PL9fwy3NUQKwZ2maYQWAufx8JKyPTiiP30/LftGtVx2Jyc.srt

1
00:00:00,930 --> 00:00:05,210
بسم الله الرحمن الرحيم والصلاة والسلام على أشرف

2
00:00:05,210 --> 00:00:11,650
المرسلين سيدنا محمد وعلى آله وصحبه أجمعين، طلبتنا 

3
00:00:11,650 --> 00:00:16,070
الأكارم، نرجو من الله الكريم أن تكونوا جميعا بخير

4
00:00:16,070 --> 00:00:21,810
وبصحة جيدة، اليوم سوف نستكمل ما تقطع من شرح 

5
00:00:21,810 --> 00:00:26,880
الرابع، حيث تحدثنا في المحاضرات السابقة عن القَالية

6
00:00:26,880 --> 00:00:31,600
والنظام المتبع من أجل تحفيز المبيض للسيدة التي 

7
00:00:31,600 --> 00:00:35,780
تخضع لعمليات التلقيح الصناعي أو الزراعة من أجل

8
00:00:35,780 --> 00:00:40,500
الحصول على أكبر عدد من البويضات الناضجة وذات 

9
00:00:40,500 --> 00:00:45,520
الجودة العالية، وقُسّمت هذه الأنظمة المستخدمة إلى 

10
00:00:45,520 --> 00:00:50,020
الـ Agonist Protocol والـ Antagonist Protocol. الـ Agonist

11
00:00:50,020 --> 00:00:54,100
Protocol على سبيل المثال قُسّم إلى Ultra Short و

12
00:00:54,100 --> 00:00:59,300
Short و Long، والـ Antagonist Protocol قُسّم إلى One

13
00:00:59,300 --> 00:01:04,000
Dose أو Single Dose أو Multi Dose.  نادي بالنسبة إلى 

14
00:01:04,000 --> 00:01:08,380
ما تحدثنا عنه في المحاضرة السابقة، ثم انتقلنا

15
00:01:08,380 --> 00:01:13,160
للتحدث عن حالة مرضية تسمى Hyperovarian Stimulation 

16
00:01:13,160 --> 00:01:17,700
Syndrome والتي تحدث عند بعض السيدات بسبب الإفراط

17
00:01:17,700 --> 00:01:22,740
في عملية إعطاء الأدوية التي تعمل على تحفيز المبيض 

18
00:01:22,740 --> 00:01:27,920
مما يؤدي إلى إنتاج بويضات غير ناضجة أو الوصول إلى 

19
00:01:27,920 --> 00:01:35,050
فوليكل ناضج تحتوي على fluid بدون أي mature oocyte.

20
00:01:35,050 --> 00:01:40,270
اليوم سوف نتكلم عن المرحلة الثانية من مراحل تحضير 

21
00:01:40,270 --> 00:01:46,090
السيدة، فبعد إعطاء السيدة هرمون الـ HCG لـ Human 

22
00:01:46,090 --> 00:01:50,710
Chronic Gynadotropin الذي يعمل عمل الـLH من أجل

23
00:01:50,710 --> 00:01:56,280
عمل ovulation، يجب أن ننتقل وننتقل إلى نقطة جديدة

24
00:01:56,280 --> 00:02:04,060
اسمها أو  oocyte pick up بمعنى 

25
00:02:04,060 --> 00:02:08,860
آخر عملية الحصاد، عملية الـ harvest، بعد ما تم تحفيز

26
00:02:08,860 --> 00:02:14,900
المبيض ووصل الفوليكل لعدد معين وبعدد مناسب إلى

27
00:02:14,900 --> 00:02:20,680
قطر مناسب، أكبر من أو يساوي 18 ملي متر، معناه إن

28
00:02:20,680 --> 00:02:25,560
هذه الفوليكل تحتوي على بويضة ناضجة تكون صالحة 

29
00:02:25,560 --> 00:02:30,220
للتلقيح الصناعي إذا كانت متوقفة في الـ Metaphase 2

30
00:02:30,220 --> 00:02:35,300
Metaphase التاني، يعني الـ Metaphase الخاص بالقسم 

31
00:02:35,300 --> 00:02:38,920
الميوزي الثاني، والذي يدل على هذا الأمر وجود الـ

32
00:02:38,920 --> 00:02:42,600
Ferrous Polar Body، ننتقل إلى مرحلة جديدة وهي مرحلة

33
00:02:42,600 --> 00:02:47,560
الـ Collection أو الـ Oocyte Retrieval أو الـ Ovum

34
00:02:47,560 --> 00:02:53,180
Pick Up، بمعنى آخر إن كل follicle وصلت إلى الـ 

35
00:02:53,180 --> 00:02:57,900
maturation stage، المفروض تحتوي على بويضة ناضجة، 

36
00:02:57,900 --> 00:03:02,780
المفروض بعد إعطاء الكورونادوتروبين administration 

37
00:03:02,780 --> 00:03:08,260
نستطيع هذه الـ follicle أن تقوم بعملية ovulation.

38
00:03:08,260 --> 00:03:12,520
ليه بتضبط بعد الكورونادوتروبين؟ لأن هذا الهرمون 

39
00:03:12,520 --> 00:03:18,280
مسؤول عن عمل الـ LH أو عمله يحاكي عمل الـ LH، وهو 

40
00:03:18,280 --> 00:03:23,000
عبارة عن عملية الـ ovulation and oocyte pickup is 

41
00:03:23,000 --> 00:03:27,460
performed approximately 36 hours later by

42
00:03:27,460 --> 00:03:31,940
ultrasound transvaginal aspiration. بمعنى آخر إن

43
00:03:31,940 --> 00:03:37,680
عملية جمع البويضات تحدث بعد 36 ساعة من إعطاء إبرة 

44
00:03:37,680 --> 00:03:42,000
التفجير اللي بنسميها بالوضع العام، بإبرة التفجير أو

45
00:03:42,000 --> 00:03:46,500
sheregon، يعني إبرة التفجير، إبرة الشيرجون، وهي عبارة 

46
00:03:46,500 --> 00:03:52,320
عن إبرة تحتوي على كورونات جونادوتروبين، هرمون طبعاً،

47
00:03:52,320 --> 00:03:55,820
عملية بتصير، عملية الـ collection عن طريق ال

48
00:03:55,820 --> 00:04:00,080
aspiration، باستخدام needle معينة، بجوج معينة، تدخل 

49
00:04:00,080 --> 00:04:03,500
من خلال ما يُعرف باسم الـ Transvaginal aspiration.

50
00:04:03,500 --> 00:04:09,240
هذه العملية ككل، في لحظة عمل الـ Oocyte Collection

51
00:04:09,240 --> 00:04:12,980
لازم نعمل Clearing للفاجينة بالـ Normal Saline

52
00:04:12,980 --> 00:04:18,440
بدون استخدام أي مطهر، على سبيل المثال الـ Betadine

53
00:04:18,440 --> 00:04:24,040
لا يمكن ولا ينصح باستخدامه كنوع من أنواع المطهرات

54
00:04:24,040 --> 00:04:28,900
قبل عملية الـ Egg Collection، لأنه very toxic، وممكن 

55
00:04:28,900 --> 00:04:33,920
يؤثر على الـ egg بشكل سلبي وبشكل غير مرغوب فيه.

56
00:04:33,920 --> 00:04:37,500
عملية جمع البويضات تسمى الـ oocyte pick up أو الـ

57
00:04:37,500 --> 00:04:41,820
oocyte harvest أو harvest، the harvesting is 

58
00:04:41,820 --> 00:04:45,660
carried out using the aspiration unit composed of

59
00:04:45,660 --> 00:04:50,260
vacuum pump، A collection tube connected to 70 gauge

60
00:04:50,260 --> 00:04:53,840
needle and collection test tube، يعني الوحدة

61
00:04:53,840 --> 00:04:57,720
المسؤولة عن عملية جمع البويضات تتكون من ثلاثة مكونات 

62
00:04:57,720 --> 00:05:02,020
أساسية، المكون الأول هو الـ vacuum pump، مضخة تعتمد

63
00:05:02,020 --> 00:05:08,590
على الـ suction، سحب الأوعية، والشغلة الثانية وسحب الـ

64
00:05:08,590 --> 00:05:11,710
fluid، الشغلة الثانية الـ collection tube متصلة 

65
00:05:11,710 --> 00:05:16,910
بنيدل الجوج تبعها 17، بالإضافة إلى collection test

66
00:05:16,910 --> 00:05:20,590
tube، وهي الـ test tube التي تجمع بها البويضات، هذه 

67
00:05:20,590 --> 00:05:25,750
عبارة عن الـ oocyte collection unit، ثلاثة مكونات 

68
00:05:25,750 --> 00:05:30,910
vacuum pump، collection tube متصلة بالـ جوج نيدل 17، و

69
00:05:30,910 --> 00:05:35,160
collection test tube. الـ fluid الموجود داخل الـ 

70
00:05:35,160 --> 00:05:39,100
follicle يجب أن يُسحب كله، ويجب أن يُسحب من كل

71
00:05:39,100 --> 00:05:43,400
follicle وصلت إلى 18 mm على الأقل، سواء كان في الـ 

