Nonostante la presenza di farmaci e della loro efficacia, essi sono molto iii) deve essere libero dai prodotti animali usati nella processo di formulazione del vaccino; iv) deve avere un costo sostenibile; v) deve essere efficace sia nel trattamento sia nella prevenzione della malattia 140 .Vaccini di prima generazione. Per la profilassi il miglior vaccino contro la leishmaniosi cutanea è l'inoculazione di L. major virulenta viva. In passato era uso comune inoculare materiale proveniente dall'essudato di lesioni attive in parti coperte del corpo (leishmanizzazione). Questo è stato il punto di partenza nello studio delle strategie di vaccinazione.Tuttavia l'utilizzo di organismi virulenti può indurre la persistenza del parassita nell'organismo ospite e causare leishmaniosi muco cutanee diffuse 141 . Molti parassiti uccisi sono stati testati per decenni con o senza l'utilizzo di adiuvanti. Nessuno dei parassiti uccisi si è tuttavia mostrato sufficientemente efficace per essere usato nei programmi di controllo 142 .L'utilizzo di BCG come adiuvante associato a L. major autoclavata (ALM) ha mostrato proprietà protettive e la sicurezza di questa formulazione insieme all'utilizzo routinario in tutto il mondo lo rende un candidato promettente per l'espressione di antigeni eterologhi. Studi su volontari sani hanno mostrato che la somministrazione di una singola dose è sicura e non è seguita da una risposta esacerbata in seguito ad un'infezione naturale. Le proteine eterologhe espresse nel BCG inducono la produzione di anticorpi IgG, la proliferazione linfocitaria, la produzione di citochine e l'espansione dei linfociti T citotossici 143 . Non c'è evidenza che due iniezioni di Leishmania associata a BCG offrano una significativa protezione immunitaria contro la leishmaniosi viscerale rispetto a BCG da solo. Tuttavia, il vaccino ALM-BCG ha indotto livelli significativamente più alti di conversione del leishmanin skin test (LST) a 42 giorni (30% VS 7% con BCG da solo); ciò è stato associato a una minore incidenza di malattia 144 .   A questo punto i gel possono essere sottoposti all'elettroforesi: viene versato un tampone di corsa all'interno del macchinario, che crea un ambiente basico (pH 8,3) all'interno della camera elettroforetica. La maggior parte delle proteine migra verso l'anodo, poiché per lo più cariche negativamente. Non appena le proteine abbiano raggiunto il fondo del gel, vengono effettuati dei lavaggi dei gel con acqua distillata.