1 00:00:00,590 --> 00:00:05,710 مبدأ شغل الـ KET بكل بساطة، Endymetic Method بتروح 2 00:00:05,710 --> 00:00:09,630 تجيبي عينة المريض، Serum أو البلازما، بيكون فيها 3 00:00:09,630 --> 00:00:13,450 الدهون الثلاثية، إذاً الـ Triglycerides، بيكون موجود 4 00:00:13,450 --> 00:00:18,030 في الـ Serum أو البلازما تبع المريض، وبتروح تجيبي 5 00:00:18,030 --> 00:00:25,100 الـ Reagent اللي موجود في KET، في الـ Kit الخاص بفحص 6 00:00:25,100 --> 00:00:29,120 الـ Triglyceride، بتجيبي الـ Reagent، الـ Reagent 7 00:00:29,120 --> 00:00:34,620 بيكون عبارة عن إنزيمات، لما بنخلط، بنضيف الـ 8 00:00:34,620 --> 00:00:40,800 Reagent على عينة المريض، بيحدث هناك تفاعل ما بين 9 00:00:40,800 --> 00:00:44,880 الانزيمات الموجودة في الـ Reagent وما بين الـ 10 00:00:44,880 --> 00:00:49,080 Triglycerides اللي موجود في الـ Serum، محصلة 11 00:00:49,080 --> 00:00:55,830 التفاعل نحصل على لون، شدة اللون تتناسب تناسباً طردياً 12 00:00:55,830 --> 00:01:01,070 مع تركيز الـ Triglycerides اللي موجود في الـ Serum 13 00:01:01,070 --> 00:01:07,030 يعني نتيجة التفاعل، لو نتج لون غامق، هذا دليل أن 14 00:01:07,030 --> 00:01:12,010 الدهون الثلاثية تركيزها عالي في العينة، لو نتج لون 15 00:01:12,010 --> 00:01:16,450 فاتح، معناه أن الدهون الثلاثية تركيزها طبيعي في 16 00:01:16,450 --> 00:01:21,950 العينة، إذن التفاعل يكسر الـ Triglycerides اللي 17 00:01:21,950 --> 00:01:27,350 موجود في عينة المريض، ليبو بروتين ليبايز، هذا عبارة 18 00:01:27,350 --> 00:01:32,090 عن إنزيم موجود في الرياجنت، لما بندير الرياجنت على 19 00:01:32,090 --> 00:01:36,030 عينة المريض، هذا الإنزيم بيشتغل على الـ 20 00:01:36,030 --> 00:01:40,610 Triglyceride وبيكسرها، بيعطيني Glycerol و 3 fatty 21 00:01:40,610 --> 00:01:47,000 acids، الـ Glycerol في وجود الـ ATP ووجود إنزيم آخر 22 00:01:47,000 --> 00:01:52,020 موجود في الـ reagent اسمه الـ Glycerol Kinase 23 00:01:52,020 --> 00:01:56,800 هيعطيني مادة Glycerol ثلاثة فوسفات زائد ADP 24 00:01:56,800 --> 00:02:01,700 الـ Glycerol ثلاثة فوسفات في وجود إنزيم آخر موجود 25 00:02:01,700 --> 00:02:06,360 في الـ reagent اسمه Glycerol Phosphate Oxidase 26 00:02:06,360 --> 00:02:10,380 هيعطيني مادة اسمها الـ Dihydroxy 27 00:02:12,230 --> 00:02:16,330 acetone phosphate زائد hydrogen peroxide، الـ 28 00:02:16,330 --> 00:02:20,090 hydrogen peroxide لما يتفاعل مع مادة موجودة في الـ 29 00:02:20,090 --> 00:02:24,410 reagent، 4-Aminoantipyrine في وجود الـ peroxidase 30 00:02:24,410 --> 00:02:28,150 enzyme، برضه موجود في الـ reagent، في الآخر هيعطوني 31 00:02:28,150 --> 00:02:34,630 مادة اسمها quinoneimine، هذه مادة هي الـ colored 32 00:02:34,630 --> 00:02:41,710 compound، المركب الملون الناتج نتيجة تفاعل الـ 33 00:02:41,710 --> 00:02:44,790 Reagent مع الدهون الثلاثية الموجودة في الـ Serum 34 00:02:44,790 --> 00:02:49,210 تبع المريض، وطبعاً هذا اللون بنقيسه احنا على جهاز 35 00:02:49,210 --> 00:02:53,890 الـ Spectrophotometer، تمام؟ إذن نفس مبدأ عمل 36 00:02:53,890 --> 00:02:58,410 السكر، فحص السكر، وفحص الـ Total Protein، وفحص 37 00:02:58,410 --> 00:03:02,470 الألبومين، كانت كلها عبارة عن Color، ينتج عندنا 38 00:03:02,470 --> 00:03:08,620 Color ونقيسه على الـ Spectrophotometer، الـ procedure لفحص 39 00:03:08,620 --> 00:03:13,320 بتجيبي ثلاثة أنابيب بلاستيك، tubes، بتعملي لهم label 40 00:03:13,320 --> 00:03:17,040 تكتبي على الأولى blank، الثانية standard، الثالثة الـ 41 00:03:17,040 --> 00:03:20,800 patient، standard، بتجيبي الـ reagent A اللي هو الـ 42 00:03:20,800 --> 00:03:25,140 reagent تبع الـ triglyceride test، وبتحطي على كل 43 00:03:25,140 --> 00:03:30,300 تيوب 1 ملل، يعني 1000 microliter، الـ kit تبع 44 00:03:30,300 --> 00:03:34,020 الدهون الثلاثية بيقول فيه standard، هذا الـ standard 45 00:03:34,550 --> 00:03:40,310 عبارة عن دهون ثلاثية، تمام؟ وله تركيز معين، يعني 46 00:03:40,310 --> 00:03:43,570 تركيز الدهون الثلاثية الموجودة في الـ Standard 47 00:03:43,570 --> 00:03:48,630 بتكون معلومة، وبتكون مكتوبة على علبة الـ Standard 48 00:03:48,630 --> 00:03:52,790 نفسها، تفتح الـ Standard، تاخد منه 10 ميكرولتر 49 00:03:52,790 --> 00:03:57,590 وبتحطيها فوق الـ 1 ملل داخل أنبوبة الـ Standard 50 00:03:57,590 --> 00:04:02,390 وتعملي مكس منيحة، وبتجيبي الـ Serum أو البلازما تبعت 51 00:04:02,390 --> 00:04:06,430 الـ patient sample، تاخدي منها 10 ميكرولتر، و بتحطيها 52 00:04:06,430 --> 00:04:10,630 في أنبوبة الـ sample، وبتجيبي 10 ميكرولتر من الـ 53 00:04:10,630 --> 00:04:14,390 distilled water، وبتحطيها في أنبوبة الـ blank، و 54 00:04:14,390 --> 00:04:18,570 تعملي mix منيح، و incubation 10 دقائق at room 55 00:04:18,570 --> 00:04:23,330 temperature، أو ممكن تاخدي الأنابيب وتحطيها في الـ 56 00:04:23,330 --> 00:04:29,530 water bath لمدة 5 دقائق، بعدين بتقرأي هالجيت، بتجيبي 57 00:04:29,530 --> 00:04:32,970 الـ blank، وبتسفري الـ spectrophotometer على الـ blank 58 00:04:32,970 --> 00:04:38,190 بعدين بتحطي أنبوبة الـ standard، بتحطيها في cuvette 59 00:04:38,190 --> 00:04:42,390 السائل اللي جوا أنبوبة الـ standard بتحطيها في الـ 60 00:04:42,390 --> 00:04:47,210 cuvette، وبتقرأيها، إذن إحنا أخدنا الـ absorbance للـ 61 00:04:47,210 --> 00:04:53,250 standard، بعدين بتجيبي cuvette أخرى، بتحطي فيها مكونات 62 00:04:53,250 --> 00:04:58,010 الـ sample، وبتقرأي أنبوبة الـ sample، وبتاخدي 63 00:04:58,010 --> 00:05:03,850 absorbance للـ sample، والتفاعل بيضلوا stable لمدة 64 00:05:03,850 --> 00:05:08,830 ساعة، إذن أنا حصلت على الـ absorbance للـ standard و 65 00:05:08,830 --> 00:05:12,570 absorbance للـ sample، كيف بدي أطلّع تركيز الدهون 66 00:05:12,570 --> 00:05:18,370 الثلاثية؟ بطبق بيريز، الـ Concentration للـ 67 00:05:18,370 --> 00:05:24,010 Triglyceride في عينة المريض يساوي الـ Absorbance 68 00:05:25,640 --> 00:05:30,980 تبع الـ Patient Sample على الـ Absorbance للـ 69 00:05:30,980 --> 00:05:35,560 Standard، ضرب الـ Concentration للـ Standard، الـ 70 00:05:35,560 --> 00:05:38,340 Absorbance للـ Patient Sample معروف، والـ 71 00:05:38,340 --> 00:05:42,000 Absorbance للـ Standard معروف، والـ Concentration 72 00:05:42,000 --> 00:05:46,140 للـ Standard معروف، إذن بقدر أعرف الـ Concentration 73 00:05:46,660 --> 00:05:50,620 للدهون الثلاثية في الـ patient sample، والوحدة 74 00:05:50,620 --> 00:05:56,240 بالـ milligram per deciliter، والـ normal range للـ 75 00:05:56,240 --> 00:06:02,900 triglyceride عند الإنسان الطبيعي، يعني أقل من 200 76 00:06:02,900 --> 00:06:07,240 milligram per deciliter، لازم الدهون الثلاثية تكون 77 00:06:07,240 --> 00:06:11,580 أقل من 200 milligram per deciliter في العينة، الـ 78 00:06:11,580 --> 00:06:24,540 normal، تمام؟ الكوليسترول، هو 79 00:06:24,540 --> 00:06:31,400 نوع من أنواع الدهون اللي موجودة في بلازما الدم 80 00:06:31,400 --> 00:06:36,540 بشكل أساسي، إذن الـ Triglycerides، الدهون الثلاثية 81 00:06:36,540 --> 00:06:43,060 والكوليسترول، هذه الدهون أساسية موجودة في بلازما الدم 82 00:06:43,710 --> 00:06:47,010 و لها وظائف فسيولوجية مهمة بشكل رئيسي، 83 00:06:47,010 --> 00:06:51,330 بما في ذلك، الكوليسترول له ثلاث وظائف أساسية في 84 00:06:51,330 --> 00:06:56,630 الجسم، يدخل الكوليسترول في تصنيع العصارة الصفراوية، 85 00:06:56,630 --> 00:07:02,330 synthesis of bile acid، ويدخل في تصنيع الـ steroid 86 00:07:02,330 --> 00:07:06,870 hormones، أيضاً يدخل في تركيب الـ cell membrane 87 00:07:07,440 --> 00:07:13,560 الكوليسترول يدخل في تركيب غشاء الكثير من الخلايا، 88 00:07:13,560 --> 00:07:19,580 الكثير من الخلايا في الجسم، عشان تنبنى لازم 89 00:07:19,580 --> 00:07:24,580 يتكون لها مثلاً الغشاء، هذا الغشاء تركيبته الأساسية 90 00:07:24,580 --> 00:07:28,800 بتكون كوليسترول، يعني بيدخل في تركيب الغشاء، هو 91 00:07:28,800 --> 00:07:36,830 الكوليسترول، يعني الكوليسترول هو مكون أساسي ضمن 92 00:07:36,830 --> 00:07:41,330 مكونات الـ cell membrane، الكوليسترول أيضاً يظهر 93 00:07:41,330 --> 00:07:45,290 في تصلب الشرايين، atherosclerosis، هذا تراكم الكوليسترول 94 00:07:45,290 --> 00:07:49,230 هو أحد العمليات المرضية الشائعة التي تحدث 95 00:07:49,230 --> 00:07:55,760 اليوم، الكوليسترول ارتفاعه مرتبط بحدوث تصلب 96 00:07:55,760 --> 00:08:01,720 الشرايين، لأنه الفائض من الكوليسترول، والكوليسترول 97 00:08:01,720 --> 00:08:06,060 الزيادة عن الحاجة بيروح، بيتراسب في الأوعية 98 00:08:06,060 --> 00:08:11,020 الشرايين، وبالتالي عامل تصلب شرايين، عشان هيك قياس 99 00:08:11,020 --> 00:08:16,380 مستوى الكوليسترول في الدم واحد من الفحوصات الشائعة 100 00:08:16,380 --> 00:08:18,140 الروتينية حالياً 101 00:08:20,710 --> 00:08:24,790 لو إجاني شخص بده يعمل فحص الـ Cholesterol Test 102 00:08:24,790 --> 00:08:29,310 تمام، أيش نوع العينة؟ يا Serum، يا Plasma، الـ 103 00:08:29,310 --> 00:08:33,590 Anticoagulant المسموح فيها، EDTA أو هيبارين، أي 104 00:08:33,590 --> 00:08:38,430 Anticoagulant غير الـ EDTA أو الهيبارين مرفوضة، زي 105 00:08:38,430 --> 00:08:43,330 الـ Fluoride، السترات، الأوكزالات، هذه كلها مرفوضة 106 00:08:43,330 --> 00:08:50,830 وليش مرفوضة؟ لنفس السبب في فحص الـ Triglyceride 107 00:08:50,830 --> 00:08:55,290 حكينا أن لو استخدمت هذه الـ Anticoagulant، هتعمل 108 00:08:55,290 --> 00:09:00,190 shifting للـ water اللي موجود في الـ RBCs، ويطلعوا 109 00:09:00,190 --> 00:09:05,150 على البلازما، وبالتالي هتخفف مكونات البلازما، يعني 110 00:09:05,150 --> 00:09:08,970 هتخفف الكوليسترول، وبالتالي هيجي مستوى 111 00:09:08,970 --> 00:09:14,550 الكوليسترول بشكل خاطئ، لـ Storage and Stability، ممكن 112 00:09:14,550 --> 00:09:18,790 السيرم أو البلازما أخذهم سبعة أيام في الثلاجة، أو 113 00:09:18,790 --> 00:09:25,030 ثلاثة أشهر في الـ Freezer، برضه مبدأ عمل الـ kit 114 00:09:25,030 --> 00:09:29,250 enzymatic reaction، يعني الـ reagent الخاص 115 00:09:29,250 --> 00:09:34,330 بالكوليسترول بيكون عبارة عن enzymes، عن مجموعة من 116 00:09:34,330 --> 00:09:39,590 الإنزيمات، الكلام اللي فوق بالـ slide، ملخصه الـ 117 00:09:39,590 --> 00:09:44,050 chart اللي تحت، خلينا نتبع على الـ chart اللي تحته، 118 00:09:44,050 --> 00:09:48,570 إذن الـ Serum أو البلازما، عينة المريض، بيكون فيها 119 00:09:48,570 --> 00:09:54,130 الكوليسترول، بس يا جماعة، ملاحظة أن الكوليسترول ما 120 00:09:54,130 --> 00:10:00,550 بيكون موجود بشكل حر في البلازما تبع الدم عند 121 00:10:00,550 --> 00:10:06,270 الإنسان، الكوليسترول ما بيكون free، بيكون مربوط بـ 122 00:10:06,270 --> 00:10:11,650 Fatty Acid، بأحماض دهنية، بواسطة رابطة الـ Ester 123 00:10:11,650 --> 00:10:15,570 bond، يعني الكوليسترول اللي موجود في الـ Serum تبعي 124 00:10:16,480 --> 00:10:21,980 أو في البلازما تبعتي، بيكون شكله Cholesterol esters 125 00:10:21,980 --> 00:10:27,820 يعني كوليسترول مربوط بأحماض دهنية بواسطة Ester 126 00:10:27,820 --> 00:10:31,700 bond، إذن السيرم أو البلازما تبعت المريض فيها 127 00:10:31,700 --> 00:10:38,510 Cholesterol esters، في وجود الماء، وCholesterol esterase 128 00:10:38,510 --> 00:10:42,710 إنزيم موجود في الـ reagent، هيشتغل على الكوليسترول 129 00:10:42,710 --> 00:10:48,630 ester، ويكسر الكوليسترول ester، وبالتالي هيتحرر 130 00:10:48,630 --> 