Nell'era pre -JAK2 la diagnosi della Policitemia Vera si fondava su "consensus criteria" che si riferivano in parte a valori misurabili (come valori aumentati di ematocrito ed emoglobina), in parte a tecnologie con una discreta variabilità soggettiva (come la biopsia ossea) (72) . I primi criteri diagnostici furono pubblicati nel 1975 dal PVSG con lo scopo di escludere dal reclutamento per i loro studi tutti i pazienti con policitemia relativa o secondaria (73) .Questi criteri si basavano sulla dimostrazione di una massa eritrocitaria elevata (misurata con eritrociti marcati) in condizione di normossiemia. Venivano quindi esclusi i pazienti che rientravano nelle code della curva Gaussiana dei valori di massa eritrocitaria, i pazienti con deplezione di depositi di ferro o con sanguinamenti importanti, e coloro che avevano concomitanti condizioni di ipossiemia non correlate con la policitemia. Venivano poi considerati altri criteri come splenomegalia, leucocitosi, trombocitosi, aumento della fosfatasi alcalina e aumento sierico della vitamina B12. Tali criteri però avevano scarsa sensibilità e specificità (23) .Nel 2001 sono stati pubblicati dalla World Health Organization dei nuovi criteri diagnostici (74) che includevano la valutazione dei livelli sierici di EPO e l'utilizzo della biopsia midollare, test fino ad allora scarsamente utilizzati.Veniva inoltre inserito negli step diagnostici il test sulla formazione di colonie eritroidi spontanee in vitro, in assenza di eritropoietina. I criteri erano dunque divisi in maggiori e minori. Per una corretta diagnosi erano necessari tre dei seguenti criteri maggiori: aumento della massa eritrocitaria o dell'emoglobina, esclusione di cause secondarie, splenomegalia, anomalie genetiche e formazione di colonie eritroidi endogene in vitro (di cui i primi due sempre presenti); in alternativa, occorreva l'associazione dei primi due criteri maggiori e di due dei criteri minori, ovvero trombocitosi, leucocitosi e bassi livelli sierici di EPO.Nel 2007 la World Health Organization ha proposto un aggiornamento delle linee guida e dei criteri diagnostici della PV in considerazione della scoperta delle mutazione JAK2V617F e delle mutazioni dell'esone 12 presenti virtualmente in tutti i pazienti affetti da policitemia vera e assenti nelle forme di eritrocitosi spuria o secondaria (75) . La presenza di una delle mutazioni di JAK2 costituisce uno dei criteri maggiori, l'aumento dell'emoglobina l'altro. I criteri minori comprendono la biopsia midollare compatibile, i livelli di EPO sierica inferiori alla norma e la presenza di colonie eritroidi endogene. Per la diagnosi sono richiesti 2 criteri maggiori e uno minore oppure il primo maggiore (aumento dell' emoglobina) e 2 minori. Il 97% dei pazienti con PV dovrebbe rientrare nei 2 criteri maggiori, ma, per ridurre al minimo le conseguenze di eventuali falsi positivi al test molecolare e per migliorare la specificità, viene aggiunto il criterio minore.Allo stesso tempo l'utilizzo di 2 criteri minori nei JAK2 negativi permette di includere anche i pazienti con una mutazione ancora sconosciuta o con un livello di mutazione al di sotto dei valori rilevabili.Dunque in caso di riscontro di un aumento dell'emoglobina o dell'ematocrito non è più necessario eseguire la valutazione della massa eritrocitaria ma vanno ricercate con l'esame molecolare eventuali mutazioni di JAK2.La determinazione dei livelli sierici di EPO è poi un test da eseguire precocemente nel processo diagnostico, poiché è caratterizzato da una specificità maggiore del 90% pur non essendo invasivo (23) . I livelli sierici di EPO sono sempre bassi nei pazienti affetti da PV (anche nei salassati) e, se inferiori a 1,4 (valori normali 3,3-16,6), sono altamente suggestivi per PV.La biopsia ossea, invece, che ha valore diagnostico solo se effettuata da personale esperto, andrebbe effettuata solo nei casi JAK2 negativi ma con eritropoietina soppressa. I reperti istologici suggestivi di PV sono ipercellularità, presenza di megacariociti aumentati di numero, pleomorfi o giganti, la moderata fibrosi (76) .Può non essere sempre facile effettuare la diagnosi differenziale tra policitemia vera e trombocitemia essenziale o mielofibrosi primitiva JAK2 positive, anche se la rilevanza terapeutica di tale distinzione è ad oggi dubbia. Per inquadrare correttamente la patologia è necessario attenersi ai nuovi criteri proposti e monitorare strettamente il paziente per identificare qualunque cambiamento sostanziale che renda necessaria una revisione della diagnosi (77) . 