72
00:05:43,400 --> 00:05:46,960
 ovary اليمين أو في الـ ovary اليسار، فبالتالي أنا أسحب

73
00:05:46,960 --> 00:05:50,720
كل fluid الموجود، معناه إن أنا بسحب الـ fluid مع ال

74
00:05:50,720 --> 00:05:54,280
oocyte، سواء كانت mature أو immature، لأن ال

75
00:05:54,280 --> 00:05:59,400
immature في خارج جسم الإنسان لها استخدامات شتى بعد 

76
00:05:59,400 --> 00:06:03,310
كده ببدأ أعمل examination للـ fluid اللي جمعته في ال

77
00:06:03,310 --> 00:06:07,790
test tube علشان أشوف كم عدد البويضات الموجودة، و

78
00:06:07,790 --> 00:06:10,710
أبدأ أعمل collection لهذه البويضات، وأنقلها من 

79
00:06:10,710 --> 00:06:16,150
هذا الـ fluid إلى a new media اللي اسمها maturation

80
00:06:16,150 --> 00:06:23,800
media أو IVF media. During the collection يجب أن 

81
00:06:23,800 --> 00:06:28,740
يستخدم ضغط يقدر على أقصى حد مائة وعشرين ميلي متر

82
00:06:28,740 --> 00:06:34,080
زئبقي، هذا الضغط الموصى به خلال عملية الجمع وإلا

83
00:06:34,080 --> 00:06:37,670
زيادة الضغط بيعمل rupture في الـ follicle، وهذا شيء 

84
00:06:37,670 --> 00:06:41,950
غير مطلوب، to avoid the risk of damage of oocyte

85
00:06:41,950 --> 00:06:45,990
such as stripping the cumulus cell or the zona

86
00:06:45,990 --> 00:06:50,910
plucida، بمعنى آخر إنه مهم جداً أستخدم ضغط يقدر 

87
00:06:50,910 --> 00:06:56,400
بـ 120 ميلي متر ذئبقي خلال عملية الجمع، ما أزيد هذا

88
00:06:56,400 --> 00:07:00,280
الضغط، لأن زيادته ممكن تؤثر على الـ oocyte بشكل سلبي

89
00:07:00,280 --> 00:07:04,660
وتدمرها أو تدمر الـ cumulus الموجودة حوالي ال

90
00:07:04,660 --> 00:07:07,700
oocyte أو تدمر الـ zona pellucida، ودمرت

91
00:07:07,700 --> 00:07:10,440
الـ zona pellucida يعني أنا فقط الـ cytoplasm والمادة

92
00:07:10,440 --> 00:07:14,980
النووية، once the oocyte are collected they are

93
00:07:14,980 --> 00:07:19,320
placed or put in culture plate with neutron media

94
00:07:19,320 --> 00:07:24,060
and then placed into incubator. بمجرد ما أحصل على

95
00:07:24,060 --> 00:07:28,050
الـ oocyte، الـ fluid اللي جمعته من الـ follicle و

96
00:07:28,050 --> 00:07:31,130
ابتدأ أعمل examination تحت الـ inverted microscope 

97
00:07:31,130 --> 00:07:34,910
وأجمع البويضات، هذه البويضات بأخذها بـ sterile

98
00:07:34,910 --> 00:07:38,830
dropper وبنقلها على طبق يحتوي على قطرات من ال

99
00:07:38,830 --> 00:07:43,630
media المغذية، وبنقل هذا الطبق وبضعه في ال

100
00:07:43,630 --> 00:07:49,210
incubator. بقولي ببساطة جداً، هذه العملية كلها تحدث 

101
00:07:49,210 --> 00:07:54,100
عملية الـ oocyte collection تحت تخدير موضعي أو تخدير

102
00:07:54,100 --> 00:07:58,080
كلي ولكن خفيف لفترة زمنية قصيرة، الفترة الزمنية 

103
00:07:58,080 --> 00:08:00,840
المفروض تاخدها العملية كلها، عملية الـ egg

104
00:08:00,840 --> 00:08:04,340
collection والـ fluid aspiration من 10 إلى 15

105
00:08:04,340 --> 00:08:09,020
دقيقة، والطبيب الشاطر ما بيطلع blood في الـ fluid

106
00:08:09,020 --> 00:08:14,640
المسحوب من الـ follicle. Therefore, during a system

107
00:08:14,640 --> 00:08:17,080
reproductive technology procedure, cumulus cells

108
00:08:17,080 --> 00:08:19,440
surrounding the oocyte should be removed to

109
00:08:19,440 --> 00:08:23,120
improve oocyte evaluation and manipulation. هنعرف

110
00:08:23,120 --> 00:08:26,500
إيش يعني cumulus cell؟ واتكلمنا عنها، cumulus cell 

111
00:08:26,500 --> 00:08:29,900
فيما سبق إنه في خلايا خفيفة موجودة حول الـ oocyte

112
00:08:29,900 --> 00:08:33,200
تسمى cumulus cell، هذه الـ cumulus cell لازم أخفف 

113
00:08:33,200 --> 00:08:37,120
عددها بشكل كبير جداً أو أزيلها علشان يسهل عملية

114
00:08:37,120 --> 00:08:42,380
evaluation للـ oocyte وأحدد هل هي mature ولا

115
00:08:42,380 --> 00:08:45,460
immature ويسهل عملية الـ manipulation، وما المقصود

116
00:08:45,460 --> 00:08:50,060
فيها الـ injection، مهم جداً أعرّي الخلية، أخفف عدد الـ

117
00:08:50,060 --> 00:08:52,920
Cumulus Cell اللي حوالها، أزيل الـ Cumulus Cell

118
00:08:52,920 --> 00:08:59,500
اللي حوالها. بعض الأحيان بيكون عندي بويضات أو بيكون 

119
00:08:59,500 --> 00:09:03,800
عندي فولكل وصلت للـ 18 مليمتر، ولكن البويضات لم

120
00:09:03,800 --> 00:09:07,450
تصل إلى درجة النضوج، فبالتالي في هذه الحالة أعملها

121
00:09:07,450 --> 00:09:11,710
maturation outside، in vitro maturation، تحت مصطلح 

122
00:09:11,710 --> 00:09:15,670
oocyte maturation في الـ clinical IVF laboratories.

123
00:09:15,670 --> 00:09:21,090
التكنولوجيست اللي بيشتغلوا في هذا المجال بيميلوا 

124
00:09:21,090 --> 00:09:25,890
إلى استغلال البويضات الغير ناضجة وإنضاجها في

125
00:09:25,890 --> 00:09:31,470
المختبر، ثم استخدامها في عملية الحَقْن من أجل زيادة 

126
00:09:31,470 --> 00:09:36,740
عدد البويضات المحقونة مما يؤدي لزيادة معدل الحقن أو

127
00:09:36,740 --> 00:09:40,200
معدل الـ fertilization. وخدوا بالكم، بعض البويضات اللي 

128
00:09:40,200 --> 00:09:44,060
بالشكل هذا بتنجح وبتعطيني embryo، وبعضها لا ينجح 

129
00:09:44,060 --> 00:09:47,780
ولا يعطي embryo، في بعض البويضات في بتكون في مرحلة 

130
00:09:47,780 --> 00:09:54,000
الـ GV وهي التي تسمى germinal vesicle، وفي مرحلة ال

131
00:09:54,000 --> 00:09:59,600
M1 وهي القسم الميوزي الأول، وفي الـ M2 القسم الميوزي

132
00:09:59,600 --> 00:10:05,680
الثاني. فبالتالي، myotic maturation actually is a

133
00:10:05,680 --> 00:10:08,740
continuous process and some oocyte aspirated from 

134
00:10:08,740 --> 00:10:14,000
follicle of various size would be expected to be

135
00:10:14,000 --> 00:10:16,560
intermediate stage of maturation، يعني في بعض

136
00:10:16,560 --> 00:10:20,060
الأحيان بيصير في عندي بعض الـ follicle تحتوي على

137
00:10:20,060 --> 00:10:26,420
بويضات، أنا بسحب هذه الـ fluid وبما فيها من بويضات 

138
00:10:26,420 --> 00:10:30,700
ولكنّ بلاج البويضات غير ناضجة أو وقفت في أحد ال

139
00:10:30,700 --> 00:10:34,560
stages الذي يُعتبر intermediate stage خلال عملية ال

140
00:10:34,560 --> 00:10:39,640
maturation. من أشهر هذه البويضات زي ما حكينا هي ال 

141
00:10:39,640 --> 00:10:43,840
GV من أشهر هذه البوايضات التي تُعتبر إما pure

142
00:10:43,840 --> 00:10:48,240
oocyte هي الـ GV وهي الـ germinal vesicle و الـ

143
00:10:48,240 --> 00:10:53,120
metaphase I إذن أنا عندي أربع .. ثلاث أقسام

144
00:10:53,120 --> 00:11:00,080
للبوايضة ممكن أحصل عليها إما GV أو M1 أو M2  M2

145
00:11:00,080 --> 00:11:05,400
معناه إن البويضة وقفت في انقسام الميوز الثاني في