00:10:53,610 الكوليسترول وينفك عن الـ fatty acid اللي كانت مرتبطة 131 00:10:53,610 --> 00:10:58,590 فيه، هيجي الكوليسترول يرتبط في الـ Oxygen اللي جاي من 132 00:10:58,590 --> 00:11:02,910 الهواء الجوي، في وجود إنزيم اسمه Cholesterol 133 00:11:02,910 --> 00:11:06,810 oxidase، موجود في الـ reagent، هيعطيني مركب اسمه 134 00:11:06,810 --> 00:11:10,830 Cholesterol 3 one زائد hydrogen peroxide، 135 00:11:10,830 --> 00:11:14,970 hydrogen peroxide مع الـ 4-hydroxybenzoate 136 00:11:17,260 --> 00:11:24,120 و4-Aminoantipyrine، هذه كلها مواد موجودة في 137 00:11:24,120 --> 00:11:28,520 الـ reagent، في وجود الـ peroxidase enzyme، محصلة 138 00:11:28,520 --> 00:11:34,340 الـ reaction، هيعطيني لون أحمر، وأربع جزيئات ماء، 139 00:11:34,340 --> 00:11:42,040 إذن اتحاد أو تفاعل الكوليسترول ester اللي موجود في 140 00:11:42,040 --> 00:11:46,200 الـ Serum مع الـ Reagent، محصلة التفاعل هيعطيني 141 00:11:46,200 --> 00:11:50,780 مادة ملونة، ولون التفاعل هيكون أحمر، أول ما أشوف 142 00:11:50,780 --> 00:11:54,340 اللون الأحمر، معناه حدث هناك reaction ما بين 143 00:11:54,340 --> 00:11:57,060 الكوليسترول الموجود في عينة المريض وما بين الـ 144 00:11:57,060 --> 00:12:01,120 Reagent، وشدة اللون تتناسب تناسباً طردياً مع تركيز 145 00:12:01,120 --> 00:12:07,810 الكوليسترول اللي موجود في العينة، تمام؟ نفس مبدأ شغل 146 00:12:07,810 --> 00:12:11,450 الـ Kit لـ Triglyceride والسكر، والـ Total Protein 147 00:12:11,450 --> 00:12:17,300 والألبومين، الـ procedure نفس شغل الـ Triglyceride، 148 00:12:17,300 --> 00:12:22,300 بتجيبي ثلاثة أنابيب، بتعملي blank، بتعملي label، تكتبي 149 00:12:22,300 --> 00:12:25,320 على الأنبوبة الأولى blank، الثانية standard، الثالثة 150 00:12:25,320 --> 00:12:28,840 sample، بتجيبي الـ reagent الخاص بالكوليسترول، بتحطي 151 00:12:28,840 --> 00:12:33,100 على كل tube، 1 ملل، بتجيبي الـ standard اللي 152 00:12:33,100 --> 00:12:37,460 جواه كوليسترول واللي تركيزه معلوم، تاخدي منه عشرة 153 00:12:37,460 --> 00:12:41,360 ميكرولتر، بيكون في الـ kit تبع الكوليسترول، وبتحطيه في 154 00:12:41,360 --> 00:12:45,010 أنبوبة الـ standard، وبتعملي mix، وبتجيبي الـ patient 155 00:12:45,010 --> 00:12:48,590 sample، Serum أو البلازما، بتاخدي منها 10 ميكرولتر، و 156 00:12:48,590 --> 00:12:52,810 بتحطيها في أنبوبة الـ sample، وبتجيبي 10 ميكرولتر من 157 00:12:52,810 --> 00:12:57,040 الـ distilled water، وبتحطيها في الـ blank، تعملي مكس 158 00:12:57,040 --> 00:13:00,720 منيح للأنابيب، وincubation عشرين دقيقة at room 159 00:13:00,720 --> 00:13:05,240 temperature، أو ممكن تاخدي الأنابيب تحطيها على الـ 160 00:13:05,240 --> 00:13:09,520 water bath لمدة عشر دقائق، بعدين بتسفري الجهاز على 161 00:13:09,520 --> 00:13:13,740 500 نانومتر، بتسفري على الـ blank، تضبطي الـ 162 00:13:13,740 --> 00:13:17,620 wavelength على 500 نانومتر، وبتحطيها في cuvette 163 00:13:17,620 --> 00:13:23,170 في الـ cuvette مكونات أنبوبة الـ standard، تاخدي الـ 164 00:13:23,170 --> 00:13:26,790 Absorbance للـ Standard، وبعدين الـ Absorbance للـ 165 00:13:26,790 --> 00:13:31,270 Sample، وبعدين بتطبقي بيريز، عشان تحسبّي تركيز 166 00:13:31,270 --> 00:13:36,730 الكوليسترول في عينة الـ patient، والوحدة هتطلع بالـ 167 00:13:36,730 --> 00:13:40,970 milligram per deciliter، أيضاً الـ normal range 168 00:13:40,970 --> 00:13:45,530 للكوليسترول في الجسم لازم يكون أقل من 200 169 00:13:45,530 --> 00:13:50,440 milligram per deciliter، وبدناش ننسى أن الـ normal 170 00:13:50,440 --> 00:13:55,180 range من مختبر لمختبر بيكون مختلف، حسب الـ kit، وحسب 171 00:13:55,180 --> 00:14:01,420 الشركة اللي بتصنع الـ kit، تمام؟ الـ HDL، الـ high 172 00:14:01,420 --> 00 223 00:18:46,140 --> 00:18:50,540 سينصاب بـ coronary heart disease لأنه تخيلوا 224 00:18:50,540 --> 00:18:55,500 الموضوع لو الـ HDL تركزه قليل في الجسم، إيش سيصير؟ 225 00:18:55,500 --> 00:18:59,080 في الكوليسترول الموجود في الخلايا؟ سيترسّب على 226 00:18:59,080 --> 00:19:05,650 تشغيل الخلايا، مش سيلاقي الـ HDL الناقل، مش سيكون 227 00:19:05,650 --> 00:19:11,450 موجود، وحكينا وظيفته أنه يأخذ الفائض عن حاجة الخلية 228 00:19:11,450 --> 00:19:16,190 ويرجعه للكبد. طيب، لو مش موجود الـ HDL، إيش سيصير في 229 00:19:16,190 --> 00:19:20,310 الكوليسترول؟ مش سيلاقي من يشيله ويطلعه على الـ liver 230 00:19:20,310 --> 00:19:25,470 فهيضل مترسب على الخلايا ويُخرّب الخلايا ويعمل 231 00:19:25,470 --> 00:19:29,930 أمراضًا في الشرايين والأوردة، تمام؟ لأن الكوليسترول 232 00:19:29,930 --> 00:19:31,630 سيكون مترسبًا فيها. 233 00:19:34,330 --> 00:19:39,690 الـ Analysis Methods، طرق قياس الـ HDL، كيف نقيس 234 00:19:39,690 --> 00:19:44,490 الـ HDL؟ أول طريقة بالـ Ultra Centrifugation، ما 235 00:19:44,490 --> 00:19:50,850 بيستخدموها أكثر طبعًا. الـ Lipoprotein، نواقل الدهون 236 00:19:50,850 --> 00:19:56,460 الأربعة: الـ Kylomicron، والـ HDL، والـ LDL، والـ VLDL. 237 00:19:56,460 --> 00:20:00,820 هدولا كلهم بيكونوا موجودين في البلازما تبع الإنسان 238 00:20:00,820 --> 00:20:04,980 أو في السيروم. تأخذ عينة البلازما أو السيروم، 239 00:20:04,980 --> 00:20:10,740 وتحطيها في جهاز centrifuge اسمه Ultra Centrifuge. 240 00:20:10,740 --> 00:20:18,940 هذا الجهاز سيفصل العينة إلى أربع طبقات، تمام؟ طبقة 241 00:20:18,940 --> 00:20:24,100 سيكون موجود فيها الـ HDL، وطبقة سيكون فيها الـ LDL، 242 00:20:24,100 --> 00:20:28,780 وطبقة سيكون فيها الـ VLDL، وطبقة سيكون فيها 243 00:20:28,780 --> 00:20:33,860 الكايلومايكرون. ستأخذون التفصيل أكثر مع الدكتور مازن، 244 00:20:33,860 --> 00:20:38,420 بس احنا الفكرة، فكرة الفحص أنه في جهاز يفصل 245 00:20:38,420 --> 00:20:43,820 الـ Lipoproteins الأربعة، يفصلها عن بعضها، يفصل 246 00:20:43,820 --> 00:20:49,310 الـ HDL، و LDL، و VLDL، و الكايلومايكرون عن بعضها. الفصل بناءً 247 00:20:49,310 --> 00:20:55,870 على الـ density، بناءً على مدى كثافة هذا الناقل طبعًا. 248 00:20:55,870 --> 00:21:01,690 الـ HDL هو أعلى واحد من حيث الـ density، من اسمه، 249 00:21:01,690 --> 00:21:06,010 اسمه High Density Lipoprotein، واللي بتكون كثافته 250 00:21:06,010 --> 00:21:11,510 أكثر، بيكون محتوى من البروتينات أكثر. احنا حكينا 50% 251 00:21:11,510 --> 00:21:16,630 من تركيبة الـ HDL عبارة عن بروتينات، يعني أعلى 252 00:21:16,630 --> 00:21:24,070 واحد في الكثافة الـ HDL، تمام؟ سيأتي من ورائه الـ LDL، 253 00:21:24,070 --> 00:21:29,030 الـ Low Density Lipoprotein، ومن ورائه الـ VLDL، الـ 254 00:21:29,030 --> 00:21:33,240 Very Low Density Lipoprotein، ومن ورائه الـ Kylomicron. 255 00:21:33,240 --> 00:21:38,460 الـ Kylomicron، يُقال أنها أقل واحدة من حيث الكثافة، 256 00:21:38,460 --> 00:21:45,540 وبالتالي محتواها من البروتين قليل جدًا، تمام؟ إذن فكرة 257 00:21:45,540 --> 00:21:49,260 الـ Ultra Centrifugation، ما أريد أي تفصيل من اللي 258 00:21:49,260 --> 00:21:53,380 حكيته، ستأخذونه مع الدكتور مازن، بس بدكم تعرفوا أن 259 00:21:53,380 --> 00:21:57,840 طريقة بتنفصل فيها الـ Lipoprotein، نواقل الدهون، عن 260 00:21:57,840 --> 00:22:04,350 بعضها البعض، حسب كثافتها، واللي تركيبه، واللي محتواه 261 00:22:04,350 --> 00:22:09,450 بروتيني أكثر، يعني الناقل اللي عنده بروتينات أكثر، 262 00:22:09,450 --> 00:22:15,890 هو معناه كثافته أعلى، تمام. بولي أكريلا مايد جيل 263 00:22:15,890 --> 00:22:21,150 إلكتروفوريسس، هذا إن شاء الله السنة الجاية، الفصل 264 00:22:21,150 --> 00:22:23,270 الثاني، سنأخذ 265 00:22:26,740 --> 00:22:30,860 الـ Polyacrylamide Gel Electrophoresis، الفصل القادم، 266 00:22:30,860 --> 00:22:37,950 سنأخذ كيف ممكن أفصل الليبو بروتين، الأربعة نواقل 267 00:22:37,950 --> 00:22:41,910 الدهون الأربعة، على الـ Polyacrylamide Gel. سترون 268 00:22:41,910 --> 00:22:46,670 يا جماعة، الأربعة باندات: الـ HDL، والـ LDL، والـ VLDL، 269 00:22:46,670 --> 00:22:52,250 و الـ Kilomicron، وبقدر بعد ما أفصلهم، أحسب تركيز 270 00:22:52,250 --> 00:22:57,390 كل واحد على حدة، من خلال جهاز اسمه Densitometer. 