1 00:00:01,420 --> 00:00:05,520 طيب الجزء الآخر fractionation, identification and 2 00:00:05,520 --> 00:00:10,920 quantitation of specific proteins طبعا بكيف ممكن 3 00:00:10,920 --> 00:00:17,920 نحدد الـ fractions المختلفة لـ الـ proteins الموجودة 4 00:00:17,920 --> 00:00:26,360 في الـ serum الآن عندنا ممكن نحسب الـ ratio لـ الـ 5 00:00:26,360 --> 00:00:31,610 proteins ونحسب اللي هو الـ albumin to globulin 6 00:00:31,610 --> 00:00:37,370 ratio وحساب هذه الـ ratio فعليا ممكن من خلالها نحصل 7 00:00:37,370 --> 00:00:43,490 على useful diagnostic information. A significant 8 00:00:43,490 --> 00:00:46,770 change in the ratio can point to specific diseases. 9 00:00:46,770 --> 00:00:52,310 وإذا كان صار في أنه تغير في هذه النسبة هذا مرتبط 10 00:00:52,310 --> 00:00:58,630 في يعني بعض الأمراض بعض specific diseases. طيب الآن 11 00:00:58,630 --> 00:01:05,350 كيف ممكن نحسب هذه الـ ratio؟ الآن احنا عارفين أن الـ 12 00:01:05,350 --> 00:01:11,090 total protein هو عبارة عن albumin زائد globulins. 13 00:01:11,090 --> 00:01:16,930 الـ total protein بتكون من الـ albumin زائد الـ 14 00:01:16,930 --> 00:01:21,910 globulins. طيب يبقى إذا كان احنا بدنا نشوف كمية 15 00:01:21,910 --> 00:01:28,050 الـ globulins الموجودة يبقى بدنا نحسب الـ 16 00:01:28,050 --> 00:01:33,750 total protein وممكن نحسب الـ albumin ونطرح 17 00:01:33,750 --> 00:01:37,030 total protein نقص الـ albumin ومنها نحصل على الـ 18 00:01:37,030 --> 00:01:43,630 globulins. إذا كان حسبنا شغلتين ممكن نحسب يعني عملنا 19 00:01:43,630 --> 00:01:46,710 analysis وحددنا الـ concentration لـ الـ proteins 20 00:01:46,710 --> 00:01:49,410 اللي هو الـ total protein و الـ albumin ممكن نحسب 21 00:01:49,410 --> 00:01:54,840 اللي هو الـ globulin. أولًا حسبنا الـ total protein و 22 00:01:54,840 --> 00:01:58,560 الـ globulins ممكن نحسب كمية الـ albumin 23 00:01:58,560 --> 00:02:03,340 الموجودة. الآن إذا كان حددنا الـ total protein زي ما 24 00:02:03,340 --> 00:02:08,960 قلنا باستخدام الـ Biuret reagent و حددنا كمية 25 00:02:08,960 --> 00:02:11,220 الـ albumin باستخدام reagent اللي يسمى 26 00:02:11,220 --> 00:02:16,300 بروموكريزول جرين يبقى ممكن نحسب كمية الـ globulin 27 00:02:16,300 --> 00:02:20,820 وبالتالي ممكن نحسب الـ albumin to globulin ratio. 28 00:02:24,770 --> 00:02:29,390 الآن زي ما قلنا تحديد هذه الـ ratio يعني بتعطيني 29 00:02:29,390 --> 00:02:35,670 diagnostic significance. The albumin to globulin ratio may 30 00:02:35,670 --> 00:02:40,570 reflect إذا كان كان عندنا انخفاض في الـ ratio يبقى 31 00:02:40,570 --> 00:02:45,290 هذا ممكن يكون بسبب الـ over production of globulins. 32 00:02:45,290 --> 00:02:51,330 إذا انخفضت النسبة زي عندنا بسط عندنا مقام إذا 33 00:02:51,330 --> 00:02:56,300 المقام الكمية تبعته زادت يبقى أكيد الـ ratio هتنخفض. 34 00:02:56,300 --> 00:03:00,440 تمام، و المقام هو الـ globulins يبقى إذا كان زاد 35 00:03:00,440 --> 00:03:03,820 عندنا إنتاج لـ globulins يبقى هذا هيؤدي إلى انخفاض 36 00:03:03,820 --> 00:03:07,560 في الـ ratio وهذا وين ممكن يصير؟ ممكن يصير في حالات 37 00:03:07,560 --> 00:03:12,060 الـ multiple myeloma أو في حالات الـ autoimmune 38 00:03:12,060 --> 00:03:16,780 diseases. طيب الآن شغلة تانية اللي ممكن تؤدي إلى 39 00:03:16,780 --> 00:03:22,200 انخفاض الـ ratio أنه لو قل عندنا البسط إذا كانت الـ 40 00:03:22,200 --> 00:03:27,840 concentration قليلة، ستقل الـ ratio وهذا ممكن يحدث 41 00:03:27,840 --> 00:03:31,920 في حالات مثل الـ cirrhosis اللي هو التليف الكبد 42 00:03:31,920 --> 00:03:36,080 أيضا selective loss of albumin from the 43 00:03:36,080 --> 00:03:41,860 circulation as may occur with kidney disease. اه في 44 00:03:41,860 --> 00:03:44,540 مرض اللي من أمراض الكلى يسمى nephrotic syndrome 45 00:03:44,540 --> 00:03:48,460 وإيه هذا بيصير فيه أنه فقد للبروتينات والكمية 46 00:03:48,460 --> 00:03:51,880 الأكبر من الـ proteins اللي بتنفقدها هي الـ albumin 47 00:03:51,880 --> 00:03:56,260 تمام. بيجي هذه برضه هيصير فيه أنه فقد كمية كبيرة لـ 48 00:03:56,260 --> 00:04:02,460 الـ albumin يبقى هينخفض عندنا الـ بسط وبالتالي الـ 49 00:04:02,460 --> 00:04:08,640 ratio أيضا هتقل. عندنا حالات أخرى اللي بيزيد عندنا 50 00:04:08,640 --> 00:04:12,330 الـ albumin to globulin ratio وهذا بدى يصير في 51 00:04:12,330 --> 00:04:17,670 حالات الـ under production of immunoglobulins انه 52 00:04:17,670 --> 00:04:23,790 يصير فيه انه انخفاض في الـ globulins تمام؟ و ضمن الـ 53 00:04:23,790 --> 00:04:26,370 globulins عندنا الـ immunoglobulins اللي هو الـ 54 00:04:26,370 --> 00:04:33,230 antibodies اه يبقى إذا كان انخفض عندنا المقام يبقى 55 00:04:33,230 --> 00:04:38,010 معناته الراشيو هذه هترتفع. و الـ under production of 56 00:04:38,010 --> 00:04:40,890 immunoglobulins may be seen in some genetic 57 00:04:40,890 --> 00:04:44,610 deficiencies and in some leukemias. يعني ببعض 58 00:04:44,610 --> 00:04:47,570 الأمراض الوراثية ممكن يكون في أنه انخفاض في الـ 59 00:04:47,570 --> 00:04:51,050 concentration لـ الـ immunoglobulins أو في بعض أمراض 60 00:04:51,050 --> 00:04:58,060 سرطان الدم. طبعا إن الـ ratio الـ normal ratio الـ 61 00:04:58,060 --> 00:05:06,600 albumin لـ الـ globulins هي 1.24 لـ 2.36. هذه الـ normal 62 00:05:06,600 --> 00:05:12,880 ratio. طيب، 63 00:05:12,880 --> 00:05:19,820 الآن كيف ممكن احنا نفصل المكونات؟ ممكن نفصل 64 00:05:19,820 --> 00:05:22,860 البروتينات عن طريق الـ salt fractionation 65 00:05:24,150 --> 00:05:27,590 Fractionation of proteins done using precipitation 66 00:05:27,590 --> 00:05:33,750 يا ممكن باستخدام concentration معينة من الأملاح من 67 00:05:33,750 --> 00:05:40,070 الـ salts نعمل precipitation لنوع من الـ proteins 68 00:05:40,070 --> 00:05:47,930 تمام، ويظل عندنا في الـ supernatant النوع الآخر و 69 00:05:47,930 --> 00:05:52,630 باستخدام concentration معينة من الـ salts اه هيبدأ 70 00:05:52,630 --> 00:05:58,910 الـ globulin تترسب لأنه لما نيجي احنا ندوب salt في 71 00:05:58,910 --> 00:06:02,950 المحلول اللي كانت ذائبة فيه البروتينات هيبدأ الـ 72 00:06:02,950 --> 00:06:08,130 salt ياخد من الـ bonds اللي متكونة بين البروتين 73 00:06:08,130 --> 00:06:13,910 وبين الـ solvent تمام؟ هيبدأ الـ ... الـ ... الأملاح 74 00:06:13,910 --> 00:06:18,140 هذه تبدأ ترتبط مع الـ ... الـ solvent تمام وبالتالي 75 00:06:18,140 --> 00:06:22,100 تاخد من الـ bonds اللي كانت بين البروتين وبين هذا 76 00:06:22,100 --> 00:06:25,700 الـ solvent وبالتالي هيبدأ يصير فينا بروتين بروتين 77 00:06:25,700 --> 00:06:29,520 interaction وهيبدأ يصير فينا precipitation 78 00:06:29,520 --> 00:06:36,200 للبروتين. طبعا هان احنا بنتحكم في الـ concentration 79 00:06:36,200 --> 00:06:39,540 للـ salt يعني different salt concentrations ممكن 80 00:06:39,540 --> 00:06:44,680 يعمللي precipitation لـ different proteins. يبقى الـ 81 00:06:44,680 --> 00:06:48,820 globulins are separated from by salting out 82 00:06:48,820 --> 00:06:53,640 using sodium salt to cause precipitation of 83 00:06:53,640 --> 00:06:59,620 the globulins. بهيك احنا رسبنا الـ globulins تمام و 84 00:06:59,620 --> 00:07:05,160 بيظل عندنا في الـ supernatant الـ albumin هو الموجود 85 00:07:05,160 --> 00:07:10,180 تمام و الـ albumin ممكن انقيزه باستخدام الـ routine 86 00:07:10,180 --> 00:07:15,250 total protein method تمام لأن احنا الآن إذا كان 87 00:07:15,250 --> 00:07:18,950 أخدنا الـ supernatant واستخدمنا على سبيل المثال 88 00:07:18,950 --> 00:07:20,890 اللي هي الطريقة اللي طبعا حكينا عليها اللي هو الـ 89 00:07:20,890 --> 00:07:24,890 Biuret reagent وقصنا الـ total protein في هذه 90 00:07:24,890 --> 00:07:29,070 الحالة الـ total protein هيمثل فقط الـ albumin اللي 91 00:07:29,070 --> 00:07:31,430 موجود في الـ supernatant. 92 00:07:33,290 --> 00:07:37,370 السلطة ليست مستعملة اليوم لأن هناك طرق مستعملة 93 00:07:37,370 --> 00:07:42,850 تتعامل مع الـ albumin في مزيج من الـ protein يمكن 94 00:07:42,850 --> 00:07:52,030 استخدامها حاليًا لأن هناك مجال مستخدم يسمى برومو 95 00:07:52,030 --> 00:07:53,250 كريزول جرين. 96 00:07:59,790 --> 00:08:02,910 الألبومين ميجرمنت يعني بجهة دي برضه طريقة. يبقى زي 97 00:08:02,910 --> 00:08:06,610 ما شوفنا أنه توي عملنا separation لـ الـ globulins عن 98 00:08:06,610 --> 00:08:09,890 الألبومين. طيب الآن ممكن نقيس الـ albumin. 99 00:08:09,890 --> 00:08:12,310 Measurement: Most widely used methods for 100 00:08:12,310 --> 00:08:15,950 determining albumin are dye binding procedures. زي 101 00:08:15,950 --> 00:08:23,190 ما قلنا باستخدام اللي هو bromocresol green. pH 102 00:08:23,190 --> 00:08:26,690 of the solution is adjusted so that albumin is 103 00:08:26,690 --> 00:08:32,790 positively charged. حسب الـ pH زي ما قلنا سابقا 104 00:08:32,790 --> 00:08:35,590 أن الـ pH بتأثر على إيش الشحنة الموجودة على 105 00:08:35,590 --> 00:08:45,250 البروتين. يبقى الـ reagent اللي هنستخدمه هيكون الـ 106 00:08:45,250 --> 00:08:52,330 pH بتاعته تخلي الـ albumin positively charged. الآن 107 00:08:52,330 --> 00:08:56,650 الـ albumin اللي positively charged هينجذب لـ الـ dye 108 00:08:56,650 --> 00:09:00,800 الموجودة اه يبقى is attracted to and binds to an 109 00:09:00,800 --> 00:09:04,180 anionic dye اللي هو bromocresol green اللي حاكينا 110 00:09:04,180 --> 00:09:09,140 عليها. By electrostatic forces. الآن ارتباط الـ albumin 111 00:09:09,140 --> 00:09:13,140 مع هذه الـ dye برضه هيعمل لي shift في الـ absorption 112 00:09:13,140 --> 00:09:18,070 maximum لـ الـ dye. يبقى الـ free dye هيكون عندي الـ 113 00:09:18,070 --> 00:09:22,910 maximum absorbance بختلف عن الـ dye اللي مرتبطة مع 114 00:09:22,910 --> 00:09:30,690 الـ albumin. وعند 515 هو الـ maximum absorbance لـ الـ 115 00:09:30,690 --> 00:09:34,150 dye لوحدها لكن لما ترتبط مع الـ albumin بصير في عندي 116 00:09:34,150 --> 00:09:38,590 shift لـ الـ absorbance وبصير 620. 117 00:09:40,840 --> 00:09:44,100 بجه هذه الطريقة ممكن نحسب من خلالها الـ albumin 118 00:09:44,100 --> 00:09:47,800 concentration وطريقة الـ Biuret reagent نحسب 119 00:09:47,800 --> 00:09:52,020 فيها الـ total protein وبالتالي ممكن نحسب النقص الـ 120 00:09:52,020 --> 00:09:55,080 total protein من الـ albumin ونحصل على الـ globulins. 