146
00:11:05,400 --> 00:11:10,440
الـ Stage Metaphase فهي صالحة للحقن الـ GV الـ

147
00:11:10,440 --> 00:11:14,660
Germinal Vesicle و الـ M1 يعني انقسام الميوز الأول

148
00:11:14,660 --> 00:11:18,100
في الـ Metaphase الأول أو انقسام الميوز الأول

149
00:11:18,100 --> 00:11:23,280
معناه هذه البويضات إما pure oocyte تكون غير صالحة 

150
00:11:23,280 --> 00:11:28,810
للحقن إلا بعض بعد الإنضاج ومش كلهم بيصلوا للـ level

151
00:11:28,810 --> 00:11:32,210
الخاص بالـ maturation break down of germinal

152
00:11:32,210 --> 00:11:39,050
vesicle indicates the continuance of meiosis and

153
00:11:39,050 --> 00:11:42,590
ejection of the first polar body indicates

154
00:11:42,590 --> 00:11:45,250
complete the first meiotic division in human

155
00:11:45,250 --> 00:11:49,130
oocyte عشان أقول والله الخلية أو الويضة التي

156
00:11:49,130 --> 00:11:53,480
سُحِبت وهي في مرحلة الـ GV الـ germinal vesicle لازم

157
00:11:53,480 --> 00:11:58,060
أوضعها في ظروف تشبه الظروف الموجودة داخل الـ Ovary 

158
00:11:58,060 --> 00:12:01,480
الخاصة بالسيدة يعني في ظروف شبه طبيعية في media

159
00:12:01,480 --> 00:12:06,280
تحاكي الظروف التي تعيش فيها البوايضة عشان أسمح لها

160
00:12:06,280 --> 00:12:11,960
بالنضوج والدليل على نضوجها أو تحويلها من GV إلى

161
00:12:11,960 --> 00:12:19,240
مثلا M2 تكون عند إذن صالحة للحقل أنه يزيد حجمها

162
00:12:19,730 --> 00:12:24,290
وتقضف الـ first polar body الخاص بها للخارج فبتطيني

163
00:12:24,290 --> 00:12:30,210
خلية أو بويضة اسمها بويضة ناضجة في مرحلة الـ M2 عند

164
00:12:30,210 --> 00:12:34,110
هذا اللحظة أو عند تلك اللحظة تكون صالحة للإخصاب

165
00:12:34,110 --> 00:12:40,630
إذن ثلاث حالات للبويضة تلخيص الحدث GV M1 M2 هذه

166
00:12:40,630 --> 00:12:44,390
حالات البويضة التي يمكن أن نراها الـ M2 تكون هي

167
00:12:44,390 --> 00:12:49,030
الوحيدة الصالحة لعملية الإخصاب الـ GV هي عبارة عن

168
00:12:49,030 --> 00:12:54,150
خلية غير ناضجة والـ M1 خلية غير ناضجة أيضًا يمكن

169
00:12:54,150 --> 00:12:59,350
أن تنضج في المختبر صورة توضح الكلام اللي احنا

170
00:12:59,350 --> 00:13:05,170
حكيناه عن طبيعة انقسام البويضة هي في عندي الـ GV

171
00:13:05,170 --> 00:13:11,190
الخاص بالبويضة على سبيل المثال هذه GV وهي عبارة عن

172
00:13:11,190 --> 00:13:15,970
Germinal Vesicle وهي عند الـ M1 وهي عبارة عن البويضة

173
00:13:15,970 --> 00:13:18,770
التي وقفت في أحد الـ stages خاصة بالانقسام الميوزي

174
00:13:18,770 --> 00:13:25,590
الأول وهي M2 وهي عبارة عن البويضة البويضة دخلت

175
00:13:25,590 --> 00:13:32,570
وأنهت الانقسام الميوزي الأول واتوقفت في الانقسام

176
00:13:32,570 --> 00:13:37,110
الميوزي الثاني في مرحلة الـ metaphase مما أدى إلى

177
00:13:37,110 --> 00:13:43,730
ظهور الـ first polar body بعد الـ maturation و الـ

178
00:13:43,730 --> 00:13:48,450
fertilization يظهر الـ second polar body لأنه حكينا

179
00:13:48,450 --> 00:13:52,530
أن الـ first polar body هو أول indication على أن

180
00:13:52,530 --> 00:13:57,150
البويضة أنهت الانقسام الميوزي الأول و أنهت جزء كبير

181
00:13:57,150 --> 00:14:01,470
من انقسام الميوز الثاني و توقفت في الـ stage الاسم

182
00:14:01,470 --> 00:14:06,850
metaphase 2 يعني الـ metaphase الثاني من انقسام الثاني

183
00:14:06,850 --> 00:14:10,440
أو الـ metaphase الخاص بالانقسام الميوز الثاني أما

184
00:14:10,440 --> 00:14:13,160
بالنسبة إلى الـ two polar body أو الـ second polar

185
00:14:13,160 --> 00:14:19,040
body لا يظهر إلا بعد عملية ونجاح عملية الـ

186
00:14:19,040 --> 00:14:23,800
fertilization تلقيح البويضة من خلال وجود الـ sperm

187
00:14:23,800 --> 00:14:31,060
هذه عبارة عن مراحل البويضة بشكل الكامل طيب the

188
00:14:31,060 --> 00:14:34,520
immature oocyte are incubated in the original

189
00:14:34,870 --> 00:14:38,570
Culture Media or Original Tissue Culture Dish

190
00:14:38,570 --> 00:14:42,570
بتكون من واحد أو يحتوي على واحد ملليمتر من الـ

191
00:14:42,570 --> 00:14:45,670
Oocyte Maturation Media يعني الميديا المستخدمة

192
00:14:45,670 --> 00:14:50,370
لتطوير ونضوج الـ Oocyte حيث تحتوي هذه الميديا على

193
00:14:50,370 --> 00:14:55,630
75 مللي International Unit لكل ملليمتر من الـ FSH

194
00:14:55,630 --> 00:15:00,530
بالإضافة إلى 75 من الـ LH وموجودة في إنكبيوتير 37

195
00:15:00,530 --> 00:15:05,730
درجة مئوية يعني كل هذه الميديا هي مواد مغذية ودرجة

196
00:15:05,730 --> 00:15:09,570
حرارة مناسبة بالإضافة إلى هرمونات الـ FSH

197
00:15:09,570 --> 00:15:14,910
والـ LH المستخدمان في إنضاج البوايضات طبعًا بوضعوها

198
00:15:14,910 --> 00:15:20,630
في إنكبيوتير على 37 درجة مئوية في وجود 5% carbon

199
00:15:20,630 --> 00:15:27,050
dioxide و 95% air with high humidity ويجب أن تكون

200
00:15:27,050 --> 00:15:31,110
في نسبة عالية من الرطوبة طبعًا يفضل إنها تحضن

201
00:15:31,110 --> 00:15:35,570
البوايضات الغير ناضجة لكي تنضج في وجود إنكبيوتير فيه

202
00:15:35,570 --> 00:15:39,410
triple gas نيتروجين كاربون دايوكسايد أكسجين

203
00:15:39,410 --> 00:15:45,570
النيتروجين يشكل 90% والكربون 5% والأكسجين

204
00:15:45,570 --> 00:15:50,870
5% و الـ humidity الرطوبة 100% عشان كده إما بيكون

205
00:15:50,870 --> 00:15:55,190
في عندي normal saline bottle معلقة في الانكبيوتير

206
00:15:55,190 --> 00:15:59,250
من الخارج موصولة بأنبوب لداخل الانكبيوتير عشان توفر

207
00:15:59,800 --> 00:16:03,820
الرطوبة المناسبة أو بيضعوا يعني زي حاوية بسيطة

208
00:16:03,820 --> 00:16:06,980
فيها distilled water أو ultra pure water داخل الـ

209
00:16:06,980 --> 00:16:10,900
incubator علشان في درجة حرارة 37 بتتبخر الماء

210
00:16:10,900 --> 00:16:15,880
فبتكون لي كمية مناسبة ودرجة مناسبة من الرطوبة التي

211
00:16:15,880 --> 00:16:20,820
تبقي البوايضة في حالة جيدة جدًا الـ oocyte

212
00:16:20,820 --> 00:16:26,220
maturation media should be prepared بنسبة .. طبعًا

213
00:16:26,220 --> 00:16:30,740
الـ media التي تستخدم لإنضاج الـ oocyte يجب أن تحضر

214
00:16:30,740 --> 00:16:35,360
قبل ساعتين من وضع البويضة الغير ناضجة ويفضل أن

215
00:16:35,360 --> 00:16:40,040
تحضر قبل بيوم يعني بنحضرها و بنحط لها drops أو

216
00:16:40,040 --> 00:16:42,480
بنحط الـ media في الـ petri dish و الـ petri dish

217
00:16:42,480 --> 00:16:46,280
بندخله داخل الـ incubator اللي فيه الـ triple gas و

218
00:16:46,280 --> 00:16:52,040
37 درجة مئوية علشان يصير في عندي balance و عملية

