PL9fwy3NUQKwZ2maYQWAufx8JKyPTiiP30/LftGtVx2Jyc_raw.srt

1
00:00:00,930 --> 00:00:05,210
بسم الله الرحمن الرحيم والصلاة والسلام على أشرف

2
00:00:05,210 --> 00:00:11,650
المرسلين سيدنا محمد وعلى آله وصحبه أجمعين طلبنا

3
00:00:11,650 --> 00:00:16,070
الأكارم نرجو من الله الكريم أن تكونوا جميعا بخير

4
00:00:16,070 --> 00:00:21,810
وبصحة جيدة اليوم سوف نستكمل ما تقطع من الشبط

5
00:00:21,810 --> 00:00:26,880
الرابعحيث تحدثنا في المحاضرات السابقة عن القالية

6
00:00:26,880 --> 00:00:31,600
والنظام المتبع من أجل تحفيز المبيض للسيدة التي

7
00:00:31,600 --> 00:00:35,780
تخضع لعمليات التلقيح الصناعي أو الزراعة من أجل

8
00:00:35,780 --> 00:00:40,500
الحصول على أكبر عدد من البويضات الناضجة وذات

9
00:00:40,500 --> 00:00:45,520
الجودة العالية وقُسمت هذه الأنظمة المستخدمة إلى

10
00:00:45,520 --> 00:00:50,020
Agonist Protocol وAntagonist Protocolالـ Agonist

11
00:00:50,020 --> 00:00:54,100
Protocol على سبيل المثال قُسم إلى Ultra Short و

12
00:00:54,100 --> 00:00:59,300
Short و Long والـ Antagonist Protocol قُسم إلى One

13
00:00:59,300 --> 00:01:04,000
Dose أو Single Dose أو Multi Doseأدى بالنسبة إلى

14
00:01:04,000 --> 00:01:08,380
ما تحدثنا عنه في المحاضرة السابقة ثم انتقلنا

15
00:01:08,380 --> 00:01:13,160
للتحدث عن حالة مرضية تسمى Hyperovarian Stimulation

16
00:01:13,160 --> 00:01:17,700
Syndrome والتي تحدث عند بعض السيدات بسبب الإفراط

17
00:01:17,700 --> 00:01:22,740
في عملية إعطاء الأدوية التي تعمل على تحفيظ المبيض

18
00:01:22,740 --> 00:01:27,920
مما يؤدي إلى إنتاج بويضات غير ناضجة أو الوصول إلى

19
00:01:27,920 --> 00:01:35,050
فوليكل ناضق تحتوي علىfluid بدون أي mature oocyte

20
00:01:35,050 --> 00:01:40,270
اليوم سوف نتكلم عن المرحلة الثانية من مراحل تحضير

21
00:01:40,270 --> 00:01:46,090
السيدة فبعد إعطاء السيدة هرمون الـHCG لـHuman

22
00:01:46,090 --> 00:01:50,710
Chronic Gynadotropin الذي يعمل عمل الـLH من أجل

23
00:01:50,710 --> 00:01:56,280
عمل ovulationيجب أن نلتقي وننتقل إلى نقطة جديدة

24
00:01:56,280 --> 00:02:04,060
اسمها or oocyte pick up بمعنى

25
00:02:04,060 --> 00:02:08,860
آخر عملية الحصاد عملية ال harvest بعد ما تم تحفيز

26
00:02:08,860 --> 00:02:14,900
المبيع و اتصل فولكل بعدد معين و بعدد مناسب إلى

27
00:02:14,900 --> 00:02:20,680
ديامتر مناسب أكبر من أو يساوي 18 ملي مترمعناه إن

28
00:02:20,680 --> 00:02:25,560
هذه الفوليكل تحتوي على بويضة ناضجة تكون صالحة

29
00:02:25,560 --> 00:02:30,220
للطلقيح الصناعي إذا كانت متوقفة في الـ Metaphase 2

30
00:02:30,220 --> 00:02:35,300
Metaphase التاني يعني الـ Metaphase الخاص بالقسام

31
00:02:35,300 --> 00:02:38,920
الميوزي الثاني والذي يدل على هذا الأمر وجود الـ

32
00:02:38,920 --> 00:02:42,600
Ferrous Polar Body ننتقل إلى مرحلة جديدة وهي مرحلة

33
00:02:42,600 --> 00:02:47,560
الـ Collection أو الـ Oocyte Retrieval أو الـ Ovum

34
00:02:47,560 --> 00:02:53,180
Pick Upبمعنى آخر إن كل follicle وصلت إلى الـ

35
00:02:53,180 --> 00:02:57,900
maturation stage المفروض تحتوي على بويضة ناتجة

36
00:02:57,900 --> 00:03:02,780
المفروض بعد إعطاء الكورونادوتروبين administration

37
00:03:02,780 --> 00:03:08,260
نستطيع هذه الـ follicle أن تقوم بعملية ovulation

38
00:03:08,260 --> 00:03:12,520
ليه بتضبط بعد الكورونادوتروبين؟ لأن هذا الهرمون

39
00:03:12,520 --> 00:03:18,280
مسئول عن عمل الألأتش أو عمله يحاكي عمل الألأتشوهي

40
00:03:18,280 --> 00:03:23,000
عبارة عن عملية الـ ovulation and oocyte pickup is

41
00:03:23,000 --> 00:03:27,460
performed approximately 36 hours later by

42
00:03:27,460 --> 00:03:31,940
ultrasound transvaginal aspiration بمعنى آخر إن

43
00:03:31,940 --> 00:03:37,680
عملية جمع البويضات تحدث بعد 36 ساعة من إعطاء إبرة

44
00:03:37,680 --> 00:03:42,000
التفجير اللي بنسميها بالوضع العام بإبرة التفجير أو

45
00:03:42,000 --> 00:03:46,500
sheregon يعني إبرة التفجير إبرة الشيرجون وهي عبارة

46
00:03:46,500 --> 00:03:52,320
عنأبرة تحتوي على كورونات جونادوتروبين هورمون طبعاً

47
00:03:52,320 --> 00:03:55,820
عملية بتصير عملية ال collection عن طريق ال

48
00:03:55,820 --> 00:04:00,080
aspiration باستخدام needle معينة بجوج معينة تدخل

49
00:04:00,080 --> 00:04:03,500
من خلال ما يُعرف باسم ال Transvaginal aspiration

50
00:04:03,500 --> 00:04:09,240
هذه العملية ككلفي لحظة عمل الـ Oocyte Collection

51
00:04:09,240 --> 00:04:12,980
لازم نعمل Clearing للفاجينة بالـ Normal Saline

52
00:04:12,980 --> 00:04:18,440
بدون استخدام أي مطهر على سبيل المثال الـ Betadine

53
00:04:18,440 --> 00:04:24,040
لا يمكن ولا ينصح باستخدامه كنوع من أنواع المطهرات

54
00:04:24,040 --> 00:04:28,900
قبل عملية الـ Egg Collectionلأنه very toxic وممكن

55
00:04:28,900 --> 00:04:33,920
يؤثر على ال egg بشكل سلبي وبشكل غير مرغوب فيه

56
00:04:33,920 --> 00:04:37,500
عملية جمع البويضات تسمى ال oocyte pick up أو ال

57
00:04:37,500 --> 00:04:41,820
oocyte harvest أو harvest the harvesting is

58
00:04:41,820 --> 00:04:45,660
carried out using the aspiration unit composed of

59
00:04:45,660 --> 00:04:50,260
vacuum pumpA collection tube connected to 70 gauge

60
00:04:50,260 --> 00:04:53,840
needle and collection test tube يعني الوحدة

61
00:04:53,840 --> 00:04:57,720
المسؤولة عن عملية جمع البويضات تتكون من تلت مكونات

62
00:04:57,720 --> 00:05:02,020
أساسية المكون الأول هو ال vacuum pump مضخة تعتمد

63
00:05:02,020 --> 00:05:08,590
علىالـ suction سحب الأواء الشغلة التانية و سحب الـ

64
00:05:08,590 --> 00:05:11,710
fluid الشغلة التانية الـ collection tube متصلة

65
00:05:11,710 --> 00:05:16,910
بنيدل الجوج تبعها 17 بالإضافة إلى collection test

66
00:05:16,910 --> 00:05:20,590
tube وهي الـ test tube التي تجمع بها البوايضات هذه

67
00:05:20,590 --> 00:05:25,750
عبارة عن الـ oocyte collection unit تلت مكونات

68
00:05:25,750 --> 00:05:30,910
vacuum pump collection tube متصلة بالجوج نيدل 17 و

69
00:05:30,910 --> 00:05:35,160
collection test tubeالـ fluid الموجود داخل الـ

70
00:05:35,160 --> 00:05:39,100
follicle يجب أن يُسحب كله ويجب أن يُسحب من كل

71
00:05:39,100 --> 00:05:43,400
follicle وصلت إلى 18 mm على الأقل سواء كان في الـ

