1 00:00:00,770 --> 00:00:04,450 بسم الله الرحمن الرحيم والصلاة والسلام على أشرف 2 00:00:04,450 --> 00:00:09,830 المرسلين سيدنا محمد وعلى آله وصحبه أجمعين طلابنا 3 00:00:09,830 --> 00:00:14,270 العزاء أرجو من الله أن تكونوا بخير استكمالا لما 4 00:00:14,270 --> 00:00:17,930 بدأنا فيه من محاضرة sperm assessment processing 5 00:00:17,930 --> 00:00:22,230 and selection تحدثنا عن عدة أمور لها علاقة بال 6 00:00:22,230 --> 00:00:25,170 macroscopic examination وmicroscopic examination 7 00:00:25,870 --> 00:00:29,110 وفي النهاية، تحدثنا عن الـVatility Test أو الـLife 8 00:00:29,110 --> 00:00:33,450 Sperm Examination من خلال فحص الأيوزين أو 9 00:00:33,450 --> 00:00:38,150 النجروسين استثنى استكمال لهذا الأمر، سوف نتكلم عن 10 00:00:38,150 --> 00:00:41,610 الـHoss Test أو ما يُعرف باسم الـHypoosmotic 11 00:00:41,610 --> 00:00:45,770 Swelling Test الـHypoosmotic Swelling Test، اختصار 12 00:00:45,770 --> 00:00:50,910 Hoss Test وهو عبارة عن فحص يُستخدم للتفريغ ما بين 13 00:00:50,910 --> 00:00:56,570 الحيوان المنوي الحيوالحيوان المنوي الميت وهو كفحص 14 00:00:56,570 --> 00:01:00,850 مهم جدا خلال عملية ال fertilization لإنه أنا بهمني 15 00:01:00,850 --> 00:01:05,590 أحقن الخلية بحيوان منوي حي حتى لو كان مش متحرك 16 00:01:05,590 --> 00:01:10,890 فالمهم أن يكون حي The principle only living cell 17 00:01:10,890 --> 00:01:14,590 with intact membrane will swell under hypoosmotic 18 00:01:14,590 --> 00:01:20,530 condition 150 mO·L يعني المبدأ عمل هذا الفحص إن 19 00:01:20,530 --> 00:01:25,960 الخلايا الحيةتميل إلى الـ swelling في حالة تعرضها 20 00:01:25,960 --> 00:01:30,480 إلى الـ hypo osmotic condition يعني أنا أي خلية 21 00:01:30,480 --> 00:01:34,400 حاططها في hypo osmotic condition هتنتفخ وهذه نفس 22 00:01:34,400 --> 00:01:39,360 الفكرة في الـ host test أو الـ hypo osmotic 23 00:01:39,360 --> 00:01:44,540 swelling the influx of a fluid into via pedicel is 24 00:01:44,540 --> 00:01:49,020 reflected by the coiling of the sperm يعني ال 25 00:01:49,020 --> 00:01:53,080 sperm إذا كان هذا ال sperm حيوضعته في hypo-osmotic 26 00:01:53,080 --> 00:01:57,640 swelling or solution مباشرة، نهاية التل الخاصة فيه 27 00:01:57,640 --> 00:02:02,200 هتنتفخ، معناه إن والله هذا ال sperm life، هذا ال 28 00:02:02,200 --> 00:02:07,660 sperm available or lifeأحد أفضلات هذا الاختبار هو 29 00:02:07,660 --> 00:02:13,460 أنه لا يقتل الفحص الذي يسمح بالتوليجة لهذا الفحص 30 00:02:13,460 --> 00:02:18,500 للتكنولوجيا التجاربية يعني بمعنى أخر أن هذا الفحص 31 00:02:18,500 --> 00:02:21,480 ما بيأثر على الفحص ما بيأثر على المادة الوراثية 32 00:02:21,480 --> 00:02:24,240 بتاعة الفحص ما بيأثر على الـ function بتاعة الفحص 33 00:02:24,240 --> 00:02:28,640 ما بيأثر على الكبسط بتاعة الفحص فبالتالي أي فحص 34 00:02:28,640 --> 00:02:32,600 أخضعته لهذه العملية واتضح فيما بعد أن الـ life 35 00:02:32,600 --> 00:02:39,220 ممكن أن أستخدمه في الـ Xبشكل مباشر بدون أي تردد In 36 00:02:39,220 --> 00:02:42,100 this method, sperm sample should be mixed with the 37 00:02:42,100 --> 00:02:46,660 hypoosmotic solution and incubated at 37 Celsius 38 00:02:46,660 --> 00:02:50,700 for 30 minutes عشان انا اتأكد هذا ال sperm alive 39 00:02:50,700 --> 00:02:54,320 ولا لا طب اذا كانت العينة بتستخدمها للإكزي يكفي 40 00:02:54,320 --> 00:02:59,910 خمس دقائق تحضيرها بال hypoosmotic solutionبعد 41 00:02:59,910 --> 00:03:05,930 عملية أحضين على 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة أو 42 00:03:05,930 --> 00:03:11,150 لمدة 5 دقائق باجي بعمل check up لل sperm أو بعد ال 43 00:03:11,150 --> 00:03:16,070 sperm بعمل with preparation على ال slide should be 44 00:03:16,070 --> 00:03:19,170 made and assess the sample under phase contrast 45 00:03:19,170 --> 00:03:23,630 microscope على عدسة تكبير 400 أو 200 بعيد 200 46 00:03:23,630 --> 00:03:28,330 sperm بشوف مين فيهم life و مين فيهم deadبناء على 47 00:03:28,330 --> 00:03:34,450 الانتفاخ اللي يظهر أسفل الذئب في هذا الشكل طبعا دي 48 00:03:34,450 --> 00:03:37,890 اللي على اليسار رقم A هي عبارة عن ال fertility 49 00:03:37,890 --> 00:03:42,590 test بفعل النجروسين أو ال Iosin بضيف I قطرة من ال 50 00:03:42,590 --> 00:03:46,170 Iosin بضيف قطرة من النجروسين و بضيف قطرة من السيمن 51 00:03:46,170 --> 00:03:50,450 بعمله mix او واحد سيمن اتنين drop Iosin اتنين drop 52 00:03:50,450 --> 00:03:54,170 نجروسين بعمل mix و بشوفها تحت الميكروسكوب