abdullah's picture
Add files using upload-large-folder tool
b4f4679 verified
raw
history blame
44.8 kB
1
00:00:00,770 --> 00:00:04,450
بسم الله الرحمن الرحيم والصلاة والسلام على أشرف
2
00:00:04,450 --> 00:00:09,830
المرسلين سيدنا محمد وعلى آله وصحبه أجمعين، طلابنا
3
00:00:09,830 --> 00:00:14,270
العزاء، أرجو من الله أن تكونوا بخير. استكمالًا لما
4
00:00:14,270 --> 00:00:17,930
بدأنا فيه من محاضرة sperm assessment processing
5
00:00:17,930 --> 00:00:22,230
and selection، تحدثنا عن عدة أمور لها علاقة بالـ
6
00:00:22,230 --> 00:00:25,170
macroscopic examination والـmicroscopic examination.
7
00:00:25,870 --> 00:00:29,110
وفي النهاية، تحدثنا عن الـVatility Test أو الـLife
8
00:00:29,110 --> 00:00:33,450
Sperm Examination من خلال فحص الأيوزين أو
9
00:00:33,450 --> 00:00:38,150
النجروسين. استكمالًا لهذا الأمر، سوف نتكلم عن
10
00:00:38,150 --> 00:00:41,610
الـHoss Test أو ما يُعرف باسم الـHypoosmotic
11
00:00:41,610 --> 00:00:45,770
Swelling Test. الـHypoosmotic Swelling Test، اختصار
12
00:00:45,770 --> 00:00:50,910
Hoss Test، وهو عبارة عن فحص يُستخدم للتفريق ما بين
13
00:00:50,910 --> 00:00:56,570
الحيوان المنوي الحي والحيوان المنوي الميت. وهو كفحص
14
00:00:56,570 --> 00:01:00,850
مهم جدًا خلال عملية الـ fertilization، لأنه أنا بهمني
15
00:01:00,850 --> 00:01:05,590
أن أحقن الخلية بحيوان منوي حي، حتى لو كان غير متحرك.
16
00:01:05,590 --> 00:01:10,890
فالمهم أن يكون حي. The principle: only living cell
17
00:01:10,890 --> 00:01:14,590
with intact membrane will swell under hypoosmotic
18
00:01:14,590 --> 00:01:20,530
condition 150 mO·L. يعني مبدأ عمل هذا الفحص أن
19
00:01:20,530 --> 00:01:25,960
الخلايا الحية تميل إلى الـ swelling في حالة تعرضها
20
00:01:25,960 --> 00:01:30,480
إلى الـ hypo osmotic condition. يعني أنا أي خلية
21
00:01:30,480 --> 00:01:34,400
أحطها في hypo osmotic condition هتنتفخ. وهذه نفس
22
00:01:34,400 --> 00:01:39,360
الفكرة في الـ host test أو الـ hypo osmotic
23
00:01:39,360 --> 00:01:44,540
swelling: the influx of a fluid into via pedicel is
24
00:01:44,540 --> 00:01:49,020
reflected by the coiling of the sperm. يعني الـ
25
00:01:49,020 --> 00:01:53,080
sperm إذا كان هذا الـ sperm حيوضعته في hypo-osmotic
26
00:01:53,080 --> 00:01:57,640
swelling or solution مباشرة، نهاية التل الخاصة به
27
00:01:57,640 --> 00:02:02,200
هتنتفخ، معناه إن والله هذا الـ sperm life، هذا الـ
28
00:02:02,200 --> 00:02:07,660
sperm available or life. أحد أفضليات هذا الاختبار هو
29
00:02:07,660 --> 00:02:13,460
أنه لا يقتل الـ sperm، الفحص الذي يسمح بالتوليد لهذا الـ sperm.
30
00:02:13,460 --> 00:02:18,500
للتكنولوجيا التجاربية. يعني بمعنى آخر أن هذا الفحص
31
00:02:18,500 --> 00:02:21,480
لا يؤثر على الـ sperm، ما بيأثر على المادة الوراثية
32
00:02:21,480 --> 00:02:24,240
بتاعة الـ sperm، ما بيأثر على الـ function بتاعة الـ sperm،
33
00:02:24,240 --> 00:02:28,640
ما بيأثر على الـ capacity بتاعة الـ sperm. فبالتالي أي Sperm
34
00:02:28,640 --> 00:02:32,600
أخضعته لهذه العملية واتضح فيما بعد أن الـ life
35
00:02:32,600 --> 00:02:39,220
ممكن أن أستخدمه في الـ IVF بشكل مباشر بدون أي تردد. In
36
00:02:39,220 --> 00:02:42,100
this method, sperm sample should be mixed with the
37
00:02:42,100 --> 00:02:46,660
hypoosmotic solution and incubated at 37 Celsius
38
00:02:46,660 --> 00:02:50,700
for 30 minutes. عشان أنا أتأكد هذا الـ sperm alive
39
00:02:50,700 --> 00:02:54,320
ولا لا. طب إذا كانت العينة بتستخدمها للإخصاب يكفي
40
00:02:54,320 --> 00:02:59,910
خمس دقائق تحضيرها بالـ hypoosmotic solution. بعد
41
00:02:59,910 --> 00:03:05,930
عملية الحضانة على 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة أو
42
00:03:05,930 --> 00:03:11,150
لمدة 5 دقائق، باجي بعمل check up للـ sperm، أو بعد الـ
43
00:03:11,150 --> 00:03:16,070
sperm بعمل with preparation على الـ slide. should be
44
00:03:16,070 --> 00:03:19,170
made and assess the sample under phase contrast
45
00:03:19,170 --> 00:03:23,630
microscope على عدسة تكبير 400 أو 200، بعيد 200.