121 00:09:55,080 --> 00:10:00,340 عشان نشوف الـ albumin to globulin ratio. طيب، الآن 122 00:10:00,340 --> 00:10:05,530 طريقة أخرى ممكن نحسب الـ total globulins ونحسب الـ 123 00:10:05,530 --> 00:10:08,930 Total Protein ونطرح الـ Total Protein من الـ Total 124 00:10:08,930 --> 00:10:12,830 Globulins ممكن نحصل على الـ Albumin. يبقى another 125 00:10:12,830 --> 00:10:15,930 approach to fractionation of proteins is the 126 00:10:15,930 --> 00:10:21,330 measurement of total globulins. Albumin can then be 127 00:10:21,330 --> 00:10:23,610 calculated زي ما حكينا by subtraction of the 128 00:10:23,610 --> 00:10:29,410 globulin from total protein. ممكن نحسب الـ Total 129 00:10:29,410 --> 00:10:33,350 Globulin Level باستخدام Glycosidic Acid. 130 00:10:34,630 --> 00:10:41,430 والجليكوزيليك أسيد تتعامل مع تريبتوفان موجود في 131 00:10:41,430 --> 00:10:45,470 الجلوبيولين. عيبجة بيجي برتبط مع الـ tryptophan الموجود 132 00:10:45,470 --> 00:10:54,350 بالبروتينات وبيعطيني purple color. الـ albumin 133 00:10:54,350 --> 00:10:59,470 لديه تقريبا 0.2% تريبتوفان. هذه الميزة أنه 134 00:10:59,470 --> 00:11:03,550 بالألبومين عندي نسبة لـ tryptophan قليلة جدا، 0.2%. 135 00:11:03,550 --> 00:11:09,770 لكن الـ tryptophan في الـ globulins بتمثل 2 إلى 3%. 136 00:11:09,770 --> 00:11:14,950 وبالتالي النسبة أعلى بكثير. When calibrated using 137 00:11:14,950 --> 00:11:20,670 serum of known albumin and globulin concentrations 138 00:11:20,670 --> 00:11:26,150 the total globulins can be determined. Measurement 139 00:11:26,150 --> 00:11:28,770 of globulins based on their tryptophan content 140 00:11:28,770 --> 00:11:32,450 has never come into common use. يبقى برضه طريقة مش 141 00:11:32,450 --> 00:11:37,230 مستخدمة يعني أنا ليش أروح لطرق شوية يعني صعبة و 142 00:11:37,230 --> 00:11:40,990 معقدة مزال أنا عندي فيه طرق بسيطة اللي هو ال bio 143 00:11:40,990 --> 00:11:43,810 -retreat agent و زي ما قلنا ال bromocresol-green 144 00:11:43,810 --> 00:11:47,690 يعني هدول two methods بسيطين ممكن أنا من خلالهم 145 00:11:47,690 --> 00:11:51,310 أحسب ال total protein أحسب ال albumen و منها أحسب 146 00:11:51,310 --> 00:11:55,210 ال globulins وبالتالي أحسب ال albumin tooglobulin 147 00:11:55,210 --> 00:12:00,310 ratio طيب، 148 00:12:00,310 --> 00:12:06,690 الآن في عندنا تغيرات في fraction معينة من البروتين 149 00:12:06,690 --> 00:12:11,950 أو في بروتين معين هذا ممكن يغير أو يعمل 150 00:12:11,950 --> 00:12:18,630 abnormality في البروتين الآن من خلال الـ Serum 151 00:12:18,630 --> 00:12:21,170 Protein Concentration والـ Proportions Of The 152 00:12:21,170 --> 00:12:26,290 Individual Protein Fractions تمام ممكن هذا يعني 153 00:12:26,290 --> 00:12:34,430 يتغير زي ما قلنا يعني بسبب أمراض مختلفة طيب الآن 154 00:12:34,430 --> 00:12:36,790 when abnormality is found in the total protein 155 00:12:36,790 --> 00:12:40,610 other techniques can be used إذا كان أنا عندي 156 00:12:40,610 --> 00:12:43,390 مشكلة في الـ total protein زي ما قولنا إذا كان 157 00:12:43,390 --> 00:12:48,750 المشكلة يعني مش يعني عامة يعني إنه زي يكون عندي 158 00:12:48,750 --> 00:12:52,160 liver disease مثلا وبالتالي liver disease فأكيد في 159 00:12:52,160 --> 00:12:55,920 عندي انخفاض في ال proteins عندي مثلا malnutrition 160 00:12:55,920 --> 00:12:59,820 عندي malabsorption يبقى حيكون في عندي اللي هو يعني 161 00:12:59,820 --> 00:13:04,700 decrease في ال proteins ككل لكن في عندنا في بعض 162 00:13:04,700 --> 00:13:07,300 الأحيان ممكن يكون عندي ال total protein 163 00:13:07,300 --> 00:13:11,460 concentration abnormal مش طبيعية تمام لكن ما عنديش 164 00:13:11,460 --> 00:13:16,040 الحالات اللي حكينا عليها يبقى ممكن اللي يخلي ال ال 165 00:13:16,040 --> 00:13:19,400 total protein abnormal هو وجود مشكلة في protein 166 00:13:19,400 --> 00:13:28,760 معين تمام سواء بإنه زيادة أو ممكن في نقص يبقى الآن 167 00:13:28,760 --> 00:13:33,300 عشان نحدد احنا المشكلة موجودة في أي protein بنعمل 168 00:13:33,300 --> 00:13:36,860 electrophoresis بنعمل serum protein 169 00:13:36,860 --> 00:13:38,800 electrophoresis 170 00:13:40,970 --> 00:13:45,290 والآن زي ما قلنا من خلال الـ Ectophoresis بنقسم ال 171 00:13:45,290 --> 00:13:49,750 proteins اللي موجودة في ال serum إلى أكثر من peak 172 00:13:49,750 --> 00:13:54,290 زي ما شفنا فينا اللي هو pre albumin والألبومين وبعدين 173 00:13:54,290 --> 00:13:58,810 فينا ال alpha 1 و ال alpha 2 و ال beta و ال gamma 174 00:13:58,810 --> 00:14:02,050 يبقى هيك بنقسم احنا ال proteins اللي موجودة إلى 175 00:14:02,050 --> 00:14:07,960 different fractions والآن بيصير يعني إن الموضوع 176 00:14:07,960 --> 00:14:12,920 ممكن شوية أسهل إنه أشوف أنا أي fraction اللي فيها 177 00:14:12,920 --> 00:14:18,120 المشكلة اللي abnormal وابدأ أركز عليها وأشوف وين 178 00:14:18,120 --> 00:14:22,760 بالضبط المشكلة موجودة وفي أي protein اللي وضمن هذه 179 00:14:22,760 --> 00:14:26,300 