培養一次または確立された細胞株は、動物モデルを使用する前に初期のアプローチとして、基本的な生物学的および機械的な質問に対処するために一般的に使用される。原子吸光度分光法を有するその他の微量元素の研究のために全細胞抽出物を調製し、細胞内フラクションを準備する方法を説明する。Abstract遷移金属は、生物にとって不可欠な微量栄養素ですが、タンパク質中の生理的金属と競合し、酸化還元ストレスを発生させることにより、高濃度の細胞に対して毒性を及ぼします。金属の枯渇または蓄積につながる病的状態は、異なるヒト疾患の因果作用物質である。enteropathica、ウィルソンとメンケスの病気が含まれています。したがって、これらの要素がどのように正常な生理的機能に寄与するかを探究する研究を容易にするためには、生体試料中の遷移金属のレベルと輸送を高感度かつ正確に測定できることが重要である。多くの哺乳動物タンパク質における補因子であり、シグナル伝達事象に関与し、そして細胞における二次的なメッセンジャーである。有毒であり、他の金属の吸収を阻害することができますが、赤字では、潜在的に致命的な条件の様々につながることができます。その他の遷移金属濃度を決定するための非常に高感度かつ有効の方法を提供します。使用して微粒化を行います。ビール-ランバート法の線形性の範囲内では、金属による光の吸光度は、検体の濃度に正比例する。線蛍光よりも容易にアクセスできます。分析のための異なる培養細胞株の系統的サンプル調製物が記載されている。この微量元素の変動は、原則の証明として、細胞溶解物および増殖した細胞の細胞内フラクションの両方において比較された。移行および重金属は、食品および汚染物質の両方の栄養素の環境で自然に見出されます。すべての生物は、これらの微量栄養素の異なる量を必要とします。高レベルへの暴露は、生物に有害である。金属の捕捉は主に食事を介して行いますが、金属はまた、皮膚1、2、3、4、5を介して吸入または吸収することができます。大気中の粒子の金属の存在が増加していることに注意することが重要であり、主に健康上のリスクに関連付けられています。土壌6,7で検出されています。競合する可能性があり、生物学的プロセスのための基礎的な酵素を不活化することによって毒性作用を誘発する。以上でのタンパク質のフォールディングおよび触媒活性に必要な基礎的な補因子となる。10;その結果、多様な生理機能8,11に必須である。多くの微量元素と同様に、これらの金属の間には繊細なバランスがあり、正常な生理的機能を促進し、毒性を引き起こします。13、14、15、16、17、18。細胞毒性であり、銅19、20、21などの他の必須金属の吸収を損なう。一部の金属は、有害な反応に関与する可能性があります。生成は、鉄硫黄クラスタータンパク質のアセンブリを妨害し、脂質代謝を変化させる22、23、24。この損傷を防ぐために、細胞は金属結合のシャペロンとトランスポーターを利用して毒性作用を防ぎます。特定のセルタイプが適切なレベルの金属を維持できるように、金属の恒常性を厳密に制御する必要があります。このため、生体試料中の微量金属を正確に測定するための技術を進歩させることが重要である。発達し成熟した生物においては、細胞レベルでの微量元素のための生物学的必要性の相違、異なる発達段階における、および正常および病的状態に存在する。したがって、組織と全身の金属レベルの正確な決定は、有機体金属の恒常性を理解する必要があります。少量のサンプル容量に使用される高感度な技術で、生物学および環境試料中に存在する遷移および重金属を測定するのに理想的です。微細な輸送特性を研究するために適切であることが示されている。モデルシステム29としての卵母細胞。サンプル内の微粒化された要素は対象の金属を含む光源から放出される放射線の波長を吸収し、吸収された輻射は要素の濃度に比例します。元素電子励起は、各化学元素に固有の量子化されたプロセスで、紫外線または可視放射の吸収によって起こります。試料によって吸収される光子の量を決定し、これは放射線吸収の数に比例するグラファイトチューブで微粒化された元素。この技術の選択性は、各要素が特定の吸収/発光スペクトル線を有する原子の電子構造に依存する。あり、他の金属と正確に区別することができます。定量化するために使用することができます。吸収した波長の変化は統合され、特定の、孤立した波長のエネルギー吸収のピークとして示される。分析に適用することは、いくつかの合併症も示します。サンプルの微粒化および/または均質でない濃度の変動は、金属測定に影響を与える可能性があります。3つの基本的なステップで構成されています。desolvation、です。温度に達した後に残します。加熱することによって気化させ、気体となる。範囲の温度で微粒化されます。これは、することができる濃度の作業範囲である装置によって決定される。決定することによって、低濃度および方法のダイナミックレンジを慎重に決定することを必要とする。3倍の標準偏差として定義されます。ビール・ランバート法を使用して検出することができる最大濃度です。我々は、試料調製時の金属損失を防止するために、異なる細胞系に核プロトコルの迅速な単離を適応させた。これらの細胞は、異なる系統から確立され、インビトロでの金属レベルの系統特異的変動を調査するための良好なモデルである。マウスの衛星細胞から派生した一次芽細胞は、骨格筋の分化を調査するのに適したインビトロモデルを構成しています。これらの細胞の増殖は、高血清条件下で培養すると高速である。筋肉系統への分化は、その後、低血清条件30によって誘発される。確立された細胞株は、マウスニューラルクレストに由来した。これらの細胞は神経およびアメーバ様幹細胞の形態を示す。ニューロンのいくつかの特性を示す。神経毒性31、32、33を調査するために使用されます。マウス前脂肪細胞を樹立した細胞株は、脂肪生成に関連する代謝および生理的変化を調査するために一般的に用いられる。これらの細胞は、線維芽細胞様の形態を提示するが、分化のために一度刺激したが、脂質合成およびトリグリセリド蓄積に関連する酵素活性化を提示する。これは、細胞質脂質液滴34、35を産生するための形態学的変化として観察することができる。研究に広く使用されてきました。上皮細胞株は、広く上皮表現型の確立に関連する特性および分子イベントを調査するために使用されています。