46
00:03:23,630 --> 00:03:28,330
sperm، بشوف مين فيهم life ومين فيهم dead. بناء على
47
00:03:28,330 --> 00:03:34,450
الانتفاخ اللي يظهر أسفل الذيل في هذا الشكل، طبعًا دي
48
00:03:34,450 --> 00:03:37,890
اللي على اليسار رقم A هي عبارة عن الـ fertility
49
00:03:37,890 --> 00:03:42,590
test بفعل الـ نجروسين أو الـ Iosin. بضيف قطرة من الـ
50
00:03:42,590 --> 00:03:46,170
Iosin، بضيف قطرة من الـ نجروسين، و بضيف قطرة من الـ semen
51
00:03:46,170 --> 00:03:50,450
بعمله mix. أو واحد semen اتنين drop Iosin، اتنين drop
52
00:03:50,450 --> 00:03:54,170
نجروسين، بعمل mix وبشوفها تحت الـ microscope اللي
53
00:03:54,170 --> 00:04:00,980
بالشب هو الـ life. أما الأخر صفقة الـ Iosin هو الـ
54
00:04:00,980 --> 00:04:05,340
dead أو الـ non-viable. اللي على اليسار هي عبارة عن
55
00:04:05,340 --> 00:04:09,700
الـ hypo osmotic swelling test، الـ host test. بضيف
56
00:04:09,700 --> 00:04:14,140
sample من الـ seminal fluid، بضيف عليه الـ hypo
57
00:04:14,140 --> 00:04:18,180
osmotic swelling fluid or solution وبعمل mixing
58
00:04:18,180 --> 00:04:24,900
وincubation لمدة 30 أو 5 دقائق على 37 درجة مئوية. أي
59
00:04:24,900 --> 00:04:29,440
sperm بظهر له swelling في أسفله، هذا معناه normal
60
00:04:29,440 --> 00:04:32,280
sperm swelling زي ما أحنا شايفينه على جهة اليسار
61
00:04:32,280 --> 00:04:36,840
في منطقة التل. بسميه normal sperm، viable sperm. أما
62
00:04:36,840 --> 00:04:39,800
إذا كان مافيه swelling في نهاية التل فهو عبارة عن
63
00:04:39,800 --> 00:04:45,420
non viable sperm أو dead sperm. هذا الفرق ما بين
64
00:04:45,420 --> 00:04:50,220
الفرقتين. في طريقة ثانية وهي طريقة العد معتمدة على
65
00:04:50,220 --> 00:04:54,480
الكمبيوتر. بنسميها Computerized
66
00:04:54,480 --> 00:05:00,560
Assisted Sperm Analysis أو Computer Assisted Sperm
67
00:05:00,560 --> 00:05:07,840
Analysis، تحت مصطلح كذا كذا، C للكمبيوتر، A Assisted
68
00:05:07,840 --> 00:05:12,940
Sperm Analysis. يعني أنت كـ technician ما بتشتغل شيء إلا
69
00:05:12,940 --> 00:05:16,360
بتعمل weight mount. يعني كـ technician بتضيف 50 micro من
70
00:05:16,730 --> 00:05:19,590
عينة الـ Seminal Fluid بعد الـ mix الجيد، وبتغطيها
71
00:05:19,590 --> 00:05:22,930
بـ cover slide وبتدخلها تحت الـ microscope، والـ
72
00:05:22,930 --> 00:05:26,550
microscope بناء على software معين بيقرأ كل الـ
73
00:05:26,550 --> 00:05:29,870
field، بيهدلك الـ sperm وبيجيبلك الـ motility، و
74
00:05:29,870 --> 00:05:34,130
بيجيبلك الـ morphology، حتى بيجيبلك تصنيف الـ motile
75
00:05:34,130 --> 00:05:37,830
هل هي الـ progressive ولا non progressive motile. ولكن
76
00:05:37,830 --> 00:05:42,410
خد بالك أنه لازم بنعمل check-up على نتائجه لأن في
77
00:05:42,410 --> 00:05:47,270
نسبة خطأ منها بفعل أن بعض الـ Debris ممكن يعدها كـ
78
00:05:47,270 --> 00:05:56,030
sperm. خلينا نشوف الفيديو متعلق بعد الموضوع، نشوف
79
00:05:56,030 --> 00:05:59,030
الفيديو. Motility and concentration sample
80
00:05:59,030 --> 00:06:03,290
preparation. First step is to prepare a sample for
81
00:06:03,290 --> 00:06:05,410
motility and concentration analysis.
82
00:06:12,750 --> 00:06:13,950
يمكن استخدام بطاريات مستخدمة. يمكن استخدامها
83
00:06:13,950 --> 00:06:16,590
بطاريات مستخدمة. يمكن استخدامها. بطاريات مستخدمة
84
00:06:16,590 --> 00:06:20,710
يمكن استخدامها. بطاريات مستخدمة. يمكن استخدامها
85
00:06:20,710 --> 00:06:21,250
بطاريات مستخدمة. يمكن استخدامها. بطاريات مستخدمة
86
00:06:21,250 --> 00:06:23,670
يمكن استخدامها. بطاريات مستخدمة. يمكن استخدامها
87
00:06:23,670 --> 00:06:27,550
بطاريات مستخدمة. يمكن استخدامها. بطاريات مستخدمة
88
00:06:27,550 --> 00:06:29,270
يمكن استخدامها. بطاريات مستخدمة. يمكن استخدامها
89
00:06:29,270 --> 00:06:31,470
بطاريات مستخدمة. يمكن استخدامها. بطاريات مستخدمة
90
00:06:31,470 --> 00:06:36,270
يمكن استخدامها. بطاريات مستخدمة. يمكن استخ
91
00:06:40,810 --> 00:06:45,450
ثم إزالة المواصفات المكسورة، السلسلة مستعدة للتعامل
92
00:06:45,450 --> 00:06:50,150
معها. مقاطع الميكروسكوبللتحديث الموتولوجيا
93
00:06:50,150 --> 00:06:54,150
والتركيزية سنستخدم الـ Green Filter، الـ Condenser
94
00:06:54,150 --> 00:06:59,490
في موقع PH1 و10X Face Consciousness Objective. تذكر
95
00:06:59,490 --> 00:07:02,650
أنه ممكن أيضًا أن تستخدم الـ Fluorescence
96
00:07:02,650 --> 00:07:06,870
موتولوجيا والتركيزية. تستخدم الـ Fluorescence. It is
97
00:07:06,870 --> 00:07:09,670
possible to access the analysis module from the
98
00:07:09,670 --> 00:07:12,670
respective button in results tab or from the icons
99
00:07:12,670 --> 00:07:16,810
bar. In this window, the user can choose different
100
00:07:16,810 --> 00:07:20,760
analysis configurations. This is the main analysis
101
00:07:20,760 --> 00:07:23,540
window where the sample information is presented.