72
00:05:43,400 --> 00:05:46,960
over اليمين أو في ال over اليسار فبالتالي أنا أسحب

73
00:05:46,960 --> 00:05:50,720
كل fluid الموجود معناه أنا بسحب ال fluid مع ال

74
00:05:50,720 --> 00:05:54,280
oocyte سواء كانت mature أو immature لأن ال

75
00:05:54,280 --> 00:05:59,400
immature في خارج جسم الإنسان لها استخدامات شتة بعد

76
00:05:59,400 --> 00:06:03,310
كده ببدأأعمل examination للـ fluid اللي جمع في ال

77
00:06:03,310 --> 00:06:07,790
test tube علشان أشوف كداش عدد البوايدات الموجودة و

78
00:06:07,790 --> 00:06:10,710
أبدأ أعمل collection لهذه البوايدات و أنقلها من

79
00:06:10,710 --> 00:06:16,150
هذا ال fluid إلى a new media اللي اسمها maturation

80
00:06:16,150 --> 00:06:23,800
media أو IVF mediaDuring the collection يجب أن

81
00:06:23,800 --> 00:06:28,740
يستخدم ضغط يقدر على أقصى حد مائة وعشرين ميلي متر

82
00:06:28,740 --> 00:06:34,080
ذئبقي هذا الضغط الموصفي خلال عملية الجمع وإلا

83
00:06:34,080 --> 00:06:37,670
زيادة الضغط بيعمل rupture في ال follicleوهذا شيء

84
00:06:37,670 --> 00:06:41,950
غير مطلوب to avoid the risk of damage of oocyte

85
00:06:41,950 --> 00:06:45,990
such as stripping the cumulus cell or the zona

86
00:06:45,990 --> 00:06:50,910
plucida بمعنى آخر إنه مهم جدا أستخدم ضغط يقدر

87
00:06:50,910 --> 00:06:56,400
بـ120 ميلي متر ذئبقي خلال عملية الجمعما أزيد هذا

88
00:06:56,400 --> 00:07:00,280
الضغط لأن زيادته ممكن تؤثر على ال oocyte بشكل سلبي

89
00:07:00,280 --> 00:07:04,660
وتدمرها أو تدمر ال cumulus الموجودة حوالي ال

90
00:07:04,660 --> 00:07:07,700
oocyte أو تدمر الزيونابليوسيدا ودمرت

91
00:07:07,700 --> 00:07:10,440
الزيونابليوسيدا يعني أنا فقط ال cytoplasm والمادة

92
00:07:10,440 --> 00:07:14,980
النووية once the oocyte are collected they are

93
00:07:14,980 --> 00:07:19,320
placed or put in culture plate with neutron media

94
00:07:19,320 --> 00:07:24,060
and then placed into incubator بمجرد ما أحصل على

95
00:07:24,060 --> 00:07:28,050
ال oocyteالـ fluid اللي جمعته من الـ follicle و

96
00:07:28,050 --> 00:07:31,130
ابتدأ أعمل examination تحت ال inverted microscope

97
00:07:31,130 --> 00:07:34,910
و أجمع البويضات هذه البويضات باخدها ب sterile

98
00:07:34,910 --> 00:07:38,830
dropper و بنجلها على طبق يحتوي على قطرات من ال

99
00:07:38,830 --> 00:07:43,630
media المغذية و بنقل هذا الطبق و بوضعه في ال

100
00:07:43,630 --> 00:07:49,210
incubator بقولي ببساطة جدا هذه العملية كلها تحدث

101
00:07:49,210 --> 00:07:54,100
عملية ال oocyte collection تحت تخدير موضعيأو تخدير

102
00:07:54,100 --> 00:07:58,080
كلي ولكن خفيف لفترة زمانية قصيرة الفترة الزمانية

103
00:07:58,080 --> 00:08:00,840
المفروض تاخدها العملية كلها عملية ال egg

104
00:08:00,840 --> 00:08:04,340
collection و ال fluid aspiration من 10 إلى 15

105
00:08:04,340 --> 00:08:09,020
دقيقة و الطبيب الشاطر ما بتطلق blood في ال fluid

106
00:08:09,020 --> 00:08:14,640
المسحوب من ال follicle Therefore, during a system

107
00:08:14,640 --> 00:08:17,080
reproductive technology procedure, cumulus cells

108
00:08:17,080 --> 00:08:19,440
surrounding the oocyte should be removed to

109
00:08:19,440 --> 00:08:23,120
improve oocyte evaluation and manipulationهنعرف

110
00:08:23,120 --> 00:08:26,500
إيش يعني cumulus cell واتكلمنا عنها cumulus cell

111
00:08:26,500 --> 00:08:29,900
فيما سبق إنه في خلايا خفيفة موجودة حول ال oocyte

112
00:08:29,900 --> 00:08:33,200
تسمى cumulus cell هذه ال cumulus cell لازم أخفف

113
00:08:33,200 --> 00:08:37,120
عددها بشكل كبير جدا أو أزينها علشان يسهل عملية

114
00:08:37,120 --> 00:08:42,380
evaluation لل oocyte وأحدد هل هي mature ولا

115
00:08:42,380 --> 00:08:45,460
immature ويسهل عملية ال manipulation وما المقصود

116
00:08:45,460 --> 00:08:50,060
فيها ال injection مهم جداأعرّ الخلية، أخفف عدد الـ

117
00:08:50,060 --> 00:08:52,920
Cumulus Cell اللي حوالها، أزيل الـ Cumulus Cell

118
00:08:52,920 --> 00:08:59,500
اللي حوالها بعض الأحيان بكون عندى بويضات أو بكون

119
00:08:59,500 --> 00:09:03,800
عندى Full Hill وصلت للـ18 مليمتر ولكن البويضات لم

120
00:09:03,800 --> 00:09:07,450
تصل إلى درجة النضوجةفبطّر في هذه الحلقة أعملها

121
00:09:07,450 --> 00:09:11,710
maturation outside in vitro maturation تحت مصطلح

122
00:09:11,710 --> 00:09:15,670
oocyte maturation في ال clinical IVF laboratories

123
00:09:15,670 --> 00:09:21,090
التكنولوجيست اللي بيشتغلوا في هذا المجال بيميلوا

124
00:09:21,090 --> 00:09:25,890
إلى استغلال البويضات الغير ناضجة وانضاجها في

125
00:09:25,890 --> 00:09:31,470
المختبر ثم استخدامها في عملية الحقد من أجل زيادة

126
00:09:31,470 --> 00:09:36,740
عدد البويضات المحقونة مما يؤدي لزيادة معدلالحقن أو

127
00:09:36,740 --> 00:09:40,200
معدل ال fertilization وخدوا بالك بعض البويضات اللي

128
00:09:40,200 --> 00:09:44,060
بالشكل هذا بتنجح و بتعطيني embryo و البعض لا ينجح

129
00:09:44,060 --> 00:09:47,780
ولا يعطي embryo في بعض البويضات في بتكون في مرحلة

130
00:09:47,780 --> 00:09:54,000
ال GV وهي التي تسمى germinal vesicle وفي مرحلة ال

131
00:09:54,000 --> 00:09:59,600
M1 وهي القسم الميوز الأولوفي الـ M2 القسم الميوزي

132
00:09:59,600 --> 00:10:05,680
التاني فبالتالي myotic maturation actually is a

133
00:10:05,680 --> 00:10:08,740
continuous process and some oocyte aspirated from

134
00:10:08,740 --> 00:10:14,000
follicle of various size would be expected to be

135
00:10:14,000 --> 00:10:16,560
intermediate stage of maturation يعني في بعض

136
00:10:16,560 --> 00:10:20,060
الأحيان بيصير في عندي بعض ال follicle تحتوي على

137
00:10:20,060 --> 00:10:26,420
بويضات أنا بسحب هذه ال fluid وبما فيها منبوايضات

138
00:10:26,420 --> 00:10:30,700
ولكن بلاج البوايضات غير ناضجة أو وكفت في أحد ال

139
00:10:30,700 --> 00:10:34,560
stage الذي يُعتبر intermediate stage خلال عملية ال

140
00:10:34,560 --> 00:10:39,640
maturation من أشهر هذه البوايضات زي ما حكينا هي ال

141
00:10:39,640 --> 00:10:43,840
GV من أشهر هذه البوايضات التي تُعتبر إما pure

142
00:10:43,840 --> 00:10:48,240
oocyte هي ال GV وهي ال germinal vesicle و ال

143
00:10:48,240 --> 00:10:53,120
metaphase I إذن أنا عندي أربع .. تلت أقسام

144
00:10:53,120 --> 00:11:00,080
للبوايضة ممكن أحصل عليهاإما GV أو M1 أو M2 M2

145
00:11:00,080 --> 00:11:05,400
معناه إن البويضة وقفت في انقسام الميوز الثاني في

146
00:11:05,400 --> 00:11:10,440
الـ Stage Metaphyse فهي صالحة للحقن الـ GV الـ

147
00:11:10,440 --> 00:11:14,660
Germinal Vesicle و الـ M1 يعني انقسام الميوز الأول

