Spliceosome SNRNP200 promotes viral RNA sensing and IRF3 activation of antiviral response
Le système immunitaire innée est la première ligne de défense de l’organisme contre une multitude d’agents pathogènes tel que les bactéries, les virus, les parasites et les champignons. Afin d’identifier de nouveau régulateur de l’immunité antivirale innée, nous avons complété le premier criblage pangénomique par ARN interférent (RNAi) s’intéressant à la réponse transcriptionnelle de l’interféron-β (IFNB1) suite à une infection par le virus Sendai (SeV). De façon surprenante, une analyse d’enrichissement génomique (GESA) nous a permis d’identifier 114 gènes régulateurs dont plusieurs facteurs du splicéosome. Par eux, nous avons priorisé la caractérisation de SRNNP200, une protéine clé de la machinerie d’épissage des introns et une hélicase de la famille Ski2, sur la base de similitudes entre sa structure et celle d’autres hélicases antivirales tel que RIG-I et MDA5. Dans cette thèse, nous montrons, pour la première fois, un rôle distinct, pour SNRNP200, de sa fonction canonique dans l’épissage des pré-ARNs. En effet, le silençage de l’expression de SNRNP200 dans des lignées de cellules humaines primaires entraîne une réduction de l’immunité antivirale et une augmentation de la susceptibilité à une infection virale. Plus spécifiquement, nous montrons que SNRNP200 est un régulateur positif de l’activation de IRF3 via une interaction protéine-protéine avec la sérine/thréonine-kinase TBK1. Additionnement, nous avons montré que, lors d’une infection, SNRNP200 est capable de lier l’ARN viral cytoplasmique et qu’il relocalise, du noyau au cytoplasme, avec TBK1 dans des structures périnucléaires distinctes et spécifiques. En lien avec la clinique, nous avons observé une réponse antivirale réduite dans les cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) de patients atteints de rétinite pigmentaire de type 33 (RP33) causée par des mutations dans le gène SNRNP200. De plus, nous avons démontré qu’un mutant de SNRNP200 associé à RP33 n’était plus en mesure de lier l’ARN viral cytoplasmique ou de rétablir l’immunité antivirale de cellules ciblée par un RNAi lors d’une expérience de sauvetage. Ainsi, cette thèse présente les premiers travaux portant sur la fonction immunomodulatrice de SNRNP200 et de son rôle comme senseur d’ARN viral et de protéines adaptatrice de TBK1 et d’IRF3.
Criblage pangénomique Immunité innée Virus de Sendai Interféron de type I RIG-I Voie de signalisation RLR SNRNP200 IRF3 TBK1 Senseur d’ARN viral Protéine adaptatrice Rétinite pigmentaire