ال fraction في عندي المشكلة 180 00:14:29,260 --> 00:14:33,400 يبقى بنعمل Electrophoresis وممكن نحدد زي ما قلنا 181 00:14:33,400 --> 00:14:38,180 المشكلة موجودة في أي fraction وبعد هيك ببدأ أنا 182 00:14:38,180 --> 00:14:41,920 طبعا بناء على حالة المريض ممكن بناء على ال 183 00:14:41,920 --> 00:14:45,640 symptoms بناء على ال history ممكن أبدأ أستخدم ال 184 00:14:45,640 --> 00:14:48,680 ال immunological techniques ل different 185 00:14:48,680 --> 00:14:52,660 proteins الموجودة في هذه ال fraction اللي طبعا 186 00:14:52,660 --> 00:14:56,060 فيها مشكلة أو abnormal 187 00:15:04,310 --> 00:15:08,610 تمام يبقى عندنا ال .. عملنا ال total protein ال 188 00:15:08,610 --> 00:15:11,450 total protein طلعت abnormal اجينا عملنا 189 00:15:11,450 --> 00:15:17,670 electrophoresis وقسمنا أو فصلنا ال fractions 190 00:15:17,670 --> 00:15:22,390 المختلفة الآن بشوف أنا ال .. المشكلة موجودة بأي 191 00:15:22,390 --> 00:15:26,050 fraction تمام؟ هل موجودة في ال album؟ هل موجودة 192 00:15:26,050 --> 00:15:27,910 بال alpha one؟ بال alpha two؟ بال beta أو بال 193 00:15:27,910 --> 00:15:31,970 gamma؟ وبعد هيك المشكلة إذا كانت موجودة بالـAlpha 194 00:15:31,970 --> 00:15:35,610 -1 زي ما قلنا بنركز يبقى على الـAlpha-1 وإيش 195 00:15:35,610 --> 00:15:40,030 البروتينز الموجودة بالـAlpha-1 وزي ما قلنا إيش 196 00:15:40,030 --> 00:15:43,390 البروتينز اللي ممكن أنا أقيسها وأشوف إذا كان فيها 197 00:15:43,390 --> 00:15:50,690 مشكلة أو لأ A quantitation of total serum protein 198 00:15:50,690 --> 00:15:53,970 and its individual fractions is of value on the 199 00:15:53,970 --> 00:15:57,430 diagnosis of certain acute and chronic disorders 200 00:15:58,800 --> 00:16:01,220 Plasma proteins are often still classified into 201 00:16:01,220 --> 00:16:04,840 groups according to their electrophoretic mobility 202 00:16:04,840 --> 00:16:08,900 كما قلنا هو الألبوم الـ α1 و الـ α2 و الـ Beta و 203 00:16:08,900 --> 00:16:13,420 الـ Gamma الآن احنا قلنا إنه بنعمل separation 204 00:16:13,420 --> 00:16:19,120 لسيرم تمام؟ Serum protein electrophoresis طب ليش 205 00:16:19,120 --> 00:16:23,500 ما نستخدمش لبلازمة تمام؟ و بنعمل electrophoresis 206 00:16:23,500 --> 00:16:27,480 لبلازمة ويكون لنا plasma protein electrophoresis 207 00:16:28,840 --> 00:16:34,060 لأن الـ Plasma موجود فيها الـ Fibrinogen الـ 208 00:16:34,060 --> 00:16:39,560 Plasma تحتوي على الـ Fibrinogen ولما بنيجي بنعمل 209 00:16:39,560 --> 00:16:43,480 Separation باستخدام الـ Electrophoresis ل .. و الـ 210 00:16:43,480 --> 00:16:50,200 Plasma Proteins بيعطيني Band في الـ Beta Region و 211 00:16:50,200 --> 00:16:56,480 الـ Band هذه ممكن يتم تشخيصها خطأ على إنها 212 00:16:56,480 --> 00:17:01,640 Paraprotein اللي بتظهر في حالات ال multiple myeloma 213 00:17:01,640 --> 00:17:07,560 عشان هيك بنستخدم ال serum بدل ال plasma لأن ال 214 00:17:07,560 --> 00:17:10,780 serum طبعا صار في excluding واتخلصنا من 215 00:17:10,780 --> 00:17:15,160 الفيبرينوجين هذا 216 00:17:15,160 --> 00:17:19,860 عنا اللي هو normal serum protein electrophoresis 217 00:17:19,860 --> 00:17:25,000 يعني كيف تكون عنا اللي هو ال bands وهنا في حال ال 218 00:17:25,000 --> 00:17:30,990 plasma شايفين في حال ال plasma ظهرت إن بيك هنا في 219 00:17:30,990 --> 00:17:35,590 الـ beta تمام والبيك هذه بتشبه لحد ما البيك اللي 220 00:17:35,590 --> 00:17:40,530 ممكن تظهر في حالات ال multiple myeloma عشان هيك 221 00:17:40,530 --> 00:17:47,970 بنستخدم ال serum ومش ال plasma تمام، 222 00:17:47,970 --> 00:17:50,650 هنحكي الآن شوية عن ال serum protein 223 00:17:50,650 --> 00:17:54,430 electrophoresis عبارة عن simple technique for 224 00:17:54,430 --> 00:18:00,450 separating serum proteins والـ Solid Support اللي 225 00:18:00,450 --> 00:18:04,750 بنروح نحط نفس البروتينات بنستخدم cellulose acetate أو 226 00:18:04,750 --> 00:18:12,410 agarose gel وطبعا من خلال ال Electrophoresis بيصير 227 00:18:12,410 --> 00:18:16,670 فيه Separation للبروتينات الموجودة بالدم إلى أقسام من 228 00:18:16,670 --> 00:18:20,410 Alpha 1, Alpha 2, Beta and Gamma Globulins 229 00:18:23,300 --> 00:18:26,740 طبعا Electrophoresis أكيد الكل يعني أخذ وعارف عنه 230 00:18:26,740 --> 00:18:33,100 اللي بيتم طبعا من خلاله فصل لبروتينات طبعا 231 00:18:33,100 --> 00:18:39,420 البروتينات بتكون بتحمل شحنات تمام والشحنات 232 00:18:39,420 --> 00:18:44,220 المختلفة و ال size لها البروتين بيعمل على فصلها 233 00:18:44,220 --> 00:18:50,720 إلى طبعا يعني ال ال ال bands المختلفة اللي حكيناها 234 00:18:55,040 --> 00:19:00,760 بالعادة، buffer قلوي pH 8.6 يسمح بتحريك لجهة 235 00:19:00,760 --> 00:19:05,400 الـ anode بسبب تحريك نت charge سالب لجميع البروتينات 236 00:19:05,400 --> 00:19:16,500 الـ serum buffer 8.6 يجعل جميع البروتينات تحمل 237 00:19:16,500 --> 00:19:22,050 نوع شحنة سالبة وبالتالي لما نعمل Electrophoresis 238 00:19:22,050 --> 00:19:29,530 هتتجه هذه ال proteins باتجاه ال anode بالنسبة ل 239 00:19:29,530 --> 00:19:35,530 migration إن أسرع ال protein هو ال albumin