1 00:00:01,250 --> 00:00:05,690 بسم الله الرحمن الرحيم نستقبل 2 00:00:05,690 --> 00:00:11,350 إن شاء الله في محاضرة enzymes ووصلنا 3 00:00:11,350 --> 00:00:19,160 المرة السابقة لـ measuring enzyme activity بما يتعلق 4 00:00:19,160 --> 00:00:23,460 بـ Measurement Conditions زي ما اتفقنا إنه لازم 5 00:00:23,460 --> 00:00:30,100 يكون فيه عندنا excess amounts of substrate و أيضا أي 6 00:00:30,100 --> 00:00:37,780 cofactors أو coenzymes تلزم لعمل الإنزيم و 7 00:00:37,780 --> 00:00:42,760 زي ما حكينا هذا to handle possible abnormality 8 00:00:42,760 --> 00:00:46,820 high patient enzyme levels يعني إذا كان إنا كان 9 00:00:46,820 --> 00:00:50,980 عينة المريض بتحتوي على concentration عالية من 10 00:00:50,980 --> 00:00:54,560 الإنزيم يبقى زي ما قولنا ممكن لو عندنا ال 11 00:00:54,560 --> 00:01:00,160 incubation time عشر دقائق ممكن يتم استهلاك ال 12 00:01:00,160 --> 00:01:03,940 substrate الموجود في أول خمس دقائق و الخمس دقائق 13 00:01:03,940 --> 00:01:08,740 التانية مايكونش في عندنا أي زيادة في ال product 14 00:01:08,740 --> 00:01:15,710 عشبي للمثال وبالتالي هيك هيكون في عندنا falsely لو 15 00:01:15,710 --> 00:01:23,370 concentration لـ ال product و هذا هيعكس falsely لو 16 00:01:23,370 --> 00:01:27,970 طبعا concentration لـ الإنزيم يبقى عشان هيك بيكون 17 00:01:27,970 --> 00:01:30,790 في عندنا excess amounts of substrate and any co 18 00:01:30,790 --> 00:01:35,000 factorsأيضا الـ measurement conditions زي ما اتفقنا 19 00:01:35,000 --> 00:01:38,440 أن أي 20 00:01:38,440 --> 00:01:44,840 إنزيم فيه optimum temperature و فيه optimum pH و 21 00:01:44,840 --> 00:01:50,300 هدول برضه لازم يكونوا متوفرين inhibitors must be 22 00:01:50,300 --> 00:01:57,630 lacking لأنه أكيد يمنعوا عمل الإنزيم الحرارة يجب أن 23 00:01:57,630 --> 00:02:03,930 تكون مستمرة بـ ± 0.1 درجة مئوية خلال الاختبار في 24 00:02:03,930 --> 00:02:10,150 حرارة موجودة فيها الإنزيم الآن 25 00:02:10,150 --> 00:02:17,430 في عندنا طريقتين لقياس الـ activity لـ إنزيم في 26 00:02:17,430 --> 00:02:23,970 مجموعة معينة الطريقة الأولى هي الـ fixed-time 27 00:02:23,970 --> 00:02:30,180 methodوالطريقة التانية continuous monitoring 28 00:02:30,180 --> 00:02:36,800 methods أو تسمى kinetics الـ fixed-time methods 29 00:02:36,800 --> 00:02:43,000 باستخدام هذه الطريقة بيصير في عندنا دمج للمتفاعلات 30 00:02:43,000 --> 00:02:49,520 يبقى المتفاعلات اللازمة لأن الـ reagent اللازم مع 31 00:02:49,520 --> 00:02:57,910 الـ sample بيتم خلطهم مع بعض و بيتم عمل incubation 32 00:02:57,910 --> 00:03:03,630 at optimum temperature لوقت معين يعني ممكن الوقت 33 00:03:03,630 --> 00:03:09,330 تكون خمس دقائق، عشر دقائق و بعد انتهاء الوقت the 34 00:03:09,330 --> 00:03:15,120 reaction is stoppedو عادةً بتم إيقاف التفاعل عن 35 00:03:15,120 --> 00:03:20,200 طريق إضافة weak acid و ما زال ضفنا weak acid يبقى 36 00:03:20,200 --> 00:03:29,480 عملنا .. غيرنا الـ optimum pH للـ enzyme a 37 00:03:29,480 --> 00:03:33,100 measurement is made of the amount of reaction that 38 00:03:33,100 --> 00:03:38,220 has occurred تمام 39 00:03:38,220 --> 00:03:44,960 يبقى بنشوف بعد هيك اللي هو إيش صار في عندنا تفاعل 40 00:03:44,960 --> 00:03:49,360 إيش يعني اتكون ممكن product أو صار في عندنا نقص في 41 00:03:49,360 --> 00:03:54,100 substrate the 42 00:03:54,100 --> 00:03:57,220 reaction is assumed to be linear over the reaction 43 00:03:57,220 --> 00:04:03,560 time بيبقى بنحط فرضية في الـ fixed time إنه التفاعل 44 00:04:03,560 --> 00:04:07,980 كان عندنا linear يعني عندنا خلال الـ incubation time 45 00:04:07,980 --> 00:04:15,780 اللي صارت كان في عندنا زيادة ثابتة في كمية على سبيل 46 00:04:15,780 --> 00:04:21,480 المثال الـ product اللي اتكون يعني كل دقيقة مثلا 47 00:04:21,480 --> 00:04:28,200 اتكون عندنا كمية محددة من الـ product وهذا اتكرر في 48 00:04:28,200 --> 00:04:34,150 الدقائق المختلفة وإذا كان إن الـ incubation time 49 00:04:34,150 --> 00:04:38,210 لعشر دقائق يبقى هيكون فيه زيادة ثابتة في كمية ال 50 00:04:38,210 --> 00:04:42,910 product اللي بينتج خلال العشر دقائق الـ incubation 51 00:04:42,910 --> 00:04:46,290 يبقى الـ reaction is assumed to be linear over the 52 00:04:46,290 --> 00:04:50,670 reaction time the larger the reaction the more 53 00:04:50,670 --> 00:04:55,790 enzyme is presentطبعاً بعد ذلك في النهاية اللي هو 54 00:04:55,790 --> 00:04:59,810 الـ incubation time زي ما قولناه بعد ما نوقف عمل 55 00:04:59,810 --> 00:05:03,790 الإنزيم بيصير فينا قياس باستخدام ال 56 00:05:03,790 --> 00:05:06,190 spectrophotometer زي ما اتفقنا المرة السابقة أما 57 00:05:06,190 --> 00:05:09,890 بزيادة الـ product بنقص substrate بـ لو زيادة 58 00:05:09,890 --> 00:05:13,010 coenzyme أو نقص coenzyme يبقى بيصير فينا 59 00:05:13,010 --> 00:05:18,630 measurement وعلى سبيل المثال كمية الـ product اللي 60 00:05:18,630 --> 00:05:25,040 انتجت هتعكس لكمية الإنزيم اللي موجودة الآن هنقل 61 00:05:25,040 --> 00:05:28,020 المشكلة possible problems with extremely high 62 00:05:28,020 --> 00:05:32,860 enzyme levels إذا كان عندنا الـ sample كانت بتحتوي 63 00:05:32,860 --> 00:05:36,940 على كمية كبيرة من الإنزيم اه زي ما