148
00:11:14,660 --> 00:11:18,100
في الـ Metaphyse الأول أو انقسام الميوز الأول

149
00:11:18,100 --> 00:11:23,280
معناه هذه البويضات إما pure oocyte تكون غير صالحة

150
00:11:23,280 --> 00:11:28,810
للحقن إلا بعضبعد الإنضاج ومش كلهم بيصلوا لل level

151
00:11:28,810 --> 00:11:32,210
الخاص بال maturation break down of germinal

152
00:11:32,210 --> 00:11:39,050
vesicle indicates the continuance of meiosis and

153
00:11:39,050 --> 00:11:42,590
ejaculate of the first polar body indicates

154
00:11:42,590 --> 00:11:45,250
complete the first meiotic division in human

155
00:11:45,250 --> 00:11:49,130
oocyte عشان أقول والله الخلية أو الويضة التي

156
00:11:49,130 --> 00:11:53,480
سُحِبت وهي في مرحلة ال GV ال germinal vesicleلازم

157
00:11:53,480 --> 00:11:58,060
أوضعها في ظروف تشبه الظروف الموجودة داخل الـ Opera

158
00:11:58,060 --> 00:12:01,480
الخاصة بالسيدة يعني في ظروف شبه طبيعية في media

159
00:12:01,480 --> 00:12:06,280
تحاكي الظرفة التي تعيش فيها البوايدة عشان أسمح لها

160
00:12:06,280 --> 00:12:11,960
بالنضوج والدليل على نضوجها أو تحويلها من GV إلى

161
00:12:11,960 --> 00:12:19,240
مثلا M2 تكون عند إذن صالح للحقل أنه يزيد حجمها

162
00:12:19,730 --> 00:12:24,290
وتقضف ال first polar body الخاص بها للخارج فبتطيني

163
00:12:24,290 --> 00:12:30,210
خلية أو بويضة اسمها بويضة ناضجة في مرحلة ال M2 عند

164
00:12:30,210 --> 00:12:34,110
هذا اللحظة أو عند تلك اللحظة تكون صالحة للإخصام

165
00:12:34,110 --> 00:12:40,630
اذا تلت حالات البويضة تلخيص الحدث GV M1 M2 هذه

166
00:12:40,630 --> 00:12:44,390
حالات البويضة التي يمكن أنراها ال M2 تكون هي

167
00:12:44,390 --> 00:12:49,030
الوحيدة الصالحة لعملية الإخصادالـ GV هي عبارة عن

168
00:12:49,030 --> 00:12:54,150
خلية غير ناضجة والـ M1 خلية غير ناضجة أيضًا يمكن

169
00:12:54,150 --> 00:12:59,350
أن تنضج في المختبر صورة توضح الكلام اللي احنا

170
00:12:59,350 --> 00:13:05,170
حكيناه عن طبيعة انقسام البويضة هي في عندي الـ GV

171
00:13:05,170 --> 00:13:11,190
الخاص بالبويضة على سبيل المثال هذه GV وهي عبارة عن

172
00:13:11,190 --> 00:13:15,970
German Visicleوهي عند ال M1 وهي عبارة عن البويضة

173
00:13:15,970 --> 00:13:18,770
اللتي وقفت في أحد الستجل خاصة بالانقسام الميوزي

174
00:13:18,770 --> 00:13:25,590
الأول وهي M2 وهي عبارة عن البويضة البويضة دخلت

175
00:13:25,590 --> 00:13:32,570
وأنهت الانقسام الميوزي الأول واتوقفت في الانقسام

176
00:13:32,570 --> 00:13:37,110
الميوزي التاني في مرحلة ال meta phase مما أدى إلى

177
00:13:37,110 --> 00:13:43,730
ظهور ال fairest polar bodyبعد ال maturation و ال

178
00:13:43,730 --> 00:13:48,450
fertilization يظهر ال second polar body لأنه حكينا

179
00:13:48,450 --> 00:13:52,530
أن ال first polar body هو أول indication على أن

180
00:13:52,530 --> 00:13:57,150
البويضة أنهت الانقسام الميوز الأول و أنهت جزء كبير

181
00:13:57,150 --> 00:14:01,470
من انقسام الميوز التاني و توقفت في ال stage الاسم

182
00:14:01,470 --> 00:14:06,850
ميتا فيز 2 يعني الميتا فيز التاني من انقسام التاني

183
00:14:06,850 --> 00:14:10,440
او الميتا فيز الخاص بالانقسام الميوز التانيأما

184
00:14:10,440 --> 00:14:13,160
بالنسبة إلى الـ two polar body أو الـ second polar

185
00:14:13,160 --> 00:14:19,040
body لا يظهر إلا بعد عملية ونجاح عملية ال

186
00:14:19,040 --> 00:14:23,800
fertilization تلقيح البويضة من خلال وجود ال spirit

187
00:14:23,800 --> 00:14:31,060
هذه عبارة عن مراحل البويضة بشكل الكامل طيب the

188
00:14:31,060 --> 00:14:34,520
immature oocyte are incubated in the original

189
00:14:34,870 --> 00:14:38,570
Culture Media or Original Tissue Culture Dish

190
00:14:38,570 --> 00:14:42,570
بتكون من واحد أو يحتوي على واحد مليمتر من الـ

191
00:14:42,570 --> 00:14:45,670
Oocyte Maturation Media يعني الميديا المستخدمة

192
00:14:45,670 --> 00:14:50,370
لتطوير ونضوج الـ Oocyte حيث تحتوي هذه الميديا على

193
00:14:50,370 --> 00:14:55,630
75 ملل International Unit لكل مليلتر من الـ FSH

194
00:14:55,630 --> 00:15:00,530
بالإضافة إلى 75 من الـ LH وموجودة في إنكبياتور 37

195
00:15:00,530 --> 00:15:05,730
درجة مئوية يعني كل هذه الميدياهي مواد مغذية ودرجة

196
00:15:05,730 --> 00:15:09,570
حرارة مناسبة بالإضافة إلى هرمونات الأفاساتش

197
00:15:09,570 --> 00:15:14,910
والألاتش المستخدمان في إنضاج البوايدة طبعا بوضعوها

198
00:15:14,910 --> 00:15:20,630
في إنكبياتور على 37 درجة مئوية في وجود 5% carbon

199
00:15:20,630 --> 00:15:27,050
dioxide و95% air with high humidity ويجب أن تكون

200
00:15:27,050 --> 00:15:31,110
في نسبة عالية من الرطوبة طبعا يفضل إنها تحضن

201
00:15:31,110 --> 00:15:35,570
البوايدة الغير نادجة لكي تنضجفي وجود انكبياتور فيه

202
00:15:35,570 --> 00:15:39,410
triple gas نيتروجين كاربون دايفسايد اكسيجين

203
00:15:39,410 --> 00:15:45,570
النيتروجين يوصف 90% الثريفستر كاربون 5% والأكسيجن

204
00:15:45,570 --> 00:15:50,870
5% و ال humidity الرطوبة 100% عشان كده لإما بيكون

205
00:15:50,870 --> 00:15:55,190
في عندي normal saline bottle معلقة في الانكبياتور

206
00:15:55,190 --> 00:15:59,250
من الخارج موصلة بأنبوب لداخل الانكبياتور عشان توفر

207
00:15:59,800 --> 00:16:03,820
الرطوبة المناسبة أو بيضعوا يعني زي حاوية بسيطة

208
00:16:03,820 --> 00:16:06,980
فيها ديستل ووتر أو ultra pure water داخل ال

209
00:16:06,980 --> 00:16:10,900
incubator علشان في درجة حرارة 37 بتتبخر الماء

210
00:16:10,900 --> 00:16:15,880
فبتكونلي كمية مناسبة ودرجة مناسبة من الرطوبة التي

211
00:16:15,880 --> 00:16:20,820
تبقي البوايدة في حالة جيدة جدا ال oocyte

212
00:16:20,820 --> 00:16:26,220
maturation media should be preparedبنسبة .. طبعا

213
00:16:26,220 --> 00:16:30,740
ال media التي تستخدم لإنضاج ال oocyte يجب أن تحضر

214
00:16:30,740 --> 00:16:35,360
قبل ساعتين من وضع البويضة الغير نادجة ويفضل أن

215
00:16:35,360 --> 00:16:40,040
تحضر قبل بيوم يعني بنحضرها و بنحط لها drops أو

216
00:16:40,040 --> 00:16:42,480
بنحط ال media في ال petri dish و ال petri dish

217
00:16:42,480 --> 00:16:46,280
بندخله داخل ال incubator اللي فيه ال triple gas و

218
00:16:46,280 --> 00:16:52,040
37 درجة موية علشان يصير في عندي balance و عملية

219
00:16:52,040 --> 00:16:57,450
اتزان في ال pHمهم جدا علشان ما تروح البويضة على

