ヒト単核細胞、THP-1の選択的プロテオーム解析における前処理クロマトグラフィヒト単核細胞、THP-1の選択的プロテオーム解析のための前処理用クロマトグラフィ最近プロテオーム解析を利用して、異なる状態の細胞で発現するタンパク質を、同定及び相対定量する研究が盛んです。細胞の全タンパク質を、二次元電気泳動などで網羅的に解析すると、それは膨大な量となり長い処理時間が必要となります。イオン交換体HPLCカラム」を用いた、選択的プロテオーム解析を紹介いたします。イオン交換体HPLCカラム」に負荷します。その際、負荷された全てのタンパク質は、陽イオン交換体(−)か、陰イオン交換体(+)に吸着され、漏れがありません(クロマトグラム上で、最初に見られる非吸着分画のピークがありません)。次に、吸着分配(分離)するために、塩濃度グラジエントでタンパク質を溶出していき、フラクションを採取します。選択的に探索したいフラクションだけを、トリプシン等の消化酵素で処理し、LC/MS/MSあるいはLC/LC/MS/MSでタンパク質を同定します。よる網羅的プロテオーム解析(2003年2月掲載)」ですと、全タンパク質中で大きな割合を占めるアルブミンが、最初からトリプシン酵素で消化されペプチド断片にされてしまい、この消化された多様なアルブミン由来のペプチド断片が、一番目の強陽イオン交換体(SCX)で分離/分取した際に、ほとんど全てのフラクションに混入してきてしまい、その処理量は膨大になってしまいました。溶液で溶解します(膜タンパク質にも有用です)。cells相当)を、一晩かけ臭化シアンで消化します。Inc.)Topics>>。