حكينا أكثر من 64 00:05:36,940 --> 00:05:42,380 مرة في هذه الحالة ممكن التفاعل عندنا يكون لخمس 65 00:05:42,380 --> 00:05:46,220 دقائق و بعد هيك يصير في عندنا استهلاك لـ ال 66 00:05:46,220 --> 00:05:49,560 substrate أو إذا كان في عندنا coenzyme ممكن 67 00:05:49,560 --> 00:05:54,060 بيحتاجوا التفاعل و الخمس دقائق التانية مش هيكون في 68 00:05:54,060 --> 00:06:01,270 عندنا أي زيادة في الـ product يبقى زي ما هو واضح هان 69 00:06:01,270 --> 00:06:07,650 في الـ graph هان عندنا الـ time وهان عندنا كمية ال 70 00:06:07,650 --> 00:06:12,990 product اللي اتكونت طبعا هان على أساس انه اللي 71 00:06:12,990 --> 00:06:16,110 هيتم قياسه هو الـ product و الـ product له maximum 72 00:06:16,110 --> 00:06:22,030 absorbance at wavelengths معينة يبقى الـ .. هان في 73 00:06:22,030 --> 00:06:25,370 حال إنه كان في عندنا high enzyme concentration في 74 00:06:25,370 --> 00:06:30,580 الـ sample هيمشي عندنا الـ sample ممكن أول خمس دقائق 75 00:06:30,580 --> 00:06:34,940 يعني على سبيل المثال زي ما قلنا هيصير في عندنا 76 00:06:34,940 --> 00:06:41,100 استهلاك لـ ممكن الـ substrate الموجود وبالتالي مش 77 00:06:41,100 --> 00:06:44,260 هيتبقى substrate اللي هو الـ enzyme يحوله قليل إلى 78 00:06:44,260 --> 00:06:47,800 الـ product يبقى احنا لما بنيجي بنشتغل بالـ fixed 79 00:06:47,800 --> 00:06:51,000 time زي ما قلنا بنضيف الـ reactants اللي هو ال 80 00:06:51,000 --> 00:06:54,700 reagent مع الـ sample اللي عندي وبعمل الـ incubation 81 00:06:54,700 --> 00:06:56,120 العشر دقائق 82 00:06:58,550 --> 00:07:04,550 وباجي في نهاية العشر دقائق باجي بقرا اللي وجدناه 83 00:07:04,550 --> 00:07:09,210 كمية الـ product اللي اتكونت عندي تمام؟ يبقى أنا مش 84 00:07:09,210 --> 00:07:14,330 عارف فعليا إيش اللي صار خلال العشر دقائق هذه هل 85 00:07:14,330 --> 00:07:18,870 كان عندنا فعليا linear increase في الـ product خلال 86 00:07:18,870 --> 00:07:23,130 العشر دقائق لغاية ما تم إيقاف التفاعل ولا زي 87 00:07:23,130 --> 00:07:26,650 الحالة هذه زي ما احنا شايفين إنه كان في عندنا 88 00:07:26,650 --> 00:07:30,430 زيادة في الـ product أول خمس دقائق وبعد ذلك صار في 89 00:07:30,430 --> 00:07:33,950 عندنا ثبات في كمية الـ product لأن الـ substrate 90 00:07:34,370 --> 00:07:39,370 انتهى، بها دي المشكلة بـ الـ fixed-time methods 91 00:07:39,370 --> 00:07:43,270 يبقى احنا بنعمل incubation لعشر دقائق، بيجي بنقيس 92 00:07:43,270 --> 00:07:46,810 في نهاية العشر دقائق لكن فعليا إيش اللي صار خلال 93 00:07:46,810 --> 00:07:52,930 العشر دقائق مش هنكون عارفين وكما ذكرنا سابقا إنه 94 00:07:52,930 --> 00:07:58,510 هان هيعطيني falsely low طبعا product concentration 95 00:07:58,510 --> 00:08:02,890 وبالتالي هذا هيكسلي إن في عندي low enzyme 96 00:08:02,890 --> 00:08:07,340 concentrationطيب الطريقة الأخرى اللي هو ال 97 00:08:07,340 --> 00:08:11,300 continuous monitoring method أو الـ kinetics هان 98 00:08:11,300 --> 00:08:16,080 عندنا بيصير multiple measurements اللي هو ال 99 00:08:16,080 --> 00:08:19,040 absorbance باستخدام الـ spectrophotometer بيبقى مش 100 00:08:19,040 --> 00:08:22,560 قراءة واحدة فقط زي الـ fixed time لأ هان بيكون في 101 00:08:22,560 --> 00:08:30,830 عندنا أكثر من قراءة اللي بيتم أخذها خلال التفاعل و 102 00:08:30,830 --> 00:08:35,430 القراءات هذه either at specific time intervals 103 00:08:35,430 --> 00:08:41,630 يعني ممكن كل ثلاثين ثانية ناخد قراءة أو ممكن 104 00:08:41,630 --> 00:08:45,550 continuously by a continuous recording 105 00:08:45,550 --> 00:08:49,770 spectrophotometer وفي عندنا أجهزة أجهزة 106 00:08:49,770 --> 00:08:50,750 spectrophotometer 107 00:08:52,790 --> 00:08:57,770 ممكن يصير في عندنا سحب لعينة وطبعا الجهاز بيكون 108 00:08:57,770 --> 00:09:04,430 مُبرمج و مُبرمج يعني هان مثلا إنه يقرأ لي كل ثلاثين 109 00:09:04,430 --> 00:09:09,200 ثانية و يقرأ لي مثلا أربع قراءات أو ست قراءات و 110 00:09:09,200 --> 00:09:12,760 الطريقة التانية برضه ممكن يتم برمجة الجهاز إنه 111 00:09:12,760 --> 00:09:17,940 باستمرار يقرأ لي كيف كان الزيادة على سبيل المثال 112 00:09:17,940 --> 00:09:22,220 في الـ product بي hand بيكون زي ما قلنا إما at 113 00:09:22,220 --> 00:09:26,960 specific time intervals أو continuously تمام طول 114 00:09:26,960 --> 00:09:31,940 الوقت يقعد بياخد قراءات للتفاعل اللي بيصير وكمية 115 00:09:31,940 --> 00:09:35,160 الـ product اللي على سبيل المثال بتنتج 116 00:09:37,310 --> 00:09:42,310 طبعا الطرق هذه الأسواق باستخدام الـ specific time 117 00:09:42,310 --> 00:09:46,270 أو الـ continuously طبعا أفضل من الـ fixed-time 118 00:09:46,270 --> 00:09:50,490 method because the linearity of the reaction may 119 00:09:50,490 --> 00:09:53,150 be more adequately verified يعني من خلال هذه 120 00:09:53,150 --> 00:10:00,310 الطريقة ممكن نتأكد إذا كان فعلا التفاعل كان linear 121 00:10:00,310 --> 00:10:06,510 واستمر linear أو لا ولو صار في عندنا أي مشكلة في 122 00:10:06,510 --> 00:10:10,730 التفاعل و يبطل 123 00:10:10,730 --> 00:10:17,730 يصير مثلا يتكون product يبقى هيبين عن دهان مباشرة 124 00:10:17,730 --> 00:10:24,350 تمام بيجهد الطريقة أفضل من الطريقة الأولى if 125 00:10:24,350 --> 00:10:26,850 absorbance is measured at intervals several