102
00:07:23,540 --> 00:07:28,400
Press analyze to start. Live image is displayed
103
00:07:28,400 --> 00:07:34,420
focus. طبعًا هنا ضاف العينة وشغل الـ microscope وعمل
104
00:07:34,420 --> 00:07:38,000
analysis، فجاب الـ field أخد capture للـ microscope
105
00:07:38,000 --> 00:07:41,100
فيما بعد. ببدأ أو الكمبيوتر ببدأ يعد الـ sperm
106
00:07:41,100 --> 00:07:47,140
الموجودة في هذا الـ capture بناء على طبعًا عدد
107
00:07:47,140 --> 00:07:53,220
وParameter معينة وطول وعرض خاصة بالـ head. بعد كده
108
00:07:53,220 --> 00:07:55,600
بياخد أكتر من الـ capture وبيقارنهم مع بعض ومع
109
00:07:55,600 --> 00:08:00,740
بعض علشان يشوف مين الـ motile ومين الـ مش متايل، sperm
110
00:08:00,740 --> 00:08:04,220
fill and start the analysis clicking again the
111
00:08:04,220 --> 00:08:08,560
analyze button. main analysis information is always
112
00:08:08,560 --> 00:08:12,760
present on this side or capture sequences can be
113
00:08:12,760 --> 00:08:17,250
played in the analysis user tab. باستخدام مانيال
114
00:08:17,250 --> 00:08:18,930
النتائج، يمكن للمستخدم أن يختار مقاطع الـ Sperm
115
00:08:18,930 --> 00:08:22,830
مختلفة ويقوم بمعرفة أو لا معرفة أي Spermatozoa تم
116
00:08:22,830 --> 00:08:25,850
إظهارها.
117
00:08:25,850 --> 00:08:33,950
من
118
00:08:33,950 --> 00:08:36,790
الممكن أيضًا أن تشاهد المعلومات عن واحدة Sperm
119
00:08:36,790 --> 00:08:42,260
بمضغط عينيها، وفتح مقاطع الـ Sperm Info. بنقل إلى
120
00:08:42,260 --> 00:08:44,100
نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة.
121
00:08:44,100 --> 00:08:46,600
نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة.
122
00:08:46,600 --> 00:08:49,960
نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة.
123
00:08:49,960 --> 00:08:55,400
نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة.
124
00:08:55,400 --> 00:08:55,500
نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة.
125
00:08:55,500 --> 00:08:55,600
نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة.
126
00:08:55,600 --> 00:09:05,720
نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة. نتيجة.
127
00:09:05,720 --> 00:09:10,080
نتيج
128
00:09:10,580 --> 00:09:13,360
أتابع مع المعلومات عن مصادرها الـ Spermatozoon
129
00:09:13,360 --> 00:09:28,380
وخلاصة.
130
00:09:28,380 --> 00:09:32,040
مصادر تجارب. تجارب. تجارب. تجارب. تجارب. تجارب. تجارب.
131
00:09:32,040 --> 00:09:33,260
تجارب. تجارب. تجارب.
132
00:09:41,070 --> 00:09:44,770
هو بسهولة جدًا للوصول إلى مقال التجارب اللي يمكن
133
00:09:44,770 --> 00:09:55,650
أن يتم تحميله لأي مصمم التجارب التجاربية.
134
00:09:55,650 --> 00:09:57,210
يمكن أن يتم تحميله لأي مصمم التجارب التجاربية.
135
00:09:57,210 --> 00:10:00,650
التجاربية. يمكن أن يتم تحميله لأي مصمم التجارب
136
00:10:00,650 --> 00:10:02,630
التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجاربية.
137
00:10:02,630 --> 00:10:03,230
التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجاربية.
138
00:10:03,230 --> 00:10:03,310
التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجاربية.
139
00:10:03,310 --> 00:10:03,710
التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجاربية.
140
00:10:03,710 --> 00:10:09,650
التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجاربية. التجارب.
141
00:10:14,380 --> 00:10:18,700
إذا هذه فكرة الكازا وهي ال computer assisted sperm
142
00:10:18,700 --> 00:10:22,200
analysis إنه أنا ك technician ما بشغل شيء بيدي و
143
00:10:22,200 --> 00:10:25,320
جرد إن بحضر ال sample من خلال وضع خمسين micro أو
144
00:10:25,320 --> 00:10:28,740
عشرة micro بناء على ال protocol المستخدم وبعدين
145
00:10:28,740 --> 00:10:31,220
بضيفه تحت ال fluorescent microscope أو ال phase
146
00:10:31,220 --> 00:10:34,840
contrast microscope على عدسة عشرة بعدين بعمل
147
00:10:34,840 --> 00:10:38,640
switch on للجهاز وبخليه ياخد capture و 2 و 3 و 4
148
00:10:39,000 --> 00:10:42,500
بعدين بدأت على ال analysis عشان يبدأ الجهاز يحلل
149
00:10:42,500 --> 00:10:46,100
الصور اللي أخدهم أكثر من مرة بيديني ال utility،
150
00:10:46,100 --> 00:10:48,520
بيديني أنواعها، بيديني ال concentration، بيديني ال
151
00:10:48,520 --> 00:10:51,540
total count، بيديني ال morphology، بناء على شو أنا
152
00:10:51,540 --> 00:10:54,720
بدي براميتر كلها متوفرة، بناء على ال program
153
00:10:54,720 --> 00:10:59,130
المستخدم، كل شركة لها program خاص فيهاخدوا بالكوا
154
00:10:59,130 --> 00:11:03,030
الكازا ما بيستخدم في الـ routine lab أو اللي بيقول
155
00:11:03,030 --> 00:11:06,790
كمية العيلة بتجي لها خمسة، ستة، سبعة، ثمانية في
156
