In het waanzinnige avontuur Night at the Museum is Larry Daley (Ben Stiller) een gescheiden vader die zijn baantjes niet langer dan een week kan vasthouden. Als hij met enige tegenzin een baan als nachtwaker in het Historisch Museum accepteert, kan hij zijn ogen niet geloven: alles in het museum komt 's nachts tot leven! Larry zal zijn best moeten doen om de samenzwering binnen het museum op te lossen om ervoor te zorgen dat de deuren niet voorgoed zullen sluiten, terwijl hij wordt opgehouden door het aapje Dexter en het rondrennende skelet T-Rex.