data 126 00:10:26,850 --> 00:10:30,370 points are necessary to increase the accuracy of 127 00:10:30,370 --> 00:10:34,630 linearity assessment بجهة هام ده ناخد أكثر من 128 00:10:34,630 --> 00:10:42,430 قراءة ممكن ناخد مثلا أربع قراءات قراءة بعد ممكن 129 00:10:42,430 --> 00:10:48,510 ثلاثين ثانية ستين تسعين مائة وعشرين وبعدين ممكن إيش 130 00:10:48,510 --> 00:10:56,700 نعمل نطرح الـ absorbance اللي تم قراءته مثلا على وقت 131 00:10:56,700 --> 00:11:00,580 ستين ثانية من الـ absorbance اللي على ثلاثين ثانية 132 00:11:00,580 --> 00:11:05,400 حيكون في عندي الفرق الـ absorbance، الآن مرة ثانية 133 00:11:05,400 --> 00:11:10,230 بقرأ اللي الـ absorbance على 90 و بنقصه من ال 134 00:11:10,230 --> 00:11:15,450 absorbance اللي على 60 المفروض الرقم الـ absorbance 135 00:11:15,450 --> 00:11:20,850 اللي هو الـ 90 minus الـ 60 و الـ 60 minus الـ 30 يكون 136 00:11:20,850 --> 00:11:25,630 في عندنا الـ absorbance ثابت إذا كان التفاعل linear 137 00:11:25,630 --> 00:11:31,410 يبقى زي ما هو واضح هان بالـ figure هي هان عندنا ال 138 00:11:31,410 --> 00:11:35,170 absorbance وعندنا قراءات على 30 ثانية و 60 و 90 و 139 00:11:35,170 --> 00:11:39,770 120طبعا زي ما قولنا بعد هيك بنعمل بنشوف ال 140 00:11:39,770 --> 00:11:46,790 absorbance على ستين و بننقصها من القراءة اللي كانت 141 00:11:46,790 --> 00:11:55,910 على تلاتين ثانية هيعطينى فرق طبعا الفرق هذا بدى 142 00:11:55,910 --> 00:12:00,630 يساوي اللي هو الفرق في ال absorbance لما نيجي نطرح 143 00:12:00,630 --> 00:12:03,710 ال absorbance على تسعين ناقص ال absorbance على 144 00:12:03,710 --> 00:12:09,270 ستين طبعا بيجي هيك بدل إذا كان هنا إن كانت الزيادة 145 00:12:09,270 --> 00:12:14,070 ثابتة ممكن يعني على سبيل المثال يقول مثلا point 2 146 00:12:14,070 --> 00:12:19,070 في ال absorbance و هنا point 2 في ال absorbance 147 00:12:19,070 --> 00:12:27,770 يبقى معناه عندنا التفاعل linear لكن لو بعد هيك 148 00:12:27,770 --> 00:12:34,510 صار في عندنا مشكلة خلص ال substrate مثلا طبعا يعني 149 00:12:34,510 --> 00:12:38,810 مثلا هنا لو قلنا على مثلا مية و خمسين على سبيل 150 00:12:38,810 --> 00:12:46,530 المثال طبعا و اجينا أخذنا مية و خمسين ناقص مية و 151 00:12:46,530 --> 00:12:51,010 عشرين هلاقي انه هنا ال absorbance ممكن صارت مثلا 152 00:12:51,010 --> 00:12:58,490 point واحد خمسة أه يبقى بعرف أنا انه لغاية مية و 153 00:12:58,490 --> 00:13:06,230 عشرين كان عندي التفاعل linear و بعد هيك ممكن يكون 154 00:13:06,230 --> 00:13:10,290 صار في عندي نقص فيه ال substrate على سبيل المثال 155 00:13:10,290 --> 00:13:15,850 طبعا بيجي امتى بيصير في عندي مشكلة نقص فيه 156 00:13:15,850 --> 00:13:19,350 substrate نقص فيه coenzyme يبقى على طول بيبين عندي 157 00:13:19,350 --> 00:13:23,390 من خلال ال continuous monitoring 158 00:13:27,030 --> 00:13:33,370 احنا زي ما اتفقنا سابقا انه النتائج المختبر عادة 159 00:13:33,370 --> 00:13:37,730 بيكون فيه عندي بما يتعلق في الانزيمات طبعا بيكون 160 00:13:37,730 --> 00:13:42,130 activity إذا كان زي ما حكينا قصنا اللي هو ال 161 00:13:42,130 --> 00:13:48,290 activity للانزيم و مش كمية الانزيم الموجودة يبقى ال 162 00:13:48,290 --> 00:13:54,050 units لإصدار النتائج عندنا international unit 163 00:13:56,030 --> 00:13:59,550 و التعريف الـ international unit الـ amount of 164 00:13:59,550 --> 00:14:03,250 enzyme that will convert one micromole of 165 00:14:03,250 --> 00:14:07,950 substrate per minute in specified conditions 166 00:14:07,950 --> 00:14:12,390 و النتيجة عادة بيصلها reporting على international 167 00:14:12,390 --> 00:14:17,830 unit per liter بهيك بيكون بيصير إصدار لنتيجة ال 168 00:14:17,830 --> 00:14:22,780 enzymes اللي هو ال activity of enzymes في عندنا 169 00:14:22,780 --> 00:14:26,220 unit أخرى اللي هي ال international system of units 170 00:14:26,220 --> 00:14:33,740 و ال .. ال unit هنا catal و ال catal هي عبارة عن 171 00:14:33,740 --> 00:14:37,500 mole per second يبقى ال moles of substrate 172 00:14:37,500 --> 00:14:42,780 converted per second و بيصير عندنا reporting 173 00:14:42,780 --> 00:14:50,400 للنتيجة catal per liter و ممكن تحويل ال 174 00:14:50,400 --> 00:14:55,330 international unit الى catal ان ال one 175 00:14:55,330 --> 00:15:04,370 international unit بتساوي seventeen nano catal طيب 176 00:15:04,370 --> 00:15:09,650 قلنا ان احنا عادة بنقيس ال activity لكن مش ممكن 177 00:15:09,650 --> 00:15:14,430 نقيس ال ال mass ال concentration ل ال enzyme ممكن 178 00:15:14,430 --> 00:15:20,560 ممكن أيضا و في عندنا فعليا عدد من الفحوصات اللي 179 00:15:20,560 --> 00:15:25,060 بيتم عن طريق قياس ال mass of enzyme أو ال 180 00:15:25,060 --> 00:15:31,420 concentration of enzyme يبقى 181 00:15:31,420 --> 00:15:34,580 هنا زي ما قلنا بنقيس كمية ال enzyme لكن فيه انه 182 00:15:34,580 --> 00:15:39,880 يعني ممكن بعض المشاكل اللي بتواجه هذه الطريقة و من 183 00:15:39,880 --> 00:15:44,120 هذه المشاكل طبعا احنا إذا كان بندنقيس ال ال enzyme 184 00:15:44,120 --> 00:15:47,780 mass ال concentration لـ ال enzyme يبقى بندنستخدم 185 00:15:47,780 --> 00:15:52,420 antibody عشان نعمل detection للانزيم الموجود 186 00:15:52,420 --> 00:15:57,140 باستخدام antibody يستهدف