219
00:16:52,040 --> 00:16:57,450
اتزان في الـ pH مهم جدًا علشان ما تروح البويضة على

220
00:16:57,450 --> 00:17:02,010
atmosphere أو تروح على media مختلفة اختلاف كل فبيصير

221
00:17:02,010 --> 00:17:05,830
فيها shock وممكن يصير failure فتحضير الـ media قابل

222
00:17:05,830 --> 00:17:09,050
بساعتين من خلال وضعها في الطبق ويدخل الطبق للـ

223
00:17:09,050 --> 00:17:13,630
incubator بيخلي فيه اتزان واستقبال وتكييف للميديا

224
00:17:13,630 --> 00:17:18,870
مع الظروف المحيطة بها الـ oocyte will be arrived to

225
00:17:18,870 --> 00:17:22,550
the metaphase of the second meiotic division stage

226
00:17:22,550 --> 00:17:29,610
on the day of collection are stripping

227
00:17:29,610 --> 00:17:33,230
and fertilized يعني بمعنى آخر بيسميها الـ

228
00:17:33,230 --> 00:17:37,330
denudation بمعنى آخر أن البوايضة اللي كانت في حالة

229
00:17:37,330 --> 00:17:42,350
الـ maturation وسحبناها وهي mature لازم في يوم

230
00:17:42,350 --> 00:17:47,240
السحب تتعرض لحالتين أو خطوتين الخطوة الأولى الـ

231
00:17:47,240 --> 00:17:50,980
Denudation أو الـ Stripping بسموها التعرية وإزالة

232
00:17:50,980 --> 00:17:54,540
الـ cumulus cells والنقطة الثانية الـ fertilization

233
00:17:54,540 --> 00:17:59,920
طبعًا together with any in vitro matured oocyte

234
00:17:59,920 --> 00:18:04,240
while immature oocyte are collected in IVM media

235
00:18:04,240 --> 00:18:10,640
for 24 to 48 hours يعني أي بويضة ناضجة وكانت ناضجة

236
00:18:10,640 --> 00:18:14,440
في يوم السحب يجب أن يحدث لها denudation أو

237
00:18:14,440 --> 00:18:17,760
stripping و fertilization في نفس اليوم مش أجيبها من

238
00:18:17,760 --> 00:18:21,400
أي يوم ثاني لا في نفس يوم السحب بيصير الـ

239
00:18:21,400 --> 00:18:25,920
injection أما بالنسبة للبويضة الغير ناضجة لازم

240
00:18:25,920 --> 00:18:30,700
أوضعها في الـ IVM media و يعني ما يطلق عليها in

241
00:18:30,700 --> 00:18:36,430
vitro maturation media لمدة 24 ساعة على الأقل وعلى

242
00:18:36,430 --> 00:18:42,150
الأكثر 48 ساعة لكي يسمح أو نسمح لهذه البويضة

243
00:18:42,150 --> 00:18:46,730
بالنضوج الـ Follicle is the basic functional unit

244
00:18:46,730 --> 00:18:51,050
of mammalian ovary which each follicle contained a

245
00:18:51,050 --> 00:18:53,370
single oocyte surrounded by inner layer of

246
00:18:53,370 --> 00:18:56,170
granulosa cells and outer layer of theca cells

247
00:18:56,170 --> 00:19:00,650
الفوليكل هي الوحدة الأساسية التي تحتوي على البويضة

248
00:19:00,650 --> 00:19:09,360
الناضجة أو غير ناضجة فبالتالي هذه البويضة و

249
00:19:09,360 --> 00:19:14,330
كل بويضة ناضجة تكون محاطة بطبقة خفيفة ورقيقة جدًا

250
00:19:14,330 --> 00:19:17,210
من الـ granulosa cells بالإضافة .. طبعًا هذه طبقة

251
00:19:17,210 --> 00:19:21,270
داخلية أو طبقات في بعض الأحيان بتكون داخلية من الـ

252
00:19:21,270 --> 00:19:25,270
granulosa cells بالإضافة إلى طبقة أو طبقات متعددة

253
00:19:25,270 --> 00:19:29,010
من الخارج تسمى theca cells وحنشوفها كمان شوية

254
00:19:29,010 --> 00:19:35,030
بالصورة يعني في المركز بويضة حواليها طبقات متعددة

255
00:19:35,030 --> 00:19:39,740
من الخلايا تسمى الـ granulosa cells ومن الخارج طبقات

256
00:19:39,740 --> 00:19:43,120
متعددة من الـ theca cells الـ granulosa cells بتلعب

257
00:19:43,120 --> 00:19:47,280
دورًا مهمًا جدًا بتعمل زي الـ nursing يعني زي كأنها

258
00:19:47,280 --> 00:19:53,000
بتعمل خادمة أو ممرضة أو يعني حاجة بتسهر على راحة

259
00:19:53,000 --> 00:19:57,520
البويضة توفر الأمور اللازمة للبويضة nurse أو

260
00:19:57,520 --> 00:20:01,540
nursing the oocyte and differentiated and

261
00:20:01,540 --> 00:20:06,530
proliferation in response to gonadotropin التي مهمة

262
00:20:06,530 --> 00:20:12,310
لتطبيب وتضميد وإنعاش البويضة لمعنى الـ Granulosa

263
00:20:12,310 --> 00:20:17,230
cells بالمجمل تلعب دورًا مهمًا جدًا في تطبيب وتضميد و

264
00:20:17,230 --> 00:20:22,550
إنعاش البويضة كما أنها تلعب دورًا مهمًا جدًا في تميز و

265
00:20:22,550 --> 00:20:27,750
نمو البويضة كما أنها تلعب مهمًا جدًا في استجابة و

266
00:20:27,750 --> 00:20:31,750
زيادة استجابة البويضة للـ gonadotropin الهرمون الذي

267
00:20:31,750 --> 00:20:37,630
يُعطى فبالتالي فهي تلعب دورًا حاسمًا ودورًا مهمًا في

268
00:20:37,630 --> 00:20:42,430
نجاح نمو البوايضة ونجاح عملية الـ ovulation هذا

269
00:20:42,430 --> 00:20:46,230
بالنسبة إلى الـ granulosa cells بدونها البوايضة لن

270
00:20:46,230 --> 00:20:51,430
تنمو بدونها البوايضة لن تنضج بدونها الـ ovulation

271
00:20:51,430 --> 00:20:55,970
لن يحدث لأن حكينا إنها بتلعب دورًا كبيرًا وسرفنا إيش

272
00:20:55,970 --> 00:20:58,730
الدور اللي بتلعبه من أهمها الـ response for

273
00:20:58,730 --> 00:21:02,250
gonadotropin على سبيل المثال There are bi

274
00:21:02,250 --> 00:21:05,830
-directional communication between the oocyte and

275
00:21:05,830 --> 00:21:09,290
the surrounding somatic cells من خلال الـ Gap

276
00:21:09,290 --> 00:21:13,430
Junctions and Paracrine Signals طبعًا الـ Somatic

277
00:21:13,430 --> 00:21:17,730
Cells أو الـ Oocyte خليني أسميها بالمجمل ما بتكون

278
00:21:17,730 --> 00:21:22,750
في معزل عن الخلايا الأخرى أو البيئة المحيطة فيها

279
00:21:22,750 --> 00:21:27,610
لأ في عندي connection تؤثر وتتأثر تتأثر بالبيئة

280
00:21:27,610 --> 00:21:31,610
المحيطة وتؤثر على البيئة المحيطة من خلال Junctions 

281
00:21:31,610 --> 00:21:34,270
gap موجودة ما بينها وما بين الـ somatic cell

282
00:21:34,270 --> 00:21:38,710
المحيطة بها ومن خلال ما يُعرف باسم الـ Paracrine

283
00:21:38,710 --> 00:21:42,650
Signal ويعرف الناس اللي أخذت Endocrine في حسمة

284
00:21:42,650 --> 00:21:48,690
Autocrine في Paracrine وفي أنواع مختلفة من الـ

285
00:21:48,690 --> 00:21:52,230
signal من Endocrine و Paracrine و Autocrine هذه

286
00:21:52,230 --> 00:21:57,370
أنواع مختلفة من الـ signal بتفرز بالفعل الخلايا

287
00:21:57,370 --> 00:22:02,090
الموجودة طبعاً هذه العملية بتسهل بشكل كبير جداً نمو

288
00:22:02,090 --> 00:22:05,890
البوايضة وتطور البوايضة الموجودة داخل الـ

289
00:22:05,890 --> 00:22:08,850
follicle مما يؤدي إلى نجاح عملية الـ

290
00:22:08,850 --> 00:22:14,690
folliculogenesis عملية تطور البوايضة نجد المرحلة

291
00:22:14,690 --> 00:22:18,230
الأولى التي تحدث والعملية الأولى التي تحدث بعد

292
00:22:18,230 --> 00:22:21,530
عملية الـ collection وهي ما يُعرف باسم oocyte

293
00:22:21,530 --> 00:22:25,510
denudation أو denoding في الغالب بيسموها stripping

294
00:22:25,510 --> 00:22:30,030
أو denudation يعني التعرية أو الإزالة طبعاً لما