اللي 53 00:03:54,170 --> 00:04:00,980 بالشب هو ال lifeأما الأخر صفقة الـ Iosin هو الـ 54 00:04:00,980 --> 00:04:05,340 dead أو الـ non-viable اللي على اليسار هي عبارة عن 55 00:04:05,340 --> 00:04:09,700 الـ hypo osmotic swelling test الـ host test بضيف 56 00:04:09,700 --> 00:04:14,140 sample من الـ seminal fluid بضيف عليه الـ hypo 57 00:04:14,140 --> 00:04:18,180 osmotic swelling fluid or solution وبعمل mixing 58 00:04:18,180 --> 00:04:24,900 وincubation لمدة 30 أو 5 دقائقعلى 37 درجة مهوية أي 59 00:04:24,900 --> 00:04:29,440 sperm بظهر لـ swelling في أسفله هذا معناه normal 60 00:04:29,440 --> 00:04:32,280 sperm swelling زي ما أحنا شايفينه على جهة اليسار 61 00:04:32,280 --> 00:04:36,840 في منطقة التل بسميه normal sperm viable sperm أما 62 00:04:36,840 --> 00:04:39,800 إذا كان مافيه swelling في نهاية التل فهو عبارة عن 63 00:04:39,800 --> 00:04:45,420 non viable sperm أو dead sperm هذا الفرق ما بين 64 00:04:45,420 --> 00:04:50,220 الفرقتانفي طريقة تانية وهي طريقة العدو معتمدة على 65 00:04:50,220 --> 00:04:54,480 الكمبيوتر بنسميها Computerized 66 00:04:54,480 --> 00:05:00,560 Assisted Sperm Analysis أو Computer Assisted Sperm 67 00:05:00,560 --> 00:05:07,840 Analysis تحت مصطلح كذا كذا C للكمبيوتر A Assisted 68 00:05:07,840 --> 00:05:12,940 Sperm Analysis يعني أنت كتكنيشن ما بتشتغل شيء إلا 69 00:05:12,940 --> 00:05:16,360 بتعمل weight mount يعني كتانك تضيف خمسين micro من 70 00:05:16,730 --> 00:05:19,590 عينة الـ Similar Fluid بعد الـ mix الجيد و بتغطيها 71 00:05:19,590 --> 00:05:22,930 بـ cover slide و بتدخلها تحت ال microscope و ال 72 00:05:22,930 --> 00:05:26,550 microscope بناء على software معين بيقرأ كل ال 73 00:05:26,550 --> 00:05:29,870 field بيهدلك ال sperm و بيجيبلك ال motility و 74 00:05:29,870 --> 00:05:34,130 بيجيبلك ال morphology حتى بيجيبلك تصنيف ال motile 75 00:05:34,130 --> 00:05:37,830 هى ال progressive و لا non progressive motile ولكن 76 00:05:37,830 --> 00:05:42,410 خد بالك أنه لازمبنعمل check-up على نتائجه لأن في 77 00:05:42,410 --> 00:05:47,270 نسبة خطأ منها بفعل أن بعض الـ Depress ممكن يعدها ك 78 00:05:47,270 --> 00:05:56,030 Spare خلينا نشوف الفيديو متعلق بعد الموضوع نشوف 79 00:05:56,030 --> 00:05:59,030 الفيديو Motility and concentration sample 80 00:05:59,030 --> 00:06:03,290 preparation First step is to prepare a sample for 81 00:06:03,290 --> 00:06:05,410 motility and concentration analysis 82 00:06:12,750 --> 00:06:13,950 يمكن استخدام بطاريات مستخدمة يمكن استخدامها 83 00:06:13,950 --> 00:06:16,590 بطاريات مستخدمة يمكن استخدامها بطاريات مستخدمة 84 00:06:16,590 --> 00:06:20,710 يمكن استخدامها بطاريات مستخدمة يمكن استخدامها 85 00:06:20,710 --> 00:06:21,250 بطاريات مستخدمة يمكن استخدامها بطاريات مستخدمة 86 00:06:21,250 --> 00:06:23,670 يمكن استخدامها بطاريات مستخدمة يمكن استخدامها 87 00:06:23,670 --> 00:06:27,550 بطاريات مستخدمة يمكن استخدامها بطاريات مستخدمة 88 00:06:27,550 --> 00:06:29,270 يمكن استخدامها بطاريات مستخدمة يمكن استخدامها 89 00:06:29,270 --> 00:06:31,470 بطاريات مستخدمة يمكن استخدامها بطاريات مستخدمة 90 00:06:31,470 --> 00:06:36,270 يمكن استخدامها بطاريات مستخدمة يمكن استخ 91 00:06:40,810 --> 00:06:45,450 ثم إزالة المواصفات المكسورة السلسلة مستعدة للتعامل 92 00:06:45,450 --> 00:06:50,150 معها مقاطع الميكروسكوبللتحديث الموتولوجيا 93 00:06:50,150 --> 00:06:54,150 والتركيزية سنستخدم الـ Green Filter، الـ Condenser 94 00:06:54,150 --> 00:06:59,490 في موقع PH1 و10X Face Consciousness Objective تذكر 95 00:06:59,490 --> 00:07:02,650 أنه ممكن أيضًا أن تستخدم الـ Fluorescence 96 00:07:02,650 --> 00:07:06,870 موتولوجيا والتركيزية تستخدم الـ Fluorescence It is 97 00:07:06,870 --> 00:07:09,670 possible to access the analysis module from the 98 00:07:09,670 --> 00:07:12,670 respective button in results tab or from the icons 99 00:07:12,670 --> 00:07:16,810 bar In this window, the user can choose different 100 00:07:16,810 --> 00:07:20,760 analysis configurationsThis is the main analysis 101 00:07:20,760 --> 00:07:23,540 window where the sample information is presented 102 00:07:23,540 --> 00:07:28,400 Press analyze to start Live image is displayed 103 00:07:28,400 --> 00:07:34,420 focus طبعا هنا ضاف العينة وشغل الميكروسكوب وعمل 104 00:07:34,420 --> 00:07:38,000 analysis فجاب ال field أخد capture الميكروسكوب 105 00:07:38,000 --> 00:07:41,100 فيما بعد ببدأ أو