});製品説明RetroNectin(リコンビナントヒトフィブロネクチンCH-296)1)は、ヒトフィブロネクチンの細胞接着ドメイン(C-domain)、ヘパリン結合ドメイン(H-domain)およびCS-1部位の3種類の機能性ドメインを含む組換えタンパク質*1である。RetroNectinはインテグリンVLA-4、VLA-5を発現している哺乳類細胞に対してレトロウイルスベクター*2を介した遺伝子導入を行う際に有用である。14)に結合することによってRetroNectin上に共配置される。これにより、局所的に両者の濃度が高められ、遺伝子導入が促進されると考えられる(図1)。レンチウイルスベクターを介した遺伝子導入を行う際にも有用です。dishにあらかじめコーティングしたものである。コーティング操作が不要となり、一定の遺伝子導入効率を得ることができる。virus)法により遺伝子を導入する。細胞とウイルスを混合してRetroNectinコートプレート上で感染させる方法である。簡便に短時間でRetroNectinを用いたウイルスベクターによる遺伝子導入を行うことができる。(図2)図2.Supernatant法(2)RBV法(改良法)組換えレトロウイルスを先にRetroNectinコートプレートに吸着させ、感染阻害物質を含むレトロウイルス液を除いた後に細胞を加える方法である。RBV法はレトロウイルスベクターを介した遺伝子導入を行う際に、プロデューサー細胞から分泌されるプロテオグリカンやレトロウイルス包膜タンパク質などの物質が存在すると導入効率に影響を与えるため、組換えレトロウイルスを感染させるときにはこれらの阻害物質を除いておくことが重要であることから改良された方法である。Supernatant法で十分な遺伝子導入効率が得られない場合、RBV法を用いることを推奨する。高濃度にウイルス液を使用する場合、より高い効果を発揮する。培養バッグを用いたラージスケールのウイルス感染方法(RBV-LTS法)の詳細はこちら。RetroNectinはTリンパ球の培養を増強する効果も有する。T細胞の拡大培養は、通常、抗CD3抗体刺激によりインターロイキン-2(IL-2)の存在下で行う。このときRetroNectinを共存させることで拡大培養効率が格段に増大する(実験例参照)。得られたT細胞集団中には未分化な細胞であるナイーブT細胞が多く含まれる。ナイーブT細胞は、抗原提示を受け細胞傷害性T細胞に分化する能力をもつ。蛍光タンパク質発現レトロウイルスベクターをRetroNectin法、Polybrene法、Protamine法を用いて各細胞に遺伝子導入した。蛍光タンパク質発現レンチウイルスベクターをSupernatant法(静置感染/遠心感染)、RBV-Spin法、Polybrene法を用いて各細胞に遺伝子導入した。(アミノ酸配列より)純度HPLCにて純度90%以上。本製品の凍結融解は10回程度まで可能である。本製品の撹拌はゆるやかに行ってください。ボルテックスによる撹拌は避けてください。μg/cm2となるようプレートにコーティングする。μg/ml)を加えればよい。protein)で2~12ディッシュ分をコートすることができる。ガイドタカラバイオで展開している幹細胞研究のための試薬・受託サービス選択ガイドの他、関連情報をまとめています。本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。して使用しないでください。ための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。