大腸菌でタンパク質を発現させる際、タンパク質の正しいフォールディングが起こらず、封入体(インクルージョンボディー)になったり、活性のないタンパク質になったりする問題が生じます。これは、大腸菌の菌体内が動物細胞などと大きく異なり、極めて還元的な環境となっていることなどが要因です。上記の問題を解決し、大腸菌で、タンパク質を正しくフォールディングさせ、可溶性を高めるためには主に3つの方法があります。大腸菌内で可溶性の高いタンパク質と融合タンパク質として発現させる。(NusAなど)還元環境を改善させるタンパク質と融合させて発現させる。(Trx、GSTなど)分泌させて、中性環境に近いペリプラズム(大腸菌内外膜間の空間)に発現させる。(シグナル配列、Dsbなど)これらを実現するpETベクターには以下の種類があります。pET-27b(+)今回は、それぞれの発現ベクターについて、その特徴と効果を紹介します。pET-50b(+)ポリペプチド配列を495アミノ酸のNusA(Nus•Tag)タンパク質と融合させ、高レベルな発現を行えるように設計された製品です。