271 00:22:57,390 --> 00:23:02,260 سنأخذه بالتفصيل الفصل القادم. الـ Precipitation في 272 00:23:02,260 --> 00:23:06,560 الكتّات، وهذه الكتّات المعتمدة عندنا في المختبر، أنني 273 00:23:06,560 --> 00:23:10,680 أفحص تركيز الـ HDL بطريقة الـ Precipitation. 274 00:23:10,680 --> 00:23:16,720 الطريقة تعتمد على أني أضيف، أضيف مادة على 275 00:23:16,720 --> 00:23:20,920 الـ Serum تبع المريض، هذه المادة تعمل الـ 276 00:23:20,920 --> 00:23:28,060 Precipitation، ترسيب، لكل الـ lipoprotein ما عدا الـ 277 00:23:28,060 --> 00:23:32,520 lipoprotein اللي أنا بدي أقيصه، يبقى فوق، يبقى فيه 278 00:23:32,520 --> 00:23:37,940 الـ supernatant. مثلًا اليوم أنا بدي أقيص الـ HDL، أحط 279 00:23:37,940 --> 00:23:43,060 مادة تُرسّب كل الـ lipoprotein تحت، اللي هم الـ 280 00:23:43,060 --> 00:23:48,040 VLDL، والـ LDL، والـ Kilomicron، ويبقى عندي فوق 281 00:23:48,040 --> 00:23:52,920 الـ HDL. إذن، Based on the ability of various agents 282 00:23:52,920 --> 00:23:56,240 to precipitate the selectively of the major 283 00:23:56,240 --> 00:24:00,820 lipoprotein fractions except HDL. أضيف مادة تُرسّب 284 00:24:00,820 --> 00:24:05,130 كل الـ lipoprotein ما عدا الـ HDL. الطرق المناعية، 285 00:24:05,130 --> 00:24:09,270 طرق مناعية. احنا بنحكي نواقل الدهون، اللي هي الـ 286 00:24:09,270 --> 00:24:12,030 lipoprotein، عبارة عن بروتينات، عبارة عن 287 00:24:12,030 --> 00:24:16,730 الانتيجينات. فلو جبت أنا antibodies، مثلًا هنا 288 00:24:16,730 --> 00:24:22,510 يُقال لي بدي أقيس الـ HDL. لو جبت antibodies، هذا الـ 289 00:24:22,510 --> 00:24:28,490 Antibody، مثلًا جبت Antibody ضد الـ LDL، و Antibody ضد 290 00:24:28,490 --> 00:24:34,170 الـ VLDL، و Antibody ضد الـ Kilomicron. أو إذا، تمام، 291 00:24:34,170 --> 00:24:39,870 المهم، Antibodies، أجيبها لكل الـ lipoprotein ما عدا هذا 292 00:24:39,870 --> 00:24:44,090 الـ lipoprotein اللي أنا بدي أقيصه، أتركه حرًا، 293 00:24:44,090 --> 00:24:51,490 آخذه، وأقيصه، تمام؟ أو العكس، أروح أجيب antibody ضد 294 00:24:51,490 --> 00:24:56,050 مثلًا الـ HDL اللي أنا بدي أقيصه، يرتبط معه، ما هو 295 00:24:56,050 --> 00:24:59,570 الـ HDL-antigen مع الـ antibody يعطيني الـ complex. 296 00:24:59,570 --> 00:25:03,570 بالإليزا، بالطرق المناعية اللي أنتم تعرفونها، يتم 297 00:25:03,570 --> 00:25:08,720 قياس تركيز الـ HDL. هنا، إيش أقول لكم؟ إن Antibodies 298 00:25:08,720 --> 00:25:13,200 against human lipoproteins are used to form 299 00:25:13,200 --> 00:25:17,540 antigen-antibody complexes with LDL, VLDL, and 300 00:25:17,540 --> 00:25:22,480 chylomicron. يعني جاب Antibody ضد الليبو بروتينات هذه 301 00:25:22,480 --> 00:25:28,550 الثلاثة، in a way that only فقط الـ HDL، الـ 302 00:25:28,550 --> 00:25:33,550 selectively determined، فقط الـ HDL يظلون أحرارًا، و 303 00:25:33,550 --> 00:25:39,030 أقييسهم بالطريقة العادية، عادةً بتكون enzymatic 304 00:25:39,030 --> 00:25:43,310 method، تمام؟ الـ kit تبعه، لما نرجع الجامعة، سنقرأ الـ 305 00:25:43,310 --> 00:25:46,290 kit، الـ pamphlet تبعه، ونشوف طريقة شغله. 306 00:25:51,150 --> 00:25:54,670 لـ precipitation methods، حكينا، in the plasma 307 00:25:54,670 --> 00:25:58,570 الكوليسترول، is transported by three ليبو بروتينات في 308 00:25:58,570 --> 00:26:03,890 البلازما. الكوليسترول ينقل عن طريق ثلاثة نواقل: الـ 309 00:26:03,890 --> 00:26:07,270 high-density ليبو بروتين، الـ HDL، والـ low-density 310 00:26:07,270 --> 00:26:10,510 ليبو بروتين، الـ LDL، والـ very low-density 311 00:26:10,510 --> 00:26:14,860 ليبو بروتين. قلنا أن الـ VLDL، هذا الـ Very low 312 00:26:14,860 --> 00:26:18,400 density lipoprotein، ينقل الـ Triglyceride بشكل 313 00:26:18,400 --> 00:26:24,880 أساسي، وأيضًا ينقل الكوليسترول، ولكن بنسبة قليلة. أما الـ 314 00:26:24,880 --> 00:26:32,160 HDL والـ LDL، هدول نواقل خاصة بالكوليسترول. الـ HDL 315 00:26:32,160 --> 00:26:37,380 Lipoproteins are assayed، كيف أنا ممكن، يعني، أقيس 316 00:26:37,380 --> 00:26:42,600 الكوليسترول اللي يحمله الـ HDL، هذا الناقل الـ High 317 00:26:42,600 --> 00:26:47,620 Density Lipoprotein، عن طريق أني أُرسِب النواقل 318 00:26:47,620 --> 00:26:53,260 الأخرى، أُرسِب الـ LDL والـ VLDL في القاع، ومَن يبقى؟ 319 00:26:53,260 --> 00:26:57,460 الـ supernatant. في الـ supernatant، يبقى الـ HDL. 320 00:26:58,780 --> 00:27:02,700 الترسيب يكون بواسطة مادة اسمها الـ Polyethylene 321 00:27:02,700 --> 00:27:07,380 Glycol. هذه مادة تكون موجودة في الـ Reagent تبع الـ 322 00:27:07,380 --> 00:27:11,540 kit تبع فحص الـ HDL. لما أضيف الـ Reagent على 323 00:27:11,540 --> 00:27:14,840 السيرم، الـ Reagent فيه مادة الـ Polyethylene 324 00:27:14,840 --> 00:27:19,280 Glycol، اللي تُرسِب الـ LDL والـ VLDL، و 325 00:27:19,280 --> 00:27:23,610 الـ كايلومايكرون. فقط سيبقى في الـ supernatant، الـ 326 00:27:23,610 --> 00:27:29,650 HDL، نأخذه، ونحسب تركيز الكوليسترول اللي يكون 327 00:27:29,650 --> 00:27:34,910 داخل الـ HDL. HDL is left in the supernatant 328 00:27:34,910 --> 00:27:39,170 solution for cholesterol quantitation، عشان نقيس 329 00:27:39,170 --> 00:27:46,200 تركيز الكوليسترول اللي داخله. وهذا فحص الـ HDL-cholesterol. 330 00:27:46,200 --> 00:27:51,640 HDL-cholesterol، يعني حساب الكوليسترول الموجود، ومحمول 331 00:27:51,640 --> 00:28:00,180 على الليبو بروتين HDL. low density lipoprotein، الـ 332 00:28:00,180 --> 00:28:07,280 LDL، الناقل الآخر. هل جئنا يا جماعة، الـ LDL، برضه له 333 00:28:07,280 --> 00:28:12,600 كيت خاص به، عشان من خلال هذا الـ kit، أقيس تركيز 334 00:28:12,600 --> 00:28:17,180 الكوليسترول الموجود في هذا الناقل، في الـ LDL، 335 00:28:17,180 --> 00:28:23,130 لكن له طريقة سهلة، ممكن من خلال معادلة اسمها 336 00:28:23,130 --> 00:28:28,230 Fredwald equation، أطبقها، وبالتالي من خلالها أقدر 337 00:28:28,230 --> 00:28:32,570 أعرف تركيز الكوليسترول الموجود، واللي محمول 338 00:28:32,570 --> 00:28:38,710 داخل الـ LDL. الـ LDL-cholesterol، تركيز الكوليسترول 339 00:28:38,710 --> 00:28:45,310 اللي محمول بواسطة الـ LDL، إيش بده يساوي؟ بده يساوي 340 00:28:45,310 --> 00:28:51,050 الـ Total Cholesterol، أي تركيز الكوليسترول الكامل 341 00:28:51,050 --> 00:28:56,850 اللي حسبناه في البلازما، ناقص الـ HDL-cholesterol، 342 00:28:56,850 --> 00:29:03,610 يعني ناقص الكوليسترول الموجود، ومحمول داخل الـ 343 00:29:03,610 --> 00:29:08,370 HDL، ما هذا برضه احنا جبناه وحسبناه بطريقة الـ kit، 344 00:29:08,370 --> 00:29:13,910 و Total Cholesterol حسبناه. حكيت لكم الطريقة الـ 345 00:29:13,910 --> 00:29:19,430 procedure تبعته، ناقص لـ triglyceride، تركيز لـ 346 00:29:19,430 --> 00:29:24,850 triglyceride على 2.2. تقسيم نتيجة triglyceride 347 00:29:24,850 --> 00:29:33,020 على 2.2، والنتيجة اللي تطلع هو تركيز الكوليسترول 348 00:29:33,020 --> 00:29:40,480 اللي موجود داخل الـ LDL، والوحدة تكون بالملي مول 349 00:29:40,480 --> 00:29:47,670 per لتر. لكن يا جماعة، لو قسمت لـ Triglyceride على 350 00:29:47,670 --> 00:29:54,390 الرقم 5، تمام؟ النتيجة ستطلع بالـ milligram per 351 00:29:54,390 --> 00:30:01,820 deciliter. ويُقال لي كمان شغلة، لـ Triglyceride، 352 00:30:01,820 --> 00:30:08,000 تركيز الدهون الثلاثية، لو قسمتُه على خمسة، سيعطيني 353 00:30:08,000 --> 00:30:13,520 الـ VLDL-cholesterol، كمية الكوليسترول اللي موجودة 354 00:30:13,520 --> 00:30:17,940 داخل الـ VLDL، اللي يحملها الـ Very Low Density 355 00:30:17,940 --> 00:30:22,120 Lipo Protein. إذًا، معليش، فلنُعيد الـ slide كمان 356 00:30:22,120 --> 00:30:27,530 مرة. لو بدي أحسب الكوليسترول، تركيزه اللي موجود على 357 00:30:27,530 --> 00:30:32,470 ناقل الـ LDL، داخل الـ LDL، سيساوي الـ Total 358 00:30:32,470 --> 00:30:36,550 Cholesterol اللي حسبناه في الـ Slides الأولى، فحص 359 00:30:36,550 --> 00:30:40,070 الكوليسترول، فحص الكوليسترول في السيرم أو البلازما، 360 00:30:40,070 --> 00:30:46,040 كسلسلة، تسجل نتيجته، ناقص HDL-cholesterol، تركيز 361 00:30:46,040 --> 00:30:50,460 الكوليسترول اللي جوه الـ HDL. هذا حسبناه بطريقة 362 00:30:50,460 --> 00:30:54,120 الـ precipitation، وقلنا أن الـ procedure بتاعة الـ 363 00:30:54,120 --> 00:31:00,380 method، لما نرجع الجامعة، سنتعلّمه، ناقص لـ 364 00:31:00,380 --> 00:31:05,960 Triglyceride، حسبنا تركيزه، على 2.2، فستطلع النتيجة 365 00:31:05,960 --> 00:31:10,680 بالـ millimole per liter، لكن لو بدي النتيجة 366 00:31:10,680 --> 00:31:15,060 بالـ milligram per deciliter، وهي الوحدة الأكثر شيوعًا، 367 00:31:15,060 --> 00:31:20,540 أقسم لـ Triglyceride، بدل ما هي على 2.2، أقسمها على 5. 368 00:31:21,360 --> 00:31:25,940 وقلنا هذه معادلة، لو جئتُ بتركيز لـ Triglyceride، 369 00:31:25,940 --> 00:31:32,080 وقسمته على خمسة، سيظهر لي تركيز الكوليسترول اللي 370 00:31:32,080 --> 00:31:38,940 مُحمَل جوه الـ VLDL، تمام؟ إذن، Where all 371 00:31:38,940 --> 00:31:42,180 concentrations are given in millimoles per liter. 372 00:31:42,180 --> 00:31:47,420 المعادلة الزرقاء، لو كل الوحدات كانت، يعني، لما أقسمها 373 00:31:47,420 --> 00:31:51,840 2.2 لـ triglyceride، الوحدة ستطلع بالـ millimoles per 374 00:31:51,840 --> 00:31:58,250 liter. إذا كتبت تركيز الكوليسترول بالملي جرام بار دي 375 00:31:58,250 --> 00:32:02,230 سيلتر، لو أنا بدي المعادلة بالملي جرام بار دي سيلتر، 376 00:32:02,230 --> 00:32:05,890 والنتيجة تركيز الكوليسترول بالملي جرام بار دي 377 00:32:05,890 --> 00:32:11,130 سيلتر، بدك تقسم لـ Triglyceride على خمسة بدل من 2 378 00:32:11,130 --> 00:32:17,390 .2. The Quotient Triglyceride على خمسة، لو قسمتُ لـ 379 00:32:17,390 --> 00:32:22,890 Triglyceride على خمسة، is used and estimate. هيك أنا 380 00:32:22,890 --> 00:32:29,750 أقدر أعرف تركيز الكوليسترول اللي محمول بالـ VLDL. 381 00:32:31,340 --> 00:32:35,880 يقول لي، الجملة الأخيرة، The virtually all of the plasma 382 00:32:35,880 --> 00:32:41,980 triglyceride is carried on VLDL. كل triglyceride 383 00:32:41,980 --> 00:32:46,080 اللي موجودة في البلازما، واللي مصدرها من الكبد، 384 00:32:46,080 --> 00:32:52,350 صُنعت في الكبد، تُحمل عن طريق الـ VLDL. And second that 385 00:32:52,350 --> 00:32:56,670 the triglyceride cholesterol ratio of VLDL is 386 00:32:56,670 --> 00:33:03,010 constant at about 5.1. يقول لي، يعني، الـ VLDL ينقل 387 00:33:03,010 --> 00:33:07,890 Triglyceride و Cholesterol، ولكن ينقل الـ 388 00:33:07,890 --> 00:33:12,770 Triglyceride بكميات أكبر من الكوليسترول، يعني حوالي 389 00:33:12,770 --> 00:33:17,410 ينقل خمسة إلى واحد، خمسة أجزاء من الـ Triglyceride 390 00:33:17,410 --> 00 445 00:38:00,130 --> 00:38:05,550 بقيس تركيز الكوليسترول الموجودة في النواقل 446 00:38:05,550 --> 00:38:07,570 تمام؟ يعطيكم العافية