هذا الانزيم أو ال iso 187 00:15:57,140 --> 00:16:01,760 انزيم وبالتالي المشاكل اللي ممكن نواجهها بهذه 188 00:16:01,760 --> 00:16:04,780 الحالة انه يصير في عنا cross reactivity with 189 00:16:04,780 --> 00:16:09,900 inactive enzymes يعني ممكن يكون أنا عندي موجود بال 190 00:16:09,900 --> 00:16:15,860 sample انزيمات بعض من هذه الانزيمات active و بعض من 191 00:16:15,860 --> 00:16:21,300 هذه الانزيمات non-functional, inactive, denatured 192 00:16:21,300 --> 00:16:27,120 ممكن يبقى لما أنا بقيس بستخدم ال antibody إذا كان 193 00:16:27,120 --> 00:16:30,500 ال Epitope اللي بديجي يرتبط معاه ال antibody سليم 194 00:16:30,500 --> 00:16:34,520 مافيش فيه مشكلة مافيه أي تغير يبقى ال antibody 195 00:16:34,520 --> 00:16:39,620 هيرتبط بغض النظر انه هل ال enzyme active أو 196 00:16:39,620 --> 00:16:46,450 inactive طبعا يبقى زي ما قلنا ممكن يعملي reactivity 197 00:16:46,450 --> 00:16:50,490 with inactive enzymes أو ممكن يعملي مع inactive 198 00:16:50,490 --> 00:16:56,790 isoenzymes و أيضا ممكن ينتبه ان حتى يرتبط مع 199 00:16:56,790 --> 00:17:00,880 partially digested enzyme يبقى حتى إذا كان جزء من 200 00:17:00,880 --> 00:17:05,100 الانزيم يعني الانزيم صار له breakdown لكن في عندي 201 00:17:05,100 --> 00:17:10,240 الجزء من الانزيم اللي بيرتبط مع ال antibody لسه 202 00:17:10,240 --> 00:17:14,100 سليم وما صار له degradation يبقى ال antibody برضه 203 00:17:14,100 --> 00:17:21,180 هيرتبط و ممكن يعملي يعني 204 00:17:21,180 --> 00:17:27,240 يعطيني falsely high concentration للانزيم 205 00:17:28,730 --> 00:17:32,610 تمام بيه هذه المشكلة اللي بتواجهنا في قياس ال 206 00:17:32,610 --> 00:17:37,090 concentration و عشان هيك يعني عشان نتجنب هذه 207 00:17:37,090 --> 00:17:43,240 المشكلة لازم يصير في عنا مقارنة يا اما نعتمد أي 208 00:17:43,240 --> 00:17:48,560 قياس لـ enzyme concentration أو enzyme mass لابد 209 00:17:48,560 --> 00:17:56,120 من عمل experiment نشوف إيش العلاقة بين ال enzyme 210 00:17:56,120 --> 00:18:00,550 activity مع ال enzyme mass العلاقة بين عملية 211 00:18:00,550 --> 00:18:08,590 الانزيم ومجموعة الانزيم عامة بشكل عام لكن يجب 212 00:18:08,590 --> 00:18:13,970 أن تكون محدودة لكل انزيم لازم نحدد لكل انزيم ان هل 213 00:18:13,970 --> 00:18:20,990 فعلا ال activity متوافقة مع ال quantity أو لا 214 00:18:20,990 --> 00:18:23,710 انزيم 215 00:18:24,210 --> 00:18:26,810 يمكن أيضا أن يكون قرر و يقوم بالتقريب من تقنية 216 00:18:26,810 --> 00:18:38,950 Electrophoresis التي تقدر تقريبًا و يقدر 217 00:18:38,950 --> 00:18:41,630 تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا 218 00:18:41,630 --> 00:18:41,870 تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا 219 00:18:41,870 --> 00:18:42,330 تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا 220 00:18:42,330 --> 00:18:46,430 تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا 221 00:18:52,560 --> 00:18:59,620 للـ Bands المختلفة هيك بنكون حكينا يعني مقدمة 222 00:18:59,620 --> 00:19:04,820 بسيطة عن الإنزيمات و كيفية قياسها و الآن هنبدأ في 223 00:19:04,820 --> 00:19:13,140 التحدث عن بعض من الإنزيمات المهمة الموجودة في جسم 224 00:19:13,140 --> 00:19:18,980 الإنسان في عندنا من الإنزيمات اللي هنحكي عليها الـ 225 00:19:18,980 --> 00:19:22,110 Acid Phosphatase طبعا هنا لدينا الانزيم و هنا لدينا 226 00:19:22,110 --> 00:19:26,430 ال clinical significance يعني مرتبط ممكن بأي مرض 227 00:19:26,430 --> 00:19:30,730 acid phosphatase بالبرستاتيكارسينوما في عندنا ALT 228 00:19:30,730 --> 00:19:37,630 في ال hepatic disorder يبقي طبعا الارتفاع في 229 00:19:37,630 --> 00:19:42,090 الانزيم بيدل على مشكلة في organ معين و زي ما قلنا 230 00:19:42,090 --> 00:19:48,330 هذا مرتبط في وجود كميات من هذا الانزيم في داخل 231 00:19:48,330 --> 00:19:52,620 خلايا الكبد يعني إذا كان نحكي على ALT و إذا كان 232 00:19:52,620 --> 00:19:56,400 صرفي عندي Hepatic Disorder هيرتفع ال ALT ليش؟ لأنه 233 00:19:56,400 --> 00:20:00,320 فعليا عندي concentration عالية من ال ALT في خلايا 234 00:20:00,320 --> 00:20:04,500 الكبد عندنا أيضا alkaline phosphatase اللي هو ال 235 00:20:04,500 --> 00:20:07,420 hepatic disorder أو ال bone disorder عندنا 236 00:20:07,420 --> 00:20:13,870 ال amylase بال acute pancreatitis Aspartate, Amino 237 00:20:13,870 --> 00:20:17,830 Transferase و الـ AST بأكثر من شغلة Myocardial 238 00:20:17,830 --> 00:20:20,410 Infarction, Hepatic Disorder, Skeletal Muscle 239 00:20:20,410 --> 00:20:26,510 Disorder, Creatine Kinase, Myocardial Infarction 240 00:20:26,510 --> 00:20:29,250 و Skeletal Muscle Disorder طب زي ما هنشوف الآن كمان 241 00:20:29,250 --> 00:20:32,390 شوية يعني لما بنقول مثلا Creatine Kinase طب هي 242 00:20:32,390 --> 00:20:37,030 عندنا بالقلب و عندنا بال skeletal muscles طيب يعني 243 00:20:37,030 --> 00:20:40,310 لما يرتفع أن الكرياتين كينيز ده كيبنا نعرف إيش 244 00:20:40,310 --> 00:20:44,710 المشكلة هنا بييجي دور ال iso-enzymes زي ما هنشوف 245 00:20:44,710 --> 00:20:48,650 انه في ان انزيمات هذه اللي مرتبطة بأكثر من 246 00:20:48,650 --> 00:20:53,530 مشكلة في ممكن الها iso-enzymes و إذا كان قصنا ال 247 00:20:53,530 --> 00:20:58,330 iso-enzymes ممكن