L'effetto può verificarsi a causa dell'eccesso di antigene, quando sia gli anticorpi di cattura che quelli di rilevazione vengono saturati dall'alta concentrazione dell'analita. In questo caso, nessun sandwich può essere formato dall'anticorpo di cattura, dall'antigene e dall'anticorpo di rilevazione. In questo caso, l'antigene libero è in competizione con l'antigene catturato per il rilevamento del legame anticorpale. L'aggiunta sequenziale di antigene e anticorpo, abbinata a un lavaggio rigoroso, può prevenire l'effetto, così come aumentare la concentrazione relativa dell'anticorpo verso l'antigene, mediando così l'effetto.