Estudio de la inmuno patogenia producida por leishmania infantum en el aparato reproductor masculino y musculo temporal en modelo canino. Valoracion de la proteina ngal como nuevo biomarcador precoz de dano renal e inflamacion
La leishmaniosis canina, producida por el protozoo Leishmania infantum es una enfermedad con gran potencial zoonotico que se encuentra ampliamente distribuida por la cuenca Mediterranea y el continente americano. Se trata de una enfermedad sistemica o visceral, lo que significa que puede afectar a numerosos sistemas u organos, mostrando un gran polimorfismo clinico. El desarrollo de la clinica observada principalmente se produce por dos mecanismos patogenicos. En primer lugar por una inflamacion donde se multiplica el parasito que se caracteriza por la presencia de linfocitos, celulas plasmaticas y macrofagos, dando lugar a las lesiones clinicas en piel, higado intestino y mucosas. Y, en segundo lugar, las lesiones pueden ser debidas al deposito de inmunocomplejos, dando lugar a signos como uveitis, poliartritis, vasculitis y enfermedad renal, de vital importancia esta ultima, para la supervivencia del animal. Debido a esta expresion multisistemica de la infeccion, y teniendo en cuenta los escasos estudios realizados en organos del sistema musculoesqueletico y reproductivo, en el presente trabajo se planteo un estudio en profundidad de los mismos con el fin de contribuir al conocimiento de su patogenia. Para ello, se realizo inicialmente una infeccion experimental con Leishmania infantum en perros y a continuacion se procedio a confirmar los resultados de la misma mediante el diagnostico clinico, serologico y molecular en todos los animales. Una vez obtenidos estos datos y confirmando la infeccion, se pusieron a punto tecnicas de inmunohistoquimica para la deteccion de celulas relacionadas con la respuesta inflamatoria, tales como linfocitos y macrofagos, asi como la presencia de inmunoglobulinas. Asimismo, se pusieron a punto las tecnicas para la deteccion del parasito en los tejidos mediante inmunohistoquimica y tecnicas moleculares. Posteriormente, se relacionaron las lesiones con la presencia o ausencia del parasito asi como con las caracteristicas clinicas y serologicas, resultado de la infeccion. Otro de los objetivos de esta tesis fue el estudio de un metodo alternativo de diagnostico del fallo renal, debido a la baja especificidad de los parametros bioquimicos para valorar la proteinuria renal en estados leves. Actualmente, se considera el fallo renal como el signo de peor pronostico y principal causa de muerte del animal, generalmente por el deposito de inmunocomplejos y un diagnostico precoz es indicado como factor fundamental para un tratamiento efectivo. Para este objetivo se considero el estudio de la proteina NGAL en orina como biomarcador debido a su creciente uso como marcador de fallo renal. Ademas, este marcador lo es de procesos inflamatorios y en el presente trabajo tambien se trato de relacionar con las lesiones observadas en reproductor y muscular. Los resultados del estudio de NGAL se valoraron en conjuncion con las lesiones observadas a nivel renal, especialmente aquellas relacionadas con los glomerulos y los tubulos que podrian sugerir el mecanismo patogenico, y porque, ademas, la histopatologia es actualmente la tecnica de referencia para el estudio del fallo renal. Estos resultados se compararon con los valores de UPC y creatinina, los cuales son de uso rutinario en el estudio de fallo renal. Los resultados obtenidos del primer estudio han demostrado que las lesiones musculares y reproductivas son frecuentes en animales infectados por Leishmania infantum y que frecuentemente estas aparecen en ausencia del parasito, especialmente en testiculo, lo cual sugiere podrian ser debidas, en parte, a disfunciones inmunitarias. Por otra parte, el estudio del NGAL ha demostrado que es capaz de detectar proteinuria en estados leves de fallo renal correlacionandose de forma positiva, ademas, con el dano glomerular valorado mediante histologia, lo cual abre la puerta a nuevas opciones clinicas para diagnosticar de forma temprana la enfermedad renal producida por Leishmania infantum.