00:11:06,790 --> 00:11:12,030
اليوم لأ بيستخدم في المختبرات الكبيرة التي يوجد
157
00:11:12,030 --> 00:11:16,190
عندها ضغط كبير من العمل أو مختبرات التي لها علاقة
158
00:11:16,190 --> 00:11:20,370
بال research المتعلق في ال anthropology هذه فكرة
159
00:11:20,370 --> 00:11:25,470
الكازا الفكرة الثانية التي بتتكلم عنها كيف تعمل
160
00:11:25,470 --> 00:11:29,850
evaluation لل sperm DNA طبعا ال sperm عرفته أنه
161
00:11:29,850 --> 00:11:33,590
life ال sperm عرفته أنه motile هل ال sperm DNA
162
00:11:33,590 --> 00:11:37,710
جيد فيه damage في ال sperm DNA لأنه ممكن ال sperm
163
00:11:37,710 --> 00:11:43,210
يكون motile ويكون life ولكن ال capacity تبعته مش
164
00:11:43,210 --> 00:11:47,350
هال capacity و ال DNA تبعته صار فيها fragmentation
165
00:11:47,350 --> 00:11:50,790
فبالتالي لو عمل fertilization ممكن يؤدي إلى إجهاض
166
00:11:50,790 --> 00:11:56,480
الجنين لأنه ما ارتقى إلى الكيف والكم المناسب لإتمام
167
00:11:56,480 --> 00:12:00,180
عملية ال fertilization بالشكل المطلوب تحت مصطلح
168
00:12:00,180 --> 00:12:03,680
evaluation of sperm DNA damage the maintenance of
169
00:12:03,680 --> 00:12:08,160
sperm DNA integrity is vital for fertilized and to
170
00:12:08,160 --> 00:12:10,440
transmit the genetic material from one
171
00:12:10,440 --> 00:12:13,880
generation to another لأن المادة الوراثية هي عبارة
172
00:12:13,880 --> 00:12:18,800
عن جوهر العملية ال fertilization تصير عشان ينقل
173
00:12:18,800 --> 00:12:23,350
المادة النووية الخاصة بالأب إلى المادة النووية
174
00:12:23,350 --> 00:12:26,810
الخاصة بالأم تكوين الزيجوت إذا كان هذه المادة
175
00:12:26,810 --> 00:12:29,550
النووية فيها مشكلة معناه الزيجوت التي اتكونت
176
00:12:29,550 --> 00:12:34,310
حتصير فيها مشكلة معناه فرصة ال abortion portion هتزيد ال
177
00:12:34,310 --> 00:12:37,850
sperm chromatin undergoes extensive remodeling
178
00:12:37,850 --> 00:12:43,430
during spermatogenesis to protect sperm DNA بمعنى
179
00:12:43,430 --> 00:12:46,590
آخر إن هذا ال DNA الموجود داخل ال sperm في ال head
180
00:12:46,590 --> 00:12:50,450
تاع ال sperm فيه عند ال chromatin الكروماتين الموجود
181
00:12:50,450 --> 00:12:53,970
هناك بيصير له عملية كبيرة جدا من الـ remodeling
182
00:12:53,970 --> 00:12:58,050
عشان يحافظ على ال sperm و يحمل مادة نوية لخاصة
183
00:12:58,050 --> 00:13:02,690
بال sperm من التكسير أو من التلف إذا ما صارش إلها
184
00:13:02,690 --> 00:13:06,130
remodeling معناه فيه defect حيصير على صعيد ال
185
00:13:06,130 --> 00:13:10,410
sperm DNA in this process most of sperm DNA
186
00:13:10,410 --> 00:13:14,610
histone should be replaced with protamine 1 و
187
00:13:14,610 --> 00:13:19,050
البروتامين 2 وكمية صغيرة من البروتامين يجب أن
188
00:13:19,050 --> 00:13:24,530
تبقى موجودة في ال DNA، في المبالغة هذه العملية
189
00:13:24,530 --> 00:13:27,550
مهمة جدا أنه إذا كان عندك كمية كبيرة جدا من
190
00:13:27,550 --> 00:13:31,550
البروتامين كبروتين هذا البروتامين سوف يستبدل
191
00:13:31,550 --> 00:13:35,790
بالبروتامين 1 وبروتامين 2 ولازم ما يتبقى من
192
00:13:35,790 --> 00:13:40,310
البروتامين إلا كمية قليلة جدا جدا جدا لو لم تحدث
193
00:13:40,310 --> 00:13:44,760
هذه العملية عملية البروتامين replacement هيكون فيه
194
00:13:44,760 --> 00:13:47,800
end effect في الـ structure of DNA في الـ
195
00:13:47,800 --> 00:13:50,720
spermatogenesis، معناه الـ sperm لن يؤدي الوظيفة
196
00:13:50,720 --> 00:13:55,140
المطلوبة منه if this event don't occur probably
197
00:13:55,140 --> 00:13:58,240
endospermatozoa will retain more or save more
198
00:13:58,240 --> 00:14:01,460
histone than they should sperm DNA become more
199
00:14:01,460 --> 00:14:04,060
sensitive to damaging هذا الكلام اللي حكيته قبل
200
00:14:04,060 --> 00:14:07,560
بشوية إنه يجب أن تتم عملية استبدال الهستون
201
00:14:07,560 --> 00:14:11,300
بالبروتامين 1 وبروتامين 2 ويبقى الهستون بكمية
202
00:14:11,300 --> 00:14:14,830
قليلة جدا جدا جدا داخل ال sperm إذا لم تحدث هذه
203
00:14:14,830 --> 00:14:18,450
العملية، معناه إن الـDNA الموجود داخل الـSperm
204
00:14:18,450 --> 00:14:23,230
هيكون أكثر حساسية للتلف والتكسير طيب، شو اللي
205
00:14:23,230 --> 00:14:27,250
هيكسر؟ وشو هيخليه عرض للتلف؟ بقول الـDNA الـdamage
206
00:14:27,250 --> 00:14:31,090
can occur during spermatogenesis أكيد، but
207
00:14:31,090 --> 00:14:35,610
also during storage in epididymis or transport from
208
00:14:35,610 --> 00:14:39,310
one place to another يعني معنى آخر إن الـSperm
209
00:14:39,310 --> 00:14:43,950
طالما خُلق ولم يحدث له عن أي مشكلة خلال عمل التخليق
210
00:14:43,950 --> 00:14:49,470
