Electrochemical determination of activity of acetylcholinesterase immobilized on magnetic particles
Acetylcholinesterasa (AChE) je enzym ukoncujici prenos vzruchu v cholinergnim systemu. Aktivita enzymu se bezne vysetruje Ellmanovou metodou, ktera ma ovsem nedostatky jako je nestabilita pouzitych reagencii. Dalsi nevyhodou je neschopnost vyuzit enzym znovu. Proto jsme vyvinuli proces vyuzivajici EDC pro imobilizaci AChE na povrch magnetickych castic, ktere nabizeji moznost separovat enzym a znovu jej vyuzit. Pro stanoveni enzyove aktivity jsme optimalizovali metodu square wave voltametrie za pouziti tistenych elektrod modifikovanych Pruskou modri. Pro testovany inhibitor AChE, takrin, jsme ziskali detekcni limit 8,1 mM. V porovnani se standardni Ellmanovou metodou, imobilizovany enzym ma limitovanou citlivost k organickym rozpoustedlum.