Neuroprotection Non cellulaire Autonome Par OTX2 Dans La Retine.
Les homeoproteines sont des facteurs de transcription contenant un homeodomaine caracteristique et jouent un role essentiel dans la mise en place du schema corporel d'un organisme. OTX2 est l'une de ces homeoproteines. Au meme titre que les autres homeoproteines, en plus de son activite cellulaire autonome, OTX2 peut transferer entre les cellules et exercer un role non cellulaire autonome. De precedentes etudes ont demontre qu'OTX2 avait un effet neuroprotecteur sur les cellules retiniennes adultes. OTX2 favorise la survie des cellules ganglionnaire retinienne (CGR) adultes in vitro et les protege egalement in vivo contre la toxicite du N Methyl d aspartate (NMDA) dans un modele adulte du glaucome. De plus, lorsqu'OTX2 est inactive de maniere conditionnelle dans les cellules de l'epithelium pigmentaire retinien (EPR) cela provoque la degenerescence des photorecepteurs (PRs) Son expression dans les cellules de l'EPR est suffisante pour la survie des PRs, ce qui montre qu'OTX2 dans les cellules de l'EPR est necessaire a la survie des PRs. Cependant, on ne sait pas si OTX2 provenant de l'EPR a un effet protecteur sur les PRs grace a son action non cellulaire autonome. L'objectif de cette these est de caracteriser l'activite non cellulaire autonome d'OTX2 dans la retine et son effet sur la fonction visuelle et survie des PRs. Dans la premiere partie, nous avons bloque le transfert d'OTX2 dans la retine et teste les fonctions visuelles grace a l'utilisation de souris PVCre::scFvOtx2 dans lesquelle les cellules exprimant la parvalbumine secretent un anticorps simple chaine dirige contre OTX2 (OTX2scFv) L'OTX2scFv secrete bloque le transfert d'OTX2 dans la retine ce qui n'a aucun effet sur la structure et l'anatomie de la retine. Cependant, les souris PVCre::scFvOtx2 ont une acuite visuelle reduite et une alteration de la physiologie de la retine interne. Ceci demontre une activite non cellulaire autonome d'OTX2 sur la fonction de la retine interne. Dans la deuxieme partie, nous avons recherche si OTX2 a un effet neuroprotecteur sur les PRs. Nous avons demontre qu'OTX2 est present dans la matrice inter photoreceptrice (MIP) de souris WT ou se trouvent les segments externes des PRs. Nous avons egalement constate qu'OTX2 exogene est capable de se lier aux glycosaminoglycanes (GAGs) de la MIP sur des coupes de retines congelees. Nous avons egalement observe que, dans des retines ex vivo, OTX2 exogene est capable de moduler les genes de la voie des especes reactives de l'oxygene (ERO) mitochondriales afin de proteger les cellules de la retine contre le stress oxydatif. Ce travail demontre que l'effet non cellulaire autonome d'OTX2 dans la retine provoque une alteration des fonctions des cellules de la retine interne ce qui cause une diminution de l'acuite visuelle. OTX2 se lie aux segments externes et altere l'expression des genes impliques dans la voie des ERO dans la retine. Tout cela contribue a fournir un effet neuroprotecteur aux PRs.