نحدد بالظبط هل المشكلة على سبيل 248 00:20:58,330 --> 00:21:02,590 مثال القلب في هذه الحالة أو في العضلات gamma 249 00:21:02,590 --> 00:21:08,390 glutamyl transferase hepatic disorder G6PD Drug 250 00:21:08,390 --> 00:21:12,010 -Induced Pneumonia لكتير ديهيدروجينيز برضه مطابق 251 00:21:12,010 --> 00:21:14,990 بأكثر من Disorder هنا مي Cardial Infarction، 252 00:21:14,990 --> 00:21:20,710 Hepatic Disorder و Carcinoma نبدأ بالإنزيم الأول 253 00:21:20,710 --> 00:21:27,410 كرياتين كينيز و اختصاره CK هذا 254 00:21:27,410 --> 00:21:31,090 الانزيم طبعا احنا حكينا قبل هيك على الكرياتين 255 00:21:32,710 --> 00:21:38,110 كينيز لما حكينا عن تكوين الكرياتينين هذا الانزيم 256 00:21:38,110 --> 00:21:42,470 مرتبط بـ Regeneration and Storage of High Energy 257 00:21:42,470 --> 00:21:46,610 Phosphate اللي هو الـ ATP و زي ما قلنا هذا اللي 258 00:21:46,610 --> 00:21:50,570 موجود في العضلات it catalyzes the following 259 00:21:50,570 --> 00:21:56,530 reversible reaction in the body الكرياتين مع ATP 260 00:21:56,530 --> 00:22:01,390 في وجود الكرياتين كينيز بيعطيني كرياتين فوسفات زائد 261 00:22:01,390 --> 00:22:07,470 ATP و هذا التفاعل يسير في الاتجاهين غالبًا يمكن 262 00:22:07,470 --> 00:22:10,010 كرياتين مع ATP في وجود الكرياتين كينيز يعطيني 263 00:22:10,010 --> 00:22:13,930 كرياتين فوسفات و ADP و الكرياتين فوسفات مع ADP في 264 00:22:13,930 --> 00:22:21,970 وجود الكرياتين كينيز هيعطيني كرياتين و ATP ال 265 00:22:21,970 --> 00:22:26,260 high concentration of Creatine Kinase موجود يبقى و ان 266 00:22:26,260 --> 00:22:29,640 موجود هذا الانزيم ب concentration عالية في أي 267 00:22:29,640 --> 00:22:33,980 tissue في أي خلايا عندنا موجود بال skeletal muscle 268 00:22:33,980 --> 00:22:41,600 cardiac muscle و أيضا brain tissue طيب 269 00:22:41,600 --> 00:22:46,340 الآن لو جينا ان في عندنا زيادة في انزيم الكرياتين 270 00:22:46,340 --> 00:22:50,720 kinase activity في ال plasma يبقى هذا أكيد بده يكون 271 00:22:50,720 --> 00:22:57,720 صار فينا damage لواحدة من هذه ال tissues المختلفة 272 00:22:57,720 --> 00:23:04,020 الزيادة في ال Creatine Kinase useful to diagnose 273 00:23:04,020 --> 00:23:09,680 acute myocardial infarction يبقى بتلعب دور مهم في 274 00:23:09,680 --> 00:23:17,510 ال diagnosis لجلطات اللي بتصير في القلبو أيضا في 275 00:23:17,510 --> 00:23:22,730 حالات الأمراض متعلقة بالعضلات زي ال muscular 276 00:23:22,730 --> 00:23:28,930 dystrophy طبعا زي ما قلنا انه لوحده ال Creatine 277 00:23:28,930 --> 00:23:34,370 Kinase يعني مش هيعطيني دلالة معينة يعني لو جينا 278 00:23:34,370 --> 00:23:36,430 اشتغلنا ال Creatine Kinase و جينا ال Creatine 279 00:23:36,430 --> 00:23:41,700 Kinase مرتفع طب هل ال .. ال .. ال .. ال enzyme هذا 280 00:23:41,700 --> 00:23:46,160 صار له release من خلايا القلب؟ صار له release من خلايا 281 00:23:46,160 --> 00:23:51,000 العضلات؟ صاله release من الـ .. الـ brain؟ تمام؟ 282 00:23:51,000 --> 00:23:55,340 يبقى الـ enzyme لوحده أه مش هيفيد كتير يعني هيقولنا 283 00:23:55,340 --> 00:23:59,660 أنه في مشكلة في أحد اللي هو الـ tissues التلاتة هذه 284 00:23:59,660 --> 00:24:03,940 لكن وين بالظبط؟ مش هنقدر نعرف وزي ما حكينا هن بيجي 285 00:24:03,940 --> 00:24:06,480 دور الـ ISO enzymes 286 00:24:08,380 --> 00:24:15,600 وفعليا في عندي تلاتة iso enzymes لـ الكرياتين كينيز 287 00:24:15,600 --> 00:24:22,020 و الـ iso enzymes المختلفة بتتكون من two different 288 00:24:22,020 --> 00:24:28,080 polypeptide chains ففي عندي سلسلتين من الـ 289 00:24:28,080 --> 00:24:32,240 polypeptide هدول هم اللي بيعملولي هذا الـ enzyme 290 00:24:34,870 --> 00:24:39,490 عنا الـ polypeptides الـ chain هذه في عنا الـ 291 00:24:39,490 --> 00:24:44,930 polypeptide M و الـ polypeptide التانية B الآن هدول 292 00:24:44,930 --> 00:24:49,850 أي polypeptides هيرتبطوا مع بعض هيعطوني الـ ISO 293 00:24:49,850 --> 00:24:53,810 enzymes المختلفة يعني إذا كان عندي كانت الـ two 294 00:24:53,810 --> 00:24:59,810 polypeptides B يبقى هذا هيكون CK1 وهذا الـ ISO 295 00:24:59,810 --> 00:25:05,130 enzyme اللي موجود في الـ brain إذا كان عنديوحدة 296 00:25:05,130 --> 00:25:08,850 بوليبيبتايد M والبوليبيبتايد التانية B يبقى هذا 297 00:25:08,850 --> 00:25:16,750 CK2 وهذا موجود في القلب اللي هو Cardic-type أو 298 00:25:16,750 --> 00:25:21,090 بيسمى أيضًا Hybrid-type هجين لأنه عندي واحدة من M 299 00:25:21,090 --> 00:25:26,810 وواحدة من B يعني CK2 أو CKMP وهذا برضه ممكن يكون 300 00:25:26,810 --> 00:25:32,930 CKBB والعيزوينزايم التالت عندي الـ two polypeptides 301 00:25:32,930 --> 00:25:39,270 اللي هو M-typeوبهذه الحالة بنقول إنه CKMM أو CK3 302 00:25:39,270 --> 00:25:44,690 وهذا النوع الموجود في العضلات يبقى الـ ISO enzymes 303 00:25:44,690 --> 00:25:50,030 بتفيدن كتير بهذه الحالة زي ما قلنا إذا كان لمريد 304 00:25:50,030 --> 00:25:54,870 فحصنا الـ CK ولاجيناه مرتفع يبقى لازم نفحص الـ ISO 305 00:25:54,870 --> 00:25:59,890 enzymes عشان نشوفالارتفاع في أي ايزو انزايم 306 00:25:59,890 --> 00:26:07,050 وبالتالي يدلنا على الـ tissue اللي فيه المشكلة طيب 307 00:26:07,050 --> 00:26:10,850 الـ Unnormal Serum consists of approximately 94% 308 00:26:10,850 --> 