研究グループは、以前からたんぱく質リン酸化を大規模かつ定量的に解析するための技術開発を進めており、この研究分野をリードしてきましたが、このたび同技術を用いてmTORC1の下流で機能する分子を探索したところ、mTORC1にはFOXK1(※2)というたんぱく質を活性化する働きがあることを明らかにしました。活性化したFOXK1にはマクロファージを誘引するたんぱく質であるCCL2(※3)の産生を促す作用があることがわかりました。以前より、がんの周囲にマクロファージ(腫瘍随伴マクロファージ、TAM)(※4)が集積すると、がん免疫が抑制されてがんの進行が早まることが知られていましたが、がん細胞内のFOXK1の機能を阻害すると、CCL2の分泌が低下してTAMががんに集積せず、がんの増殖が抑制されました。研究グループは、mTORC1の活性化に起因したTAMの集積を引き起こす分子FOXK1を発見し、それががんの新たな治療標的分子になることを示しました。これまで多くのがんでなぜTAMが集積するのか、その具体的なメカニズムは謎でしたが、本研究によってmTORC1-FOXK1-CCL2経路の活性化がひとつの原因であることが明らかになりました。これらの結果は、TAMの集積をターゲットとした新たな抗がん剤創薬の可能性を示すものです。Reports」で公開されます。(参考図)mTORC1は腫瘍随伴マクロファージ浸潤を促進する研究者からひとこと:mTORC1の異常活性化とマクロファージの浸潤は、どちらも多くのがんに共通した特徴として知られていました。今回FOXK1の発見によって、二つの現象に因果関係があることが分かりました。これらの知見から、マクロファージを対象とした新たな抗がん剤開発が期待されます。研究の背景と経緯これまでに発がんに繋がる様々な遺伝子変異が知られていますが、その中にはmTORC1の異常活性化を誘導するものが多く含まれており、60%以上のがんにおいてmTORC1が異常活性化されていると言われています。mTORC1はたんぱく質リン酸化酵素であり、他の様々なたんぱく質をリン酸化することでがんを促進します。mTORC1がどのようなたんぱく質群をリン酸化しているのか、またその結果何が起こってがんが促進されているかについては大部分が謎でした。一方で、多くのがんには腫瘍随伴マクロファージ(TAM)の浸潤が観察されます(図1)。TAMは細胞傷害性T細胞を阻害することでがん免疫を抑制することが知られており、新規抗がん剤の標的として期待されています。多くのがんでTAMの浸潤が観察されるのかについては謎でした。これまで「mTORC1の機能」と「TAM浸潤の原因」の二つについての謎が残されていましたが、長い間これら二つは無関係だと考えられてきました。用いたリン酸化プロテオミクス技術を用いてデータ取得を行いました。細胞内の一万箇所以上に上るリン酸化について解析を行った結果、mTORC1によって制御されるものとして53個のリン酸化たんぱく質を同定しました(図2)。その中でも特に転写因子であるFOXK1に焦点を当てて詳細に解析を行ったところ、mTORC1の活性が上昇すると、FOXK1が活性化されることが明らかになりました。次にFOXK1によって転写が誘導される遺伝子を探索したところ、マクロファージを誘引する作用のあるCCL2の転写が、mTORC1によるFOXK1の活性化により上昇することが明らかになりました。以上の事から、mTORC1によってFOXK1が活性化し、CCL2の産生を上昇させることが明らかとなりました(図3)。mTORC1の活性化とTAMの浸潤の二つの現象は様々ながんで同時に起こることが知られています。これまでmTORC1の活性がTAMの浸潤に寄与するとは考えられていませんでした。そこでmTORC1、FOXK1、CCL2の遺伝子発現を抑制したマウスのがん細胞を作製し、各々を用いてマウスの皮下移植実験(※5)を行いました。その結果、何も抑制しないがん細胞と比べて上記3種類の細胞ではどれもTAMの浸潤量が減少し(図4)、なおかつ腫瘍重量も減少しました。ヒト大腸がん細胞株であるHCT116のFOXK1を抑制した細胞をヌードマウスの皮下に移植した実験においても、腫瘍の増殖は有意に抑制されました(図5)。