Développement d’une méthode informatique appliquée à la quantification immunohistochimique du mastocyte et du macrophage M1 et M2 lors de la guérison cutanée chez le cheval
Le but de cette étude randomisée et contrôlée était de développer une méthode quantitative fiable et accessible en immunohistochimie, puis de quantifier le patron temporel et anatomique des mastocytes et des macrophages M1 et M2 au cours de la guérison cutanée équine. Deux plaies de pleine épaisseur ont été créées sur le métacarpe et l’hémithorax chez quatre juments (n = 4). Des prélèvements ont été réalisés aux jours 2, 7, 14 et 21 et ces spécimens ont été archivés (n = 28). Une immunohistochimie a été effectuée pour étudier les mastocytes (CD117), puis les macrophages (pan : CD14, M1 : CD86 et M2 :CD204). Une méthode de quantification ImageJ a été développée et comparée à un comptage manuel sur 6 spécimens. Les 22 autres ont ensuite été quantifiés avec la méthode informatique. Pour la validation de la méthode (CD117), un coefficient de corrélation intraclasse intra-,interopérateur et comparé avec le comptage manuel de 0,90 (p < 0,01), 0,69 (p < 0,01) et 0,67 (p < 0,05) ont été trouvés. Aucune différence significative du nombre de mastocytes en relation avec la localisation anatomique (thorax vs membre) et le temps de guérison n’a été trouvée. La morphologie des macrophages M2 était fusiforme ou ronde et celle des macrophages généraux était ronde, « fried egg » ou dendritique. La méthode quantitative développée est fiable, reproductible, accessible et gratuite. De futures études devraient, à l’aide d’anticorps spécifiques, caractériser davantage l’implication du mastocyte et du macrophage dans la guérison cutanée et l’inflammation chronique chez le cheval.
Cheval Immunohistochimie Quantification Macrophages M1 et M2 Mastocytes Peau