أنه بيكون فيه أمان وفيه مكان مأمون عن المخاطر لأ
211
00:14:49,470 --> 00:14:53,150
ممكن يتعرض إلى external factor أو another factor
212
00:14:53,150 --> 00:14:56,330
خلال عملية التخزين في ال epididymis أو خلال عملية ال
213
00:14:56,330 --> 00:14:59,650
ejaculation أو خلال ال transfer من منطقة إلى منطقة
214
00:14:59,650 --> 00:15:04,020
يؤدي إلى تلفه يعني من أشهر العوامل التي تؤدي إلى
215
00:15:04,020 --> 00:15:07,460
DNA damage هي عبارة عن Oxidative Stress التي
216
00:15:07,460 --> 00:15:11,680
بتسميه OS شو يعني Oxidative Stress؟ ببساطة في
217
00:15:11,680 --> 00:15:15,160
أجسامنا في حاجة اسمها Free Radical وفي حاجة اسمها
218
00:15:15,160 --> 00:15:18,020
Antioxidant لازم يصير فيه balance ما بين ال
219
00:15:18,020 --> 00:15:23,200
antioxidant و ال free radical إذا صار في عندي
220
00:15:23,200 --> 00:15:26,200
imbalance ما بين ال free radical و ال antioxidant
221
00:15:26,200 --> 00:15:30,520
حيصير عندي حالة بنسميها oxidative stress oxidative
222
00:15:30,520 --> 00:15:33,460
stress is one of the most common intrinsic factors
223
00:15:33,460 --> 00:15:37,640
leading to sperm DNA damage but it may also result
224
00:15:37,640 --> 00:15:42,440
from pathogenic status of the reproductive system
225
00:15:42,440 --> 00:15:48,610
برجع بقول مرة ثانية ال Oxidative Stress ينتج من
226
00:15:48,610 --> 00:15:52,750
خلال عدم وجود اتزان ما بين كمية ال Antioxidant
227
00:15:52,750 --> 00:15:56,890
الموجودة في أجسامنا و ال Free Radical و الأكثر
228
00:15:56,890 --> 00:16:01,590
تخصيص عدم وجود اتزان ما بين كمية ال Antioxidant و
229
00:16:01,590 --> 00:16:04,470
ال Free Radical الموجودة في seminal fluid فواحد
230
00:16:04,470 --> 00:16:08,310
يزيد عن الثاني هيعطيني Oxidative Stress Oxidative
231
00:16:08,310 --> 00:16:12,620
Stress يعتبر من أشهر وأكثر الأسباب المسببة إلى
232
00:16:12,620 --> 00:16:16,800
تكسير وتلف المادة الوراثية الخاصة بال sperm ولكن
233
00:16:16,800 --> 00:16:21,940
هناك عوامل أخرى لها علاقة بالأمراض المتعلقة بال
234
00:16:21,940 --> 00:16:28,680
Male Reproductive System حوالي 25% زيادة من ال
235
00:16:28,680 --> 00:16:33,940
reactive oxidase species التي سميناها free radical
236
00:16:33,940 --> 00:16:38,030
25% increase in seminal معنى ال Reactive Oxygen
237
00:16:38,030 --> 00:16:43,070
Species Level مرتبط ب 10% تزيد في عدد ال Sperm
238
00:16:43,070 --> 00:16:47,190
DNA Fragmentation يعني عندي لو زاد ال Reactive
239
00:16:47,190 --> 00:16:53,050
Oxygen Species التي سميناها Free Radical 25% ستكون
240
00:16:53,050 --> 00:16:59,970
سبب في تدمير 10% من ال Sperm DNA تحت مصطلح DNA
241
00:16:59,970 --> 00:17:04,790
Fragmentation بمعدل 10% DNA Damage can affect both
242
00:17:04,790 --> 00:17:09,940
Nuclear DNA و Mitochondrial DNA يعني بمعنى آخر أن
243
00:17:09,940 --> 00:17:13,760
ال Oxidative Stress لن يؤثر فقط على ال Nucleic
244
00:17:13,760 --> 00:17:16,500
Acid الموجودة في ال head، في ال Nuclear ولكن
245
00:17:16,500 --> 00:17:19,040
هيؤثر أيضًا على ال Nucleic Acid الموجودة في ال
246
00:17:19,040 --> 00:17:23,300
Mitochondria Oxidative Stress induced damage to
247
00:17:23,300 --> 00:17:27,180
Nuclear DNA may accelerate germ cell apoptosis
248
00:17:27,180 --> 00:17:30,300
leading to decline in sperm production and
249
00:17:30,300 --> 00:17:35,080
consequently decrease sperm count in ejaculation لو
250
00:17:35,080 --> 00:17:38,440
حصل فيه stress أكسدة سيدمر ال DNA الموجودة في
251
00:17:38,440 --> 00:17:42,120
نواة ال sperm فبالتالي سيتعرض ال sperm إلى
252
00:17:42,120 --> 00:17:46,120
Apoptosis معناه سيصير نقصان في عدد ال sperm
253
00:17:46,120 --> 00:17:50,760
الموجودة في ال ejaculation معناه في عندي ببساطة جدا
254
00:17:50,760 --> 00:17:54,640
نقصان في كمية ال sperm المخلقة معناه في عندي نقصان
255
00:17:54,640 --> 00:17:58,780
في ال sperm count يعني one step another step go to
256
00:17:58,780 --> 00:18:02,080
another step a positive sum study
257
00:18:13,420 --> 00:18:18,640
معناه زيادة ال sperm DNA fragmentation متعلق
258
00:18:18,640 --> 00:18:22,440
بزيادة ال abnormal في ال sperm morphology و
259
00:18:22,440 --> 00:18:26,820
بالذات في ال sperm ثاني في دراسة أخرى قالت إنه في
260
00:18:26,820 --> 00:18:30,800
عندي higher incidence of aneuploidy in man in men
261
00:18:30,800 --> 00:18:34,520
or males with high sperm DNA fragmentation ال
262
00:18:34,520 --> 00:18:40,120
incidence تبع الانبلويدي في الذكور بيزيد لو زاد
263
00:18:40,120 --> 00:18:46,160
عندي ال DNA fragmentation هذه شكل آخر ودراسة أخرى
264
00:18:46,160 --> 00:18:50,800