00:26:17,570 to 100% CKMM يبقى الكرياطين كينيز اللي موجود في 309 00:26:17,570 --> 00:26:24,200 البلازمةمعظمه اللي هو من النوع CKMM اللي له علاقة 310 00:26:24,200 --> 00:26:30,680 بالـ muscle type 94% لـ 100% من الـ CK الموجود في 311 00:26:30,680 --> 00:26:35,320 البلازمة بشكل طبيعي هو الـ CKMM 312 00:26:39,190 --> 00:26:44,450 الان بما يتعلق بالـ cardiac muscle اللي هو 313 00:26:44,450 --> 00:26:48,670 الكيريتينكانيزي الموجود في عضلة القلب عندنا موجود 314 00:26:48,670 --> 00:26:57,830 انه عين موجود عندنا 80% CKMM أيضا لكن في عندنا 20% 315 00:26:57,830 --> 00:27:03,930 CKMP اللي هو هذا خاص بعضلة القلب 316 00:27:09,740 --> 00:27:14,080 طبعا ممكن يتم فصل هذه الـ Isoenzymes زي ما حكينا 317 00:27:14,080 --> 00:27:18,660 سابقا باستخدام الـ Electrophoresis و هنحصل على 318 00:27:18,660 --> 00:27:27,660 الأنواع المختلفة BB migrate fastest to a node than 319 00:27:27,660 --> 00:27:33,600 MB and MM يبقى الأسرع بيكون هو الـ BB و بعدين الـ MB 320 00:27:33,600 --> 00:27:35,660 و بعدين الـ MM 321 00:27:38,340 --> 00:27:41,520 زي ما اتفقنا انه the major isoenzyme in the sera 322 00:27:41,520 --> 00:27:44,860 of healthy people is the M M form اللي قولنا بشكل 323 00:27:44,860 --> 00:27:50,500 94 إلى 100% طيب الـ isoenzyme المهم اللي هو اللي له 324 00:27:50,500 --> 00:27:54,620 علاقة بالقلب و المشاكل اللي بالقلب زي ما اتفقنا 325 00:27:54,620 --> 00:28:00,460 انه الـ Mb isoenzyme يداش نسبته الـ Mb isoenzyme في 326 00:28:00,460 --> 00:28:07,170 الـ normal persons اما undetectableيعني ممكن نفحص 327 00:28:07,170 --> 00:28:11,790 الـ CKMP ونلاقيه مش موجود طبعا نحكي على الأشخاص الـ 328 00:28:11,790 --> 00:28:18,110 healthy الطبيعيين وممكن يصل لغاية أقل من 6% of 329 00:28:18,110 --> 00:28:24,490 total keratin kinase يبقى لغاية أقل من 6% الـ CKMP 330 00:28:24,490 --> 00:28:28,930 بيكون عندنا طبيعي يبقى undetectable لغاية أقل من 6 331 00:28:28,930 --> 00:28:35,850 %ارتفع عن هيك يبقى معناته احتمال انه في انا مشكلة 332 00:28:35,850 --> 00:28:41,830 في عضلة القلب it also appears that ckbb is present 333 00:28:41,830 --> 00:28:45,050 in small quantities in the sera of healthy people 334 00:28:45,050 --> 00:28:49,050 يبقى موجود لكن بكميات قليلة جدا الوانوء التالت الـ 335 00:28:49,050 --> 00:28:55,810 ckbb و اللي قولنا خاص بالبراين الـ diagnostic 336 00:28:55,810 --> 00:29:00,420 significance لهذا الانزينالقيمة الخاصة بـ CK 337 00:29:00,420 --> 00:29:03,420 -Enzyme Separation يمكن أن تكون وجدتها في الوصول 338 00:29:03,420 --> 00:29:07,560 إلى إيجابة تدمير ميوكارديال يبقى لازم، كما قلنا، 339 00:29:07,560 --> 00:29:11,400 إذا كان إشتغلنا و لجينا الـ keratin kinase الـ 340 00:29:11,400 --> 00:29:19,020 total مرتفع يبقى لازم نشتغل الـ enzyme كارد يكتشف 341 00:29:19,020 --> 00:29:22,860 مقاومة كامة كبيرة من الـ CKMP قلنا تقريبا نسبة تصل 342 00:29:22,860 --> 00:29:30,640 لـ 20%والزيادة في الـ CKMP لأكتر من 6% is a strong 343 00:29:30,640 --> 00:29:35,360 indication of acute myocardial infarction اللي وأن 344 00:29:35,360 --> 00:29:41,060 الـ C صار فينا جلطة في القلب وصار فينا موت لجزء من 345 00:29:41,060 --> 00:29:46,080 خلايا القلب وبالتالي بدأ يصير عندنا release لهذا 346 00:29:46,080 --> 00:29:50,590 الـ ISO enzyme وارتفعت الـ concentration تبعتهفي 347 00:29:50,590 --> 00:29:55,330 الدم إذا كان زيادة عن 6% يبقى هذا strong 348 00:29:55,330 --> 00:30:00,430 indication of acute myocardial infarction طيب كيف 349 00:30:00,430 --> 00:30:07,930 بتصير الزيادة وحسب الوقت يعني بعد حدوث مثلا الجلطة 350 00:30:07,930 --> 00:30:10,290 الـ acute myocardial infarction كيف بتصير الزيادة 351 00:30:10,290 --> 00:30:14,650 للـ CKMP CKMP increases four to eight hours post 352 00:30:14,650 --> 00:30:20,190 acute myocardial infarctionبتبدأ تزيد بعد 4 إلى 8 353 00:30:20,190 --> 00:30:27,430 ساعات إمتى بتصل إلى أعلى مستوياتها بعد 12 إلى 24 354 00:30:27,430 --> 00:30:32,170 ساعة بيبقى بعد ما يصاب الشخص بـ acute myocardial 355 00:30:32,170 --> 00:30:36,710 infarction بـ 24 ساعة لو أجينا و قصنا الـ CKMP 356 00:30:36,710 --> 00:30:41,550 بنلاقي إنه هذا أعلى level ممكن يصله الـ CKMP بعد 357 00:30:41,550 --> 00:30:47,040 هيك أش بيصير ببدأ الـ concentration بالنزولو بترجع 358 00:30:47,040 --> 00:30:54,480 الـ concentration للمستوى الطبيعي بعد 48 إلى 72 359 00:30:54,480 --> 00:31:02,840 ساعة طيب بقاش بتفيدني ان اعرف امتى بيرتفع امتى 360 00:31:02,840 --> 00:31:07,600 بيصل لأعلى مستوياته امتى بيرجع للطبيعي عشان لما 361 00:31:07,600 --> 00:31:13,620 يجي شخص للمستشفى او للمختبر و بدنا نفحصله هذا 362 00:31:13,620 --> 00:31:21,590 الفحصيعني الآن إذا كان شخص حاس مثلا في ضيق بالصدر 363 00:31:21,590 --> 00:31:27,830 و ثقوبة بالتنفس يبل خلينا نقول خمس أيام مثلا و 364 00:31:27,830 --> 00:31:34,610 بعدين إجا على المستشفى هل بنفع أن أقسله الـ CKMP 365 00:31:34,610 --> 00:31:40,370 أكيد بنفعش ليش لأنه returns to normal within 48 to 366 00:31:40,370 --> 00:31:47,640 72 hours تمام؟طب امتى افحصله؟ انا زى ما قولنا انه 367 00:31:47,640 --> 00:31:52,620 بعد اربع ساعات ممكن يبدأ اللى يتظهر عندى اللى هو 368 00:31:52,620 --> 00:31:57,340 علامة الارتفاع طبعا ممكن يبدأ اللى هو التدخل وممكن 369 00:31:57,340 --> 00:32:00,540 يقيصه بعد هيك بعد اللي هو اتناشر اربعة او اربع 370 00:32:00,540 --> 00:32:03,940 عشرين ساعة واذا كان لجوا انه فعلا اتفع اكتر ال 371 00:32:03,940 --> 00:32:09,240 CKMP بجهد باكد الـ diagnosisيبقى الأوقات مهمة عشان 372 00:32:09,240 --> 00:32:15,460 نعرف إيش الفحص اللي نعمله في الحالات المرضية 373 00:32:15,460 --> 00:32:16,840 المختلفة 374 00:32:21,860 --> 00:32:26,500 وهذا الـ figure اللي بيوضح يعني لو جينا عملنا 375 00:32:26,500 --> 00:32:30,180 Electrophoresis و بعد هيك استخدمنا الـ densitometer 376 00:32:30,180 --> 00:32:35,260 زي ما حكينا لما حكينا عن الـ proteins و الـ area 377 00:32:35,260 --> 00:32:39,440 under the graph بيعكس الكمية الـ ISO enzyme 378 00:32:39,440 --> 00:32:44,050 الموجود، بشخص طبيعيهي عندنا كمية الـ isoenzyme 379 00:32:44,050 --> 00:32:48,550 اللي هو CK2 أو CKMP وزي ما قلنا إنه النسبة الأكبر 380 00:32:48,550 --> 00:32:55,490 بتكون لـ CKMM وهذا بيكون أقل من 6% لكن الحالة 381 00:32:55,490 --> 00:32:58,370 التانية اللي هو a patient with acute myocardial 382 00:32:58,370 --> 00:33:01,870 infarction زي ما أحنا شايفين إنه صار في عندنا 383 00:33:01,870 --> 00:33:07,090 ارتفاع في الـ concentration لـ CKMP وزي ما قلنا هذا 384 00:33:07,090 --> 00:33:09,930 ممثل بالـ area under the peak 385 00:33:16,400 --> 00:33:21,100 هذا الـ graph بيوضح لي كيف بيصير الارتفاع في 386 00:33:21,100 --> 00:33:25,400 الانزيمات المختلفة في حال صار فينا acute 387 00:33:25,400 --> 00:33:28,440 myocardial infarction وأي انزيمات اللي هي بترتفع 388 00:33:28,440 --> 00:33:34,110 الـ concentration بتاعتهاأكثر من الانزيمات الأخرى 389 00:33:34,110 --> 00:33:38,410 زي ما هو واضح أنه فيها نفسير ارتفاع بالـAST بالـCK 390 00:33:38,410 --> 00:33:41,390 بالـ lactate dehydrogenase يبقى أكتر من انزيم 391 00:33:41,390 --> 00:33:44,710 بيرتفع لكن زي ما احنا شايفين أنه عندنا الـkeratin 392 00:33:44,710 --> 00:33:49,230 kinase بيرتفع بشكل كبير وبيصل الارتفاع إلى six 393 00:33:49,230 --> 00:33:54,190 times upper limit normal الارتفاع بيصل إلى ست 394 00:33:54,190 --> 00:34:01,260 أضعاف الـ concentration الطبيعيةوالـ CKMP ممكن يصل 395 00:34:01,260 --> 00:34:04,820 الـ Concentration تبعته إلى عشر أضعاف الـ 396 00:34:04,820 --> 00:34:12,680 Concentration الطبيعية الـ 397 00:34:12,680 --> 00:34:19,780 CKS ممكن يظهر أشياء 398 00:34:19,780 --> 00:34:25,260 اللي ممكن نقيسهلأ بنحتاج إلى أكتر من تفاؤل وزي ما 399 00:34:25,260 --> 00:34:31,380 هنشوف فيه أنه تلت تفاؤلات بتصير لغاية ما نصلى a 400 00:34:31,380 --> 00:34:37,160 compound أو product اللي ممكن يتم قياسهوفي هذه 401 00:34:37,160 --> 00:34:41,660 الحالة أن the rate at which not pH is produced is 402 00:34:41,660 --> 00:34:46,100 a function of keratin kinase activity in the first 403 00:34:46,100 --> 00:34:51,200 reaction يبقى هنا أنه not pHهيتكون عندي و نفس 404 00:34:51,200 --> 00:34:55,540 الفكرة لما حكينا عن الـ NAD H يبقى الـ NAD H و الـ 405 00:34:55,540 --> 00:34:59,000 NAD BH اللي هو maximum absorbance على تلات مية و 406 00:34:59,000 --> 00:35:04,180 أربعين بينما الـ NAD و الـ NADB مالهمش 407 00:35:06,480 --> 00:35:12,140 بتستخدم انزيمات أخرى كالـ Coupled Assay Reaction، 408 00:35:12,140 --> 00:35:17,480 انزيمات الـ Hexokinase والـ G6PD بتم استخدامها 409 00:35:17,480 --> 00:35:23,860 كإنزيمات مساعدةوالـ .. زي ما قلنا إنه إحنا التفاعل 410 00:35:23,860 --> 00:35:28,540 بيمشي بالاتجاهين، عزيزي ما حكينا بأول slide عن الـ 411 00:35:28,540 --> 00:35:32,500 keratin kinase وعادة التفاعل اللي بيتم استخدامه هو 412 00:35:32,500 --> 00:35:36,880 الـ reverse reaction زي ما هو واضح في هذه 413 00:35:36,880 --> 00:35:40,500 المعادلة، يبقى عندنا الـ keratin phosphate مع الـ 414 00:35:40,500 --> 00:35:43,200 ADP في وجود الـ keratin kinase بيعطينا keratin و 415 00:35:43,200 --> 00:35:48,060 ATPالـ ATP اللي بينتج بالتفاعل الأول مع الـ 416 00:35:48,060 --> 00:35:50,680 glucose بيكون موجود بالـ reagent و في وجود الـ 417 00:35:50,680 --> 00:35:56,060 hexokinase بيعطيني ADP و glucose 6-phosphate الـ 418 00:35:56,060 --> 00:35:59,520 glucose 6-phosphate اللي نتجة تهان مع .. طبعا في 419 00:35:59,520 --> 00:36:04,620 وجود الـ 1-NADB و في وجود أنزام G6PD بيعطيني 6 420 00:36:04,620 --> 00:36:11,700 -phosphogluconate و NADPH و بهذه الحالةالزيادة في 421 00:36:11,700 --> 00:36:18,560 الـ NADPH هو اللي بتم قياسها على 340 نانومتر بيلان 422 00:36:18,560 --> 00:36:24,900 الـ NADPH هنا كمية الـ NADPH تعكس كمية الـ Creatine kinase 423 00:36:24,900 --> 00:36:31,630 الـ Creatine kinase اللي كان موجود عندي في الـ sample 424 00:36:31,630 --> 00:36:38,430 Reference Interval لـ Total CK في الـ 115 ل 160 425 00:36:38,430 --> 00:36:41,410 اللي هو Unit per Liter و International Unit per 426 00:36:41,410 --> 00:36:47,590 Liter على 37 في 115 ل 130 والـ CKMB زي ما اتفقنا 427 00:36:47,590 --> 00:36:52,510 أقل من 6% من الـ Total Creatine Kinase 428 00:36:57,810 --> 00:37:00,470 طيب احنا قلنا إنه إذا كان الـ Creatine kinase 429 00:37:00,470 --> 00:37:06,050 مرتفع لازم نفحص الـ Iso enzymes عشان نشوف إذا كان 430 00:37:06,050 --> 00:37:11,730 المشكلة بالقلب