220
00:16:57,450 --> 00:17:02,010
أتموسفير أو تروح على ميديا مختلفة اختلاف كل فبيصير

221
00:17:02,010 --> 00:17:05,830
فيها shock وممكن يصير failure فتحضير ال media جابل

222
00:17:05,830 --> 00:17:09,050
بساعتين من خلال وضعها في الطبق ويدخل الطبق لل

223
00:17:09,050 --> 00:17:13,630
incubator بيخل فيه اتزان واستقبال وتكييف للميديا

224
00:17:13,630 --> 00:17:18,870
مع الظرف المحيط بها ال oocyte will be arrivedto

225
00:17:18,870 --> 00:17:22,550
the metaphase of the second meiotic division stage

226
00:17:22,550 --> 00:17:29,610
on the day of collection are stripping

227
00:17:29,610 --> 00:17:33,230
and fertilized يعني بمعنى أخر بيسميها الـ

228
00:17:33,230 --> 00:17:37,330
denudation بمعنى أخر أن البوايضة اللي كانت في حالة

229
00:17:37,330 --> 00:17:42,350
ال maturation و ساحبناها و هي mature لازم في يوم

230
00:17:42,350 --> 00:17:47,240
السحب تتعرض لحالتينولا خطواتين الخطوة الأولى الـ

231
00:17:47,240 --> 00:17:50,980
Denodation أو الـ Stripping بسموها التعرية وإزالة

232
00:17:50,980 --> 00:17:54,540
الكيومال السل و النقطة التانية ال fertilization

233
00:17:54,540 --> 00:17:59,920
طبعا together with any in vitro matured oocyte

234
00:17:59,920 --> 00:18:04,240
while immature oocyte are collected in IVM media

235
00:18:04,240 --> 00:18:10,640
for 24 to 48 hours يعني أي بويضة ناضجة وكانت ناضجة

236
00:18:10,640 --> 00:18:14,440
في يوم السحب يجب أن يحدث لها denodation أو

237
00:18:14,440 --> 00:18:17,760
strippingو fertilization في نفس اليوم مش أجيله من

238
00:18:17,760 --> 00:18:21,400
أي يوم تاني لأ في نفس اليوم السحب بيصير ال

239
00:18:21,400 --> 00:18:25,920
injection أما بالنسبة للبوايضة الغير نادجة لازم

240
00:18:25,920 --> 00:18:30,700
أوضعها في ال IVM media و يعني ما يطلق عليها in

241
00:18:30,700 --> 00:18:36,430
vitro maturation mediaلمدة 24 ساعة على الأقل وعلى

242
00:18:36,430 --> 00:18:42,150
الأكثر 48 ساعة لكي يسمح أو نسمح لهذه البويضة

243
00:18:42,150 --> 00:18:46,730
بالنضوج الـ Follicle is the basic functional unit

244
00:18:46,730 --> 00:18:51,050
of mammalian ovary which each follicle contained a

245
00:18:51,050 --> 00:18:53,370
single oocyte surrounded by inner layer of

246
00:18:53,370 --> 00:18:56,170
granulosa cell and outer layer of fecal cell

247
00:18:56,170 --> 00:19:00,650
الفوليكل هي الوحدة الأساسية التي تحتوي على البويضة

248
00:19:00,650 --> 00:19:09,360
الناضجة أو غير ناضجةفبالتالي هذه البويضة و

249
00:19:09,360 --> 00:19:14,330
كل بويضة ناضجةتكون محاطة بطبقة خفيفة و رقيقة جدا

250
00:19:14,330 --> 00:19:17,210
من الـ granulosa cell بالاضافة .. طبعا هذه طبقة

251
00:19:17,210 --> 00:19:21,270
داخلية أو طبقات في بعض الأحيان بتكون داخلية من الـ

252
00:19:21,270 --> 00:19:25,270
granulosa cell بالاضافة إلى طبقة أو طبقات متعددة

253
00:19:25,270 --> 00:19:29,010
من الخارج تسمى fecal cell وحنشوفها كمان شوية

254
00:19:29,010 --> 00:19:35,030
بالصورة يعني في المركز بويضة حواليها طبقات متعددة

255
00:19:35,030 --> 00:19:39,740
من الخلايا تسمى الـ granulosa cellومن الخارج طبقات

256
00:19:39,740 --> 00:19:43,120
متعددة من الـ fecal cell الـ granulosa cell بتلعب

257
00:19:43,120 --> 00:19:47,280
دور مهم جدا بتعمل زي ال nursing يعني زي كأنها

258
00:19:47,280 --> 00:19:53,000
بتعمل خادمة أو ممرضة أو يعني حاجة بتسهر على راحة

259
00:19:53,000 --> 00:19:57,520
البوادة توفر الأمور اللازمة للبوادة nurse أو

260
00:19:57,520 --> 00:20:01,540
nursing the oocyte and differentiated and

261
00:20:01,540 --> 00:20:06,530
proliferation in response to gonadotropinالتي مهمة

262
00:20:06,530 --> 00:20:12,310
لتطبيق و تضميد و إنعاش البويضة لعنى الـ Granulosa

263
00:20:12,310 --> 00:20:17,230
cell بالمجمل تلعب دور مهم جدا في تطبيق و تضميد و

264
00:20:17,230 --> 00:20:22,550
إنعاش البويضة كما أنها تلعب دور مهم جدا في تميز و

265
00:20:22,550 --> 00:20:27,750
نمو البويضة كما أنها تلعب مهم جدا في استجابة و

266
00:20:27,750 --> 00:20:31,750
زيادة استجابة البويضة لل-gonadotropin هرمون الذي

267
00:20:31,750 --> 00:20:37,630
يُعطى فبالتاليفهي تلعب دورة حاسمة ودورة مهمة في

268
00:20:37,630 --> 00:20:42,430
نجاح نمو البوايضة ونجاح عملية ال ovulation هذا

269
00:20:42,430 --> 00:20:46,230
بالنسبة إلى ال granulosa cell بدونها البوايضة لن

270
00:20:46,230 --> 00:20:51,430
تنمو بدونها البوايضة لن تنضج بدونها ال ovulation

271
00:20:51,430 --> 00:20:55,970
لن يحدث لأن حكينا إنها بتلعب دور كبير وسارفنا إيش

272
00:20:55,970 --> 00:20:58,730
الدور اللي بتلعبه من أهمها ال response for

273
00:20:58,730 --> 00:21:02,250
gonadotropin على سبيل المثالThere are bi

274
00:21:02,250 --> 00:21:05,830
-directional communication between the oocyte and

275
00:21:05,830 --> 00:21:09,290
the surrounding somatic cell من خلال الـ Gap

276
00:21:09,290 --> 00:21:13,430
Injection and Paracrine Signal طبعا الـ Somatic

277
00:21:13,430 --> 00:21:17,730
Cell أو الـ Oocyte خليني أسميها بالمجمل ما بتكون

278
00:21:17,730 --> 00:21:22,750
في معزل عن الخلايا الأخرى أو البيئة المحيطة فيها

279
00:21:22,750 --> 00:21:27,610
لأ في عندي connection تؤثر وتتأثر تتأثر بالبيئة

280
00:21:27,610 --> 00:21:31,610
المحيطة وتؤثر على البيئة المحيطةمن خلال junction

281
00:21:31,610 --> 00:21:34,270
gap موجودة ما بينها وما بين الـ somatic cell

282
00:21:34,270 --> 00:21:38,710
المحيطة بها ومن خلال ما يُعرف اسم الـ Paracrine

283
00:21:38,710 --> 00:21:42,650
Signal ويعرفين الناس اللي أخدت Indocrine في حسمة

284
00:21:42,650 --> 00:21:48,690
Autocrine في Paracrine وفي أنواع مختلفة من ال

285
00:21:48,690 --> 00:21:52,230
signal من Indocrine و Paracrine و Autocrine هذه

286
00:21:52,230 --> 00:21:57,370
أنواع مختلفة من ال signal بتفرز بالفعل الخلايا

287
00:21:57,370 --> 00:22:02,090
الموجودة طبعاهذه العملية بتسهل بشكل كبير جدا نمو

288
00:22:02,090 --> 00:22:05,890
البوايضة و تطور البوايضة الموجودة داخل الـ

289
00:22:05,890 --> 00:22:08,850
follicle مما يؤدي إلى نجاح عملية الـ

290
00:22:08,850 --> 00:22:14,690
folliculogenesis عملية تطور البوايضة نجد المرحلة

291
00:22:14,690 --> 00:22:18,230
الأولى التي تحدث و العملية الأولى التي تحدث بعد

292
00:22:18,230 --> 00:22:21,530
عملية الـ collection و هي ما يُعرف اسم oocyte

293
00:22:21,530 --> 00:22:25,510
denodation أو denoding في الغالب بيسموها stripping

294
00:22:25,510 --> 00:22:30,030
أو denodation يعني التعرية أو الإزالةطبعاً لما

295
00:22:30,030 --> 00:22:34,550
أقول oocyte denoding تعني إزالة الـ somatic cell

