Reagentは、広範な哺乳類細胞へさまざまなタイプのRNAを高効率に導入可能なトランスフェクション試薬である。Reagentは、通常のトランスフェクション試薬で危惧される細胞毒性が低減されており、極めて低い細胞ダメージで哺乳類細胞へのトランスフェクションが可能である。mRNAのトランスフェクションは、DNAトランスフェクションの際に懸念されるゲノムへの挿入変異がなく、迅速な導入遺伝子の発現が可能である。本製品はCRISPR/Cas9によるゲノム編集に必要なsgRNA導入を高効率に行うことが可能である。631317、631318)と組み合わせてDNAとRNAのコトランスフェクションを行うことも可能である。632635)を用いてsgRNAを合成した(図A)。pmolを1回、あるいは2回トランスフェクションした。トランスフェクションから7日後、FITC標識抗CD81抗体を用いて細胞を免疫染色し、フローサイトメトリー解析を行って、抗CD81抗体が結合しなかった細胞の割合を示した。コントロールとして、トランスフェクションも抗体染色も行わない細胞(図B左上)、抗体染色のみを行った細胞(図B右上)についてもフローサイトメトリー解析を行った。sgRNAのトランスフェクションを1回行った細胞(図B左下)、2回行った細胞(図B右下)とも、抗CD81抗体に結合しない細胞の割合が増加し、CRISPR/Cas9によるCD81のノックアウトが機能していることが示された。632635)を用いてsgRNAを合成した(図A)。ng)の混合物をそれぞれトランスフェクションした。トランスフェクションから48時間後、ルシフェラーゼアッセイにより導入遺伝子の活性を測定した。その結果、sgRNAを導入した全てのサンプルにつきルシフェラーゼ活性の高効率なノックアウトが確認できた。Reagentを用いてトランスフェクションした。20時間後、フローサイトメトリー解析によって検出を行い、GFP発現細胞の割合(%)と平均蛍光強度(MFI)を決定した。Reagentを用いてトランスフェクションした。用いて細胞の画像を取得した。HeLa細胞の画像は20倍の倍率で撮影し、NHDF細胞とMSCs細胞は40倍で撮影した。Reagentを用いてトランスフェクションした。μgのpCMV-Lucをトランスフェクションし、48時間後、ルシフェラーゼアッセイを行った。コントロールサンプルとして、細胞にpCMV-Lucのみをトランスフェクションしたサンプルを用意した。siRNAを添加した全ての細胞でルシフェラーゼ活性が劇的に減少した。保存-20°Cいったん融解したものは4°C保存し、12ヵ月以内にご使用ください。本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。して使用しないでください。ための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。