Le DC possono essere generate da donatori sani secondo due metodi, lento e rapido. (141,144) Per il metodo lento, che abbiamo utilizzato nei nostri esperimenti abbiamo seguito la metodica classica descritta in letteratura: (141) le Preparazione del Monocyte Conditioned Media (MCM) (143) Per la preparazione del MCM abbiamo coattato una piastra sterile con 5 ml di IgG umane (10 mg/ml) in PBS per 1 ora a temperatura ambiente; la piastra è stata poi lavata 3 volte con PBS e abbiamo aggiunto 5x10 7 PBMC in 8 ml di terreno. Dopo 24 ore abbiamo raccolto il surnatante, lo abbiamo centrifugato per 5 minuti a 400xg, filtrato e congelato a -20° C.