296
00:22:34,550 --> 00:22:38,890
المحيطة بالـ oocyte لأن أنا ما بدي أثناء عملية ال

297
00:22:38,890 --> 00:22:43,650
injection أدخل somatic cell داخل الـ oocyte خلال

298
00:22:43,650 --> 00:22:46,510
عملية ال injection أو جزء من المادة الوراثية

299
00:22:46,510 --> 00:22:49,770
الخاصة بالـ somatic cell تدخل مع الإبرة خلال عملية

300
00:22:49,770 --> 00:22:52,830
ال injection فبدي أزيل أغلب الـ somatic cell

301
00:22:52,830 --> 00:22:56,670
المحيطة بالـ oocyte علشان أعمل injection بشكل صحيح

302
00:22:57,000 --> 00:23:00,980
و مضمون 100% The removal of cumulus cell become

303
00:23:00,980 --> 00:23:04,860
critical step, very necessary step, very important

304
00:23:04,860 --> 00:23:09,940
step before fertilization since it allow an

305
00:23:09,940 --> 00:23:14,940
evaluation of oocyte nuclear maturity and easily

306
00:23:14,940 --> 00:23:19,150
handling of the oocyteDuring manipulation عملية

307
00:23:19,150 --> 00:23:22,790
الإزالة عملية الـ stripping تسمح لأنا ك تكنولوجيست

308
00:23:22,790 --> 00:23:27,370
أقيم ال Oocyte بشكل صحيح هل هي M1 ولا M2 ولا GV

309
00:23:27,370 --> 00:23:32,170
أيضا بسهل عملية ال injection أن أعمل injection في

310
00:23:32,170 --> 00:23:35,510
منطقة بعيدة عن ال polar body أعمل injection في

311
00:23:35,510 --> 00:23:39,130
منطقةتحتوي على كمية قليلة جدا من الـ somatic cell

312
00:23:39,130 --> 00:23:44,270
The cumulus and corona cell are removed before any

313
00:23:44,270 --> 00:23:49,670
step of micromanipulation procedure by using two

314
00:23:49,670 --> 00:23:54,190
method enzymatic method و mechanical treatment أنا

315
00:23:54,190 --> 00:23:57,770
ممكن أعمل denodation أو stripping قبل ما أعمل أي

316
00:23:57,770 --> 00:24:01,400
خطوة من خطوات ال injectionإما بستخدم إنزيم، هنعرف

317
00:24:01,400 --> 00:24:06,100
إيش هو الإنزيم وكيف بستخدمه أو بستخدم طريقة يدوية،

318
00:24:06,100 --> 00:24:10,320
ميكانيكية من أشهر الإنزيمات اللي تستخدم هو إنزيم

319
00:24:10,320 --> 00:24:15,600
يؤثر على مادة تسمى الـ Hyaluronic Acid الـ

320
00:24:15,600 --> 00:24:18,260
Hyaluronic Acid مادة بتعمل عملية تلاحق ما بين

321
00:24:18,260 --> 00:24:23,880
الخلية و تباصق ما بين الخلية فبصير عملية زعزعة

322
00:24:23,880 --> 00:24:26,660
الخلايا أو إزالة الخلايا صعب هذا الـ Hyaluronic

323
00:24:26,660 --> 00:24:32,630
Acid فبدي مادة تشتغل عليه و تزيلههيالورينك أسد هو

324
00:24:32,630 --> 00:24:38,050
مجموعة كبيرة من مجموعة كيومولاس المتحركة التي تجمع

325
00:24:38,050 --> 00:24:41,850
الهيالورينك أسد فبالتالي بستخدم إنزيم اسمه

326
00:24:41,850 --> 00:24:47,850
هيورينيداز اللي بلعب دوري كتير جدا في إزالة وتقطيع

327
00:24:47,850 --> 00:24:52,510
الهيالورينك أسد مما يؤدي إلى إزالة الخلايا ده

328
00:24:52,510 --> 00:24:56,870
البروسيجير عادةً يتم تفعيله تحت ميكروسكوب ستيريو

329
00:24:58,790 --> 00:25:00,970
الأنواع الأجهزة الموجودة أشهر على الـ

330
00:25:00,970 --> 00:25:04,990
Stereomicroscope Indifferent well or micro drop

331
00:25:04,990 --> 00:25:09,170
containing content buffer media usually covered by

332
00:25:09,170 --> 00:25:13,350
oil on the warm thermoplane Stereomicroscope هو

333
00:25:13,350 --> 00:25:18,570
عبارة عن ميكروسكوب الـ stage الخاص بيه بيكون فيه

334
00:25:18,570 --> 00:25:24,930
heating stage يعني موصول ببطارية بتعطي حرارةأو

335
00:25:24,930 --> 00:25:28,710
heater بيعطي حرارة 37 درجة مئوية عشان تكون قريبة

336
00:25:28,710 --> 00:25:33,950
من درجة حرارة الجسم وأنا بستخدم طبق فيه drop أو

337
00:25:33,950 --> 00:25:37,950
فيه well كل well فيها media موجود بداخلها البويضات

338
00:25:37,950 --> 00:25:42,250
الناضجة ومغطى بال oil عشان أمنع ال contamination

339
00:25:42,250 --> 00:25:46,330
دخول أي شيء من الخارج داخل ال media فبالتالي بيؤثر

340
00:25:46,330 --> 00:25:51,650
سلبا على البويضاتكيف انا ممكن اسرع و ادى عملية ال

341
00:25:51,650 --> 00:25:55,470
removing لل cumulus و ال corona cell بستخدم انزيم

342
00:25:55,470 --> 00:26:00,790
اسمه اللي هي lorandase enzyme او ممكن اعمل

343
00:26:00,790 --> 00:26:04,570
stripping شو يعني stripping ببساطة جدا بجيب

344
00:26:04,570 --> 00:26:07,450
plastic dropper استرايه plastic dropper إلى gauge

345
00:26:07,450 --> 00:26:12,610
معين او ديامتر معين هيكون اكبر بقليل او اصغر بقليل

346
00:26:12,610 --> 00:26:17,220
من ال oocyteو بعمل suction و releasing suction و

347
00:26:17,220 --> 00:26:21,020
releasing حوالي 7-8 مرات خلال عملية ال suction و

348
00:26:21,020 --> 00:26:23,880
ال releasing أو ال aspiration و ال releasing لل

349
00:26:23,880 --> 00:26:27,900
oocyte بيصير خلخلة في ال cumulus cell و تفتت أنا

350
00:26:27,900 --> 00:26:30,920
كده بكون خلصتها بعد ما أعمل عشر مرات في ال drop

351
00:26:30,920 --> 00:26:34,040
هذه باخد ال void و بالقلها ل drop جديدة و مظيفة

352
00:26:34,040 --> 00:26:39,810
مافيها أي شوائب أو مافي حدث فيهاSuction و

353
00:26:39,810 --> 00:26:42,430
Releasing للجوايدات يعني مافيها خلايا طبعا هذه

354
00:26:42,430 --> 00:26:44,910
العملية عملية ال aspiration و ال releasing لل

355
00:26:44,910 --> 00:26:48,750
oocyte ممكن تكرر بالعدد 20 مرة أو لمدة اعمالها

356
00:26:48,750 --> 00:26:51,950
كررها لمدة 30 ثانية يعني انت بدك بالوقت او بدك

357
00:26:51,950 --> 00:26:58,770
بالعدد سين once initial cell this خلينا نسميها

358
00:26:58,770 --> 00:27:04,130
removing is observed oocyte are removed to the

359
00:27:04,130 --> 00:27:07,310
second well droplet containing buffer media taking

360
00:27:07,310 --> 00:27:11,640
careto carry over minimum amount of enzyme طبعا

361
00:27:11,640 --> 00:27:15,560
هذه ال media ممكن تكون media وفيها انزيم الانزيم

362
00:27:15,560 --> 00:27:19,120
المسئول عن خلخلة ال hyaluronic acid بالاضافة إلى

363
00:27:19,120 --> 00:27:21,740
ال aspiration و ال releasing فبصير عندي mechanical

364
00:27:21,740 --> 00:27:26,000
aspiration releasing و enzymatic وجود الانزيم بعد

365
00:27:26,000 --> 00:27:30,100
ما أعمل aspiration و releasing لمدة 30 ثانية بنقل

366
00:27:30,100 --> 00:27:34,250
البوايدة هذه إلى قطرة جديدةلم يحدث فيها عملية

367
00:27:34,250 --> 00:27:37,090
removing للـ Oocyte طبعاً بكرر هذه العملية مرة و

368
00:27:37,090 --> 00:27:42,790
مرتين و تلاتة حتى أتأكد أن كمية الكيوملة السل

369
00:27:42,790 --> 00:27:47,050
المحيطة بالـ Oocyte قليلة جداً جداً جداً جداً

370
00:27:47,050 --> 00:27:50,350
طبعاً في القطرة الأولى بستخدم الـ dropper بدياميتر