295
00:22:30,030 --> 00:22:34,550
أقول oocyte denuding تعني إزالة الـ somatic cell

296
00:22:34,550 --> 00:22:38,890
المحيطة بالـ oocyte لأن أنا ما بدي أثناء عملية الـ

297
00:22:38,890 --> 00:22:43,650
injection أدخل somatic cell داخل الـ oocyte خلال

298
00:22:43,650 --> 00:22:46,510
عملية الـ injection أو جزء من المادة الوراثية

299
00:22:46,510 --> 00:22:49,770
الخاصة بالـ somatic cell تدخل مع الإبرة خلال عملية

300
00:22:49,770 --> 00:22:52,830
الـ injection فبدي أزيل أغلب الـ somatic cell

301
00:22:52,830 --> 00:22:56,670
المحيطة بالـ oocyte علشان أعمل injection بشكل صحيح

302
00:22:57,000 --> 00:23:00,980
ومضمون 100% The removal of cumulus cell becomes 

303
00:23:00,980 --> 00:23:04,860
critical step, very necessary step, very important

304
00:23:04,860 --> 00:23:09,940
step before fertilization since it allow an

305
00:23:09,940 --> 00:23:14,940
evaluation of oocyte nuclear maturity and easily

306
00:23:14,940 --> 00:23:19,150
handling of the oocyte During manipulation عملية

307
00:23:19,150 --> 00:23:22,790
الإزالة عملية الـ stripping تسمح لي أنا كـ تكنولوجيست

308
00:23:22,790 --> 00:23:27,370
أقيم الـ Oocyte بشكل صحيح هل هي M1 ولا M2 ولا GV

309
00:23:27,370 --> 00:23:32,170
أيضاً بسهل عملية الـ injection أن أعمل injection في

310
00:23:32,170 --> 00:23:35,510
منطقة بعيدة عن الـ polar body أعمل injection في

311
00:23:35,510 --> 00:23:39,130
منطقة تحتوي على كمية قليلة جداً من الـ somatic cell

312
00:23:39,130 --> 00:23:44,270
The cumulus and corona cell are removed before any

313
00:23:44,270 --> 00:23:49,670
step of micromanipulation procedure by using two

314
00:23:49,670 --> 00:23:54,190
methods enzymatic method و mechanical treatment أنا 

315
00:23:54,190 --> 00:23:57,770
ممكن أعمل denudation أو stripping قبل ما أعمل أي

316
00:23:57,770 --> 00:24:01,400
خطوة من خطوات الـ injection إما بستخدم إنزيم، هنعرف

317
00:24:01,400 --> 00:24:06,100
إيش هو الإنزيم وكيف بستخدمه أو بستخدم طريقة يدوية،

318
00:24:06,100 --> 00:24:10,320
ميكانيكية من أشهر الإنزيمات اللي بتستخدم هو إنزيم

319
00:24:10,320 --> 00:24:15,600
يؤثر على مادة تسمى الـ Hyaluronic Acid الـ

320
00:24:15,600 --> 00:24:18,260
Hyaluronic Acid مادة بتعمل عملية تلاحم ما بين

321
00:24:18,260 --> 00:24:23,880
الخلية و تلاصق ما بين الخلية فبيصير عملية زعزعة

322
00:24:23,880 --> 00:24:26,660
الخلايا أو إزالة الخلايا صعب هذا الـ Hyaluronic

323
00:24:26,660 --> 00:24:32,630
Acid فبدي مادة تشتغل عليه وتزيلّه Hyaluronic Acid هو

324
00:24:32,630 --> 00:24:38,050
مجموعة كبيرة من مجموعة Cumulus المتحركة التي تجمع

325
00:24:38,050 --> 00:24:41,850
الـ Hyaluronic Acid فبالتالي بستخدم إنزيم اسمه

326
00:24:41,850 --> 00:24:47,850
Hyaluronidase اللي بيلعب دور كبير جداً في إزالة وتقطيع

327
00:24:47,850 --> 00:24:52,510
الـ Hyaluronic Acid مما يؤدي إلى إزالة الخلايا ده

328
00:24:52,510 --> 00:24:56,870
الـ procedure عادةً يتم تفعيله تحت ميكروسكوب Stereomicroscope

329
00:24:58,790 --> 00:25:00,970
الأنواع الأجهزة الموجودة أشهر على الـ

330
00:25:00,970 --> 00:25:04,990
Stereomicroscope In different well or micro drop

331
00:25:04,990 --> 00:25:09,170
containing culture buffer media usually covered by

332
00:25:09,170 --> 00:25:13,350
oil on the warm thermoplate Stereomicroscope هو

333
00:25:13,350 --> 00:25:18,570
عبارة عن ميكروسكوب الـ stage الخاص بيه بيكون فيه

334
00:25:18,570 --> 00:25:24,930
heating stage يعني موصول ببطارية بتعطي حرارة أو

335
00:25:24,930 --> 00:25:28,710
heater بيعطي حرارة 37 درجة مئوية عشان تكون قريبة

336
00:25:28,710 --> 00:25:33,950
من درجة حرارة الجسم وأنا بستخدم طبق فيه drop أو

337
00:25:33,950 --> 00:25:37,950
فيه well كل well فيها media موجود بداخلها البويضات

338
00:25:37,950 --> 00:25:42,250
الناضجة ومغطى بالـ oil عشان أمنع الـ contamination

339
00:25:42,250 --> 00:25:46,330
دخول أي شيء من الخارج داخل الـ media فبالتالي بيؤثر

340
00:25:46,330 --> 00:25:51,650
سلباً على البويضات كيف أنا ممكن أسرّع وأدّي عملية الـ

341
00:25:51,650 --> 00:25:55,470
removing للـ cumulus وللـ corona cell بستخدم إنزيم

342
00:25:55,470 --> 00:26:00,790
اسمه اللي هي Hyaluronidase enzyme أو ممكن أعمل

343
00:26:00,790 --> 00:26:04,570
stripping شو يعني stripping ببساطة جداً بجيب

344
00:26:04,570 --> 00:26:07,450
plastic dropper استرايه plastic dropper إلى gauge

345
00:26:07,450 --> 00:26:12,610
معين أو diameter معين هيكون أكبر بقليل أو أصغر بقليل

346
00:26:12,610 --> 00:26:17,220
من الـ oocyte وبعمل suction و releasing suction و

347
00:26:17,220 --> 00:26:21,020
releasing حوالي 7-8 مرات خلال عملية الـ suction و

348
00:26:21,020 --> 00:26:23,880
الـ releasing أو الـ aspiration و الـ releasing للـ

349
00:26:23,880 --> 00:26:27,900
oocyte بيصير خلخلة في الـ cumulus cell و تفتت أنا

350
00:26:27,900 --> 00:26:30,920
كده بكون خلصتها بعد ما أعمل عشر مرات في الـ drop

351
00:26:30,920 --> 00:26:34,040
هذه باخد الـ oocyte و بنقله لـ drop جديدة ونظيفة

352
00:26:34,040 --> 00:26:39,810
ما فيها أي شوائب أو ما في حدث فيها Suction و

353
00:26:39,810 --> 00:26:42,430
Releasing للـ oocyte يعني ما فيها خلايا طبعاً هذه

354
00:26:42,430 --> 00:26:44,910
العملية عملية الـ aspiration و الـ releasing للـ

355
00:26:44,910 --> 00:26:48,750
oocyte ممكن تكرر بالعدد 20 مرة أو لمدة عملها

356
00:26:48,750 --> 00:26:51,950
كررها لمدة 30 ثانية يعني أنت بدك بالوقت أو بدك

357
00:26:51,950 --> 00:26:58,770
بالعدد  Since initial cell this خلينا نسميها

358
00:26:58,770 --> 00:27:04,130
removing is observed oocyte are removed to the

359
00:27:04,130 --> 00:27:07,310
second well droplet containing buffer media taking

360
00:27:07,310 --> 00:27:11,640
care to carry over minimum amount of enzyme طبعاً

361
00:27:11,640 --> 00:27:15,560
هذه الـ media ممكن تكون media وفيها إنزيم الإنزيم

362
00:27:15,560 --> 00:27:19,120
المسؤول عن خلخلة الـ Hyaluronic Acid بالإضافة إلى

363
00:27:19,120 --> 00:27:21,740
الـ aspiration و الـ releasing فبيصير عندي mechanical

364
00:27:21,740 --> 00:27:26,000
aspiration releasing و enzymatic وجود الإنزيم بعد

365
00:27:26,000 --> 00:27:30,100
ما أعمل aspiration و releasing لمدة 30 ثانية بنقل

366
00:27:30,100 --> 00:27:34,250
البوايضة هذه إلى قطرة جديدة لم يحدث فيها عملية

367
00:27:34,250 --> 00:27:37,090
removing للـ Oocyte طبعاً بكرر هذه العملية مرة و

368
00:27:37,090 --> 00:27:42,790
مرتين وثلاثة حتى أتأكد أن كمية الـ Cumulus cell

