Une nouvelle stratégie de vaccination contre Salmonella Enteritidis, chez le poulet de chair : «les vésicules externes de membrane bactérienne»
La consommation de viande de poulet est considérée comme un facteur de risque important des épisodes de toxi-infections alimentaires à Salmonella enterica serotype Enteritidis (SE). Dans la perspective de contribuer au contrôle de SE chez la volaille, nous avons envisagé d’utiliser les vésicules externes de membrane bactérienne (VEMB) comme vaccin. En effet, des études ont montré que des VEMB peuvent être immunogènes et qu’elles ont été utilisées comme stratégie vaccinale. L’objectif du projet a été de produire, d’isoler et de purifier de telles vésicules à partir d’une souche de SE provenant du terrain et isolée au Québec, puis d’en faire une première caractérisation. La production des VEMB a été réalisée en conditions normales et en conditions de stress. Le stress a consisté à l’ajout d’un antibiotique dans un milieu nutritif et la croissance dans un milieu minimal acide. Les observations en microscopie électronique, ont confirmé la présence des VEMB dans toutes ces conditions. Le protocole de production en conditions normales de croissance a été ensuite retenu pour l’isolement des vésicules, et leur purification a été réalisée par gradient de densité. La caractérisation initiale des VEMB a été faite par migration sur gel d’électrophorèse (SDS-PAGE) et leur profil protéique a été comparé à celui du lysat de cellules entières et aux protéines de la membrane externe de SE. Enfin, la quantification de leur contenu en lipopolysaccharides (LPS) a été évaluée. Nous avons produit, isolé et purifié des VEMB avec un protocole nous permettant d’obtenir un produit prêt à utiliser afin de vérifier leur immunogénicité et protection dans des conditions in vivo chez le poulet.
Vésicules externes de membrane bactérienne (VEMB) Vaccin Volaille