الكمبيوتر ببدأ يعد ال sperm 106 00:07:41,100 --> 00:07:47,140 الموجودة في هذا ال capture بناء علىطبعاً عدد و 107 00:07:47,140 --> 00:07:53,220 Parameter معينة و طول و عرض خاصة بالhead بعد كده 108 00:07:53,220 --> 00:07:55,600 بياخد أكتر من ال capture و بيقارنهم مع بعض و مع 109 00:07:55,600 --> 00:08:00,740 بعض علشان يشوف مين المتايل و مين المش متايل spare 110 00:08:00,740 --> 00:08:04,220 fill and start the analysis clicking again the 111 00:08:04,220 --> 00:08:08,560 analyze button main analysis information is always 112 00:08:08,560 --> 00:08:12,760 present on this side or capture sequences can be 113 00:08:12,760 --> 00:08:17,250 played in the analysis user tabباستخدام مانيال 114 00:08:17,250 --> 00:08:18,930 النتائج، يمكن المستخدم أن يختار مقاطع الـSperm 115 00:08:18,930 --> 00:08:22,830 مختلفة ويقوم بمعرفة أو لا معرفة أي Spermatozoa تم 116 00:08:22,830 --> 00:08:25,850 إظهارها 117 00:08:25,850 --> 00:08:33,950 .من 118 00:08:33,950 --> 00:08:36,790 الممكن أيضًا أن تشاهد المعلومات عن واحدة Sperm 119 00:08:36,790 --> 00:08:42,260 بمضغط عينيها وفتح مقاطع الـSperm Infoبنقل إلى 120 00:08:42,260 --> 00:08:44,100 نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة 121 00:08:44,100 --> 00:08:46,600 نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة 122 00:08:46,600 --> 00:08:49,960 نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة 123 00:08:49,960 --> 00:08:55,400 نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة 124 00:08:55,400 --> 00:08:55,500 نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة 125 00:08:55,500 --> 00:08:55,600 نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة 126 00:08:55,600 --> 00:09:05,720 نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة نتيجة 127 00:09:05,720 --> 00:09:10,080 نتيج 128 00:09:10,580 --> 00:09:13,360 أتابع مع المعلومات عن مصادرها الـ Spermatozoon 129 00:09:13,360 --> 00:09:28,380 وخلاصًا 130 00:09:28,380 --> 00:09:32,040 مصادر تجارب تجارب تجارب تجارب تجارب تجارب تجارب 131 00:09:32,040 --> 00:09:33,260 تجارب تجارب تجارب 132 00:09:41,070 --> 00:09:44,770 هو بسهولة جدًا للوصول إلى مقال التجارب اللي يمكن 133 00:09:44,770 --> 00:09:55,650 أن يتم تحميله لأي مصمم التجارب التجاربية 134 00:09:55,650 --> 00:09:57,210 يمكن أن يتم تحميله لأي مصمم التجارب التجاربية 135 00:09:57,210 --> 00:10:00,650 التجاربية يمكن أن يتم تحميله لأي مصمم التجارب 136 00:10:00,650 --> 00:10:02,630 التجاربية التجاربية التجاربية التجاربية التجاربية 137 00:10:02,630 --> 00:10:03,230 التجاربية التجاربية التجاربية التجاربية التجاربية 138 00:10:03,230 --> 00:10:03,310 التجاربية التجاربية التجاربية التجاربية التجاربية 139 00:10:03,310 --> 00:10:03,710 التجاربية التجاربية التجاربية التجاربية التجاربية 140 00:10:03,710 --> 00:10:09,650 التجاربية التجاربية التجاربية التجاربية التجارب 141 00:10:14,380 --> 00:10:18,700 إذا هذه فكرة الكازة و هي ال computer assist sperm 142 00:10:18,700 --> 00:10:22,200 analysis إنه أنا ك technician ما بشغل شيء بيدي و 143 00:10:22,200 --> 00:10:25,320 جرد إن بحضر ال sample من خلال وضع خمسين micro أو 144 00:10:25,320 --> 00:10:28,740 عشرة micro بناء على ال protocol المستخدم و بعدين 145 00:10:28,740 --> 00:10:31,220 بضيفه تحت ال fluorescent microscope أو ال face 146 00:10:31,220 --> 00:10:34,840 contrast microscope على عدسة عشرة بعدين بعمل 147 00:10:34,840 --> 00:10:38,640 switch on للجهاز و بخليه ياخد capture و 2 و 3 و 4 148 00:10:39,000 --> 00:10:42,500 بعدين بدأت على ال analysis عشان يبدأ الجهاز يحلل 149 00:10:42,500 --> 00:10:46,100 الصور اللي أخدهم أكتر من مرة بيديني ال utility، 150 00:10:46,100 --> 00:10:48,520 بيديني أنواعها، بيديني ال concentration، بيديني ال 151 00:10:48,520 --> 00:10:51,540 total count، بيديني ال morphology، بناء على شو أنا 152 00:10:51,540 --> 00:10:54,720 بدي براميتر كلها متوفرة، بناء على ال program 153 00:10:54,720 --> 00:10:59,130 المستخدم، كل شركة لها program خاص فيهاخدوا بالكوا 154 00:10:59,130 --> 00:11:03,030 الكازم ما بيستخدم في الـ routine lab أو اللي بيقول 155 00:11:03,030 --> 00:11:06,790 كمية العيلة بتجي لها خمسة، ستة، سبعة، تمانية في 156 00:11:06,790 --> 00:11:12,030 اليوم لأ بيستخدم في المختبرات الكبيرة اللتي يوجد 157 00:11:12,030 --> 00:11:16,190 عندها ضغط كبير من العمل أو مختبرات اللي لها علاقة 158 00:11:16,190 --> 00:11:20,370 بال research المتعلق في ال anthropology هذه فكرة 159 00:11:20,370 --> 00:11:25,470 الكازم الفكرة التانية اللي بتتكلم عنها كيف تعمل 160 00:11:25,470 --> 00:11:29,850 evaluation لل sperm DNAطبعا ال sperm اعرفته انه 161 00:11:29,850 --> 00:11:33,590 life ال sperm اعرفته انه motile هل ال sperm DNA 162 00:11:33,590 --> 00:11:37,710 جيد فيه damage في ال sperm DNA لأنه ممكن ال sperm 163 00:11:37,710 --> 00:11:43,210 يكون motile ويكون life ولكن ال capacity تبعته مش 164 00:11:43,210 --> 00:11:47,350 هال capacity و ال DNA تبعته صار فيها fragmentation 165 00:11:47,350 --> 00:11:50,790 فبالتالي لو عمل fertilization ممكن يؤدي إلى إجهاض 166 00:11:50,790 --> 00:11:56,480 الجنيه لأنه ما ارتقى إلىالكيف والكم المناسب لإتمام 167 00:11:56,480 --> 00:12:00,180 عملية ال fertilization بالشكل المطلوب تحت مصطلح 168 00:12:00,180 --> 00:12:03,680 evaluation of sperm DNA damage the maintenance of 169 00:12:03,680 --> 00:12:08,160 sperm DNA integrity is vital for fertilized and to 170 00:12:08,160 --> 00:12:10,440 transmitted the genetic material from one 171 00:12:10,440 --> 00:12:13,880 generation to another لأن المادة الوراثية هي عبارة 172 00:12:13,880 --> 00:12:18,800 عن جوهر العملية ال fertilization تصير عشان ينقل 173 00:12:18,800 --> 00:12:23,350 المادة النووية الخاصة بالأب إلىالمادة النووية 174 00:12:23,350 --> 00:12:26,810 الخاصة بالقمج تكوين الزيجوت إذا كان هذا المادة 175 00:12:26,810 --> 00:12:29,550 النووية فيها مشكلة معناه الزيجوت اللي اتكوّنت 176 00:12:29,550 --> 00:12:34,310 حتصير فيها مشكلة معناه فرصة ال up portion هتزيد ال 177 00:12:34,310 --> 00:12:37,850 sperm chromatin undergoes extensive remodeling 178 00:12:37,850 --> 00:12:43,430 during spermatogenesis to protect sperm DNA بمعنى 179 00:12:43,430 --> 00:12:46,590 آخر إن هذا ال DNA الموجود داخل ال sperm في ال head 180 00:12:46,590 --> 00:12:50,450 تاع ال sperm فيه عند ال chromatinالقرمتين الموجود 181 00:12:50,450 --> 00:12:53,970 هناك بيصير له عملية كبيرة جدا من الـ remedulling 182 00:12:53,970 --> 00:12:58,050 علشان يحافظ على ال sperm و يحمل مادة نوية لخاصة 183 00:12:58,050 --> 00:13:02,690 بال sperm من التكسير أو من التلف إذا ما صارش إلها 184 00:13:02,690 --> 00:13:06,130 remedulling معناه فيه defect حيصير على صعيد ال 185 00:13:06,130 --> 00:13:10,410 sperm DNA in this process most of sperm DNA 186 00:13:10,410 --> 00:13:14,610 hostone should be replaced with protamine Iو 187 00:13:14,610 --> 00:13:19,050 البروتامين 2 و كمية صغيرة من البروتامين يجب أن 188 00:13:19,050 --> 00:13:24,530 تبقى موجودة في الديانة، في المبالغة هذه العملية 189 00:13:24,530 --> 00:13:27,550 مهمة جدا أنه إذا كان عندك كمية كبيرة جدا من 190 00:13:27,550 --> 00:13:31,550 البروتامين كبروتين هذا البروتامين سوف يستبدل 191 00:13:31,550 --> 00:13:35,790 بالبروتامين 1 وبروتامين 2 و لازم ما يتبقى من 192 00:13:35,790 --> 00:13:40,310 البروتامين إلا كمية قليلة جدا جدا جدا لو لم تحدث 193 00:13:40,310 --> 00:13:44,760 هذه العملية عملية البروتامين replacementهيكون فيه 194 00:13:44,760 --> 00:13:47,800 end effect في الـ structure of DNA في الـ 195 00:13:47,800 --> 00:13:50,720 spermatogenesis، معناه الـ sperm لن يؤدي الوظيفة 196 00:13:50,720 --> 00:13:55,140 المطلوبة منه if this event don't occur probably 197 00:13:55,140 --> 00:13:58,240 endospermatozoa will retain more or save more 198 00:13:58,240 --> 00:14:01,460 histone than they should sperm DNA become more 199 00:14:01,460 --> 00:14:04,060 sensitive to damaging هذا الكلام اللي حكيته قبل 200 00:14:04,060 --> 00:14:07,560 بشوية إنه يجب أن تتم عملية استبدال الهستون 201 00:14:07,560 --> 00:14:11,300 بالبروتامين 1 وبروتامين 2 ويبقى الهستون بكمية 202 00:14:11,300 --> 00:14:14,830 قليلة جدا جدا جدا داخل ال spermإذا لم تحدث هذه 203 00:14:14,830 --> 00:14:18,450 العملية، معناه إن الـDNA الموجود داخل الـSperm 204 00:14:18,450 --> 00:14:23,230 هيكون أكثر حساسية للتلف والتكسير طيب، شو اللي 205 00:14:23,230 --> 00:14:27,250 هيكسر؟ وشو هيخليه عرض للتلف؟ بقول الـDNA الـdamage 206 00:14:27,250 --> 00:14:31,090 can occur only during spermatogenesis أكيد، but 207 00:14:31,090 --> 00:14:35,610 also during storage in epidermis or transport from 208 00:14:35,610 --> 00:14:39,310 one place to another يعني معنى آخر إن الـSperm 209 00:14:39,310 --> 00:14:43,950 طالما خُلقولم يحدث له عن أي مشكلة خلال عمل التخليق 210 00:14:43,950 --> 00:14:49,470 أنه بيكون فيه أمان وفيه مكان مأمون عن المخاطر لأ 211 00:14:49,470 --> 00:14:53,150 ممكن يتعرض إلى external factor أو another factor 212 00:14:53,150 --> 00:14:56,330 خلال عملية التخزين في الepidermis أو خلال عملية ال 213 00:14:56,330 --> 00:14:59,650 ejaculation أو خلال ال transfer من منطقة إلى منطقة 214 00:14:59,650 --> 00:15:04,020 يودي إلى تلفد يعنيمن أشهر العوامل التي تؤدي إلى 215 00:15:04,020 --> 00:15:07,460 DNA damage هي عبارة عن Oxidative Stress اللي 216 00:15:07,460 --> 00:15:11,680 بتسميه OS شو يعني Oxidative Stress؟ ببساطة في 217 00:15:11,680 --> 00:15:15,160 أجسامنا في حاجة اسمها Free Radical وفي حاجة اسمها 218 00:15:15,160 --> 00:15:18,020 Antioxidant لازم يصير فيه balance ما بين ال 219 00:15:18,020 --> 00:15:23,200 antioxidantو ال free radical إذا صار في عندي 220 00:15:23,200 --> 00:15:26,200 imbalance ما بين ال free radical و ال antioxidant 221 00:15:26,200 --> 00:15:30,520 حيصير عندي حالة بنسميها oxidative stress oxidative 222 00:15:30,520 --> 00:15:33,460 stress is one of the most common intrinsic factors 223 00:15:33,460 --> 00:15:37,640 leading to sperm DNA damage but it may also result 224 00:15:37,640 --> 00:15:42,440 from pathogenic status of the reproductive system 225 00:15:42,440 --> 00:15:48,610 برجع بقول مرة تانيةالـ Oxidative Stress ينتج من 226 00:15:48,610 --> 00:15:52,750 خلال عدم وجود اتزان ما بين كمية الـ Antioxidant 227 00:15:52,750 --> 00:15:56,890 الموجودة في أجسامنا و الـ Free Radical و الأكتر 228 00:15:56,890 --> 00:16:01,590 تخصيص عدم وجود اتزان ما بين كمية الـ Antioxidant و 229 00:16:01,590 --> 00:16:04,470 الـ Free Radical الموجودة في سمن الفلويد فواحد 230 00:16:04,470 --> 00:16:08,310 بزيد عن التاني هيعطيني Oxidative Stress Oxidative 231 00:16:08,310 --> 00:16:12,620 Stress يعتبر من أشهر وأكترالأسباب المسببة إلى 232 00:16:12,620 --> 00:16:16,800 تكسير و تلف المادة الوراطية الخاصة بالـ sperm ولكن 233 00:16:16,800 --> 00:16:21,940 هناك عوام الأخرى لها علاقة بالأمراض المتعلقة بالـ 234 00:16:21,940 --> 00:16:28,680 Mere Reproductive System حوالي 25% زيادة من الـ 235 00:16:28,680 --> 00:16:33,940 reactive oxidase species اللي سمنها free radical 236 00:16:33,940 --> 00:16:38,030 25% increase in seminalمعنى الـ Reactive Oxygen 237 00:16:38,030 --> 00:16:43,070 Species Level مرتبط بـ 10% تزيد في عدد الـ Sperm 238 00:16:43,070 --> 00:16:47,190 DNA Fragmentation يعني عندي لو زاد الـ Reactive 239 00:16:47,190 --> 00:16:53,050 Oxygen Species اللي سميتها Free Radical 25% ستكون 240 00:16:53,050 --> 00:16:59,970 سبب في تدمير 10% من الـ Sperm DNA تحت مصطلح DNA 241 00:16:59,970 --> 00:17:04,790 Fragmentation بمعدل 10% DNA Damage can affect both 242 00:17:04,790 --> 00:17:09,940 Nuclear DNAوMitochondrial DNA يعني بمعنى آخر أن 243 00:17:09,940 --> 00:17:13,760 الـ Oxidative Stress لن يؤثر فقط على الـ Nucleic 244 00:17:13,760 --> 00:17:16,500 Acid الموجود في الـ head، في الـ Nuclear ولكن 245 00:17:16,500 --> 00:17:19,040 هيؤثر أيضًا على الـ Nucleic Acid الموجود في الـ 246 00:17:19,040 --> 00:17:23,300 Mitochondria Oxidative Stress induced damage to 247 00:17:23,300 --> 00:17:27,180 Nuclear DNA may accelerate germ cell apoptosis 248 00:17:27,180 --> 00:17:30,300 leading to decline in sperm production and 249 00:17:30,300 --> 00:17:35,080 consequently decrease sperm count in ejaculationلو 250 00:17:35,080 --> 00:17:38,440 حصل فيه stress إكسيداتيه سيدمر ال DNA الموجودة في 251 00:17:38,440 --> 00:17:42,120 نوات ال sperm فبالتالي سيسرق تواجه ال sperm إلى 252 00:17:42,120 --> 00:17:46,120 Epiptosis معناه سيصير نقصان في عدد ال sperm 253 00:17:46,120 --> 00:17:50,760 الموجود في ال ejaculation معناه في عندي ببساطة جدا 254 00:17:50,760 --> 00:17:54,640 نقصان في كمية ال sperm المخلق معناه في عندي نقصان 255 00:17:54,640 --> 00:17:58,780 في ال sperm count يعني one step another step go to 256 00:17:58,780 --> 00:18:02,080 another step a positive sum study 257 00:18:13,420 --> 00:18:18,640 معناه زيادة الـ sperm DNA fragmentation متعلق 258 00:18:18,640 --> 00:18:22,440 بزيادة الـ abnormal في الـ sperm morphology و 259 00:18:22,440 --> 00:18:26,820 بالذات في الـ sperm تاني في دراسة أخرى قالت إنه في 260 00:18:26,820 --> 00:18:30,800 عندي higher incidence of aneuploidy in manin men 261 00:18:30,800 --> 00:18:34,520 or males with high spare DNA fragmentation ال 262 00:18:34,520 --> 00:18:40,120 incidence تبع الانبلويدي في الذكور بيزيد لو زاد 263 