RhoA/ROK signal pathway is required for LPS-induced cytokine secretion by human peripheral monocytes
目的 探讨RhoA/ROK信号通路对人外周血单核细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等细胞因子的调控作用.方法用Percoll非连续性密度梯度离心法分离单核细胞,并用LPS诱导人外周血单核细胞活化;Pull down方法检测用RhoA活性,ROK活性用其底物MBS的磷酸化来表示,总RhoA、ROK及磷酸化MBS蛋白表达用免疫印迹法测定,用ELISA法检测细胞因子水平.结果 LPS可诱导单核细胞RhoA快速活化,并呈时间依赖性,Rho特异性抑制剂C3转化酶能显著抑制LPS诱导的人外周血单核细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等细胞因子;LPS亦可诱导单核细胞ROK活化,ROK特异性抑制剂Y27632可显著降低LPS刺激的人外周血单核细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等细胞因子.结论LPS可活化人外周单核细胞RhoA/ROK信号通路,选择性抑制RhoA和ROK活化能抑制单核细胞分泌多种细胞因子,提示RhoA/ROK信号通路可能在调控单核细胞分泌细胞因子中发挥重要作用。