371
00:27:50,350 --> 00:27:53,370
معين في القطرة التالية بستخدم الـ dropper بدياميتر

372
00:27:53,370 --> 00:27:58,070
أقل لأن كل منقل البويضة من قطرة لقطرة جديدة الـ

373
00:27:58,070 --> 00:28:01,710
Oocyte الدياميتر بتقل و الكيوملة السل الحواليها

374
00:28:01,710 --> 00:28:05,730
بتقلفبالتالي بدّي Dropper جديدة بـ Diameter أقل

375
00:28:05,730 --> 00:28:10,250
عشان أقدر أعمل قوة احتكار أثناء دخول وخرول

376
00:28:10,250 --> 00:28:17,070
البوايضة من الفوه .. من الفوهات الأنبوبة طيب،

377
00:28:17,070 --> 00:28:21,710
لازم أعمل Washing للـ Oocyte بشكل كامل علشان أوقف

378
00:28:21,710 --> 00:28:25,810
عملية عمل الـEnzyme عشان مايضلش فيه Enzyme مرتبط

379
00:28:25,810 --> 00:28:29,350
بخلايا الكيوميلاصيل المتبقية وبالتالي أنا بعمل

380
00:28:29,350 --> 00:28:33,540
Stopping لعمل الEnzyme فلازم أعملها Washingبعد

381
00:28:33,540 --> 00:28:36,180
after partially removal of the cumulus cell by

382
00:28:36,180 --> 00:28:40,400
short exposure أو exposure to buffered media

383
00:28:40,400 --> 00:28:45,960
contained an enzyme the oocyte are removed and put

384
00:28:45,960 --> 00:28:49,400
in the culture media and placed back to the

385
00:28:49,400 --> 00:28:52,960
incubator for 30 minutes أنا عملت Deunidation كامل

386
00:28:52,960 --> 00:28:57,220
ماخلت ولا cumulus cell حوالين الخلية أو عدد قليل

387
00:28:57,220 --> 00:29:06,110
جدا باخد ال oocyte بضيفه في mediaClear Media بدخل

388
00:29:06,110 --> 00:29:09,530
الطبق للإنكبيوتر عشان الخلية تستقر لأجل أن أنا

389
00:29:09,530 --> 00:29:16,030
كانت مجهدة بفعل وجود الإنزيم وعملية ال aspiration

390
00:29:16,030 --> 00:29:20,630
و ال releasing لمدة 30 دقيقة على الأقل قبل ال

391
00:29:20,630 --> 00:29:25,150
injection يعني قبل .. ما بين ال stripping و ما بين

392
00:29:25,150 --> 00:29:29,110
ال injection في فترة زمانية تسمى rested stage خاصة

393
00:29:29,110 --> 00:29:34,970
براحةلازم تحتاجها الـ oocyte عشان لا تجهد في نوع

394
00:29:34,970 --> 00:29:37,630
من أنواع الاستقرار المادة الوراثية بداخلها تقدر

395
00:29:37,630 --> 00:29:43,270
بتلاتين دقيقة على حد أدنى ف future step أو this

396
00:29:43,270 --> 00:29:49,890
future step led to طبعا عملية ال mixing للبوايضة

397
00:29:49,890 --> 00:29:53,950
مع ال media اللي بتحتوي على الهيرون ديز as enzyme

398
00:29:53,950 --> 00:29:58,650
تعمل عملية tweaking لقوة الترابط ما بين القلاعين

399
00:29:58,650 --> 00:30:02,680
فبسهل عملية ال removingبعد الـdenodation الـ

400
00:30:02,680 --> 00:30:05,480
Oocyte should be examined under inverted

401
00:30:05,480 --> 00:30:09,940
microscope to assess integrity and the stage of

402
00:30:09,940 --> 00:30:13,480
maturation عملت الـ denodation جاب المداخلة في الـ

403
00:30:13,480 --> 00:30:17,980
incubator لمدة 30 دقيقة طلّق البوادة نقولها عن

404
00:30:17,980 --> 00:30:20,360
inverted microscope فشوفها تحت ال inverted

405
00:30:20,360 --> 00:30:24,440
microscope شو ال integrity تبعتها؟ جداش ال

406
00:30:24,440 --> 00:30:28,150
maturation stage تبعتها؟ هل هي M1 ولا M2؟ولّا أي

407
00:30:28,150 --> 00:30:31,750
نوع من أنواع يعني تصلح أم لا تصلح لعملية ال

408
00:30:31,750 --> 00:30:36,030
fertilization the incomplete denodation of oocyte

409
00:30:36,030 --> 00:30:39,710
before eggsy يعني في بعض الناس بيقولك لأ أنا بتعمل

410
00:30:39,710 --> 00:30:43,810
complete denodation ما بتخلي أي cumula cell بهدوء

411
00:30:43,810 --> 00:30:47,030
لازم يكون فيه جزء من ال cumula cell لأن هذا بيفيد

412
00:30:47,030 --> 00:30:50,430
ال oocyte كيف بيفيد ال oocyte؟ لأنه في دراسات

413
00:30:50,430 --> 00:30:54,710
بتقولك عملية ال denodation الغير كاملة يعني التي

414
00:30:54,710 --> 00:30:57,950
تترك عدد قليل من ال cumula cellطبقة محيطة بالـ

415
00:30:57,950 --> 00:31:02,030
Oocyte تساعد في تحسين جودة الـ embryo بعد ال

416
00:31:02,030 --> 00:31:05,730
fertilization وتساعد في تحسين الـ developmental

417
00:31:05,730 --> 00:31:10,230
embryo أيضًا تلعب دور كبير جدًا في الـ assist

418
00:31:10,230 --> 00:31:13,770
embryonic metabolism و ال stimulation gene

419
00:31:13,770 --> 00:31:17,810
expression تعمل reduction لل oxidative stress يعني

420
00:31:17,810 --> 00:31:22,490
مش شضارة ولا دقة في الأداء إنك تتعرّض الخلية بشكل

421
00:31:22,490 --> 00:31:26,740
الكامل و ما تخلّي أي كيوم للسلحة حولها، لأخفف قدر

422
00:31:26,740 --> 00:31:31,100
الإمكان و افقي و لو two layers حوالها عدد قليل من

423
00:31:31,100 --> 00:31:34,060
الخلايا إنك انت ماتضرك الخلايا أثناء عملية ال

424
00:31:34,060 --> 00:31:38,840
injection و ماتضر الجنين لإن وجودها مفيد في أربع

425
00:31:38,840 --> 00:31:42,820
أو خمس نقاط بتساعد ال embryo quality أو بتحسن ال

426
00:31:42,820 --> 00:31:46,260
embryo quality و ال embryo development و بتعمل أسس

427
00:31:46,260 --> 00:31:49,560
embryonic metabolism بتعمل stimulation لـ Angelic

428
00:31:49,560 --> 00:31:52,440
suppression وتعمل reduction لل oxidative stress

429
00:31:52,440 --> 00:31:59,330
خمس فوائدمهمة لبقاء كمية من كيومة الـ cell حوالين

430
00:31:59,330 --> 00:32:06,350
الـ Oocyte طبعا هذه ببساطة جدا شكل الـ Oocyte لما

431
00:32:06,350 --> 00:32:11,050
تطلع هذه شكل الـ Oocyte لما تطلع من ال fluid و أنا

432
00:32:11,050 --> 00:32:13,850
أحصلها من ال fluid لو أنقلها لقطرة جديدة هذه بتكون

433
00:32:13,850 --> 00:32:19,470
كلها عبارة عن الـ Oocyte ولكن لو أنا فرغت هذه الـ

434
00:32:19,470 --> 00:32:24,350
Oocyteوهذه كلها cumulus cell و corona cell حوالها

435
00:32:24,350 --> 00:32:28,310
بعد ال denodation لازم تكون بهذا الشكل طبعا هذا

436
00:32:28,310 --> 00:32:31,470
اللي باللون الأحمر هذا خلينا نسميه هذا ال zoona

437
00:32:31,470 --> 00:32:35,490
وهذا ال polar body وهذا ال polar body وهذه كلها

438
00:32:35,490 --> 00:32:42,550
طبقة من ال cytoplasm هاي ال oocyte اللي باللون

439
00:32:42,550 --> 00:32:46,290
الأخضر الفاتح بيسموها cumulus cell اللي باللون

440
00:32:46,290 --> 00:32:50,520
الأخضر الداكن موريلا وهذا ال thica cellطبعاً لما

441
00:32:50,520 --> 00:32:55,100
أجى أعمل aspiration و releasing سكشن و releasing

442
00:32:55,100 --> 00:33:00,740
هتروح كل هدوء يدل اللي باللون الأخضر الفاتح و هي

443
00:33:00,740 --> 00:33:04,840
الكيومولا السل لازم انا اتجنب كمية كبيرة جدا ال

444
00:33:04,840 --> 00:33:08,880
granulosa cell هي عبارة عن خليط من الموريلا cell و