00:18:40,120 --> 00:18:46,160 عندي ال DNA fragmentation هذه شكل أخر ودراسة أخرى 264 00:18:46,160 --> 00:18:50,800 وجدت أن ال higher incidence of anibluity في الذكور 265 00:18:50,800 --> 00:18:58,480 مرتبط بالhigh spare DNA fragmentation صورة بتوضح 266 00:18:58,480 --> 00:19:02,580 الكلام اللي اتكلمنا عنههذا الـ sperm في أعلى الـ 267 00:19:02,580 --> 00:19:06,000 slide sperm، normal sperm بيصيرله capacitation 268 00:19:06,000 --> 00:19:09,260 بيصير عندي acrosome reaction بيصير عندي 269 00:19:09,260 --> 00:19:12,880 hyperactivation يعني بيصير عندي fertilization ما 270 00:19:12,880 --> 00:19:15,960 بيصير fertilization إلا إذا صارت capacitation وهو 271 00:19:15,960 --> 00:19:19,900 تحول ال sperm إلى completely mature sperm بعدين 272 00:19:19,900 --> 00:19:23,960 بيصير acrosome reaction من خلال اتصال ال sperm مع 273 00:19:23,960 --> 00:19:26,440 الـ receptor الموجودة في الزنا باليسود رقم 3 274 00:19:26,440 --> 00:19:30,430 وإفراز إنزيماته الهاضمةبعدين بيصير الـ 275 00:19:30,430 --> 00:19:33,950 hyperactivation و هي عبارة عن زيادة الحركة مما 276 00:19:33,950 --> 00:19:36,630 يسمح للـ sperm باختراق الـ void بتصير 277 00:19:36,630 --> 00:19:40,510 fertilization تصور صار عندك imbalance ما بين الـ 278 00:19:40,510 --> 00:19:43,710 free radical reactive oxygen species و ال 279 00:19:43,710 --> 00:19:47,790 antioxidant هتعطيلي حالة بنسميها oxidative stress 280 00:19:47,790 --> 00:19:51,570 هذا ال oxidative stress مصدرها قد يكون أسبابها 281 00:19:51,570 --> 00:19:55,830 خارجية زي ال smoking زي ال radiation زي الكحول و 282 00:19:55,830 --> 00:19:59,400 زي المواد التكسيديةوقد تكون داخلية زي الـ 283 00:19:59,400 --> 00:20:04,060 Varicosel دوال الخصية زي الـ Leukocyte زيادة في 284 00:20:04,060 --> 00:20:06,700 عدد Leukocyte يعني الـ inflammation وزي ال 285 00:20:06,700 --> 00:20:11,600 immature spermatozoa خدوا بالكم النقطة التهاب 286 00:20:11,600 --> 00:20:16,460 وزيادة عدد الحيوانات المنوية الغير ناضجة يؤدي إلى 287 00:20:16,460 --> 00:20:20,080 زيادة عدد الرُس زيادة عدد الرُس تعتبر من أهم 288 00:20:20,080 --> 00:20:23,840 العوامل التي تؤدي إلى الـ oxidative stress طب صار 289 00:20:23,840 --> 00:20:27,890 في oxidative stress إيش هيسوي؟هيعمل على تعطيل الـ 290 00:20:27,890 --> 00:20:31,410 physiological rules الخاصة بالـ sperm هتعطل 291 00:20:31,410 --> 00:20:34,810 الcapacitation، هتعطل الacrosome reaction، هتعطل 292 00:20:34,810 --> 00:20:38,070 الhyperactivity، يعني مافيه fertilization أضف إلى 293 00:20:38,070 --> 00:20:42,310 ذلك، هتعمل apoptosis، هتعمل DNA damage على صحيح 294 00:20:42,310 --> 00:20:47,590 الـDNA، هتعمل مشاكل في الـ lipid protein الموجودة 295 00:20:47,850 --> 00:20:52,730 في الـ peroxidation الخاصة بالـ sperm فبالتالي الـ 296 00:20:52,730 --> 00:20:57,070 infertility بتكون أقرب في هذه الحالة إلى الذكورة 297 00:20:57,070 --> 00:21:01,030 Alteration in mitochondria sperm DNA mainly led to 298 00:21:01,030 --> 00:21:04,470 impaired mitochondrial function those resulting in 299 00:21:04,470 --> 00:21:08,030 the homotility abnormality, hyperactivity 300 00:21:08,030 --> 00:21:11,310 abnormality, inability to fertilization يعني بمعنى 301 00:21:11,310 --> 00:21:16,030 أخر ليس الخطر مرتبط بالدمج في ال sperm nuclear DNA 302 00:21:16,510 --> 00:21:19,990 ولكن لو حد رزد دمش في ال sperm يتقندر ال DNA، هذا 303 00:21:19,990 --> 00:21:22,670 معناه هيوقف ال motility، هتكون ال motility غير 304 00:21:22,670 --> 00:21:28,610 متكافئة، غير سليمة، غير صحيحة، غير مطلوبة ال 305 00:21:28,610 --> 00:21:32,570 hyperactivity هيصير فيها defect، هيصير غير قادر 306 00:21:32,570 --> 00:21:35,970 على ال fertilization زي ما شفنا في ال slide السابق 307 00:21:45,480 --> 00:21:54,500 الفرصة اللي تبقى 308 00:21:54,500 --> 00:21:58,060 محدودة 309 00:21:58,060 --> 00:22:01,000 في الـ sperm DNA لإصلاح المزيد من المزيد من المزيد 310 00:22:01,000 --> 00:22:03,160 من المزيد من المزيدو Damage في الـ DNA معناه 311 00:22:03,160 --> 00:22:06,260 البروتينات الموجودة في الـ Spare هتفقد وظيفتها 312 00:22:06,260 --> 00:22:10,200 معناه الـ Spare هيفقد وظيفته The available method 313 00:22:10,200 --> 00:22:13,280 we can use it to detect the DNA damage 314 00:22:13,280 --> 00:22:17,080 fragmentation or apoptosis عندي تلت طرق Measured 315 00:22:17,080 --> 00:22:22,400 DNA damage by incorporating DNA probe Measured the 316 00:22:22,400 --> 00:22:26,580 sensitivity of DNA to denaturationindirect 317 00:22:26,580 --> 00:22:30,300 measures of level chromatin compaction هذه التلت 318 00:22:30,300 --> 00:22:34,640 عوامل أساسية هناخد تنتين مهمين جدا و لازم يتم 319 00:22:34,640 --> 00:22:39,080 إجراءهم في مراكز التوضيح الصناعي So what is the 320 00:22:39,080 --> 00:22:42,620 type of DNA damage؟ according to the type بقدر 321 00:22:42,620 --> 00:22:46,380 أحدد ال test أول حاجة DNA fragmentationوالـ DNA 322 00:22:46,380 --> 00:22:50,380 Fragmentation في عوامل أخرى كثيرة تساهم فيه منها 323 00:22:50,380 --> 00:22:53,220 الـ Intrinsic أو الـ Extrinsic Factor الـ 324 00:22:53,220 --> 00:22:56,600 Intrinsic Factor التي تؤدي إلى DNA Fragmentation 325 00:22:56,600 --> 00:23:01,980 والذي يعتبر أحد أنواع الـ DNA Damaged Epitosis and 326 00:23:01,980 --> 00:23:05,620 Oxidative Stress وحكينا عنها الـ Defect في الـ 327 00:23:05,620 --> 00:23:08,140 Protamination وهي عملية استبدال الـ stone 328 00:23:08,140 --> 00:23:13,220 بالبروتامين لأن وجود البروتامين مهم جدا لحمايةDNA 329 00:23:13,220 --> 00:23:17,480 of spermatozoa Insufficient chromatin remodeling 330 00:23:17,480 --> 00:23:20,780 خلل في الـ spermatogenesis إذا الأربع عوامل 331 00:23:20,780 --> 00:23:26,400 الأساسية تصنف intrinsic factor تعمل على و تساهم في 332 00:23:26,400 --> 00:23:30,420 حدوث الـ DNA fragmentation الذي يعتبر أحد أنواع 333 00:23:30,420 --> 00:23:33,830 الـ DNA damageالعوامل الأخرى بنسميها external 334 00:23:33,830 --> 00:23:38,530 factors زي ال life style زي الـ diet و ال drug 335 00:23:38,530 --> 00:23:43,110 consuming و ال tobacco، cigarette smoking، الشيشة، 336 00:23:43,110 --> 00:23:46,330 ال advancing age زيادة العمر، ال environment 337 00:23:46,330 --> 00:23:50,770 exposure زي ال pesticide و ال pollution، بعض ال 338 00:23:50,770 --> 00:23:53,430 medical history زي ال inflammation و الفارقوسيل و 339 00:23:53,430 --> 00:23:58,420 ال cancerدول الأربع يعتبروا external factor تساهم 340 00:23:58,420 --> 00:24:02,600 في إحداث DNA fragmentation الذي يعتبر أحد أنواع 341 00:24:02,600 --> 00:24:08,360 الـ DNA damage صورة بتوضح الكلام اللي احنا اتكلمنا 342 00:24:08,360 --> 00:24:14,220 عنه في sperm and sperm DNA damage بيصير بفعل أول 343 00:24:14,220 --> 00:24:18,480 حاجة ال aging advanced aging infection cancer 344 00:24:18,480 --> 00:24:24,360 toxic material radiation pollutionCaffeine Intake 345 00:24:24,360 --> 00:24:30,100 Body Mass Index Malnutrition Poor Diet Alcohol 346 00:24:30,100 --> 00:24:34,560 Stress Smoking Increase in testicular temperature 347 00:24:34,560 --> 00:24:37,360 و البركوسيلة عشان كده الناس اللي بتشتغل في المخابز 348 00:24:37,360 --> 00:24:40,520 القديمة و الناس اللي بتشتغل في مصانع الاسفنج و 349 00:24:40,520 --> 00:24:43,560 بتتعرض لكمية كبيرة جدا من الحرارة بتكون أقرب لل 350 00:24:43,560 --> 00:24:48,700 infertility بفيها الحدوث اتدمج في ال DNA طبعا مهم 351 00:24:48,700 --> 00:24:52,640 جدا نعرف على هذه العوامل اللي قسمها Intrinsic 352 00:24:52,860 --> 00:24:57,400 وextrinsic factor أكثر انتشاراً الـextrinsic 353 00:24:57,400 --> 00:25:01,860 factor هي الأكثر انتشارا من أشهر الفحوصات التي 354 00:25:01,860 --> 00:25:05,860 يمكن أن تستخدم بتحديد الـDNA fragmentationهي عبارة 355 00:25:05,860 --> 00:25:09,400 عن فحص بنسميه Tunnel فحص Tunnel هو عبارة عن 356 00:25:09,400 --> 00:25:12,800 Microscopic Dediction للأبيبتوسس فحص Tunnel هو 357 00:25:12,800 --> 00:25:17,240 عبارة عن Microscopic Dediction للأبيبتوسس شو ال 358 00:25:17,240 --> 00:25:21,320 принцип الأساسي الخاص فيه؟ ببساطة جدا، this assay 359 00:25:21,320 --> 00:25:27,580 is based on the labeling of 3'3-hydroxyl-M of the 360 00:25:27,580 --> 00:25:32,770 fragmented DNA with fluorescenceDiet catalyzed by 361 00:25:32,770 --> 00:25:36,930 terminal DTT يعني بمعنى آخر، لو أنا فيه عندي 362 00:25:36,930 --> 00:25:40,670 الـDNA الخاص بالـSpermatozoa الموجودة في الهدف، لو 363 00:25:40,670 --> 00:25:46,410 صار لها fragmentation، هيصير عندي Freeموجودة على 364 00:25:46,410 --> 00:25:50,770 الـ 3 Prime الـ Free OH الموجودة على الـ 3 Prime 365 00:25:50,770 --> 00:25:57,390 تعتبر كمكان مميز ومكان as mark indicator على وجود 366 00:25:57,390 --> 00:26:01,190 الـ Fragmentation ففي صبغة ممكن ترتبط مع هذا 367 00:26:01,190 --> 00:26:06,870 المكان و تعطيني fluorescent dye الـ DTTP مميز مع 368 00:26:06,870 --> 