Washed digested sludge [12], containing low (< 10 mg/l) concentrations of inorganic carbon (IC), is diluted about ten-fold to a total solids concentration of 1 g/l to 3 g/l and incubated at 35 °C ± 2 °C in sealed vessels with the test substance at 20 to 100 mg C/l for up to 60 days.
Toutefois, si l'état quasi stationnaire n'est pas atteint dans les 28 jours, la phase d'élimination est démarrée en transférant les oligochètes exposés dans des récipients contenant le même milieu sans la substance d'essai.