أو لا و بنستخدم Immunoassay بنستخدم 431 00:37:11,730 --> 00:37:16,170 Antibodies والـ Antibodies هي دي against both the 432 00:37:16,170 --> 00:37:24,470 M and B subunits الـ Anti-M inhibits all M activity 433 00:37:24,470 --> 00:37:30,990 but not B activity طبعًا يبقى عندي الـ Anti-M 434 00:37:30,990 --> 00:37:37,130 Antibody الموجودة بتعمل لي Inhibition لـ M Inhibits 435 00:37:37,130 --> 00:37:41,490 all M activity الـ Seeking activity is measured 436 00:37:41,490 --> 00:37:48,470 before and after inhibition activity remaining 437 00:37:48,470 --> 00:37:53,010 after M inhibition is a result of the B subunit of 438 00:37:53,010 --> 00:37:57,430 both MB and BB activity 439 00:38:00,790 --> 00:38:06,930 الـ Activity بعد الـ Inhibition يتم عمله بـ 2 لإعتماد 440 00:38:06,930 --> 00:38:14,430 الـ MB activity يبقى بنضرب بـ 2 عشان نعوض عن الـ 50% 441 00:38:14,430 --> 00:38:19,850 اللي صار لها Inhibition باستخدامنا لـ Anti-M 442 00:38:23,350 --> 00:38:26,810 المفادة الكبيرة من هذه الطريقة هي أنها تتكتشف 443 00:38:26,810 --> 00:38:29,490 عملية الـ BB التي على الرغم من أنها غير ممكنة تتكتشف 444 00:38:29,490 --> 00:38:32,850 بشكل عام ستسبب في نتيجة الـ MB غير مستقبلية عندما 445 00:38:32,850 --> 00:38:38,050 يتواجد الـ BB وهذه هي المفادة الوحيدة يبقى احنا 446 00:38:38,050 --> 00:38:46,750 قلنا إنه في عندنا في عندنا في الـ Sample عندنا 447 00:38:46,750 --> 00:38:47,410 الـ MM 448 00:38:49,900 --> 00:38:58,540 وعندنا الـ MB وعادة نقول الـ BB اللي هو Very Low 449 00:38:58,540 --> 00:39:03,240 Concentration بتكون طيب اللي احنا استخدمنا 450 00:39:03,240 --> 00:39:11,900 Anti-M Antibody بيهدف عمل لي Inhibition لـ CKMM 451 00:39:11,900 --> 00:39:18,380 أتوبوا لبيبتايد صار لهم Inhibition بالـ CKMB 452 00:39:18,380 --> 00:39:25,700 Anti-M عمل Inhibition لـ M polypeptide طيب و الـ B .. 453 00:39:25,700 --> 00:39:32,160 الـ B ظلت الـ Activity بتاعتها موجودة طبعًا يبقى إيش 454 00:39:32,160 --> 00:39:38,460 بنعمل بنيجي بنقيس الـ Activity لـ Sample اللي 455 00:39:38,460 --> 00:39:43,680 عندي أول مرة بدون استخدام الـ Anti-M Antibody 456 00:39:48,250 --> 00:39:54,710 وثاني قياس بعد ما نستخدم الـ Antibody اللي هو الـ 457 00:39:54,710 --> 00:39:59,950 Anti-M بأول قياس لـ Activity بدون إضافة أي 458 00:39:59,950 --> 00:40:04,890 Antibodies بعدين بنضيف الـ Anti-M وبنقيس الـ 459 00:40:04,890 --> 00:40:13,690 Activity مرة أخرى طبعًا الآن الـ Residual Activity 460 00:40:16,750 --> 00:40:21,490 يبقى زي ما قلنا إنه بنقيس الـ Activity قبل عشان 461 00:40:21,490 --> 00:40:24,170 نشوف في اللي هو ارتفاع في الـ CK ولا لا وبعدين 462 00:40:24,170 --> 00:40:29,770 بنضيف الـ Anti-M اللي هتعمل Inhibition لـ M M وه 463 00:40:29,770 --> 00:40:34,850 تعمل Inhibition لـ M لكن هيظل إن الـ B هو الـ Active 464 00:40:34,850 --> 00:40:39,210 وعلى فرض إنه هنا الـ Concentration Very Very Low 465 00:40:39,210 --> 00:40:43,130 تمام يبقى الـ Activity اللي هتطلع هتكون الـ Activity 466 00:40:43,130 --> 00:40:47,810 اللي جايه من الـ MB تمام الـ Activity اللي بقي 467 00:40:47,810 --> 00:40:51,990 Residual Activity after Inhibition تمام اللي هي 468 00:40:51,990 --> 00:40:58,170 عبارة عن الـ B بنيجي بنضربها بـ 2 عشان عملنا 469 00:40:58,170 --> 00:41:01,770 احنا Inhibition للـ M وقصنا فقط اللي هو الـ B 470 00:41:01,770 --> 00:41:05,630 Activity بنضرب بـ 2 عشان يكون عندنا النتيجة للـ B 471 00:41:05,630 --> 00:41:10,450 والنتيجة للـ M Activity The Residual Activity 472 00:41:10,450 --> 00:41:13,390 After Inhibition is multiplied by two to account 473 00:41:13,390 --> 00:41:19,270 for MB Activity زي ما قلنا المشكلة هنا ممكن وين 474 00:41:19,270 --> 00:41:25,490 تصير في حال إنه كان عندنا الـ BB Activity موجودة 475 00:41:25,490 --> 00:41:32,150 وعالية هنا هيكون في عندنا مشكلة طيب 476 00:41:32,150 --> 00:41:37,010 ممكن أيضًا أن نقيس الـ CK-Isoenzymes باستخدام الـ 477 00:41:37,010 --> 00:41:41,610 Electrophoresis والـ Electrophoresis تعتبر The 478 00:41:41,610 --> 00:41:46,400 Reference Method ممكن برضه باستخدام Ion Exchange 479 00:41:46,400 --> 00:41:49,540 Chromatography أو ممكن باستخدام Radio Immunoassay 480 00:41:49,540 --> 00:41:53,160 اللي هو باستخدامها الـ Antigen Antibody Reaction 481 00:41:53,160 --> 00:41:59,220 Rapid Assay for CK-MB subforms uses high-voltage 482 00:41:59,220 --> 00:42:02,620 Electrophoresis on an automated analyzer. The 483 00:42:02,620 --> 00:42:05,520 result will be available in 25 minutes 484 00:42:07,970 --> 00:42:14,430 ويمكّن في خلال 25 دقيقة يعطيني يدش نتيجة الـ CK إن 485 00:42:14,430 --> 00:42:19,330 بيه زي ما قلنا في حال إنه كان عندنا الـ CK مرتفع 486 00:42:19,330 --> 00:42:24,410 طبعًا الوقت في هذه الحالات مهم جدًا عام للوقت في 487 00:42:24,410 --> 00:42:29,350 حالات الـ Myocardial Infarction مهم جدًا وكل ما كان 488 00:42:29,350 --> 00:42:35,010 إنه فحص اللي يعطيني نتيجة بشكل أسرع أكيد هذا هيكون 489 00:42:35,010 --> 00:42:38,290 في مصلحة المريض لأنه لو صار فيه End Diagnosis 490 00:42:38,290 --> 00:42:45,550 هيبدأ التدخل العلاجي بشكل مباشر وهذا ممكن يقلل 491 00:42:45,550 --> 00:42:50,030 بشكل كبير من حالات الوفاة