00:26:10,050 الـ fluorescent probe نستطيع اتجاهه باستخدام 369 00:26:10,050 --> 00:26:13,910 ميكروسكوب fluorescent أو فلو سايتوميترالوصول 370 00:26:13,910 --> 00:26:18,150 للسيجنال الطبيعي سيكون مرتبط بقيمة الـ Strand 371 00:26:18,150 --> 00:26:23,930 Breaks والتي ستتفكر كمية الـ sperm DNA باختصار 372 00:26:23,930 --> 00:26:28,850 شديد الـ Tunnel هو عبارة عن تحس يستخدم لقياس مدى 373 00:26:28,850 --> 00:26:32,310 الـ Apoptosis أو الـ DNA Fragmentation في الـ 374 00:26:32,310 --> 00:26:36,870 spermatozoa DNA من خلال أن في مادة موجودة في هذا 375 00:26:36,870 --> 00:26:42,560 الـ reagent لها قابلية للارتباط مع الـ OHالـ Free 376 00:26:42,560 --> 00:26:46,440 الموجودة على الـ 3 Prime من أين أجت أن عند Double 377 00:26:46,440 --> 00:26:50,960 Strand DNA صارها Fragmentation أدت إلى وجود Free 378 00:26:50,960 --> 00:26:55,280 OH موجودة على الـ 3 Prime ترتبط بهذه المادة المادة 379 00:26:55,280 --> 00:27:02,000 هذه مرتبطة بـ Fluorescent Pro إذا عرضت للـ UV أو 380 00:27:02,000 --> 00:27:06,220 لـ Fluorescent أو لـ Fluorescent Microscope هشوفها 381 00:27:06,220 --> 00:27:10,320 تحت الميكروسكوب فممكن أقرأها ببساطة جدا على هيئة 382 00:27:10,320 --> 00:27:15,640 percentageفي علاقة ما بين عدد ال indicator اللتي 383 00:27:15,640 --> 00:27:19,320 تظهر عدد ال flow اللتي تظهر عدد ال light ال 384 00:27:19,320 --> 00:27:21,920 ignition light اللتي تظهر ال emission light اللتي 385 00:27:21,920 --> 00:27:28,860 تظهر و نسبة ال apoptosis كل ما زاد .. كل ما زاد ال 386 00:27:28,860 --> 00:27:34,020 signal معناه في عندي عدد كبير من ال DNA apoptosis 387 00:27:34,020 --> 00:27:38,550 أو ال DNA fragmentationصورة بتوضح الكلمة ده هاي في 388 00:27:38,550 --> 00:27:42,550 عندي spam double strand يعنيه صار في عندي break في 389 00:27:42,550 --> 00:27:46,310 ال double strand أدت إلى تكوين OH3 على ال 3 prime 390 00:27:46,310 --> 00:27:52,050 عملتلها mixing بال tunnel kit فلجيت أنه في عند ال 391 00:27:52,050 --> 00:27:57,010 DTT انزايم ارتبط فيها ومربوط بال fluoro scan لو 392 00:27:57,010 --> 00:27:59,630 عرضته ل flow cytometer أو fluorescent microscope 393 00:27:59,630 --> 00:28:03,150 هتعطيني emission لونه green ال emissionأو light 394 00:28:03,150 --> 00:28:07,610 لونه green light لونه green يتناسب تناسبان طرديا 395 00:28:07,610 --> 00:28:11,470 مع عدد الحيوانات المنوية التي بها defect أو بها 396 00:28:11,470 --> 00:28:17,470 apoptosis الصورة أفضل دالين هي عندي صورة ال 397 00:28:17,470 --> 00:28:24,130 background black وفي عندي لونين لون pale green 398 00:28:24,130 --> 00:28:29,090 فاتح أخضر فاتح و لون dark green ال dark green 399 00:28:29,090 --> 00:28:31,930 معناه اتونال positiveماذا يعني الـ tone الـ 400 00:28:31,930 --> 00:28:35,170 positive؟ معناه إنه في صار في عندي fragmentation 401 00:28:35,170 --> 00:28:40,070 ارتبطت ال probe مع ال OH الـ3 الموجودة على الـ 3 402 00:28:40,070 --> 00:28:44,810 prime معناه إذا عرضتها لفلورسانت مايكروسكوب أو 403 00:28:44,810 --> 00:28:49,570 الفلورسكال هيعطيني signal light لونه green كل ما 404 00:28:49,570 --> 00:28:53,110 زاد ال intensity لل green color معناه في عندي كمية 405 00:28:53,110 --> 00:28:56,610 fragmentation أعلى أما ال pale color معناه ال tone 406 00:28:56,610 --> 00:28:59,740 الـ negative يعني مافي عندي fragmentation هناما في 407 00:28:59,740 --> 00:29:04,200 OH3 يرتبط فيها الـ probe هنا عشان كده بقوللي 408 00:29:04,200 --> 00:29:06,740 Tunnel Assay for Detection of Spare DNA 409 00:29:06,740 --> 00:29:13,060 Fragmentation Under Fluorescent Microscope الـ 410 00:29:13,060 --> 00:29:16,640 Normal DNA هيديني الـ Light Green عشان كده بسميه 411 00:29:16,640 --> 00:29:19,920 Tunnel Negative بينما الـ Damaged DNA أو الـ 412 00:29:19,920 --> 00:29:24,940 Apoptosis Spare هيعطيني Bright أو Dark Green وهو 413 00:29:24,940 --> 00:29:29,740 عبارة عن الـ Tunnel الـ Positiveعن الـ tunnel 414 00:29:29,740 --> 00:29:34,860 positive طبعاً هذا هي عبارة عن الفكرة ما بين ال 415 00:29:34,860 --> 00:29:38,160 tunnel positive وال tunnel ال negative الخاصة 416 00:29:38,160 --> 00:29:42,120 بقياس ال fragmentation sperm يعني fragmentation أو 417 00:29:42,120 --> 00:29:50,660 sperm apoptosis سنكتفي 418 00:29:50,660 --> 00:29:55,000 بهذا القدر من المعلومات في هذه المحاضرة على أمل أن 419 00:29:55,000 --> 00:29:59,280 نتقي في المحاضرة القادمة ان شاء اللهDom Tom في حفظ 420 00:29:59,280 --> 00:29:59,420 الله