine) [54].In accordo con quanto riportato dal prof.Lackmann, è stato confermato che diversi tumori iperesprimenti gli Eph hanno preferenzialmente un fenotipo molto maligno: ad esempio, l'EphA2 è iperespresso in tumori della mammella e della prostata soprattutto a fenotipo basale, entrambi tendenzialmente ormono-insensibili e a prognosi peggiore rispetto agli altri istotipi. [42] Tuttavia, a differenza di ciò che si pensava fino a pochi anni fa, vi sono crescenti evidenze che il complesso Eph-efrine possa agire promuovendo la proliferazione cellulare, benché questo ruolo sia comunque minore rispetto a quello della motilità e dell'angiogenesi, e secondario rispetto a quanto avviene negli altri RTK. Tra i moltissimi esempi, ritroviamo nuovamente l'EphA2 nel carcinoma della mammella, la cui iperespressione stimola la proliferazione delle cellule neoplastiche. [41] I meccanismi tramite cui i recettori Eph possono promuovere la proliferazione al posto di inibirla, come fisiologicamente fanno, sono diversi, e solo in parte noti:-innanzitutto, per motivi da chiarire, talvolta i recettori Eph, normalmente attivati dalle efrine B, stimolano la via Ras-MAPK. Questo è stato particolarmente documentato per l'EphB2, soprattutto su linee cellulari [55].- L'iperespressione dell'EphA2 nel tumore della mammella, quindi, è un perfetto esempio di promozione del tumore ligando indipendente. L'iperespressione dell'EphA2 determina crescita spontanea di cellule di epitelio mammario in soft agar e la formazione di tumori in modelli murini, nonostante sia ipofosforilato; inoltre aumentano invasività e motilità cellulare. La fosfotirosin fosfatasi a basso peso molecolare, anzi, inibendo il forward signaling kinasi-dipendente, promuove la trasformazione neoplastica. Parallelamente, l'inibizione della traduzione dell'mRNA dell'EphA2 tramite oligonucleotidi antisenso, arresta questa trasformazione; lo stesso effetto è ottenuto dalla stimolazione dei recettori con alti livelli di efrine o con anticorpi attivanti. Tuttavia, alcuni studi hanno evidenziato che l'attività chinasica del recettore EphA2 promuove la crescita tumorale, l'invasività e la metastatizzazione in cellule tumorali mammarie di topo, che esprimono l'efrina A1; anche nel melanoma l'EphA2 è fosforilato ed espresso contemporaneamente all'efrina A1. Ciò fa ipotizzare che le funzioni degli Eph non siano solo recettore specifiche, ossia diverse da un recettore all'altro, ma anche cellula specifiche, e talvolta persino contesto cellularespecifiche. [42] Infine, un altro meccanismo che promuove la progressione tumorale è stato identificato nei frammenti di Eph, generati dal clivaggio ad opera delle γ-secretasi; frammenti di EphA4, ad esempio, aumentano l'attività di Rac, e quindi la mobilità cellulare, in cellule in coltura [56].Anche l'iperespressione delle efrine può avere un'attività oncogena: ad esempio, l'efrina A5 attiva Fyn (famiglia delle Src chinasi) con successiva stimolazione delle MAPK e dell' adesione mediata da integrine nei fibroblasti murini, provocando crescita spontanea [57] .Sicuramente però, una delle modalità più importanti tramite cui Eph ed efrine promuovono la crescita tumorale è la neoangiogenesi. L'interazione può avvenire tra le cellule endoteliali, oppure tra cellule endoteliali e cellule tumorali, potendo oltretutto influenzare anche il comportamento del tumore stesso. Eph ed efrine sembrano essere dei mediatori degli effetti angiogenetici di VEGF e TNFα; inoltre, l'iperespressione dell'EphA2 sembra mediare la resistenza alle terapie anti-VEGF [42]. Ciò che sta probabilmente rallentando l'utilizzo di questi farmaci è l'estrema complessità del sistema Eph-efrine: ad esempio, agonisti dell'EphA2 potrebbero favorire l'effetto oncosoppressore del recettore, ma promuovere l'angiogenesi; al contrario, gli antagonisti potrebbero inibire l'angiogenesi ma bloccare anche il forward signaling dei recettori, risultando utili solo in tumori con importante angiogenesi e scarsa attività oncosoppressiva dell'Eph. La risposta del tumore alla terapia, quindi, dipende soprattutto dal tipo di neoplasia, dallo stadio e dal microambiente: scegliere la strategia ottimale per interferire con questo sistema richiede una sua conoscenza incredibilmente approfondita [42]; fino ad allora, l'efficacia di ogni terapia mirata su Eph ed efrine dovrà essere valutata empiricamente su modelli in vivo. [41] Degli approcci diagnostico-terapeutici che potrebbero aggirare la dicotomia degli Eph, utilizzano questi ultimi come 'segnalatori' di tumore, sfruttando il fatto che la loro espressione in tessuti sani è minima. Oltre agli anticorpi che inducono principalmente ADCC, si trovano anticorpi associati a farmaci o vaccini che possano stimolare la citotossicità dei linfociti T. Infine, a scopo diagnostico, alcuni anticorpi diretti contro Eph o efrine sono stati legati a sostanze radioattive, in modo da poter visualizzare il tumore tramite PET.