وجدت أن ال higher incidence of aneuploidy في الذكور
265
00:18:50,800 --> 00:18:58,480
مرتبط بال high sperm DNA fragmentation صورة توضح
266
00:18:58,480 --> 00:19:02,580
الكلام التي اتكلمنا عنه هذا ال sperm في أعلى ال
267
00:19:02,580 --> 00:19:06,000
slide sperm، normal sperm بيصير له capacitation
268
00:19:06,000 --> 00:19:09,260
بيصير عندي acrosome reaction بيصير عندي
269
00:19:09,260 --> 00:19:12,880
hyperactivation يعني بيصير عندي fertilization ما
270
00:19:12,880 --> 00:19:15,960
بيصير fertilization إلا إذا صارت capacitation وهو
271
00:19:15,960 --> 00:19:19,900
تحول ال sperm إلى completely mature sperm بعدين
272
00:19:19,900 --> 00:19:23,960
بيصير acrosome reaction من خلال اتصال ال sperm مع
273
00:19:23,960 --> 00:19:26,440
ال receptor الموجودة في zona pellucida رقم 3
274
00:19:26,440 --> 00:19:30,430
وإفراز إنزيماته الهاضمة بعدين بيصير ال
275
00:19:30,430 --> 00:19:33,950
hyperactivation وهي عبارة عن زيادة الحركة مما
276
00:19:33,950 --> 00:19:36,630
يسمح لل sperm باختراق ال oocyte بيصير
277
00:19:36,630 --> 00:19:40,510
fertilization تصور صار عندك imbalance ما بين ال
278
00:19:40,510 --> 00:19:43,710
free radical reactive oxygen species و ال
279
00:19:43,710 --> 00:19:47,790
antioxidant هتعطيلي حالة بنسميها oxidative stress
280
00:19:47,790 --> 00:19:51,570
هذا ال oxidative stress مصدرها قد يكون أسبابها
281
00:19:51,570 --> 00:19:55,830
خارجية زي الـ smoking زي الـ radiation زي الكحول و
282
00:19:55,830 --> 00:19:59,400
زي المواد التكسيدية وقد تكون داخلية زي الـ
283
00:19:59,400 --> 00:20:04,060
Varicosel دوال الخصية زي الـ Leukocyte زيادة في
284
00:20:04,060 --> 00:20:06,700
عدد Leukocyte يعني الـ inflammation وزي الـ
285
00:20:06,700 --> 00:20:11,600
immature spermatozoa خدوا بالكم النقطة التهاب
286
00:20:11,600 --> 00:20:16,460
وزيادة عدد الحيوانات المنوية الغير ناضجة يؤدي إلى
287
00:20:16,460 --> 00:20:20,080
زيادة عدد الرُس زيادة عدد الرُس تعتبر من أهم
288
00:20:20,080 --> 00:20:23,840
العوامل التي تؤدي إلى الـ oxidative stress طب صار
289
00:20:23,840 --> 00:20:27,890
في oxidative stress إيش هيسوي؟ هيعمل على تعطيل الـ
290
00:20:27,890 --> 00:20:31,410
physiological rules الخاصة بالـ sperm هتعطل
291
00:20:31,410 --> 00:20:34,810
الـ capacitation، هتعطل الـ acrosome reaction، هتعطل
292
00:20:34,810 --> 00:20:38,070
الـ hyperactivity، يعني مافيه fertilization أضف إلى
293
00:20:38,070 --> 00:20:42,310
ذلك، هتعمل apoptosis، هتعمل DNA damage على الـ صحيح
294
00:20:42,310 --> 00:20:47,590
DNA، هتعمل مشاكل في الـ lipid protein الموجودة
295
00:20:47,850 --> 00:20:52,730
في الـ peroxidation الخاصة بالـ sperm فبالتالي الـ
296
00:20:52,730 --> 00:20:57,070
infertility بتكون أقرب في هذه الحالة إلى الذكورة
297
00:20:57,070 --> 00:21:01,030
Alteration in mitochondria sperm DNA mainly led to
298
00:21:01,030 --> 00:21:04,470
impaired mitochondrial function those resulting in
299
00:21:04,470 --> 00:21:08,030
the homotility abnormality, hyperactivity
300
00:21:08,030 --> 00:21:11,310
abnormality, inability to fertilization يعني بمعنى
301
00:21:11,310 --> 00:21:16,030
آخر ليس الخطر مرتبط بالدمج في الـ sperm nuclear DNA
302
00:21:16,510 --> 00:21:19,990
ولكن لو حد رزد دمش في الـ sperm mitochondrial DNA، هذا
303
00:21:19,990 --> 00:21:22,670
معناه هيوقف الـ motility، هتكون الـ motility غير
304
00:21:22,670 --> 00:21:28,610
متكافئة، غير سليمة، غير صحيحة، غير مطلوبة الـ
305
00:21:28,610 --> 00:21:32,570
hyperactivity هيصير فيها defect، هيصير غير قادر
306
00:21:32,570 --> 00:21:35,970
على الـ fertilization زي ما شفنا في الـ slide السابق
307
00:21:45,480 --> 00:21:54,500
الفرصة اللي تبقى
308
00:21:54,500 --> 00:21:58,060
محدودة
309
00:21:58,060 --> 00:22:01,000
في الـ sperm DNA لإصلاح المزيد من المزيد من المزيد
310
00:22:01,000 --> 00:22:03,160
من المزيد من المزيدو Damage في الـ DNA معناه
311
00:22:03,160 --> 00:22:06,260
البروتينات الموجودة في الـ Sperm هتفقد وظيفتها
312
00:22:06,260 --> 00:22:10,200
معناه الـ Sperm هيفقد وظيفته The available method
313
00:22:10,200 --> 00:22:13,280
we can use it to detect the DNA damage
314
00:22:13,280 --> 00:22:17,080
fragmentation or apoptosis عندي تلت طرق Measured
315
00:22:17,080 --> 00:22:22,400
DNA damage by incorporating DNA probe Measured the
316
00:22:22,400 --> 00:22:26,580
sensitivity of DNA to denaturation indirect
317
00:22:26,580 --> 00:22:30,300
measures of level chromatin compaction هذه التلت
318
00:22:30,300 --> 00:22:34,640
عوامل أساسية هناخد تنتين مهمين جدا و لازم يتم
319
00:22:34,640 --> 00:22:39,080
إجراءهم في مراكز التوضيح الصناعي So what is the