445
00:33:08,880 --> 00:33:15,650
الكيومولا cell دعونانرى هذا الفيديو المتعلق بعملية

446
00:33:15,650 --> 00:33:20,270
ال denotation علشان تكون الأمر أوضح ان شاء الله

447
00:33:20,270 --> 00:33:27,090
طبعا

448
00:33:27,090 --> 00:33:34,970
هيتكلم عن ال denotation تحت ال microscope طبعا

449
00:33:34,970 --> 00:33:38,290
هذه ال pasteur tube او pasteur pipet او dropper

450
00:33:38,290 --> 00:33:43,280
طبعا هنا هذه البوايضات الليموجودة فيها بيعمل

451
00:33:43,280 --> 00:33:45,780
suction بداخل البيضات للداخل وبعدين بيعملها

452
00:33:45,780 --> 00:33:49,040
releasing أكتر من مرة وشوف كيف بيصير تفتت لل

453
00:33:49,040 --> 00:33:49,500
cumulus

454
00:34:24,960 --> 00:34:27,440
و اخدوا بالكوا في الخطوة التانية اغير ال pipet يا

455
00:34:27,440 --> 00:34:31,580
بابت اقل ال diameter تبعها اقل لان الخلية او

456
00:34:31,580 --> 00:34:35,120
البويضة فقدت الجرانيلوزا سيل فقدت الكيوركيوميلاس

457
00:34:35,120 --> 00:34:39,120
سيل فصغر حجمها فابدي ب steer pipet ال diameter اقل

458
00:35:22,520 --> 00:35:25,720
شايفين في كل مرة بيعمل aspiration و releasing

459
00:35:25,720 --> 00:35:29,140
بيعمل في منطقة جديدة علشان ما يصير الشواقب حوالها

460
00:35:29,140 --> 00:35:33,320
و في كل مرة بعد فترة زمنية بعد ما يعمل يعني خمسين

461
00:35:33,320 --> 00:35:37,700
عشر مرات عشرين مرة خمسين ثانية بنقل هذه ال oxide

462
00:35:37,700 --> 00:35:40,300
كلها بداخلها داخل ال dropout او داخل ال pasture

463
00:35:40,300 --> 00:35:41,940
pipe و بنقلها ل drop جديد

464
00:36:07,360 --> 00:36:10,260
شوف كيف شكل البويضات هي عندي واحدة ..تنتين ..تلاتة

465
00:36:10,260 --> 00:36:12,840
..اربعة ..خمسة ..ستة ..سبعة ..تمانية ..عشرة

466
00:36:12,840 --> 00:36:16,220
..احداشر بويضة من سيدة واحدة اللي كانت مفروضة تطلع

467
00:36:16,220 --> 00:36:19,500
فقط تلت بويضات كحد أقصى هذا طبعا بعد ال

468
00:36:19,500 --> 00:36:25,200
stimulation هذه

469
00:36:25,200 --> 00:36:28,320
طريقة ال stripping أو ال denodation الخاصة

470
00:36:28,320 --> 00:36:30,660
بالاواصيت خليني أشوف فيديو تاني يتكلم عن هذا

471
00:36:30,660 --> 00:36:31,120
الموضوع

472
00:36:37,110 --> 00:36:40,190
طبعا هذا شكل البوايضات أول ما نحزلهم من ال fluid

473
00:36:40,190 --> 00:36:42,990
أو من ال flucular fluid بكون شكلهم بهذا الشكل زي

474
00:36:42,990 --> 00:36:45,790
ما شوفناها تحت الصورة هذه البوايضة و هذه كل

475
00:36:45,790 --> 00:36:49,830
الثيكاسيل و الكيملاسسيل و ال موريلاسيل و ال

476
00:36:49,830 --> 00:36:53,410
somatic cell كلها محيطة فيها بده يعملها pipetting

477
00:36:53,410 --> 00:36:59,370
هالوقت بيجي بالدربر بيعملها suction و releasing

478
00:36:59,370 --> 00:37:06,230
لمدة تلاتين ثانية على الأقل مش وجدش ال diameter

479
00:37:08,580 --> 00:37:11,900
الخاصة بال بستير بايبت أو الخاصة بالدروبة اللي

480
00:37:11,900 --> 00:37:15,740
لازم تكون استراتيك خمسة، ستة، سبعة، تمان مرات أو

481
00:37:15,740 --> 00:37:22,100
تلاتين ثانية كحد أدنى و بعدين بيعملهم transfer إلى

482
00:37:22,100 --> 00:37:25,880
a new drop علشان يتخلص من كمية الشباب هاي فال new

483
00:37:25,880 --> 00:37:29,980
drop عملها releasing و بعدين بيعملهم suction و

484
00:37:29,980 --> 00:37:33,640
releasing بس بده يغير ال bybitتغير بايبت لأنه بده

485
00:37:33,640 --> 00:37:38,020
بايبت الديامتر تبعته أقل علشان يقدر يصير قوة

486
00:37:38,020 --> 00:37:42,300
احتكاك ما بين الجدار الداخل للأنبوبة و البويضة

487
00:37:42,300 --> 00:37:45,800
واحدة واحدة و في بعضهم بيعملها كاملة ولكن افضل

488
00:37:45,800 --> 00:37:49,980
واحدة واحدة علشان مايصيرش تزاحم و مما يدى لتهتك

489
00:37:49,980 --> 00:37:54,800
الخلايا في بعض الأحيان ممكن يعيدها تلاتين ثانية زي

490
00:37:54,800 --> 00:37:59,200
ما قلنا و ينتقل إلى drop جديدة فيما بعد هينقل إلى

491
00:37:59,200 --> 00:38:04,880
drop جديدة هيغير ال بايبتالمفروض يغير الـ Pivot

492
00:38:04,880 --> 00:38:09,980
علشان يعطيني نتائج أفضل يعطيني Diameter Pivot with

493
00:38:09,980 --> 00:38:15,580
low diameter اكبر

494
00:38:15,580 --> 00:38:21,900
البوايضات هتشوفهم بهذا الشكل هذه فكرة الـ

495
00:38:21,900 --> 00:38:25,800
Denotation بشكل أساسي كيف بتصير عملية الـ

496
00:38:25,800 --> 00:38:29,760
Denotation اتعرفنا عنها بعد ما حكينا عن الـ

497
00:38:29,760 --> 00:38:32,900
Denotationالـ timing للـ oocyte denodation الـ

498
00:38:32,900 --> 00:38:37,160
oocyte denodation is usually performed between 37

499
00:38:37,160 --> 00:38:42,220
and 40 hours after HCG يعني عملية الـ denodation

500
00:38:42,220 --> 00:38:46,360
بتصير بعد عملية ال injection للشريجون أو لل human

501
00:38:46,360 --> 00:38:50,540
chronic gonadotropin اللي بيعمل ovulation بـ 37

502
00:38:50,540 --> 00:38:56,050
إلى 40 ساعة ولكن يجب أن تحدثقبل الـ insemination

503
00:38:56,050 --> 00:39:00,250
بساعة أو نص ساعة على الأقل الإنزيمات التي تستخدم

504
00:39:00,250 --> 00:39:04,670
وتركيزها بشكل عام وtraditionally الـdenodation أو

505
00:39:04,670 --> 00:39:09,050
الـ denoding process أو procedure involve a

506
00:39:09,050 --> 00:39:14,670
poivrein derivative هيلورينيدازي يعني هيلورينيدازي

507
00:39:14,670 --> 00:39:19,490
مع مشتق من الـpoivrein بشكل أساسي in order to

508
00:39:19,490 --> 00:39:23,130
minimum any potential toxic effect on oocyte for

509
00:39:23,130 --> 00:39:26,420
this type of enzymewe should be reduce the

510
00:39:26,420 --> 00:39:28,440
enzymatic concentration or the enzyme

511
00:39:28,440 --> 00:39:33,340
concentration or reduce that duration for oocyte

512
00:39:33,340 --> 00:39:37,640
exposure to this type of enzyme يعني أنا ممكن أجلل

513
00:39:37,640 --> 00:39:39,840
ال toxicity الخاصة بهذا الانزيم بطريقة تانية

514
00:39:39,840 --> 00:39:43,500
الطريقة الأولى أنه أجلل ال time اللي بتتعرض فيه

515
00:39:43,500 --> 00:39:47,540
الخلية لهذا الانزيم أو أجلل ما يُعرف باسم ال

516
00:39:47,540 --> 00:39:50,440
concentration الخاصة فيه وفي بعضهم بيجلد ال time

517
00:39:50,440 --> 00:39:54,760
أفضل لإن ال concentration بيكون fixedأقل الـ

518
00:39:54,760 --> 00:39:57,540
concentration ممكن أن أستخدم خلال الـ denotation

519
00:39:57,540 --> 00:40:02,040
80 international units per milliliter يعني لو الـ

520
00:40:02,040 --> 00:40:05,620
one drop فيها 80 unit ممكن أن أضع هذه الـ one drop

521
00:40:05,620 --> 00:40:10,520
من الإنزيم على 1 مليليتر من ال media وكل ما كان

522
00:40:10,520 --> 00:40:15,620
أقل تركيزه وكل ما كان تأثير السلبي أقل أو ال

523
00:40:15,620 --> 00:40:20,830
toxicity أقل فممكن أناأخفض درجة حرارته .. عفوا ..

