(約9km)1970年大阪万博の会場である万博記念公園内を約1周半駆け抜けるコースです。(約5km)万博記念公園を抜け、吹田市のけやき通り、さくら通りへ。緑豊かな自然に囲まれた約5kmのコースです。中継所の千里南公園はテレビ中継解説の高橋尚子さんが学生時代練習されていた場所です。(約12km)吹田市内から大阪市内へ入る最長区間の3区。3区はコースの大半が、普段は人の通ることができない新御堂筋の本線(南行車線)になっています。新御堂筋をランナーが走るのは史上初となります。大阪の名所を繋ぐコースになります。(約10.5km)レースは後半戦へ。銀杏並木とビル群に囲まれた大阪のメインストリート、御堂筋を南下し、大阪の観光名所・道頓堀で折り返します。(約5km)国道2号線から、北港通へ入ると中継所まで直線が続くコースです。最短区間を駆け抜ける各チームのスピードランナーに注目です。