369
00:27:42,790 --> 00:27:47,050
المحيطة بالـ Oocyte قليلة جداً جداً جداً جداً

370
00:27:47,050 --> 00:27:50,350
طبعاً في القطرة الأولى بستخدم الـ dropper بـ diameter

371
00:27:50,350 --> 00:27:53,370
معين في القطرة التالية بستخدم الـ dropper بـ diameter

372
00:27:53,370 --> 00:27:58,070
أقل لأن كل ما نقلت البويضة من قطرة لقطرة جديدة الـ

373
00:27:58,070 --> 00:28:01,710
Oocyte الـ diameter بتقل و الـ Cumulus cell حواليها

374
00:28:01,710 --> 00:28:05,730
بتقل فبالتالي بدي Dropper جديدة بـ Diameter أقل

375
00:28:05,730 --> 00:28:10,250
عشان أقدر أعمل قوة احتكاك أثناء دخول وخروج

376
00:28:10,250 --> 00:28:17,070
البوايضة من الفوهة... من الفوهات الأنبوبة طيب،

377
00:28:17,070 --> 00:28:21,710
لازم أعمل Washing للـ Oocyte بشكل كامل علشان أوقف

378
00:28:21,710 --> 00:28:25,810
عملية عمل الـ Enzyme عشان ما يضلش فيه Enzyme مرتبط

379
00:28:25,810 --> 00:28:29,350
بخلايا الـ Cumulus cell المتبقية وبالتالي أنا بعمل

380
00:28:29,350 --> 00:28:33,540
Stopping لعمل الـ Enzyme فلازم أعملها Washing بعد

381
00:28:33,540 --> 00:28:36,180
after partially removal of the cumulus cell by

382
00:28:36,180 --> 00:28:40,400
short exposure أو exposure to buffered media

383
00:28:40,400 --> 00:28:45,960
contained an enzyme the oocyte are removed and put

384
00:28:45,960 --> 00:28:49,400
in the culture media and placed back to the

385
00:28:49,400 --> 00:28:52,960
incubator for 30 minutes أنا عملت Denudation كامل

386
00:28:52,960 --> 00:28:57,220
ما خليت ولا Cumulus cell حوالين الخلية أو عدد قليل

387
00:28:57,220 --> 00:29:06,110
جداً باخد الـ oocyte بضيفه في media Clear Media بدخل

388
00:29:06,110 --> 00:29:09,530
الطبق للإنكبيوتير عشان الخلية تستقر لأجل أن أنا

389
00:29:09,530 --> 00:29:16,030
كانت مجهدة بفعل وجود الإنزيم وعملية الـ aspiration

390
00:29:16,030 --> 00:29:20,630
والـ releasing لمدة 30 دقيقة على الأقل قبل الـ

391
00:29:20,630 --> 00:29:25,150
injection يعني قبل... ما بين الـ stripping وما بين

392
00:29:25,150 --> 00:29:29,110
الـ injection في فترة زمنية تسمى rested stage خاصة

393
00:29:29,110 --> 00:29:34,970
بالراحة لازم تحتاجها الـ oocyte عشان لا تجهد في نوع

394
00:29:34,970 --> 00:29:37,630
من أنواع الاستقرار المادة الوراثية بداخلها تقدر

395
00:29:37,630 --> 00:29:43,270
بـ 30 دقيقة على حد أدنى فـ future step أو this

396
00:29:43,270 --> 00:29:49,890
future step led to طبعاً عملية الـ mixing للبوايضة

397
00:29:49,890 --> 00:29:53,950
مع الـ media اللي بتحتوي على الـ Hyaluronidase as enzyme

398
00:29:53,950 --> 00:29:58,650
تعمل عملية tweaking لقوة الترابط ما بين الخلايا

399
00:29:58,650 --> 00:30:02,680
فبسهل عملية الـ removing بعد الـ denudation الـ

400
00:30:02,680 --> 00:30:05,480
Oocyte should be examined under inverted

401
00:30:05,480 --> 00:30:09,940
microscope to assess integrity and the stage of

402
00:30:09,940 --> 00:30:13,480
maturation عملت الـ denudation جاب المداخلة في الـ

403
00:30:13,480 --> 00:30:17,980
incubator لمدة 30 دقيقة طلعت البويضة نقولها عن

404
00:30:17,980 --> 00:30:20,360
inverted microscope فشوفها تحت الـ inverted

405
00:30:20,360 --> 00:30:24,440
microscope شو الـ integrity تبعتها؟ جداش الـ

406
00:30:24,440 --> 00:30:28,150
maturation stage تبعتها؟ هل هي M1 ولا M2؟ ولا أي

407
00:30:28,150 --> 00:30:31,750
نوع من أنواع يعني تصلح أم لا تصلح لعملية الـ

408
00:30:31,750 --> 00:30:36,030
fertilization the incomplete denudation of oocyte

409
00:30:36,030 --> 00:30:39,710
before eggsy يعني في بعض الناس بيقول لك لأ أنا بعمل

410
00:30:39,710 --> 00:30:43,810
complete denudation ما بتخلي أي Cumula cell بهدوء

411
00:30:43,810 --> 00:30:47,030
لازم يكون فيه جزء من الـ Cumula cell لأن هذا بيفيد

412
00:30:47,030 --> 00:30:50,430
الـ oocyte كيف بيفيد الـ oocyte؟ لأنه في دراسات

413
00:30:50,430 --> 00:30:54,710
بتقول لك عملية الـ denudation الغير كاملة يعني التي

414
00:30:54,710 --> 00:30:57,950
تترك عدد قليل من الـ Cumulus cell طبقة محيطة بالـ

415
00:30:57,950 --> 00:31:02,030
Oocyte تساعد في تحسين جودة الـ embryo بعد الـ

416
00:31:02,030 --> 00:31:05,730
fertilization وتساعد في تحسين الـ developmental

417
00:31:05,730 --> 00:31:10,230
embryo أيضًا تلعب دور كبير جداً في الـ assist

418
00:31:10,230 --> 00:31:13,770
embryonic metabolism و الـ stimulation gene

419
00:31:13,770 --> 00:31:17,810
expression تعمل Reduction للـ oxidative stress يعني

420
00:31:17,810 --> 00:31:22,490
مش شذوذ ولا دقة في الأداء إنك تعرّض الخلية بشكل 

421
00:31:22,490 --> 00:31:26,740
الكامل وما تخلّي أي كيوم للخلايا حولها، لأخفف قدر

422
00:31:26,740 --> 00:31:31,100
الإمكان وافقي ولو two layers حولها عدد قليل من

423
00:31:31,100 --> 00:31:34,060
الخلايا إنك أنت ما تضرك الخلايا أثناء عملية ال

424
00:31:34,060 --> 00:31:38,840
injection وما تضر الجنين لأن وجودها مفيد في أربع

425
00:31:38,840 --> 00:31:42,820
أو خمس نقاط بتساعد الـ embryo quality أو بتحسن الـ

426
00:31:42,820 --> 00:31:46,260
embryo quality والـ embryo development وبتعمل أسس

427
00:31:46,260 --> 00:31:49,560
embryonic metabolism بتعمل stimulation للـ Angelic

428
00:31:49,560 --> 00:31:52,440
suppression وتعمل reduction للـ oxidative stress

429
00:31:52,440 --> 00:31:59,330
خمس فوائد مهمة لبقاء كمية من كيوم الـ cell حوالين

430
00:31:59,330 --> 00:32:06,350
الـ Oocyte طبعا هذه ببساطة جدا شكل الـ Oocyte لما

431
00:32:06,350 --> 00:32:11,050
تطلع هذا شكل الـ Oocyte لما تطلع من الـ fluid وأنا

432
00:32:11,050 --> 00:32:13,850
أحصلها من الـ fluid لو أنقلها لقطرة جديدة هذه بتكون

433
00:32:13,850 --> 00:32:19,470
كلها عبارة عن الـ Oocyte ولكن لو أنا فرغت هذه الـ

434
00:32:19,470 --> 00:32:24,350
Oocyte وهذه كلها cumulus cell و corona cell حولها

435
00:32:24,350 --> 00:32:28,310
بعد الـ denodation لازم تكون بهذا الشكل طبعا هذا

436
00:32:28,310 --> 00:32:31,470
اللي باللون الأحمر هذا خلينا نسميه هذا الـ zona

437
00:32:31,470 --> 00:32:35,490
وهذا الـ polar body وهذا الـ polar body وهذه كلها

438
00:32:35,490 --> 00:32:42,550
طبقة من الـ cytoplasm هاي الـ oocyte اللي باللون

439
00:32:42,550 --> 00:32:46,290
الأخضر الفاتح بيسموها cumulus cell اللي باللون

440
00:32:46,290 --> 00:32:50,520
الأخضر الداكن موريلا وهذا الـ theca cell طبعا لما

441
00:32:50,520 --> 00:32:55,100
أجي أعمل aspiration و releasing suction و releasing

442
00:32:55,100 --> 00:33:00,740
هتروح كل هدوء يدل اللي باللون الأخضر الفاتح وهي

443
00:33:00,740 --> 00:33:04,840
الـ cumulus cell لازم أنا أتجنب كمية كبيرة جدا من الـ