524
00:40:20,830 --> 00:40:24,870
أخفض تركيزه وأخفض effect تبعته إن أستخدم تركيز

525
00:40:24,870 --> 00:40:28,470
عشرة international unit per milliliter بعض

526
00:40:28,470 --> 00:40:32,170
الدراسات قالت إن هذا التركيز has also been shown

527
00:40:32,170 --> 00:40:37,970
to be able to make denotation for mature oocyte

528
00:40:37,970 --> 00:40:43,150
بشكل عالي جدا يعني العشرة international unit قادرة

529
00:40:43,150 --> 00:40:46,190
أن تعمل denotation وبكفاءة عالية جدا فأنا ليش

530
00:40:46,190 --> 00:40:49,690
أستخدم التمانين؟فلو بدى أستخدم الـ 80 بدي أقلل ال

531
00:40:49,690 --> 00:40:53,490
duration لازم

532
00:40:53,490 --> 00:40:57,230
أقلل ال duration خلصنا كده من عملية ال denodation

533
00:40:57,230 --> 00:40:59,790
و ال stripping جاهز لعملية ال injection اللى

534
00:40:59,790 --> 00:41:04,570
هناخدها في الشكتر الجديد ولكن قبل ما نخلص الموضوع

535
00:41:04,570 --> 00:41:09,570
ده فيه موضوع صغير بتنوح له وهو هرمون ال EAMH ال

536
00:41:09,570 --> 00:41:14,170
EAMH ببساطة جدا يا طلابنا الأعزاء هو عبارة عن

537
00:41:14,170 --> 00:41:18,730
هرمون يطلق عليه protein هرمونيُفرز بشكل أساسي من

538
00:41:18,730 --> 00:41:22,350
الـ granulosa cell in the ovarian follicle in the

539
00:41:22,350 --> 00:41:27,130
ovarian follicle لما تكون أو يكون عند سيدة تفرز ال

540
00:41:27,130 --> 00:41:29,830
ovarian follicle هرمون أو ال granulosa cell

541
00:41:29,830 --> 00:41:32,250
الموجودة في ال ovarian follicle تفرز هرمون

542
00:41:32,250 --> 00:41:35,590
antimolarin هرمون خدوا بالك هذا الهرمون مهم جدا

543
00:41:35,590 --> 00:41:39,790
وبناء عليه بعض الأضطراب بيستخدموه عشان يحددوا هدى

544
00:41:39,790 --> 00:41:43,630
الزوجة أو هدى السيدة تروح agonist أو antagonist

545
00:41:43,630 --> 00:41:48,700
short protocol ولا long protocolوبعضهم بيستخدم ال

546
00:41:48,700 --> 00:41:51,740
A match عشان يحدد ال shorter protocol أو ال longer

547
00:41:51,740 --> 00:41:55,840
protocol شو هيختار طبعا ال A match level بلعب دور

548
00:41:55,840 --> 00:42:01,120
كبير جدا حيث أنه يزيد بعد ال 25 سنة عند السيدات

549
00:42:01,120 --> 00:42:05,800
ويبدأ في التناقص بعد ال 30 أو عند 30 سنة ال A

550
00:42:05,800 --> 00:42:10,060
match بلعب دور كبير جدا في ال development of sex

551
00:42:10,060 --> 00:42:15,400
organ في ال unborn baby كيف بلعب هذا الدور؟بقولك

552
00:42:15,400 --> 00:42:20,420
ببساطة جدا في أول أسابيع من الحمل ال baby will be

553
00:42:20,420 --> 00:42:24,240
start reproductive organ development إذا كان ال

554
00:42:24,240 --> 00:42:28,960
baby male فهيفرس كمية كبيرة جدا من ال AMH علشان

555
00:42:28,960 --> 00:42:33,700
يمنع تكوين بالإضافة طبعا إلى ال male hormone علشان

556
00:42:33,700 --> 00:42:40,180
يمنع تكوين ال female organ development ويسمح

557
00:42:40,180 --> 00:42:47,160
بتكوين ال maledeveloped male organ يعني ال AMH

558
00:42:47,160 --> 00:42:52,860
يفرز في المرحلة الجنينية إذا كان الجنين ذكر يفرز

559
00:42:52,860 --> 00:42:57,680
كمية كبيرة جدا من ال AMH plus ال sex hormone الخاص

560
00:42:57,680 --> 00:43:02,460
بالذكور مما يمنع تكوين ال organ الخاص بال female

561
00:43:02,460 --> 00:43:08,060
organويسمح ويساعد على إنتاج وتكوين ال organ الخاص

562
00:43:08,060 --> 00:43:13,340
بالمال لو كان العكس عند ال unborn baby في المرحلة

563
00:43:13,340 --> 00:43:17,500
الجنينية female كمية اللي قد أبقاش هتقل، هتكون أقل

564
00:43:17,500 --> 00:43:23,940
ما يمكن و تكاد تكون غير مذكورة مما يسمح بظهور ال

565
00:43:23,940 --> 00:43:27,680
organ related with female و عدم ظهور ال organ

566
00:43:27,680 --> 00:43:33,510
related with male مما يؤدي إلى ظهور الجنين كجنين

567
00:43:33,510 --> 00:43:39,230
أنثى عشان كده بعض الأطباء وبعض المراكز ممكن تستخدم

568
00:43:39,230 --> 00:43:42,570
ال AMH تحديد مستوى ال AMH في المرحلة الجنينية

569
00:43:42,570 --> 00:43:47,470
لتحديد جنس المولود هل هو male أو female إذا كان

570
00:43:47,470 --> 00:43:53,050
مستوى عالي جدا بيكون male إذا كان مستوى منخفض أو

571
00:43:53,050 --> 00:44:00,970
منعدم بيكون female لإن وجوده يسمح بإنشاء الأعضاء

572
00:44:00,970 --> 00:44:06,920
الذكريةيمنع تكوين الأعضاء الجنثوية في المرحلة

573
00:44:06,920 --> 00:44:11,540
الجنينية طبعاً الـ AMH has a different role for

574
00:44:11,540 --> 00:44:17,360
female from or after puberty at the time of his

575
00:44:17,360 --> 00:44:21,020
beginning making AMH the more egg cell there are

576
00:44:21,020 --> 00:44:25,400
the high level of AMH ال AMH يمكن أن يستخدم as

577
00:44:25,400 --> 00:44:29,610
marker or indicator for ovarian responseجدّيش أنا

578
00:44:29,610 --> 00:44:32,870
عند مستوى الـ AMH عند السيدات جدّيش بكون عندها

579
00:44:32,870 --> 00:44:36,810
مخزون في المبيض ففي علاقة طردية ما بين مستوى الـ

580
00:44:36,810 --> 00:44:40,950
AMH ومخزون المبيض كل ما كان الـ AMH عالي، معناه

581
00:44:40,950 --> 00:44:45,570
فيه بيبايدات كتير جدا عند السيدة الـ AMH يمكن أن

582
00:44:45,570 --> 00:44:50,710
يستخدم ليه؟ predict for started monobios متى كل ما

583
00:44:50,710 --> 00:44:54,770
كان قليل المنوبيوز بتكون أقرب يستخدم في تشخيص الـ

584
00:44:54,770 --> 00:44:57,530
polycystic ovarian syndrome ال hormonal disorder

585
00:44:58,580 --> 00:45:02,840
يستخدم في .. for infant .. infant .. chick infant

586
00:45:02,840 --> 00:45:06,260
with genital that are not clear identified عند ال

587
00:45:06,260 --> 00:45:10,700
male و female monitoring women who have some type

588
00:45:10,700 --> 00:45:15,000
of ovarian cancer we can use it as indicator for

589
00:45:15,000 --> 00:45:18,640
fertility in women specifically in relation to the

590
00:45:18,640 --> 00:45:25,740
number of egg in reserve of ovaries so AMHcan be

591
00:45:25,740 --> 00:45:30,740
used as indicator for ovarian response and ovarian

592
00:45:30,740 --> 00:45:34,440
reserve

593
00:45:34,440 --> 00:45:40,540
على مخزون المبيض ومدى استجابة المبيض so we can use

594
00:45:40,540 --> 00:45:44,160
a match as a predictor for ovarian reserve and

595
00:45:44,160 --> 00:45:48,000
ovarian response سوف نكتفي بهذا القدر في المحاضرة

596
00:45:48,000 --> 00:45:51,380
اليوم على أن نكمل ما تبقى من هذا ال chapter في

597
00:45:51,380 --> 00:45:54,020
المحاضرة القادمة ان شاء الله