Cellule provenienti da campioni ottenuti da soggetti normali, da pazienti e da linee cellulari, sono state incubate a 37°C 5% di CO 2 per 18 ore ad una concentrazione finale di BMS-354825 pari a 10nM e 20nM ed in assenza dell'inibitore come controllo. Per valutare gli effetti dell'azione inibitoria del BMS-354825 sull'apoptosi cellulare, questa è stata analizzata utilizzando l'annessina V.In breve, al termine delle 18 ore di incubazione, le cellule sono state lavate in PBS e poi marcate con 5 µl di annessina V coniugata con fluorescina isotiocianato (FITC) e 10µl di PE (Propidium Iodide).I campioni sono stati incubati al buio a temperatura ambiente per 10 minuti e al termine, dopo l'aggiunta di 300 ml di buffer 1X, le cellule sono state analizzate mediante citometria a flusso. La frazione di campione apoptotica è stata identificata come annessina V positiva e propidio negativa.     La fluorescenza, inoltre, è stata quantificata tramite ImageJ, ed il seguente grafico mostra i risultati ottenuti: Anche in questo caso, la diversità di espressione dell'EphA3 tra un soggetto affetto da MPN ed un soggetto sano è evidente, e la quantificazione della fluorescenza ha rivelato una differenza statisticamente significativa.  