In basso il grafico riporta l'aumento percentuale statisticamente significativo solo per i linfociti T (CD3+) a 0-3 mesi di terapia. Il grafico in basso mostra la riduzione delle cellule triple positive a seguito della terapia, riduzione che non è statisticamente significativa. Alcuni studi in vitro hanno chiaramente evidenziato che i BSP inducono l'apoptosi degli osteoclasti quando vengono aggiunti al loro terreno di coltura (56,57) mentre altri studi suggeriscono che essi siano in grado di ridurre la capacità degli osteoclasti di aderire alla matrice mineralizzata (58).Il loro effetto sui precursori degli osteoclasti e sulla produzione citochinica rimane comunque incerto (59,60): alcuni studi indicano che l'effetto pro-infiammatorio degli aminobisfosfonati incrementi la produzione di citochine pro-osteoclastogeniche come l'IL-6 e il TNFα (43,61).Tuttavia altri studi non hanno evidenziato alcun effetto sui precursori osteoclastici o, al limite, una semplice riduzione a lungo termine dei livelli di citochine (62, 63,64,65). Inoltre è stato suggerito che gli aminobisfosfonati sono in grado di agire sui linfociti T aumentando il numero di cellule T in periferia e, in particolar modo, espandendo la popolazione dei linfociti T γδ. Tuttavia i dati sul possibile effetto immunomodulante dei BSP sono piuttosto controversi.Inoltre è stato dimostrato un effetto dei BSP sui precursori degli OC a livello osseo (66).E' stato descritto che osteoclasti maturi e attivi possono differenziare da colture di PBMC (35) e che la loro attività riassorbitiva è nettamente maggiore nelle pazienti affette da osteoporosi postmenopausale in confronto con controlli sani e che l'aumentata formazione osteoclastica è largamente dipendente dalla maggiore capacità dei PBMC estratti dal sangue dei pazienti di produrre citochine proosteoclastogeniche (in particolare TNFα e RANKL) in confronto con i controlli sani (64).Questo studio è stato disegnato per valutare il possibile effetto immunomodulante dell'ALN sulle sottopopolazioni di PBMC ed in particolare sui linfociti T γδ, sull'attivazione del sistema immune, valutata misurando l'espressione di RANK che è un marker di attivazione cellulare, e sui precursori degli osteoclasti.Infatti non ci sono ancora spiegazioni inequivocabili sull'effetto dei BSP sui precursori degli osteoclasti circolanti nel sangue periferico e nemmeno sul loro eventuale effetto immunomodulante (67,68). Gli effetti in vivo della terapia con bisfosfonati sulla formazione di osteoclasti in colture di PBMC e sulla produzione di citochine non sono ancora chiari (65,69). Non esistono ancora spiegazioni esaustive sugli effetti dell'ALN sulla presenza di preosteoclasti circolanti e sulla produzione citochinica sebbene ci siano in letteratura dati sull'induzione dell'apoptosi degli osteoclasti in vitro ed in vivo da parte dei bisfosfonati e sugli effetti nei confronti dei precursori (70,71). Per chiarire ulteriormente la selettività dell'effetto del ALN sulle sottopopolazioni analizzate abbiamo condotto un'indagine sui precursori degli osteoclasti nel sangue periferico.Questa analisi ha confermato come anche l'ALN, come già suggerito per il risedronato (78), sia in grado di ridurre l'output midollare di precursori degli osteoclasti.Nel gruppo di pazienti che ha assunto per i primi tre mesi calcio e vitamina D richiamati a distanza di tre mesi, non abbiamo riscontrato differenze significative nel numero nei precursori circolanti; abbiamo così escluso la possibile variabilità spontanea di questi parametri.A questo proposito abbiamo ancora in corso gli studi che riguardano la formazione di osteoclasti maturi ed attivi in coltura.In conclusione quindi questi dati preliminari suggeriscono che l'ALN avrebbe un effetto immunomodulante, riducente il numero dei linfociti Tγδ e dei precursori degli osteoclasti circolanti nel sangue periferico nonché un effetto attivante sui linfociti T. Manabe R., Kawagughi H., Chikuda H., Miyaura C., Inada M., et al. 