320
00:22:39,080 --> 00:22:42,620
type of DNA damage؟ according to the type بقدر
321
00:22:42,620 --> 00:22:46,380
أحدد الـ test أول حاجة DNA fragmentation والـ DNA
322
00:22:46,380 --> 00:22:50,380
Fragmentation في عوامل أخرى كثيرة تساهم فيه منها
323
00:22:50,380 --> 00:22:53,220
الـ Intrinsic أو الـ Extrinsic Factor الـ
324
00:22:53,220 --> 00:22:56,600
Intrinsic Factor التي تؤدي إلى DNA Fragmentation
325
00:22:56,600 --> 00:23:01,980
والذي يعتبر أحد أنواع الـ DNA Damaged Epitosis and
326
00:23:01,980 --> 00:23:05,620
Oxidative Stress وحكينا عنها الـ Defect في الـ
327
00:23:05,620 --> 00:23:08,140
Protamination وهي عملية استبدال الـ Histone
328
00:23:08,140 --> 00:23:13,220
بالبروتامين لأن وجود البروتامين مهم جدا لحماية DNA
329
00:23:13,220 --> 00:23:17,480
of spermatozoa Insufficient chromatin remodeling
330
00:23:17,480 --> 00:23:20,780
خلل في الـ spermatogenesis إذا الأربع عوامل
331
00:23:20,780 --> 00:23:26,400
الأساسية تصنف intrinsic factor تعمل على و تساهم في
332
00:23:26,400 --> 00:23:30,420
حدوث الـ DNA fragmentation الذي يعتبر أحد أنواع
333
00:23:30,420 --> 00:23:33,830
الـ DNA damage العوامل الأخرى بنسميها external
334
00:23:33,830 --> 00:23:38,530
factors زي الـ life style زي الـ diet و الـ drug
335
00:23:38,530 --> 00:23:43,110
consuming و الـ tobacco، cigarette smoking، الشيشة،
336
00:23:43,110 --> 00:23:46,330
الـ advancing age زيادة العمر، الـ environment
337
00:23:46,330 --> 00:23:50,770
exposure زي الـ pesticide و الـ pollution، بعض الـ
338
00:23:50,770 --> 00:23:53,430
medical history زي الـ inflammation و الفارقوسيل و
339
00:23:53,430 --> 00:23:58,420
الـ cancer دول الأربع يعتبروا external factor تساهم
340
00:23:58,420 --> 00:24:02,600
في إحداث DNA fragmentation الذي يعتبر أحد أنواع
341
00:24:02,600 --> 00:24:08,360
الـ DNA damage صورة بتوضح الكلام اللي احنا اتكلمنا
342
00:24:08,360 --> 00:24:14,220
عنه في sperm and sperm DNA damage بيصير بفعل أول
343
00:24:14,220 --> 00:24:18,480
حاجة الـ aging advanced aging infection cancer
344
00:24:18,480 --> 00:24:24,360
toxic material radiation pollution Caffeine Intake
345
00:24:24,360 --> 00:24:30,100
Body Mass Index Malnutrition Poor Diet Alcohol
346
00:24:30,100 --> 00:24:34,560
Stress Smoking Increase in testicular temperature
347
00:24:34,560 --> 00:24:37,360
و البركوسيلة عشان كده الناس اللي بتشتغل في المخابز
348
00:24:37,360 --> 00:24:40,520
القديمة و الناس اللي بتشتغل في مصانع الاسفنج و
349
00:24:40,520 --> 00:24:43,560
بتتعرض لكمية كبيرة جدا من الحرارة بتكون أقرب للـ
350
00:24:43,560 --> 00:24:48,700
infertility بفيها الحدوث اتدمج في الـ DNA طبعا مهم
351
00:24:48,700 --> 00:24:52,640
جدا نعرف على هذه العوامل اللي قسمها Intrinsic
352
00:24:52,860 --> 00:24:57,400
و extrinsic factor أكثر انتشاراً الـ extrinsic
353
00:24:57,400 --> 00:25:01,860
factor هي الأكثر انتشارا من أشهر الفحوصات التي
354
00:25:01,860 --> 00:25:05,860
يمكن أن تستخدم بتحديد الـ DNA fragmentation هي عبارة
355
00:25:05,860 --> 00:25:09,400
عن فحص بنسميه Tunnel فحص Tunnel هو عبارة عن
356
00:25:09,400 --> 00:25:12,800
Microscopic Detection للأبيبتوسس فحص Tunnel هو
357
00:25:12,800 --> 00:25:17,240
عبارة عن Microscopic Detection للأبيبتوسس شو الـ
358
00:25:17,240 --> 00:25:21,320
مبدأ الأساسي الخاص فيه؟ ببساطة جدا، this assay
359
00:25:21,320 --> 00:25:27,580
is based on the labeling of 3'3-hydroxyl-M of the
360
00:25:27,580 --> 00:25:32,770
fragmented DNA with fluorescence dUTP catalyzed by
361
00:25:32,770 --> 00:25:36,930
terminal dUTP يعني بمعنى آخر، لو أنا فيه عندي
362
00:25:36,930 --> 00:25:40,670
الـ DNA الخاص بالـ Spermatozoa الموجودة في الهدف، لو
363
00:25:40,670 --> 00:25:46,410
صار لها Fragmentation، هيصير عندي Free OH الموجودة على
364
00:25:46,410 --> 00:25:50,770
الـ 3 Prime الـ Free OH الموجودة على الـ 3 Prime
365
00:25:50,770 --> 00:25:57,390
تعتبر كمكان مميز ومكان as mark indicator على وجود
366
00:25:57,390 --> 00:26:01,190
الـ Fragmentation ففي صبغة ممكن ترتبط مع هذا
367
00:26:01,190 --> 00:26:06,870
المكان و تعطيني fluorescent dye الـ dUTP مميز مع
368
00:26:06,870 --> 00:26:10,050
الـ fluorescent probe نستطيع اتجاهه باستخدام
369
00:26:10,050 --> 00:26:13,910
ميكروسكوب fluorescent أو فلو سايتوميتر الوصول
370
00:26:13,910 --> 00:26:18,150
للسيجنال الطبيعي سيكون مرتبط بقيمة الـ Strand
371
00:26:18,150 --> 00:26:23,930
Breaks والتي ستتفكر كمية الـ sperm DNA باختصار
372
00:26:23,930 --> 00:26:28,850
شديد الـ Tunnel هو عبارة عن تحس يستخدم لقياس مدى
373
00:26:28,850 --> 00:26:32,310