mTORC1の阻害剤として抗がん剤であるラパマイシンがよく知られています。そこで、皮下にがん細胞を移植したマウスに対してラパマイシンの投与を行い、腫瘍内に浸潤したTAMの量を比較しました。その結果、ラパマイシンを投与することでTAMの浸潤量が減少し、腫瘍も縮小することが分かりました。以上の結果から、がんで高頻度に見られるmTORC1の活性化が、FOXK1の活性化を通じてTAM浸潤の原因となっていることが分かりました。本研究では、発がん初期で起こるmTORC1の活性化が原因となってその下流分子FOXK1が続いて活性化し、それがマクロファージ誘引物質CCL2を上昇させることによってTAMの浸潤が引き起こされ、その結果としてがんが進行するということを明らかにしました。「mTORC1の機能」と「TAM浸潤の原因」の因果関係をつなぐ転写因子としてFOXK1を同定しました。現在mTORC1阻害剤であるラパマイシンは既に抗がん剤として使われていますが、様々な副作用があることがわかっています。今後はFOXK1を阻害してTAM浸潤を抑制するような創薬を行うことで、より副作用を抑えつつ高い抗がん効果を持つ薬剤の開発につながることが期待されます。TAM(腫瘍随伴マクロファージ)の浸潤によるがん促進メカニズムTAM(腫瘍随伴マクロファージ)は、がんを攻撃する細胞傷害性T細胞を抑制して腫瘍免疫を回避し、がんの増殖を促進します。FOXK1はmTORC1に依存してリン酸化が変動するmTORC1の活性化を誘導した細胞や、mTORC1の阻害剤を添加した細胞のリン酸化の変化を大規模に測定しました。1万カ所以上のリン酸化の変動データの中から、mTORC1の活性化によって変動するものを探索しFOXK1を含む53種類のたんぱく質を同定しました。CCL2の発現はmTORC1-FOXK1経路の下流で制御されるFOXK1によって産生される遺伝子の転写物を探索した結果、CCL2を同定しました。CCL2の産生はmTORC1によるFOXK1のリン酸化制御に応答して変動することも分かりました。TAM浸潤はmTORC1-FOXK1-CCL2経路の阻害により抑制されるマウス肺がん細胞をマウスの皮下に移植したところ、TAMの浸潤が見られました。一方でmTORC1、FOXK1、CCL2を抑制したがんではTAMの浸潤が抑えられました。がんの組織切片の蛍光免疫染色を行った実験においても、同様の結果が得られました。FOXK1阻害はがんを抑制するヒト大腸がん細胞を左側の皮下に、FOXK1を抑制したヒト大腸がん細胞を右側の皮下に移植したところ、FOXK1を抑制したがんの大きさが有意に抑制されました。用語解説(※1)mTORC1:たんぱく質リン酸化酵素であり、他のさまざまなたんぱく質をリン酸化することで機能の制御を行います。インスリンやアミノ酸といった栄養に応答して活性化し、細胞の成長を促す機能を持ちます。多くのがん細胞では常時活性化状態にあります。(※2)FOXK1:DNAに結合し、遺伝子から転写物を産生するための機能をもつたんぱく質のひとつです。(※3)CCL2:細胞外に分泌されマクロファージに作用するたんぱく質で、これが作用することでマクロファージは誘引され集積します。(※4)腫瘍随伴マクロファージ(TAM):がん組織に浸潤しているマクロファージの総称。多くのがんにおいて浸潤が観察され、その浸潤量が多いと、予後が悪いケースが多いです。腫瘍免疫を抑制する機能がよく知られています。(※5)皮下移植実験:がん細胞をマウスの皮下に移植することで、腫瘍を形成させる実験です。1-7-1TEL:03-6870-2245E-mail:contact”AT"amed.go.jp※E-mailは上記アドレス“AT”の部分を@に変えてください。Reserved.本ウェブサイトは、提供するサービス向上のため、クッキー(Cookie)を使用しております。このバナーを閉じる、または継続して閲覧することで、クッキーの使用に同意いただいたものとさせていただきます。詳細につきましては、プライバシーポリシーをご覧ください。