أو طبعا 240 00:19:35,530 --> 00:19:37,530 زي ما قلنا في عندنا اللي هو ال pre albumin اللي 241 00:19:37,530 --> 00:19:41,690 بيكون قبله طبعا بعد هيك في عندنا اللي هو ال alpha 242 00:19:41,690 --> 00:19:46,150 1 في عندنا ال alpha 2 ال beta واللي هو الأبطأ 243 00:19:46,150 --> 00:19:54,730 fraction هي الـ Gamma بعد عملية الـ Separation طبعا 244 00:19:54,730 --> 00:20:00,150 مش هنقدر نشوف ال proteins إلا بعد صباغتها وبالتالي 245 00:20:00,150 --> 00:20:04,490 acid fixed then stained by dyes to visualize on 246 00:20:04,490 --> 00:20:07,130 support media cellulose acetate 247 00:20:11,780 --> 00:20:14,780 طبعا بعد هيك ممكن نستخدم الـ densitometer زي ما 248 00:20:14,780 --> 00:20:20,020 حكينا سابقا عشان نشوف ال concentration أو ال 249 00:20:20,020 --> 00:20:24,680 percentage ل ال peaks المختلفة من ال total protein 250 00:20:24,680 --> 00:20:28,940 the 251 00:20:28,940 --> 00:20:31,880 most important diagnostic use of serum protein 252 00:20:31,880 --> 00:20:34,180 electrophoresis is for the recognition of 253 00:20:34,180 --> 00:20:39,250 paraproteins تمام، هي مفيدة جدا في ال diagnosis 254 00:20:39,250 --> 00:20:44,150 والكشف عن وجود بعض ال proteins وزي ما قلنا قلت هي 255 00:20:44,150 --> 00:20:47,430 هذه بتكون في حالات ال benign أو malignant 256 00:20:47,430 --> 00:20:50,650 gamopathies اللي هو في حالات ال multiple myeloma 257 00:20:50,650 --> 00:20:57,170 برضه في إن disorders أخرى ممكن تكون ال ال ال 258 00:20:57,170 --> 00:21:00,170 protein electrophoresis برضه مفيدة فيها زي ما 259 00:21:00,170 --> 00:21:06,120 هنشوف كمان شوية هو أيضًا استخدام للتعامل مع خطرات 260 00:21:06,120 --> 00:21:10,280 بروتينات أخرى مثل التهاباتية أو المناعية الذاتية 261 00:21:10,280 --> 00:21:12,320 مناعية أو التهابات أو التهابات بروتينات أو التهابات 262 00:21:12,320 --> 00:21:12,440 بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات 263 00:21:12,440 --> 00:21:14,840 بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات 264 00:21:14,840 --> 00:21:17,460 بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات 265 00:21:17,460 --> 00:21:17,580 بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات 266 00:21:17,580 --> 00:21:19,360 بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات 267 00:21:19,360 --> 00:21:24,560 بروتينات بروتينات بروتينات بروتينات ب 268 00:21:30,750 --> 00:21:33,330 زي ما قلنا طبعا ال solid sub-bottle بنستخدم إما 269 00:21:33,330 --> 00:21:40,150 agarose gel أو ممكن نستخدم cellulose acetate وهنا 270 00:21:40,150 --> 00:21:45,910 لدينا protein Electrophoresis لأكثر من sample تمام 271 00:21:45,910 --> 00:21:51,350 ومبين بعض ال samples فيها عندنا مشكلة تمام زي ال 272 00:21:51,350 --> 00:21:54,930 sample هادر ممكن يكون فيها ال paraproteins ممكن زي 273 00:21:54,930 --> 00:21:57,490 ما قلنا ال paraprotein بنشوفها في حالات ال 274 00:21:57,490 --> 00:21:59,570 multiple myeloma 275 00:22:03,270 --> 00:22:07,430 ممكن حالات زي هيك اللي ممكن تكون إنها Polyclonal 276 00:22:07,430 --> 00:22:12,150 Antibodies ممكن تكون في حالات اللي هو ال chronic 277 00:22:12,150 --> 00:22:19,490 inflammations مثلا أو diseases طبعا الصورة هتوضح 278 00:22:19,490 --> 00:22:24,750 أكثر لما نعمل densitometry ونشوف ال area أو 279 00:22:24,750 --> 00:22:29,970 قدر كل band بتمثل من ال total protein طبعا هي إن 280 00:22:29,970 --> 00:22:31,590 ال normal 281 00:22:33,630 --> 00:22:39,570 percentage لكل band يعني أن ال album بيمثل 53% ل 282 00:22:39,570 --> 00:22:46,070 65% ال alpha 1 2.5% ل 5% ال alpha 2 7 ل 13% ال 283 00:22:46,070 --> 00:22:52,210 beta 8 ل 14% و ال gamma globulins 12 ل 22% 284 00:22:54,350 --> 00:22:59,050 طب الآن احنا ممكن فعليا نحدد قد إيش كمية ال 285 00:22:59,050 --> 00:23:04,710 protein قد إيش ال concentration ل ال album مثلا من 286 00:23:04,710 --> 00:23:07,070 خلال ال electrophoresis أو قد إيش ال concentration 287 00:23:07,070 --> 00:23:12,330 لل alpha oneoglobulins تمام فعليا ممكن يحدد لأن 288 00:23:12,330 --> 00:23:15,870 بعد احنا قلنا ما هي الخطوة الأولى بعد ما نشتغل اللي 289 00:23:15,870 --> 00:23:18,230 هو ال electrophoresis قلنا باستخدام ال 290 00:23:18,230 --> 00:23:22,610 densitometer تمام ويقول إن هو عبارة عن جهاز بيشوف 291 00:23:22,610 --> 00:23:27,070 قد إيش طبعا بناءً أنا على كمية ال protein الموجود 292 00:23:27,070 --> 00:23:32,440 هيتم صباغة هذه ال band طبعا و الآن بناءً طبعا على 293 00:23:32,440 --> 00:23:35,700 اللون الموجود يعني كل ما زاد عندنا اللون كل ما كان 294 00:23:35,700 --> 00:23:39,260 فعليا في عندنا ال protein أكتر و عشان هيك ارتبطت 295 00:23:39,260 --> 00:23:42,140 عندنا ال dye أكتر يبقى بنيجي باستخدام ال 296 00:23:42,140 --> 00:23:48,580 densitometer بنشوف ال density لها ال dye طبعا و 297 00:23:48,580 --> 00:23:53,080 طبعا بنحصل على من خلال ال densitometer على peaks و 298 00:23:53,080 --> 00:23:57,950 بتم حساب ال area المساحة تحت ال peak والمساحة هذه 299 00:23:57,950 --> 00:24:06,330 هتمثل الكمية ال protein هذا من ال total protein 300 00:24:06,330 --> 00:24:13,950 طيب كيف بعدين ممكن هنحسب كمية ال protein؟ حسبة 301 00:24:13,950 --> 00:24:18,650 بسيطة احنا بنكون حاسبين ال total protein يعني احنا 302 00:24:18,650 --> 00:24:22,790 بنكون قايسين ال total protein باستخدام ال biuret 303 00:24:24,900 --> 00:24:28,100 بنكون حاسبين كمية ال total protein باستخدام ال 304 00:24:28,100 --> 00:24:35,380 biuret وطلعت مثلا ال total protein مثلا 9 gram 305 00:24:35,380 --> 00:24:42,320 مثلا per 306 00:24:42,320 --> 00:24:43,000 deciliter 307 00:24:46,530 --> 00:24:51,470 طيب الان لو انا بدي احسب قد إيش كمية ال album لو 308 00:24:51,470 --> 00:24:56,950 لجينا انه ال percentage لها المساحة هذه لل 309 00:24:56,950 --> 00:25:02,250 album على سبيل المثال ستين بالمية يبقى ال 310 00:25:02,250 --> 00:25:10,670 concentration لل album هتكون ستين على مية ضرب تسعة 311 00:25:12,420 --> 00:25:17,140 تمام هذا بتكون لو كمية ال album اللي بال sample 312 00:25:17,140 --> 00:25:22,480 اللي عندي ال alpha one مثلا طلعت عندنا خمسة بالمية 313 00:25:22,480 --> 00:25:29,260 يبقى خمسة على مية ضرب 314 00:25:29,260 --> 00:25:34,700 تسعة وهذا بتكون عندنا عبارة عن ال concentration ل 315 00:25:34,700 --> 00:25:37,100 ال alpha one fraction 316 00:25:39,120 --> 00:25:44,920 طيب عندنا الخط اللي هو المتصل هذا هذا بيبين ال 317 00:25:44,920 --> 00:25:50,800 normal تمام الشكل ال normal الخط المتقطع هذا بيبين 318 00:25:50,800 --> 00:25:55,120 اللي هو التغير اللي بيصير في الحالة المرضية هذه 319 00:25:55,120 --> 00:26:01,900 الآن في هذه الحالة في عندنا nephrosis وفي حال ال 320 00:26:01,900 --> 00:26:05,100 nephrosis قلنا بيصير فقد ل proteins 321 00:26:07,870 --> 00:26:12,370 وبشكل أساسي اللي بيفقد عندنا ال albumin اللي هو 322 00:26:12,370 --> 00:26:16,090 كمية أكبر من البروتين اللي بيفقد ال albumin وبعض 323 00:26:16,090 --> 00:26:19,910 ال immunoglobulins طبعا هذا بيعتمد على ال 324 00:26:19,910 --> 00:26:25,250 molecular weight للبروتين تمام يبقى زي ما واضح أنه 325 00:26:25,250 --> 00:26:30,510 في عندنا صار انخفاض في ال albumin تمام صار في 326 00:26:30,510 --> 00:26:33,310 عندنا انخفاض في ال albumin عندنا ال alpha و ال 327 00:26:33,310 --> 00:26:37,670 normal هان صار في عندناالارتفاع في الـ 328 00:26:37,670 --> 00:26:43,290 concentration لـ Alpha 2 طب ليش؟ لأن الـ Alpha 2 329 00:26:43,290 --> 00:26:47,290 بتحتوي على نسبة كبيرة من الـ Alpha 2 Macroglobulin 330 00:26:47,290 --> 00:26:51,010 و الـ Alpha 2 Macroglobulin هو عبارة عن بروتين 331 00:26:51,010 --> 00:26:55,010 حجمه كبير وبالتالي صعب أنه يصير له filtration و تم 332 00:26:55,010 --> 00:26:58,310 فقده عن طريق الكدن وبالتالي أنه بيرتفع ال 333 00:26:58,310 --> 00:27:05,170 concentration ل الـ Alpha 2 fraction ال beta 2 عادية 334 00:27:05,170 --> 00:27:09,030 و كما قلنا الوان بيبقى فقط لبعض immunoglobulins 335 00:27:09,030 --> 00:27:15,290 وبالتالي بتنخفض اللي هو ال peak هذه حالة أخرى 336 00:27:15,290 --> 00:27:20,690 hypogamaglobulinemia اللي هو عندي hypo يعني انخفاض 337 00:27:20,690 --> 00:27:25,130 في ال gamma globulins اللي هو في الدم 338 00:27:25,130 --> 00:27:31,280 hypogamaglobulinemia يبقى هذا عندنا كل الـ fractions 339 00:27:31,280 --> 00:27:36,620 طبيعية تمام؟ لأن الخط المتقطع جاي مع الخط المتصل 340 00:27:36,620 --> 00:27:42,280 إلا في حال الـ Gamma fraction تمام؟ في Gamma 341 00:27:42,280 --> 00:27:46,100 fraction في أننا انخفاض بشكل كبير في ال percentage 342 00:27:46,100 --> 00:27:51,340 تمام؟ لأن هنا في عندنا مشكلة و المشكلة هذه أدت إلى 343 00:27:51,340 --> 00:27:54,740 انخفاض في ال immune globulins أو ال antibodies في 344 00:27:54,740 --> 00:28:02,470 الدم حالة ثالثة اللي هو hepatic cirrhosis اللي هو 345 00:28:02,470 --> 00:28:08,090 التليف الكبد التليف الكبد تمام بيبقى بيصير فيه 346 00:28:08,090 --> 00:28:13,310 عندنا يعني انخفاض بشكل عام في ال proteins لكن اللي 347 00:28:13,310 --> 00:28:18,750 بينخفض أكتر ال albumin وبتلاقي أنه فعليا في عندنا 348 00:28:18,750 --> 00:28:21,510 انخفاض في ال percentage ل ال albumin 349 00:28:24,060 --> 00:28:27,820 مع اللي هو normal لأ ال alpha one و ال alpha two 350 00:28:27,820 --> 00:28:34,580 لكن بيصير في عندنا اللي هو ارتفاع في ال beta مع ال 351 00:28:34,580 --> 00:28:40,400 gamma فاهم و زي بيصير الاتصال طبعا ال ال ال gamma 352 00:28:40,400 --> 00:28:44,160 هي اللي بيكون عندي أكبر ارتفاع لأن في عندنا 353 00:28:44,160 --> 00:28:49,470 chronic infection او chronic يعني disease وبالتالي 354 00:28:49,470 --> 00:28:53,810 في عندي polyclonal antibodies موجودة تمام؟ بيجي 355 00:28:53,810 --> 00:28:58,050 ال immunoglobulins بترتفع بشكل كبير ومع الارتفاع هذا 356 00:28:58,050 --> 00:29:02,450 اللي بيصير في ال gamma بيصير زي اتصال شايفين؟ فيه 357 00:29:02,450 --> 00:29:08,430 اتصال بين ال beta مع ال gamma وهذا شكل مميز في 358 00:29:08,430 --> 00:29:12,650 حالات الـ hepatitis الروزز واللي بيسموه beta gamma 359 00:29:12,650 --> 00:29:16,940 bridging في هذا الشكل المميز اللي هو الـ Beta-Gamma 360 00:29:16,940 --> 00:29:20,800 Bridging بنشوفه في حالات الـ Hepatic Cirrhosis 361 00:29:20,800 --> 00:29:25,760 الشكل 362 00:29:25,760 --> 00:29:30,200 الأخير اللي هو الـ Monoclonal Gamma Pathy زي في 363 00:29:30,200 --> 00:29:35,640 حالات الـ Multiple Myeloma هنا إنه يعني انخفاض 364 00:29:35,640 --> 00:29:40,460 بسيط فيه اللي هو الـ albumin مع الـ normal لال 365 00:29:40,460 --> 00:29:47,560 fractions الأخرى ولكن في عندي الارتفاع و peak حاد 366 00:29:47,560 --> 00:29:52,360 في ال immunoglobulin أو في الجامة طبعا طبعا مع 367 00:29:52,360 --> 00:29:57,120 زيادة اللي هو بشكل كبير هذا بيدل على أنه في عندي 368 00:29:57,120 --> 00:30:02,620 monoclonal antibodies موجودة طبعا وبالتالي زي ما 369 00:30:02,620 --> 00:30:05,120 قلنا هذا بتصير في حالات اللي هو ال multiple 370 00:30:05,120 --> 00:30:09,420 myeloma لكن في حالات اللي هو ال chronic diseases 371 00:30:09,420 --> 00:30:12,840 بيصير في عندنا زي ما قلنا اللي هو polyclonal 372 00:30:12,840 --> 00:30:16,060 ما يكونش في عندي sharp peak موجودة شايفين ال peak 373 00:30:16,060 --> 00:30:24,760 لأنه في عندي ال different antibodies صار في صار 374 00:30:24,760 --> 00:30:25,400 في زيادة 375 00:30:32,570 --> 00:30:37,570 طيب، عندنا أيضًا من الـ methods اللي بتستخدم لفصل 376 00:30:37,570 --> 00:30:43,370 لبروتينز الـ Isoelectric Focusing وإذا كان فاكرين 377 00:30:43,370 --> 00:30:48,090 في بداية كلامنا عن البروتينز قلنا إنه في عندنا الـ 378 00:30:48,090 --> 00:30:53,950 Isoelectric Point وفعليًا بهذه الـ method بيتم 379 00:30:53,950 --> 00:30:59,150 استخدام الـ Isoelectric Point لفصل لبروتينز 380 00:31:01,670 --> 00:31:04,590 يبقى بتتم فصل البروتينات بناءً على الـ Isoelectric 381 00:31:04,590 --> 00:31:10,670 point بيتم استخدام في هذا ال technique مركبات اللي 382 00:31:10,670 --> 00:31:17,030 هتسمى Ampholites of varying Isoelectric point و 383 00:31:17,030 --> 00:31:22,330 هذه ال Ampholites بالأجار اللي هستخدمه بتيجي 384 00:31:22,330 --> 00:31:27,790 بتعملي pH Gradient يبقى بتعملي 385 00:31:37,630 --> 00:31:51,710 البروتين عندما يتم تدرجه 386 00:31:51,710 --> 00:31:54,390 إلى البروتين الإيزوجيل يتحول إلى مجال الإلكتروني 387 00:31:55,830 --> 00:32:01,310 يبقى بتتم وضع البروتين وبعدين بتتم طبعا التوصيل 388 00:32:01,310 --> 00:32:06,170 بطيار كهربائي الآن البروتينات هتبدأ يصير لها migration 389 00:32:06,170 --> 00:32:12,650 هتبدأ تمشي في الجل و زي 390 00:32:12,650 --> 00:32:17,250 ما قلنا إن احنا فينا اختلاف في ال pH وفينا تدرج في 391 00:32:17,250 --> 00:32:25,370 ال pH الآن لما بيصل بيتساوى ال pH للوسط مع ال 392 00:32:25,370 --> 00:32:29,110 isoelectric point ل ال protein إيش بيصير بيها 393 00:32:29,110 --> 00:32:33,890 في هذه الحالة؟ اه قولنا إنه بيصير ال net charge ل ال 394 00:32:33,890 --> 00:32:38,870 protein zero وما زال مش عندي شحنة على ال protein 395 00:32:38,870 --> 00:32:42,410 يبقى ال protein إيش هتصير فيه؟ هيتوقف عن ال 396 00:32:42,410 --> 00:32:46,030 migration لأن إيش بيخلي ال protein يمشي في تيار 397 00:32:46,030 --> 00:32:50,450 كهربا؟ الشحنة اللي بيحملها إذا حصلت تساوية الـ pH 398 00:32:50,450 --> 00:32:53,010 مع الـ isoelectric point فسيكون الـ net charge 399 00:32:53,010 --> 00:32:59,990 مُزالة و سيتوقف البروتين عن الـ migration وهذه 400 00:32:59,990 --> 00:33:04,770 الفكرة اللي بتستخدم في الـ isoelectric focusing زي 401 00:33:04,770 --> 00:33:08,210 ما قلنا اللي هو الـ Ampholites اللي بتعمل التدرج في 402 00:33:08,210 --> 00:33:14,110 الـ pH بنحط اللي هو البروتين اللي بدنا نفصلها و 403 00:33:14,110 --> 00:33:19,550 بنوصل طيار كهربائي زي ما قلنا بتبدأ ال proteins 404 00:33:19,550 --> 00:33:23,790 تتحرك ووين بيصير إنّها بتساوي البيئة مع الـ 405 00:33:23,790 --> 00:33:28,230 isoelectric point بيتوقف ال protein وأكيد طبعا هنحتاج 406 00:33:28,230 --> 00:33:39,490 إلى صباغة عشان نشوف ال different bands الـ 407 00:33:39,490 --> 00:33:45,090 immunochemical methods احنا قلنا إنّه بعد ال 408 00:33:45,090 --> 00:33:50,530 separation لـ Proteins عن طريق الـ Electrophoresis 409 00:33:50,530 --> 00:33:57,850 وقلنا بنستخدم أو بنشوف المشكلة في أي fraction 410 00:33:57,850 --> 00:34:03,790 موجودة وبعد هيك بنبدأ نشوف ال fraction هذه إيش ال 411 00:34:03,790 --> 00:34:08,910 proteins اللي موجودة فيها وبنبدأ نفحص ال proteins 412 00:34:08,910 --> 00:34:12,770 المختلفة ونشوف إذا كان المشكلة فيها أو لأ يعني كل 413 00:34:12,770 --> 00:34:16,710 protein ممكن على حدة تمام أو بناءً زي ما قلنا على 414 00:34:16,710 --> 00:34:22,090 يعني إيش التصور لطبيب بناءً على ال symptoms وبناءً 415 00:34:22,090 --> 00:34:27,660 على ال history وبناءً ممكن على فحوصات أخرى من خلال 416 00:34:27,660 --> 00:34:31,720 الـ Immunochemical methods بنفحص البروتينز المختلفة 417 00:34:31,720 --> 00:34:36,420 وبنشوف إذا كان في عندي abnormality في هذه 418 00:34:36,420 --> 00:34:40,040 البروتينز طبعا عندنا من ال methods اللي بتستخدم 419 00:34:40,040 --> 00:34:42,100 ردًّا على ال immunodiffusion في عندنا 420 00:34:42,100 --> 00:34:44,860 immunoelectrophoresis immunofixation 421 00:34:44,860 --> 00:34:48,860 electrophoresis electroimmunodiffusion و 422 00:34:48,860 --> 00:34:54,320 immunonephelometry هذه methods مختلفة، وزي ما قلنا 423 00:34:54,320 --> 00:35:00,360 تستخدم لتحديد the proteins أو concentration لـ proteins 424 00:35:00,360 --> 00:35:07,800 مختلفة حسب وين عندي المشكلة في أي fraction طيب 425 00:35:07,800 --> 00:35:11,760 آخر جزئية في هذه المحاضرة قلنا إنه ممكن برضه نقيس 426 00:35:11,760 --> 00:35:16,000 الـ protein concentration في body fluids أخرى زي ال 427 00:35:16,000 --> 00:35:20,160 urine وزي الـ CSF، الـ urine proteins بجارة of 428 00:35:20,160 --> 00:35:22,440 proteins found in urine arises from the blood 429 00:35:23,310 --> 00:35:28,610 وعندنا بعض البروتينات جاية من طبعا الـ kidney ومن 430 00:35:28,610 --> 00:35:36,250 الـ urinary tract ممكن يظهر عندنا proteins في ال 431 00:35:36,250 --> 00:35:41,690 urine لأنه طبعا صار في فلترة لهذه البروتينات من 432 00:35:41,690 --> 00:35:47,910 خلال الـ glomerulus في النفرون، هذا الشكل بيمثل 433 00:35:47,910 --> 00:35:52,490 النفرون، و النفرون هو يعتبر الـ functional unit في 434 00:35:52,490 --> 00:35:55,130 الـ kidney، ولما نحكي على الـ kidney هنحكي على 435 00:35:55,130 --> 00:35:58,170 النفرون، إن شاء الله. الآن بتصير عندنا عملية 436 00:35:58,170 --> 00:36:02,470 filtration للدم، الدم بيدخل من afferent arteriole و 437 00:36:02,470 --> 00:36:06,390 بيصير عندنا عملية filtration للدم، والمفروض ان هنا 438 00:36:06,390 --> 00:36:10,010 عند الـ pore size للـ agglomerul يلازم تسمح بمرور 439 00:36:10,010 --> 00:36:15,700 بعض المواد الموجودة في الدم، الآن ممكن يصير في عندي 440 00:36:15,700 --> 00:36:22,620 خلل في الـ glomerulus، وهذا يسمح ممكن بمرور مركبات 441 00:36:22,620 --> 00:36:25,920 الـ molecular weight تباعتها كبيرة، وتبدأ تظهر 442 00:36:25,920 --> 00:36:34,880 عندي هذه المركبات ومن هذه البروتينات في الدم، الـ 443 00:36:34,880 --> 00:36:38,240 routine screening in urinalysis، طبعا في أن 444 00:36:38,240 --> 00:36:41,040 الـ qualitative test for proteinuria are 445 00:36:41,040 --> 00:36:44,920 commonly performed using a reagent strip، تمام في أن 446 00:36:44,920 --> 00:36:50,140 الـ reagent strip هذا اللي بيتم طبعا يعني غمسه في 447 00:36:50,140 --> 00:36:56,380 الـ urine وبعدين حسب اللون اللي بيظهر عندنا، تمام 448 00:36:56,380 --> 00:37:02,780 ممكن يقول يدلّ تقريبا كمية المركبات المختلفة 449 00:37:02,780 --> 00:37:05,840 الموجودة في الـ urine ومن ضمنها طبعا الـ protein 450 00:37:07,670 --> 00:37:16,530 بجهد، طريقة ممكن من خلالها نشوف تقريبا كمية 451 00:37:16,530 --> 00:37:19,630 البروتين الموجودة فيها، أيضا method acid 452 00:37:19,630 --> 00:37:21,710 -precipitation اللي هو باستخدام الـ 453 00:37:21,710 --> 00:37:26,190 Trichloroacetic Acid، البروتين يتميزون كميات صغيرة 454 00:37:26,190 --> 00:37:31,470 وبعد ذلك يمكن نقيس الـ turbidity باستخدام الـ 455 00:37:31,470 --> 00:37:33,070 Spectrophotometer 456 00:37:35,660 --> 00:37:40,400 وآخر إيش الـ proteins in CSF، CSF formed in the 457 00:37:40,400 --> 00:37:45,400 choroid plexus of the ventricles of the brain، عن 458 00:37:45,400 --> 00:37:48,900 طريق الـ ultra filtration of the blood plasma، يعني 459 00:37:48,900 --> 00:37:52,620 برضه عن طريق الـ filtration ultra filtration الـ 460 00:37:52,620 --> 00:37:58,280 blood plasma أو بتكون عندنا cerebrospinal fluid الـ 461 00:37:58,280 --> 00:38:04,890 CSF، أيضًا من الفحصات اللي بتُطلب لما بتم سحب عينة 462 00:38:04,890 --> 00:38:11,150 CSF، بتم طلب له فحص البروتينات أو كمية البروتين 463 00:38:11,150 --> 00:38:15,150 الموجودة، abnormally increased total CSF proteins 464 00:38:15,150 --> 00:38:16,730 may be found in conditions 465 00:38:20,670 --> 00:38:23,590 وهناك تزايد الـ permeability عندما يحدث الـ Ultra 466 00:38:23,590 --> 00:38:31,230 -filtration، إذا كانت الفلترة زادت 467 00:38:31,230 --> 00:38:34,230 الـ permeability، يمكن أن يزيد كميات البروتين 468 00:38:34,230 --> 00:38:40,010 الموجودة بالـ CSF، وهذا يمكن أن يكون بسبب الانفكاشن 469 00:38:40,010 --> 00:38:44,970 البكتيريا، الانفكاشن الفيرال أو الـ fungal meningitis 470 00:38:44,970 --> 00:38:47,070 أو التهاب السحايا 471 00:38:50,130 --> 00:38:53,930 المستخدمات المستخدمة أكثر هي التربيدومتريك، يستخدم 472 00:38:53,930 --> 00:38:54,770 التربيدومتريك، يستخدم التربيدومتريك، يستخدم التربيدومتريك 473 00:38:54,770 --> 00:38:55,390 يستخدم التربيدومتريك، يستخدم التربيدومتريك، يستخدم 474 00:38:55,390 --> 00:38:58,270 التربيدومتريك، يستخدم التربيدومتريك، يستخدم التربيدومتريك 475 00:38:58,270 --> 00:38:58,490 يستخدم التربيدومتريك، يستخدم التربيدومتريك، يستخدم 476 00:38:58,490 --> 00:38:58,910 التربيدومتريك، يستخدم التربيدومتريك، يستخدم التربيدومتريك 477 00:38:58,910 --> 00:39:05,230 يستخدم التربيدومتريك، يستخدم التربيدومتريك، يستخدم 478 00:39:05,230 --> 00:39:09,050 التربيدومتريك، يستخدم التربيدوم 479 00:39:11,500 --> 00:39:18,980 وهيك بنكون انتهينا من فصل الـ proteins، و الله 480 00:39:18,980 --> 00:39:22,740 يعطيكم الف عافية، ونلقاكم على خير إن شاء الله، و 481 00:39:22,740 --> 00:39:26,120 السلام عليكم ورحمة الله وبركاته