Il test di citotossicità è un saggio di rilascio del 51 Cr da parte di cellule bersaglio precedentemente cromate in seguito a lisi specifica ad opera di cellule effettrici citotossiche (CTL).Le cellule bersaglio (cellule primarie di osteosarcoma oppure cellule di linee commerciali) sono state raccolte, pellettate, risospese in 50 µl di FBS ed incubate per 1,5 h con 100 µCi di Na C in presenza del 5% di CO 2. Dopo l'incubazione, il surnatante (100 µl) delle co-culture è stato prelevato e contato in un γ-counter (Packard counter, BioRad). La percentuale di citotossicità specifica è stata calcolata con la formula: 51 Cr in presenza degli effettori, S rappresenta il rilascio di 51 Cr in presenza del terreno solo ed M rappresenta il rilascio di 51 Cr con TritonX-100. ( ) ( ) = ⋅ − − 100 S M S E dove E rappresenta il rilascio di