Abstract本研究では、アレルギー食材の範疇にはない雑豆由来の機能性糖鎖をグリコドラッグ開発のリード化合物として利用することを目的として、(1)雑豆糖タンパク質から調製した糖ペプチドと食材ポリマーからなるネオ糖ペプチドの合成と免疫活性検定、(2)雑豆に含まれる遊離型オリゴ糖鎖およびネオ糖ペプチドのプレバイオティクス効果検定、(3)雑豆糖タンパク質に結合するO-グリカンの構造特性解析を行う。組み合わせ、比較的均一性の高い糖鎖構造を有する糖ペプチドの大量調製を行った。多く含む糖ペプチドを調製した。ペプチドは、Th1型サイトカインであるIFN-γ産生を低濃度では促進し、高濃度では抑制することが分かった。一方で、Th2型サイトカインであるIL-4とIL-10産生は、低濃度では抑制し、高濃度では低濃度に比べて促進する結果となった。糖ペプチド画分に含まれるどのような構造の糖鎖が免疫活性に関与しているかについては、今年度中に明らかにすることはできなかったが、今後とも解析を進める予定である。小豆、エンドウ、白インゲン豆由来の遊離オリゴ糖の添加によりBifidobacteriumの増殖を有意に促進することが認められた。組み合わせ、比較的均一性の高い糖鎖構造を有する糖ペプチドの大量調製を行った。多く含む糖ペプチドを調製した。ペプチドは、Th1型サイトカインであるIFN-γ産生を低濃度では促進し、高濃度では抑制することが分かった。一方で、Th2型サイトカインであるIL-4とIL-10産生は、低濃度では抑制し、高濃度では低濃度に比べて促進する結果となった。糖ペプチド画分に含まれるどのような構造の糖鎖が免疫活性に関与しているかについては、今年度中に明らかにすることはできなかったが、今後とも解析を進める予定である。小豆、エンドウ、白インゲン豆由来の遊離オリゴ糖の添加によりBifidobacteriumの増殖を有意に促進することが認められた。以上、当初の研究計画通り、雑豆糖タンパク質由来の糖ペプチド調製とその免疫活性検定、および雑豆に含まれる遊離型オリゴ糖のプレバイオティクス効果検定を行うことができた。Activity平成23年度は、雑豆由来の糖タンパク質のアクチナーゼ処理物から比較的均一性の高い糖鎖構造を有する糖ペプチドの大量調製を行った。ペプチド画分を用いて、免疫細胞の賦活化能を解析したところ、予備実験的ではあるが、Th2型サイトカインであるIL-4とIL-10産生が低濃度の糖ペプチドで抑制され、高濃度では低濃度に比べて逆に促進する結果が得られた。そこで平成24年度は、ポリグルタミン酸をキャリアーとした人工糖鎖ポリマーを作製し、ヒトT細胞の分化・生育およびT細胞のサイトカイン類(IL-4,INF-γ,TNF-α)産生に及ぼす薬理活性の検定を継続する。小豆、大納言から比較的構造の均一性が高いハイマンノース型糖ペプチドを調製し、それらをポリグルタミン酸にカップリングさせたハイマンノース型糖鎖を多価数含むネオ糖ペプチドを調製し、それを用いて抗原提示細胞の活性化能を検定する。用いての菌数変化を基にした解析を継続する。O-グリカンについての構造解析に着手する計画である。Funding消耗品費については、以下の試薬およびカラムの購入に充てる予定である。旅費については、毎年発表している国際糖質学会への参加費および航空運賃、ホテル代金に充てる予定である。