444
00:33:04,840 --> 00:33:08,880
granulosa cell هي عبارة عن خليط من الـ mural cell والـ

445
00:33:08,880 --> 00:33:15,650
cumulus cell دعونا نرى هذا الفيديو المتعلق بعملية

446
00:33:15,650 --> 00:33:20,270
الـ denotation علشان تكون الأمر أوضح إن شاء الله

447
00:33:20,270 --> 00:33:27,090
طبعا

448
00:33:27,090 --> 00:33:34,970
هيتكلم عن الـ denotation تحت الـ microscope طبعا

449
00:33:34,970 --> 00:33:38,290
هذه الـ Pasteur tube أو Pasteur pipet أو dropper

450
00:33:38,290 --> 00:33:43,280
طبعا هنا هذه البوايضات اللي موجودة فيها بيعمل

451
00:33:43,280 --> 00:33:45,780
suction بداخل البيضات للداخل وبعدين بيعملها

452
00:33:45,780 --> 00:33:49,040
releasing أكثر من مرة وشوف كيف بيصير تفتت للـ

453
00:33:49,040 --> 00:33:49,500
cumulus

454
00:34:24,960 --> 00:34:27,440
واخدوا بالكم في الخطوة الثانية أغير الـ pipet يا

455
00:34:27,440 --> 00:34:31,580
جماعة أقل الـ diameter تبعها أقل لأن الخلية أو

456
00:34:31,580 --> 00:34:35,120
البويضة فقدت الـ granulosa cell فقدت الـ cumulus cell

457
00:34:35,120 --> 00:34:39,120
فصغر حجمها فابدي بـ steer pipet الـ diameter أقل

458
00:35:22,520 --> 00:35:25,720
شايفين في كل مرة بيعمل aspiration و releasing

459
00:35:25,720 --> 00:35:29,140
بيعمل في منطقة جديدة علشان ما يصير الشواقب حولها

460
00:35:29,140 --> 00:35:33,320
وفي كل مرة بعد فترة زمنية بعد ما يعمل يعني خمسين

461
00:35:33,320 --> 00:35:37,700
عشر مرات عشرين مرة خمسين ثانية بنقل هذه الـ oocyte

462
00:35:37,700 --> 00:35:40,300
كلها بداخلها داخل الـ dropout أو داخل الـ pasture

463
00:35:40,300 --> 00:35:41,940
pipe وبنقلها لـ drop جديد

464
00:36:07,360 --> 00:36:10,260
شوف كيف شكل البوايضات هي عندي واحدة ..اثنتين ..ثلاثة

465
00:36:10,260 --> 00:36:12,840
..أربعة ..خمسة ..ستة ..سبعة ..ثمانية ..عشرة

466
00:36:12,840 --> 00:36:16,220
..أحد عشر بويضة من سيدة واحدة اللي كانت مفروضة تطلع

467
00:36:16,220 --> 00:36:19,500
فقط ثلاث بويضات كحد أقصى هذا طبعا بعد الـ

468
00:36:19,500 --> 00:36:25,200
stimulation هذه

469
00:36:25,200 --> 00:36:28,320
طريقة الـ stripping أو الـ denodation الخاصة

470
00:36:28,320 --> 00:36:30,660
بالبويضات خليني أشوف فيديو ثاني يتكلم عن هذا

471
00:36:30,660 --> 00:36:31,120
الموضوع

472
00:36:37,110 --> 00:36:40,190
طبعا هذا شكل البوايضات أول ما نحزلهم من الـ fluid

473
00:36:40,190 --> 00:36:42,990
أو من الـ follicular fluid بكون شكلهم بهذا الشكل زي

474
00:36:42,990 --> 00:36:45,790
ما شوفناها تحت الصورة هذه البويضة وهذه كل

475
00:36:45,790 --> 00:36:49,830
الـ theca cell والـ cumulus cell والـ mural cell والـ

476
00:36:49,830 --> 00:36:53,410
somatic cell كلها محيطة فيها بده يعملها pipetting

477
00:36:53,410 --> 00:36:59,370
الوقت بيجي بالـ dropper بيعملها suction و releasing

478
00:36:59,370 --> 00:37:06,230
لمدة ثلاثين ثانية على الأقل مش وجدش الـ diameter

479
00:37:08,580 --> 00:37:11,900
الخاصة بالـ Pasteur pipet أو الخاصة بالـ dropper اللي

480
00:37:11,900 --> 00:37:15,740
لازم تكون ست مرات خمسة، ستة، سبعة، ثمان مرات أو

481
00:37:15,740 --> 00:37:22,100
ثلاثين ثانية كحد أدنى وبعدين بيعملهم transfer إلى

482
00:37:22,100 --> 00:37:25,880
a new drop علشان يتخلص من كمية الشباب هاي فالـ new

483
00:37:25,880 --> 00:37:29,980
drop عملها releasing وبعدين بيعملهم suction و

484
00:37:29,980 --> 00:37:33,640
releasing بس بده يغير الـ pipet يغير pipet لأنه بده

485
00:37:33,640 --> 00:37:38,020
pipet الـ diameter تبعته أقل علشان يقدر يصير قوة

486
00:37:38,020 --> 00:37:42,300
احتكاك ما بين الجدار الداخل للأنبوبة والبويضة

487
00:37:42,300 --> 00:37:45,800
واحدة واحدة وفي بعضهم بيعملها كاملة ولكن أفضل

488
00:37:45,800 --> 00:37:49,980
واحدة واحدة علشان ما يصيرش تزاحم ومما يدي لتهتك

489
00:37:49,980 --> 00:37:54,800
الخلايا في بعض الأحيان ممكن يعيدها ثلاثين ثانية زي

490
00:37:54,800 --> 00:37:59,200
ما قلنا وينتقل إلى drop جديدة فيما بعد هينقل إلى

491
00:37:59,200 --> 00:38:04,880
drop جديدة هيغير الـ pipet المفروض يغير الـ Pipet

492
00:38:04,880 --> 00:38:09,980
علشان يعطيني نتائج أفضل يعطيني Diameter Pipet with

493
00:38:09,980 --> 00:38:15,580
low diameter أكبر

494
00:38:15,580 --> 00:38:21,900
البويضات هتشوفهم بهذا الشكل هذه فكرة الـ

495
00:38:21,900 --> 00:38:25,800
Denotation بشكل أساسي كيف بتصير عملية الـ

496
00:38:25,800 --> 00:38:29,760
Denotation تعرّفنا عنها بعد ما حكينا عن الـ

497
00:38:29,760 --> 00:38:32,900
Denotation الـ timing للـ oocyte denodation الـ

498
00:38:32,900 --> 00:38:37,160
oocyte denodation is usually performed between 37

499
00:38:37,160 --> 00:38:42,220
and 40 hours after HCG يعني عملية الـ denodation

500
00:38:42,220 --> 00:38:46,360
بتصير بعد عملية الـ injection للشريجون أو للـ human

501
00:38:46,360 --> 00:38:50,540
chronic gonadotropin اللي بيعمل ovulation بـ 37

502
00:38:50,540 --> 00:38:56,050
إلى 40 ساعة ولكن يجب أن تحدث قبل الـ insemination

503
00:38:56,050 --> 00:39:00,250
بساعة أو نصف ساعة على الأقل الإنزيمات التي تستخدم

504
00:39:00,250 --> 00:39:04,670
وتركيزها بشكل عام وtraditionally الـ denodation أو

505
00:39:04,670 --> 00:39:09,050
الـ denoding process أو procedure involve a

506
00:39:09,050 --> 00:39:14,670
hyaluronidase derivative هيالورونيداز يعني هيالورونيداز

507
00:39:14,670 --> 00:39:19,490
مع مشتق من الـ hyaluronidase بشكل أساسي in order to

508
00:39:19,490 --> 00:39:23,130
minimize any potential toxic effect on oocyte for

509
00:39:23,130 --> 00:39:26,420
this type of enzyme we should be reduce the

510
00:39:26,420 --> 00:39:28,440
enzymatic concentration أو الـ enzyme

511
00:39:28,440 --> 00:39:33,340
concentration أو reduce that duration for oocyte

512
00:39:33,340 --> 00:39:37,640
exposure to this type of enzyme يعني أنا ممكن أقلل

513
00:39:37,640 --> 00:39:39,840
الـ toxicity الخاصة بهذا الإنزيم بطريقة ثانية

514
00:39:39,840 --> 00:39:43,500
الطريقة الأولى أنه أقلل الـ time اللي بتتعرض فيه

515
00:39:43,500 --> 00:39:47,540
الخلية لهذا الإنزيم أو أقلل ما يُعرف باسم الـ

516
00:39:47,540 --> 00:39:50,440
concentration الخاصة فيه وفي بعضهم بيقلل الـ time

517
00:39:50,440 --> 00:39:54,760
أفضل لأن الـ concentration بيكون fixed أقل الـ

518
00:39:54,760 --> 00:39:57,540
concentration ممكن أن أستخدم خلال الـ denotation

519
00:39:57,540 --> 00:40:02,040
80 international units per milliliter يعني لو الـ

520
00:40:02,040 --> 00:40:05,620
one drop فيها 80 unit ممكن أن أضع هذه الـ one drop

521
00:40:05,620 --> 00:40:10,520
من الإنزيم على 1 مليليتر من الـ media وكل ما كان

522
00:40:10,520 --> 00:40:15,620
أقل تركيزه وكل ما كان تأثيره السلبي أقل أو الـ

523
00:40:15,620 --> 00:40:20,830
toxicity أقل فممكن أنا أخفض درجة حرارته ..عفوا..

