1 00:00:00,620 --> 00:00:04,880 باسم الله الرحمن الرحيم اليوم شاء الله رب العالمين 2 00:00:04,880 --> 00:00:08,420 راح ناخد مع بعض كيف أنا بدي أعرف نسبة Hemoglobin F 3 00:00:08,420 --> 00:00:11,720 Hemoglobin F quantitation اللي هو الـ Fetal Hemoglobin 4 00:00:11,720 --> 00:00:15,460 طبعا إحنا عارفين إن Hemoglobin F is the 5 00:00:15,460 --> 00:00:19,220 main oxygen transport protein in the fetus during 6 00:00:19,220 --> 00:00:23,100 the last seven months of development in the uterus 7 00:00:23,100 --> 00:00:27,780 يعني هو الناقل الأهم للأكسوجين خلال الحياة 8 00:00:27,780 --> 00:00:34,090 الجنينية وبيستمر مع المولود تقريبا 6 شهور طبعا الـ 9 00:00:34,090 --> 00:00:37,430 baby عشان فعلا يصير completely زي ال adult بياخد 10 00:00:37,430 --> 00:00:41,130 من 6 شهور إلى سنتين لغاية ما يصير ال hemoglobin 11 00:00:41,130 --> 00:00:46,090 عنده زي ال adult Hemoglobin. Fetal 12 00:00:46,090 --> 00:00:50,190 Hemoglobin بيختلف عن ال adult Hemoglobin في قدرته 13 00:00:50,190 --> 00:00:54,210 على أنه يرتبط بالأكسوجين ب high affinity وهذه طبعا 14 00:00:54,210 --> 00:00:58,310 بتعطي ميزة ومواقمة لحياة الجنين في الرحم لأن 15 00:00:58,310 --> 00:01:01,450 الجنين بحتاج كمية كبيرة من الأكسوجين يعني هو أحوج 16 00:01:01,450 --> 00:01:04,670 من الأكسوجين للأم لأن الأم عندها رئتين و بتقدر 17 00:01:04,670 --> 00:01:08,910 تاخد أكسوجين من الهواء الجوي لكن الطفل بحاجة أنه 18 00:01:08,910 --> 00:01:12,710 ياخد كمية كبيرة من الأكسوجين فبالتالي الـ baby 19 00:01:12,710 --> 00:01:17,830 هيكون عنده Hemoglobin F عشان يقدر يزود جسم الطفل 20 00:01:17,830 --> 00:01:23,110 خلال مرحلة النمو بالأكسوجين الكافي لنموه لنضجه فيتا 21 00:01:23,110 --> 00:01:25,530 الـ Hemoglobin differs from the adult Hemoglobin 22 00:01:25,530 --> 00:01:29,230 in that it is able to bind oxygen with a greater 23 00:01:29,230 --> 00:01:32,870 affinity than the adult form giving the developing 24 00:01:32,870 --> 00:01:36,770 fetus better access to oxygen from the mother's 25 00:01:36,770 --> 00:01:40,610 bloodstream طبعا هذا بسمح لإنه ياخد كل الأكسجين 26 00:01:40,610 --> 00:01:44,570 اللي بدهيا من الأم. The transfer of oxygen is from 27 00:01:44,570 --> 00:01:47,950 the mother less tightly bound to the baby more 28 00:01:47,950 --> 00:01:51,250 tightly bound فبالتالي بيصير ال transfer للأكسجين 29 00:01:51,490 --> 00:01:55,110 من اللي عند الأم إلى الطفل ليش؟ لأن الأم الـ 30 00:01:55,110 --> 00:01:58,590 Oxygen، الـ Hemoglobin عندها أقل ارتباط بالأكسوجين 31 00:01:58,590 --> 00:02:03,930 أو أقل affinity للأكسوجين إلى الطفل اللي عنده high 32 00:02:03,930 --> 00:02:10,530 affinity للأكسوجين. طبعا Hemoglobin F بتكون من two 33 00:02:10,530 --> 00:02:17,560 Alpha و two Gamma chains. Hemoglobin F لا يتحول 34 00:02:17,560 --> 00:02:22,060 هو الـ Hemoglobin F إلى A بعدما الطفل يكبر، لأ هو 35 00:02:22,060 --> 00:02:26,860 فعلياً تصنيع بتحول من تصنيع Hemoglobin F إلى تصنيع 36 00:02:26,860 --> 00:02:30,420 Hemoglobin A. Hemoglobin F and Hemoglobin A are 37 00:02:30,420 --> 00:02:32,980 completely different Hemoglobins يعني التانيين 38 00:02:32,980 --> 00:02:37,830 مختلفين تماما وكل واحد بتصنع بطريقة مختلفة. Fetal 39 00:02:37,830 --> 00:02:41,230 Hemoglobin is alkaline resistant Hemoglobin. إيش 40 00:02:41,230 --> 00:02:45,030 يعني alkaline resistant؟ يعني لو أضفنا عليه مادة 41 00:02:45,030 --> 00:02:49,710 قلوية ما بيخرب، ما بيتلف، ما بيصيرله denaturation 42 00:02:49,710 --> 00:02:53,810 هي هذه الخاصية اللي إحنا راح نستخدمها في تحديد 43 00:02:53,810 --> 00:02:57,810 كمية Hemoglobin F. Newborn babies with sickle cell 44 00:02:57,810 --> 00:03:03,210 disease make Hemoglobin F and Hemoglobin S. عادة الـ 45 00:03:03,210 --> 00:03:07,110 baby اللي بيبقى عنده Sickle Cell Disease ممكن يصنع 46 00:03:07,110 --> 00:03:10,630 اتنين Hemoglobin F وبعد هيك بيبدأ يصنع Hemoglobin 47 00:03:10,630 --> 00:03:14,110 S وزي ما قلنا إذا كنتوا فاكرين إنه Hemoglobin F 48 00:03:14,110 --> 00:03:17,970 بأثر بقلل من تأثير الـ sickling على الخلايا عشان هيك 49 00:03:17,970 --> 00:03:21,650 الأطفال اللي عندهم Sickle Cell Disease وعندهم نسبة 50 00:03:21,650 --> 00:03:25,350 من Hemoglobin F يعني بيكون تأثير الـ Sickle Cell 51 00:03:25,350 --> 00:03:29,070 عليهم أقل. واستخدامنا هذه الخاصية عند ال Adult إنه 52 00:03:29,070 --> 00:03:33,010 نرجع تصنيع Hemoglobin F بنسبة معينة عشان نقلل من 53 00:03:33,010 --> 00:03:39,390 أعراض Sickle Cell Anemia. أمتى بزيد Hemoglobin F في 54 00:03:39,390 --> 00:03:43,580 حالات بسموها Hereditary Resistance of Hemoglobin F 55 00:03:43,580 --> 00:03:46,800 إيش يعني؟ يعني هذا الشخص بيظل طول حياته يصنع 56 00:03:46,800 --> 00:03:50,800 Hemoglobin F. ماعندهش ثلاثيميا مثلا، ماعندهش .. لأ 57 00:03:50,800 --> 00:03:54,820 هو .. هو مابيصيرش Complete Switch On لتصنيع 58 00:03:54,820 --> 00:03:59,960 Hemoglobin A فبيظل عنده Hemoglobin F تصنيعه On 59 00:03:59,960 --> 00:04:03,940 الجين بتاعه Hemoglobin F On طول الحياة وبيظل يصنع 60 00:04:03,940 --> 00:04:07,580 كمية من Hemoglobin F. هذا بلاقي عنده نسبة من 61 00:04:07,580 --> 00:04:11,370 Hemoglobin F ممكن توصل لـ 40%. ممكن يزيد في حالات 62 00:04:11,370 --> 00:04:13,810 الـ Sickle Cell Anemia لأن الـ Sickle Cell فيها 63 00:04:13,810 --> 00:04:16,450 خلل في الـ Beta-Chain. Hemoglobin F مافيش في الـ 64 00:04:16,450 --> 00:04:19,050 Beta-Chain فممكن نلاقي ارتفاع في حالات الـ 65 00:04:19,050 --> 00:04:22,090 Acquired Plastic Anemia. في حالات الـ Megaloplastic 66 00:04:22,090 --> 00:04:25,870 Anemia ممكن يرتفع في حالات البروكزيما النكتوريا 67 00:04:25,870 --> 00:04:32,010 الـ Hemoglobin Urea أو ما يسمى بالـ PNH الـ 68 00:04:32,010 --> 00:04:36,190 Principle. إيش فكرة الفحث؟ فكرة الفحث كتير بسيطة 69 00:04:36,680 --> 00:04:41,600 بتعتمد على توي قاعد حكيناها إنه Hemoglobin F مقاوم 70 00:04:41,600 --> 00:04:45,900 للـAlkaline Denaturation فأنا إيش بروح بعمل؟ بضيف 71 00:04:45,900 --> 00:04:50,260 مادة Alkaline على الـHemolysate اللي بحضره بعد ما 72 00:04:50,260 --> 00:04:54,660 بضيف مادة Alkaline هيصير Denaturation أو ترسيب لكل 73 00:04:54,660 --> 00:05:00,520 أنواع الـHemoglobin ما عدا Hemoglobin F تمام؟ الآن 74 00:05:00,520 --> 00:05:05,470 عند مرحلة معينة بوقف عملية الـDenaturation يعني 75 00:05:05,470 --> 00:05:09,450 بوقف مفعول الـ Sodium Hydroxide اللي أنا أضافته 76 00:05:09,450 --> 00:05:13,990 وببدأ أعمل filtration. ال filter paper عادية. عملية 77 00:05:13,990 --> 00:05:18,610 ال filtration هذه هينحجز من خلالها كل أنواع الـ 78 00:05:18,610 --> 00:05:21,430 Hemoglobin اللي صار لها denaturation ما عدا 79 00:05:21,430 --> 00:05:25,050 Hemoglobin F لأنه ما صارله denaturation هينزل 80 00:05:25,050 --> 00:05:28,270 وأجمعه في الـ Tube وأقرأ Spectrophotometry 81 00:05:28,270 --> 00:05:31,770 خلّيني أشوف الـ Test. استعمل الـ Characteristic of 82 00:05:31,770 --> 00:05:35,910 Hemoglobin F to resist denaturation in an alkaline 83 00:05:35,910 --> 00:05:39,690 solution يعني هو بيقاوم الـ denaturation لو أنا 84 00:05:39,690 --> 00:05:42,930 حطيته في alkaline solution. A red blood cell 85 00:05:42,930 --> 00:05:47,750 hemolysate is prepared to lyse a red cell and free 86 00:05:47,750 --> 00:05:51,270 hemoglobin. أول خطوة بحضر الـ hemolysate. The 87 00:05:51,270 --> 00:05:55,310 hemolysate is added to cyanomethemoglobin reagent 88 00:05:55,310 --> 00:05:59,530 اللي هو هذا نفسه يا بنات اللي أنا استخدمته لفحص 89 00:05:59,530 --> 00:06:01,930 الهمoglobin اللي هو الـ Drabkin reagent إذا كنتوا 90 00:06:01,930 --> 00:06:03,950 فاكرين لما قرأنا الهمoglobin لما قرأتوا 91 00:06:03,950 --> 00:06:07,330 الهمoglobin في المقدمة استخدمنا cyanomethemoglobin 92 00:06:07,330 --> 00:06:12,060 reagent أو بيسمينا Drabkin reagent. طبعا إذا بحضر 93 00:06:12,060 --> 00:06:15,340 الهيمولايزات في سيانو مت هيموجلوبين reagent بعد 94 00:06:15,340 --> 00:06:18,740 هيك إيش بضيف؟ بضيف حاجة alkaline عشان تعمل 95 00:06:18,740 --> 00:06:22,320 denaturation للهيموجلوبين. الحاجة ال alkaline ها دي 96 00:06:22,320 --> 00:06:26,280 ال sodium hydroxide. طبعا بضيف ال sodium hydroxide 97 00:06:26,280 --> 00:06:31,820 لوقت محدد exactly two minutes بس. two minutes خلال 98 00:06:31,820 --> 00:06:34,800 ال two minutes بضمن أن أنواع الهيموجلوبين صار لها 99 00:06:34,800 --> 00:06:38,840 denaturation مع ده Hemoglobin F لكن لو طولت في 100 00:06:38,840 --> 00:06:41,900 احتمال إنه برضه Hemoglobin F يصير له Denaturation 101 00:06:41,900 --> 00:06:46,480 تمام؟ خلال هذا الوقت. Normal Hemoglobin is 102 00:06:46,480 --> 00:06:50,240 destroyed but the fetal Hemoglobin remains intact 103 00:06:50,240 --> 00:06:52,260 يعني أنواع الـ Hemoglobin التانية هيصير له 104 00:06:52,260 --> 00:06:56,160 Denaturation. Hemoglobin F هيظله ايه كويس مش هيخرب 105 00:06:56,160 --> 00:07:00,460 فلقيت بعد دقيقتين أنا بدي أوقف التفاعل لأنني خايفة 106 00:07:00,460 --> 00:07:03,160 إن Hemoglobin F يصير له Denaturation فإيش بعمل؟ 107 00:07:03,160 --> 00:07:06,480 بضيف مادة. المادة هذه اللي هي الـ Ammonium Sulfate 108 00:07:06,780 --> 00:07:10,880 هذه الـ Ammonium Sulfate بتعمل شغل تاني بتعمل stop 109 00:07:10,880 --> 00:07:14,080 لل-denaturation process إذا كانت بتتفاعل مع ما 110 00:07:14,080 --> 00:07:17,520 تبقى من الـ Sodium Hydroxide يعني خلاص، بتعادل الـ 111 00:07:17,520 --> 00:07:20,040 Sodium Hydroxide المتبقي عساس أنه مايشتغلش كمان 112 00:07:20,040 --> 00:07:23,020 الشغل التاني، الـ Hemoglobin اللي صار له 113 00:07:23,020 --> 00:07:26,740 denaturation بتعمله precipitation يعني بترسبه، 114 00:07:26,740 --> 00:07:29,960 بتعمله على شكل particles كثيرة عساس أنه بعد هيك 115 00:07:29,960 --> 00:07:33,530 أعمله filtration وأفصله. بعد هيك الـ solution is 116 00:07:33,530 --> 00:07:36,970 filtered. Cyanomethemoglobin solution measured 117 00:07:36,970 --> 00:07:40,110 spectrophotometrically to determine the percent of 118 00:07:40,110 --> 00:07:43,930 Hemoglobin F. كيف يعني؟ بعمل filtration في تيوب 119 00:07:43,930 --> 00:07:48,610 عادية. باخده تيوب هادي و بقرأها على 540 نانومتر. نفس 120 00:07:48,610 --> 00:07:51,390 الطول الموج اللي كنت أقرأ عليه الهيمoglobin. هيك 121 00:07:51,390 --> 00:07:54,650 أنا بكون قرأت مين؟ بكون قرأت ال absorbance 122 00:07:54,650 --> 00:07:58,410 لهيمoglobin F. أكيد بالزمن أعمل الـ total عشان 123 00:07:58,410 --> 00:08:00,870 أقارنهم ببعض زي ما عملنا في Hemoglobin A2 124 00:08:05,580 --> 00:08:10,000 هذه الخطوات بالتفصيل إن شاء الله لما نرجع نحكيها 125 00:08:10,000 --> 00:08:13,280 لأنها كلها كميات يعني لا يمكن تبقى محافظينها 126 00:08:13,280 --> 00:08:16,560 الخطوات. أول إشي تحضير الـ Hemolysate. الخطوة 127 00:08:16,560 --> 00:08:20,920 التانية تجميع Hemoglobin F. الخطوة التالتة أني أحضر 128 00:08:20,920 --> 00:08:23,580 الـ Total Hemoglobin. أحضرت الـ Total Hemoglobin 129 00:08:23,580 --> 00:08:27,060 فبقرأ Hemoglobin F و Total Hemoglobin 130 00:08:27,060 --> 00:08:31,630 Spectrophotometry. بيصير عندي قراءة تانية بحسب نسبة 131 00:08:31,630 --> 00:08:34,130 Hemoglobin F هي عبارة عن الـ Absorbance لـ 132 00:08:34,130 --> 00:08:36,630 Hemoglobin F على الـ Absorbance للـ Total 133 00:08:36,630 --> 00:08:43,330 Hemoglobin. طبعاً في عشرة في المقام في 100% أو إني 134 00:08:43,330 --> 00:08:46,610 بدرب في عشرة مباشرة يعني اللي هي 100 على 10 هتكون 135 00:08:46,610 --> 00:08:50,650 العشرة هذه يا بنات إيش أنا بحطها؟ لأنه في عندي 136 00:08:50,650 --> 00:08:54,330 فترة تخفيف يعني أنا عشان أقارن الـ Hemoglobin F 137 00:08:54,330 --> 00:08:57,550 Absorbance بالـ Total Hemoglobin لازم أبقى شغلكم 138 00:08:57,550 --> 00:09:01,450 بنفس التخفيفات في عندي فرق في التخفيف عشر أضعاف 139 00:09:01,450 --> 00:09:05,310 وبضرب فيه في المقام عشان المقارنة بتاعتي صحيحة 140 00:09:05,310 --> 00:09:08,610 وسليمة، كويس؟ فممكن أقول هو عبارة عن الـ 141 00:09:08,610 --> 00:09:12,990 Absorbance لأفعل Absorbance للـ Total في عشرة، 142 00:09:12,990 --> 00:09:17,010 فهيك بكون خالصة الـ Normal Range من Zero إلى Six 143 00:09:17,010 --> 00:09:23,090 Months هيوصل لغاية 75%. يعني طبعا بعد ست شهور الـ 144 00:09:23,090 --> 00:09:26,710 Adult هيكون أقل من 2%. حتى في الـ Adult غالبا أقل 145 00:09:26,710 --> 00:09:27,890 من 1% كمان. 146 00:09:31,420 --> 00:09:35,820 طيب هنا بعض النقاط اللي بدنا نناقشها. هنا بقولك 147 00:09:35,820 --> 00:09:39,160 الأطفال اللي عندهم sickle cell disease هتلاقي 148 00:09:39,160 --> 00:09:43,200 عندهم مشاكل 149 00:09:43,200 --> 00:09:46,580 هتبدأ تظهر لما يقل تصنيع Hemoglobin F. وهذا الكلام 150 00:09:46,580 --> 00:09:49,440 احنا قلناه إن هو Hemoglobin F وجوده بقلل الـ 151 00:09:49,440 --> 00:09:52,840 sickling فبالتالي لما يسير switch off لتصنيع 152 00:09:52,840 --> 00:09:57,800 Hemoglobin F هتلاقي المشاكل بلش هتزيد عندهم. In 153 00:09:57,800 --> 00:10:01,800 adult. Fetal-Hemoglobin production can be reactivated 154 00:10:01,800 --> 00:10:06,140 pharmacologically. العلاج اللي حكينا عنه إنه نشط 155 00:10:06,140 --> 00:10:09,740 Fetal-Hemoglobin عن طريق علاج اسمه Hydroxyurea 156 00:10:09,740 --> 00:10:13,960 وطبعا هذا علاج جيد بيقلل من أعراض Sickle Cell 157 00:10:13,960 --> 00:10:17,440 Disease. Hydroxyurea one of the new drugs used to 158 00:10:17,440 --> 00:10:20,300 treat Sickle Cell Disease in adult work by turning 159 00:10:20,300 --> 00:10:23,420 Hemoglobin F back on. يعني برجع يصنع Hemoglobin 160 00:10:23,420 --> 00:10:28,860 بيخلّي Hemoglobin F يرجع يتصنع. عافية. هيك خلصنا 161 00:10:28,860 --> 00:10:30,300 طريقة Hemoglobin F.