La classificazione molecolare del carcinoma mammario proposta dal gruppo della Stanford University (vedi paragrafo precedente) è basata sull"analisi del profilo di espressione genica di carcinomi duttali infiltranti e di carcinomi lobulari infiltranti della mammella, ed è quindi in larga misura ristretta agli IDCs-NOS, comprendendo una quota molto limitata di carcinomi a istotipo speciale, peraltro tutti di istotipo lobulare.Recentemente è stato però condotto uno studio volto alla caratterizzazione molecolare di una serie di 11 differenti istotipi speciali, sia dal punto di vista dell"immunoistochimica (ICC) sia dal punto di vista della gene expression profiling, nel tentativo di definire una più corretta classificazione dei carcinomi della mammella [7] .Il lavoro svolto da Weigelt e colleghi, attualmente unico nel suo genere, ha utilizzato un"analisi del pattern di espressione proteica con tecniche di ICC che ha previsto l"impiego di un pannello di 22 anticorpi rappresentanti specifici marcatori. È emerso che alcuni dei diversi istotipi condividono un pattern di espressione proteica simile, il che suggerisce una comune origine eziologica e il coinvolgimento nella carcinogenesi di comuni vie genetiche/epigenetiche.ER si è nuovamente dimostrato essere il marcatore con la maggiore variabilità di espressione tra i diversi istotipi, permettendo di classificare molto chiaramente un gruppo di neoplasie ER positive e un gruppo di ER negative, e anche in questo caso è stato possibile individuare due gruppi definiti sulla base del pattern di espressione della cheratina: luminale e basale. Inoltre si è osservato che in generale, esclusa l"espressione della E-caderina (particolarmente down-regolata), in tutti i carcinomi a istotipo speciale di tipo tubulare l"espressione proteica è molto simile a quella dei carcinomi lobulari.Si sono quindi osservate differenze significative per quanto riguarda l"espressione di ER, caderina-E, CK19, CD117, AR, EMA, CK8/18, PR, vimentina, S100, sinaptofisina, GCDFP-15, CK14 e CK5/6.Al contrario, non si sono evidenziate differenze significative rispetto all"espressione di p63, cromogranina, CEA, CD56, p53, EGFR, CD10 e HER2. Per quanto riguarda IMPC, come atteso essi hanno dimostrato una positività "inside-out" per EMA e una diminuita espressione di S100 rispetto agli altri carcinomi a istotipo speciale.I risultati di questo studio sono raccolti e schematizzati nella figura che segue (Fig. 1.7), in cui le singole cellette sono codificate in base al colore: se tendono al rosso la positività per il marcatore è elevata, se tendono al verde è invece bassa.Figura 1.7. Analisi dell"espressione proteica di 112 tumori rappresentativi degli 11 istotipi speciali di carcinoma della mammella, condotta utilizzando 22 marcatori immunoistochimici. Il colore di ogni celletta riflette l"intensità della positività alla colorazione ICC. Tratto da: Weigelt B et al. J Pathol. 2008 [7] .La caratterizzazione molecolare dei carcinomi a istotipo speciale è quindi proseguita con l"analisi condotta con la gene expression profiling, valutando 8518 geni regolati in maniera significativa (Fig. 1.8). Essa ha innanzitutto suddiviso i tumori in due gruppi basati sull"espressione di ER: tra i carcinomi ER negativi i tumori apocrini e il carcinoma lobulare pleomorfo hanno formato un cluster a parte; i carcinomi adenoideocistici, i metaplastici e i midollari hanno clusterizzato in uno stesso ramo. Tutti hanno evidenziato un pattern similare di espressione genica, in parallelo con i risultati ottenuti con l"ICC.Questo dato, basato sulle analisi di espressione genica, è in accordo con precedenti osservazioni riportate dal nostro gruppo sulla base di dati di immunoistochimica e di comparative genomic hybridization [50][51] (vedi paragrafo seguente).Figura 1.8. Clustering gerarchico dei carcinomi a istotipo speciale. Il dendrogramma è stato ottenuto conducendo l"analisi di gene expression profiling di 113 carcinomi della mammella, misurando l"espressione di 8518 geni. La parte inferiore della figura mostra invece i risultati delle colorazioni immunoistochimiche di alcuni selezionati marcatori. Tratto da Weigelt B et al. J Pathol. 2008 [7] .