チューブをパラフィルムでシールして数分間よく混ぜる。rpm、15分間スピンダウンする。上清を捨て、キャップを開けたまま室温または37°Cでペレットを乾燥させる。乾燥させすぎないように注意する。μLのTEバッファーで溶解し、滅菌済みのマイクロチューブに移し、4°Cで保存する。アガロースゲル電気泳動などでDNAを確認してRNAの混入がないことを確かめる。DNAの濃度と純度は分光光度計で測定することができるフェノールクロロホルム抽出―DNA溶液中の酵素を除去するDNAのクローニングでは様々な反応条件のプロセスがあるため、バッファーの交換や、酵素を除去する作業が必要になります。この目的で、簡便で経済的なフェノールクロロホルム抽出はよく行われますので、手順を確認しておきましょう。安全性データシート(SDS)をよく確認して使用しましょう。μLの平衡化中性フェノールを添加する。ふたをしっかり閉めて、サンプルが乳液状になるまでボルテックスする。ここでタンパク質は変性してフェノール層に移動し始め、DNAは水層に留まる。クロロホルムを添加し、ふたをしっかり閉めてボルテックスする。ここでDNAとタンパク質は完全に分離する。rpm)で5分間遠心する。mLマイクロチューブに移し入れる。ふたをしっかり閉めてボルテックスし、最大速度で2分間遠心する。過塩素酸ナトリウム溶液を添加して混ぜる。イソプロパノールを加え、ふたをしっかり閉めてボルテックスし、最大速度で15分間遠心する。上清を注意深く捨て、再び、最大速度で1分間遠心する。ペレットを崩さないよう注意しながら細いピペットまたはシリンジなどで残りの上清を除去する。ペレットの反対側から上清を吸い取ると比較的容易になる。チューブの壁面にも溶液が残らないよう気をつける。ボルテックスの合間に氷上に置くようにし、ペレットが完全に溶けるまでボルテックスを断続的に行う。以上、DNAサンプルのクリーンアップでよく使われる実験方法を紹介しました。手順が多いので、大事なサンプルを途中で減らしてしまわないように集中して行いましょう。フェノールなど人体に害のある薬品の取り扱いには充分に気をつけましょう。Kitを使うこともできます。人体に有害なフェノールを用いないため安全性が高く、多くの人に利用されています。実験の状況に応じて、ぜひ使ってみてくださいね。酵素阻害剤は酵素による生化学的な反応を阻害するため、研究や医療な...2018年7月18日CRISPR-Cas9とは?原理をわかり...ゲノム編集ツールの中でも、世界中の研究室で使われているのがCRISPR-Cas9です。下記フォームでは、M-hub(エムハブ)に対してのご意見、今後読んでみたい記事等のご要望を受け付けています。メルクの各種キャンペーン、製品サポート、ご注文等に関するお問い合わせは下記リンク先にてお願いします。アルドリッチジャパン合同会社はメルクのグループ会社です。