الـ Apoptosis أو الـ DNA Fragmentation في الـ
374
00:26:32,310 --> 00:26:36,870
spermatozoa DNA من خلال أن في مادة موجودة في هذا
375
00:26:36,870 --> 00:26:42,560
الـ reagent لها قابلية للارتباط مع الـ OH الـ Free
376
00:26:42,560 --> 00:26:46,440
الموجودة على الـ 3 Prime من أين أجت أن عند Double
377
00:26:46,440 --> 00:26:50,960
Strand DNA صارها Fragmentation أدت إلى وجود Free
378
00:26:50,960 --> 00:26:55,280
OH موجودة على الـ 3 Prime ترتبط بهذه المادة المادة
379
00:26:55,280 --> 00:27:02,000
هذه مرتبطة بـ Fluorescent Probe إذا عرضت للـ UV أو
380
00:27:02,000 --> 00:27:06,220
لـ Fluorescent Microscope أو لـ Fluorescent Microscope هشوفها
381
00:27:06,220 --> 00:27:10,320
تحت الميكروسكوب فممكن أقرأها ببساطة جدا على هيئة
382
00:27:10,320 --> 00:27:15,640
percentage في علاقة ما بين عدد الـ indicator التي
383
00:27:15,640 --> 00:27:19,320
تظهر عدد الـ flow التي تظهر عدد الـ light التي
384
00:27:19,320 --> 00:27:21,920
ignition light التي تظهر الـ emission light التي
385
00:27:21,920 --> 00:27:28,860
تظهر و نسبة الـ apoptosis كل ما زاد .. كل ما زاد الـ
386
00:27:28,860 --> 00:27:34,020
signal معناه في عندي عدد كبير من الـ DNA apoptosis
387
00:27:34,020 --> 00:27:38,550
أو الـ DNA fragmentation صورة بتوضح الكلمة ده هاي في
388
00:27:38,550 --> 00:27:42,550
عندي sperm double strand يعني صار في عندي break في
389
00:27:42,550 --> 00:27:46,310
الـ double strand أدت إلى تكوين OH3 على الـ 3 prime
390
00:27:46,310 --> 00:27:52,050
عملتلها mixing بالـ TUNEL kit فلجيت أنه في عند الـ
391
00:27:52,050 --> 00:27:57,010
TdT enzyme ارتبط فيها ومربوط بالـ Fluoro Scan لو
392
00:27:57,010 --> 00:27:59,630
عرضته لـ flow cytometer أو fluorescent microscope
393
00:27:59,630 --> 00:28:03,150
هتعطيني emission لونه green الـ emission أو light
394
00:28:03,150 --> 00:28:07,610
لونه green light لونه green يتناسب تناسباً طردياً
395
00:28:07,610 --> 00:28:11,470
مع عدد الحيوانات المنوية التي بها defect أو بها
396
00:28:11,470 --> 00:28:17,470
apoptosis الصورة أفضل دالين هي عندي صورة الـ
397
00:28:17,470 --> 00:28:24,130
background black وفي عندي لونين لون pale green
398
00:28:24,130 --> 00:28:29,090
فاتح أخضر فاتح و لون dark green الـ dark green
399
00:28:29,090 --> 00:28:31,930
معناه tone positive ماذا يعني الـ tone الـ
400
00:28:31,930 --> 00:28:35,170
positive؟ معناه إنه في صار في عندي Fragmentation
401
00:28:35,170 --> 00:28:40,070
ارتبطت الـ probe مع الـ OH الـ 3 الموجودة على الـ 3
402
00:28:40,070 --> 00:28:44,810
prime معناه إذا عرضتها لفلورسانت مايكروسكوب أو
403
00:28:44,810 --> 00:28:49,570
الـ FluoroScan هيعطيني signal light لونه green كل ما
404
00:28:49,570 --> 00:28:53,110
زاد الـ intensity للـ green color معناه في عندي كمية
405
00:28:53,110 --> 00:28:56,610
Fragmentation أعلى أما الـ pale color معناه الـ tone
406
00:28:56,610 --> 00:28:59,740
الـ negative يعني مافي عندي Fragmentation هنا ما في
407
00:28:59,740 --> 00:29:04,200
OH3 يرتبط فيها الـ probe هنا عشان كده بقوللي
408
00:29:04,200 --> 00:29:06,740
TUNEL Assay for Detection of Sperm DNA
409
00:29:06,740 --> 00:29:13,060
Fragmentation Under Fluorescent Microscope الـ
410
00:29:13,060 --> 00:29:16,640
Normal DNA هيديني الـ Light Green عشان كده بسميه
411
00:29:16,640 --> 00:29:19,920
TUNEL Negative بينما الـ Damaged DNA أو الـ
412
00:29:19,920 --> 00:29:24,940
Apoptosis Sperm هيعطيني Bright أو Dark Green وهو
413
00:29:24,940 --> 00:29:29,740
عبارة عن الـ TUNEL الـ Positive عن الـ TUNEL
414
00:29:29,740 --> 00:29:34,860
positive طبعاً هذا هي عبارة عن الفكرة ما بين الـ
415
00:29:34,860 --> 00:29:38,160
TUNEL positive والـ TUNEL الـ negative الخاصة
416
00:29:38,160 --> 00:29:42,120
بقياس الـ Fragmentation Sperm يعني Fragmentation أو
417
00:29:42,120 --> 00:29:50,660
Sperm Apoptosis سنكتفي
418
00:29:50,660 --> 00:29:55,000
بهذا القدر من المعلومات في هذه المحاضرة على أمل أن
419
00:29:55,000 --> 00:29:59,280
نتقي في المحاضرة القادمة إن شاء الله Dom Tom في حفظ
420
00:29:59,280 --> 00:29:59,420
الله
Okay, please provide the Arabic/English lecture transcript that you would like me to review and correct for typos and grammatical errors.
I will ensure that I:
* **Focus on typos and grammar only.**
* **Preserve the original Arabic and English dialect and grammar.**
* **Maintain the original meaning and style of the text.**
* **Provide the corrected transcript ONLY in the same format as the input.**
* **Keep the text in the original language.**
I am ready to assist you with correcting your lecture transcript. Just paste the text and I will get to work!