News」をお届けします。Kitを販売しています。レトロウイルスベクター作製受託サービスでは、これらのプラスミドDNAおよびシステムを用いて、目的遺伝子を搭載したレトロウイルスベクターを作製いたします。レトロウイルスベクターを用いた遺伝子導入法は、一般的に以下の利点を持ち、動物細胞への効果的な遺伝子導入法として、多くの遺伝子導入実験に利用されています。安定な遺伝子導入細胞株を得ることができる。ヒト、マウスおよびラットを含む多くの動物細胞に遺伝子導入できる。増殖細胞であれば、血球系を含む多くの細胞株に遺伝子導入できる。初代培養細胞にも効率よく遺伝子導入ができる。本受託サービスでは、レトロウイルスの構造タンパク質であるgag-pol、envを発現するプラスミドと、組換えレトロウイルスゲノムmRNAを発現するプラスミドを宿主細胞に同時トランスフェクションすることによって一過性にレトロウイルスベクターを取得します。gag-pol発現プラスミド、env発現プラスミド、およびレトロウイルスベクタープラスミドを同時トランスフェクションすることによって、細胞内で発現したgag-polタンパク質、envタンパク質、および組換えレトロウイルスゲノムRNAがアセンブルして組換えレトロウイルス粒子が出芽します。エンベロープ遺伝子はマウス、ラットに感染可能なecotropic-env、あるいはヒトを含む多くの哺乳動物細胞に感染可能なamphotropic-envから選択していただきます。トランスフェクションから48時間後の培養上清をフィルターろ過してレトロウイルスベクター液とし、小分け分注して納品いたします。※タカラバイオ取扱いベクター以外を使用する場合は、別途ご相談ください。※標的とする細胞に適したウイルスエンベロープを選んでいただきます。マウス、ラット細胞への感染にはエコトロピックウイルスを、ヒトを含む多種の哺乳類細胞への感染にはアンフォトロピックウイルスを選択できます。※ウイルスベクターの力価は、測定方法により異なります。ウイルスベクター液の組成、測定に使用する細胞や血清などの影響により、同じ方法であっても施設によって異なることがあります。vectorを使用します。※ネオマイシン耐性コロニー検出法の標的細胞には、マウスNIH/3T3細胞またはヒトHT1080細胞を使用いたします。培養のスケールアップや精製方法など、ご相談により作業内容の変更が可能です。目的遺伝子2種としてプラスミドDNA調製が2件発生する場合、調製費用が2件になります。導入をご要望の際は、ウイルス感染否定試験(HIV、HCV、HBV陰性)の結果をご提示下さい。ウイルスベクター作製受託依頼書(Excel)以下の手続きの後に実際のサービスを開始します。挿入遺伝子に関する情報を開示ください。>タカラバイオの遺伝子組換え実験安全委員会への申請に必要な情報(遺伝子産物の性質、塩基配列等)をお知らせいただきます。電子ファイルに必要事項をご記載後、メールでお送りください。フラッシュメモリやCD-R等の媒体での郵送も受け付けます。配列情報の郵送、メール送信の際には情報漏洩に充分ご注意ください。(弊社では責任を負いかねます)情報の扱いには十分注意を払っております。情報開示にあたり、秘密保持契約を必要とされる場合はご用意いたします。タカラバイオの安全委員会において、開示いただいた遺伝子情報をもとに、必要とされる物理的封じ込めレベルを判断し、折り返しご連絡させていただきます。P1レベルで扱うことができない遺伝子の場合、サービスをお断りすることになります。μg以上ご留意事項レトロウイルスベクターの取り扱いは、挿入されている遺伝子の全塩基配列が既知で、かつ、その遺伝子が毒性あるいは病原性等を示さず安全であると判断できる場合に限りP2レベルで扱うことができます。本サービスでは、P2レベルで扱うことのできる場合のみ、ご依頼をお受けしています。お客様よりご提供いただいたサンプル・情報および納品物の複製物は、別途期限を定めている場合を除き、業務終了後3ヵ月を経過すると順次廃棄いたします。本受託サービスは、個別に合意した場合を除き、すべて研究目的として作業を行います。納品物を試験研究目的以外へご使用される場合、弊社では納品物に起因する損失・損害等については一切の責任を負いかねます。納品物によっては、その構成物(例えば、ベクター、蛍光色素など)の使用に制限がある場合がありますのでご注意ください。納品物に起因して、直接的もしくは間接的に発生したお客様の損害については、明らかに弊社の責に帰すべき事由による場合を除いて、弊社は一切その責任を負いません。ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。