GVHDにおいて、皮膚や腸管の組織肝細胞障害の重要性が指摘されてきたが、肝臓GVHDにおける組織幹細胞の役割は解明されていない。本研究では、マウスモデルおよび肝臓オルガノイド培養系を用いて、肝臓GVHDにおける肝臓の組織幹細胞の傷害の有無を検討し、そのメカニズムを解明する。肝臓組織幹細胞を標的とする治療法の開発を行いたい。Achievementsマウス肝臓GVHDモデルを用いて、胆管上皮幹細胞からオルガノイドを作成する培養系を確立して、オルガノイドの作成数から、胆管上皮幹細胞の量的変化が観察可能となった。これによって、移植後の胆管上皮幹細胞の量的変化を経時的に検討することができた。肝臓GVHDを発症したマウスでは、オルガノイド生成数が移植後一時的に増加するものの、その後急速な減少を起こすことが判明した。これは、肝臓GVHDによる組織障害を修復するため、胆管上皮幹細胞が反応性に増殖するものの、その後疲弊状態もしくはアポトーシスに陥って、胆管上皮幹細胞の機能が失われたことを示している。そこで、マウスモデルを用いて、胆管上皮幹細胞の機能を保てるような、新しいGVHD予防法の開発を試みた。オルガノイド培養系の検討では、腸管オルガノイドがIFN-gによって減少するのとはちがい、肝臓オルガノイドは、TGF-bの添加によって著明な減少が見られた。肝臓GVHDで肝臓に浸潤するマクロファージが、TGFbを賛成していることが示された。した結果を元に、TGF-bのシグナル伝達物質である、SMAD2/3の阻害剤を用いて、マウス肝臓GVHDの軽減を試みた。SMAD2/3阻害剤を、マウス同種骨髄移植後に投与すると、胆管上皮幹細胞の減少が軽減され、黄疸などの肝臓GVHDの兆候が軽減できることを示せた。これらの結果を、2022年10月に開催された日本血液学会で発表を行った。発表はPlenary演題に採択された。planned.Reason当初の目標であった、肝臓の組織幹細胞を標的とするGVHD予防法の確立にかなり近づいたと考えられる。学会発表も行うことができ、高い評価を得ることができた。Activity今後は更にメカニズムの解明をすすめ、来年度中に論文発表できそうである。TGF-b阻害以外の、胆管上皮幹細胞を標的とするGVHD予防・治療法についても検討をすすめる。胆管上皮幹細胞はR-SpondinレセプターであるLGR5を発現しているため、R-Spondinの投与などを検討する予定である。