524
00:40:20,830 --> 00:40:24,870
أخفض تركيزه وأخفض effect تبعته إن أستخدم تركيز

525
00:40:24,870 --> 00:40:28,470
عشرة international unit per milliliter بعض

526
00:40:28,470 --> 00:40:32,170
الدراسات قالت إن هذا التركيز has also been shown

527
00:40:32,170 --> 00:40:37,970
to be able to make denotation for mature oocyte

528
00:40:37,970 --> 00:40:43,150
بشكل عالي جدا يعني الـ عشر international unit قادرة

529
00:40:43,150 --> 00:40:46,190
أن تعمل denotation وبكفاءة عالية جدا فأنا ليش

530
00:40:46,190 --> 00:40:49,690
أستخدم الـ 80؟ فلو بدي أستخدم الـ 80 بدي أقلل الـ

531
00:40:49,690 --> 00:40:53,490
duration لازم

532
00:40:53,490 --> 00:40:57,230
أقلل الـ duration خلصنا كده من عملية الـ denodation

533
00:40:57,230 --> 00:40:59,790
والـ stripping جاهز لعملية الـ injection اللي

534
00:40:59,790 --> 00:41:04,570
هناخدها في الشكتر الجديد ولكن قبل ما نخلص الموضوع

535
00:41:04,570 --> 00:41:09,570
ده فيه موضوع صغير بتنوح له وهو هرمون الـ AMH الـ

536
00:41:09,570 --> 00:41:14,170
AMH ببساطة جدا يا طلابنا الأعزاء هو عبارة عن

537
00:41:14,170 --> 00:41:18,730
هرمون يطلق عليه protein هرمون يُفرز بشكل أساسي من

538
00:41:18,730 --> 00:41:22,350
الـ granulosa cell in the ovarian follicle in the

539
00:41:22,350 --> 00:41:27,130
ovarian follicle لما تكون أو يكون عند سيدة تفرز الـ

540
00:41:27,130 --> 00:41:29,830
ovarian follicle هرمون أو الـ granulosa cell

541
00:41:29,830 --> 00:41:32,250
الموجودة في الـ ovarian follicle تفرز هرمون

542
00:41:32,250 --> 00:41:35,590
antimullerian هرمون خدوا بالكم هذا الهرمون مهم جدا

543
00:41:35,590 --> 00:41:39,790
وبناء عليه بعض الاضطراب بيستخدموه عشان يحددوا هدى

544
00:41:39,790 --> 00:41:43,630
الزوجة أو هدى السيدة تروح agonist أو antagonist

545
00:41:43,630 --> 00:41:48,700
short protocol ولا long protocol وبعضهم بيستخدم الـ

546
00:41:48,700 --> 00:41:51,740
AMH عشان يحدد الـ short protocol أو الـ long

547
00:41:51,740 --> 00:41:55,840
protocol شو هيختار طبعا الـ AMH level بلعب دور

548
00:41:55,840 --> 00:42:01,120
كبير جدا حيث أنه يزيد بعد الـ 25 سنة عند السيدات

549
00:42:01,120 --> 00:42:05,800
ويبدأ في التناقص بعد الـ 30 أو عند 30 سنة الـ AMH

550
00:42:05,800 --> 00:42:10,060
level بلعب دور كبير جدا في الـ development of sex

551
00:42:10,060 --> 00:42:15,400
organ في الـ unborn baby كيف بلعب هذا الدور؟ بقول لك

552
00:42:15,400 --> 00:42:20,420
ببساطة جدا في أول أسابيع من الحمل الـ baby will be

553
00:42:20,420 --> 00:42:24,240
start reproductive organ development إذا كان الـ

554
00:42:24,240 --> 00:42:28,960
baby male فهيفرز كمية كبيرة جدا من الـ AMH علشان

555
00:42:28,960 --> 00:42:33,700
يمنع تكوين بالإضافة طبعا إلى الـ male hormone علشان

556
00:42:33,700 --> 00:42:40,180
يمنع تكوين الـ female organ development ويسمح

557
00:42:40,180 --> 00:42:47,160
بتكوين الـ male developed male organ يعني الـ AMH

558
00:42:47,160 --> 00:42:52,860
يفرز في المرحلة الجنينية إذا كان الجنين ذكر يفرز

559
00:42:52,860 --> 00:42:57,680
كمية كبيرة جدا من الـ AMH plus الـ sex hormone الخاص

560
00:42:57,680 --> 00:43:02,460
بالذكور مما يمنع تكوين الـ organ الخاص بالـ female

561
00:43:02,460 --> 00:43:08,060
ويسمح ويساعد على إنتاج وتكوين الـ organ الخاص

562
00:43:08,060 --> 00:43:13,340
بالمال لو كان العكس عند الـ unborn baby في المرحلة

563
00:43:13,340 --> 00:43:17,500
الجنينية female كمية اللي قد أبقاش هتقل، هتكون أقل

564
00:43:17,500 --> 00:43:23,940
ما يمكن و تكاد تكون غير مذكورة مما يسمح بظهور الـ

565
00:43:23,940 --> 00:43:27,680
organ related with female و عدم ظهور الـ organ

566
00:43:27,680 --> 00:43:33,510
related with male مما يؤدي إلى ظهور الجنين كجنين

567
00:43:33,510 --> 00:43:39,230
أنثى عشان كده بعض الأطباء وبعض المراكز ممكن تستخدم

568
00:43:39,230 --> 00:43:42,570
الـ AMH تحديد مستوى الـ AMH في المرحلة الجنينية

569
00:43:42,570 --> 00:43:47,470
لتحديد جنس المولود هل هو male أو female إذا كان

570
00:43:47,470 --> 00:43:53,050
مستوى عالي جدا بيكون male إذا كان مستوى منخفض أو 

571
00:43:53,050 --> 00:44:00,970
منعدم بيكون female لإن وجوده يسمح بإنشاء الأعضاء

572
00:44:00,970 --> 00:44:06,920
الذكرية ويمنع تكوين الأعضاء الجنثوية في المرحلة

573
00:44:06,920 --> 00:44:11,540
الجنينية طبعاً الـ AMH has a different role for

574
00:44:11,540 --> 00:44:17,360
female from or after puberty at the time of his 

575
00:44:17,360 --> 00:44:21,020
beginning making AMH the more egg cell there are

576
00:44:21,020 --> 00:44:25,400
the high level of AMH الـ AMH يمكن أن يستخدم as

577
00:44:25,400 --> 00:44:29,610
a marker or indicator for ovarian response جدّيش أنا 

578
00:44:29,610 --> 00:44:32,870
عند مستوى الـ AMH عند السيدات جدّيش بكون عندها

579
00:44:32,870 --> 00:44:36,810
مخزون في المبيض ففي علاقة طردية ما بين مستوى الـ

580
00:44:36,810 --> 00:44:40,950
AMH ومخزون المبيض كل ما كان الـ AMH عالي، معناه

581
00:44:40,950 --> 00:44:45,570
فيه بيبايدات كتير جدا عند السيدة الـ AMH يمكن أن

582
00:44:45,570 --> 00:44:50,710
يستخدم ليه؟ predict for started monobios متى كل ما 

583
00:44:50,710 --> 00:44:54,770
كان قليل المنوبيوز بتكون أقرب يستخدم في تشخيص الـ

584
00:44:54,770 --> 00:44:57,530
polycystic ovarian syndrome الـ hormonal disorder

585
00:44:58,580 --> 00:45:02,840
يستخدم في .. for infant .. infant .. chick infant

586
00:45:02,840 --> 00:45:06,260
with genital that are not clear identified عند الـ

587
00:45:06,260 --> 00:45:10,700
male و female monitoring women who have some type

588
00:45:10,700 --> 00:45:15,000
of ovarian cancer we can use it as indicator for

589
00:45:15,000 --> 00:45:18,640
fertility in women specifically in relation to the

590
00:45:18,640 --> 00:45:25,740
number of egg in reserve of ovaries so AMH can be

591
00:45:25,740 --> 00:45:30,740
used as indicator for ovarian response and ovarian

592
00:45:30,740 --> 00:45:34,440
reserve

593
00:45:34,440 --> 00:45:40,540
على مخزون المبيض ومدى استجابة المبيض so we can use

594
00:45:40,540 --> 00:45:44,160
it as a predictor for ovarian reserve and

595
00:45:44,160 --> 00:45:48,000
ovarian response سوف نكتفي بهذا القدر في المحاضرة

596
00:45:48,000 --> 00:45:51,380
اليوم على أن نكمل ما تبقى من هذا الـ chapter في

597
00:45:51,380 --> 00:45:54,020
المحاضرة القادمة إن شاء الله