The 5' translation-enhancing region of the Semliki forest virus (SFV) capsid protein gene improves antigen expression and immunogenicity of SFV replicon-based HIV Gag DNA vaccine
目的 研究塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus, SFV)衣壳蛋白5'翻译增强区对基于该病毒复制子的HIV Gag DNA疫苗抗原表达水平和免疫原性的影响. 方法将SFV衣壳蛋白(capsid, C蛋白)基因的5'端102 bp翻译增强区插入到SFV复制子DNA疫苗载体pCMV-Rep的SFV亚基因启动子下游,得到DNA疫苗载体pCMV-RepC.将删除ATG的HIV-1 gag基因插入pCMV-RepC,使gag编码区与翻译增强区融合,得到DNA疫苗质粒pCMV-RepC-gag.同时,构建携带未融合翻译增强序列的DNA疫苗质粒pCMV-Rep-gag.Western blot检测翻译增强序列对Gag表达水平的影响.用上述两种DNA疫苗分别免疫BALB/c雌性小鼠,ELISA检测Gag特异的抗体反应,ELISPOT和细胞内因子染色技术检测细胞免疫应答. 结果衣壳蛋白5'翻译增强区增强了Gag表达水平,对体液免疫应答没有显著影响,但显著增强了特异性细胞免疫应答水平.结论 SFV C蛋白翻译增强区能显著提高SFV复制子DNA疫苗的抗原表达和抗原特异性细胞免疫反应。