ブタモデルを設定するためのステップバイステップのプロトコルについて説明します。原型生物として用いられる。細菌増殖は、細菌が角膜組織を損傷する細菌の能力に依存するように、この革新的なモデルは、生体内感染を模倣する。Abstract新しい抗菌剤を開発する場合、動物試験の成功は、生体内検査から生体内の動物感染までの抗菌効果の正確な外挿に依存する。vitro試験は、典型的には拡散障壁としての宿主組織の存在が考慮されないとして抗菌効果を過大評価する。エキビボブタコネ角膜モデルを開発しました。この資料では、ブタの角膜の調製と感染の確立のためのプロトコルについて説明します。別注ガラス型は、感染研究のための角膜の簡単なセットアップを可能にする。このモデルは、細菌の増殖が角膜組織を損傷する細菌の能力に依存するので、生体内感染を模倣する。感染の確立は、生存可能なプレート数を介して評価されるコロニー形成ユニットの数の増加として検証される。vivo角膜において非常に再現性の高い方法で感染を確立できることを示している。将来的にP.緑素症以外の微生物によって引き起こされる角膜炎を模倣するために拡張することができます。このモデルの究極の目的は、生体内感染をより代表的なシナリオで抗菌化学療法が細菌感染の進行に及ぼす影響を調査することである。することで、ここで説明するモデルは、検査のための動物の使用を減らし、臨床試験での成功率を向上させ、最終的には新しい抗菌薬をクリニックに迅速に翻訳することを可能にする。Introduction角膜感染症は失明の重要な原因であり、低所得国と中所得国の流行割合で発生します。この疾患の病因は地域によって異なるが、細菌はこれらの症例の大部分を占める。緑膿菌は、急速に進行する疾患を引き起こす重要な病原体である。乱視、移植を必要とする、または最悪のシナリオでは、目1、2を失う。P.緑素症によって引き起こされる細菌性角膜炎は、特にP.緑素症の抗菌耐性株の出現の増加に起因する治療が困難な眼感染症である。過去10年の間に、角膜感染症の新しい治療法の試験と開発、一般的に、特にシュードモナスspによって引き起こされるものは、抗生物質耐性3の現在の傾向に対抗するために不可欠であることが明らかになった。角膜感染症に対する新しい治療法の有効性を試験するために、従来のインビトロ微生物学的方法は、実験室培養中および生体内感染中の細菌生理学の差と、宿主界面4,5の欠如による貧弱な代理である。生体内動物モデルは高価で時間がかかり、少数の複製を提供し、動物の福祉に関する懸念を提起することができます。vivoブタモデルを示す。用いていますが、他の細菌や角膜炎を引き起こす真菌や酵母などの生物ともうまく機能します。Protocolアルビノの実験室ウサギは、ホームオフィス承認のプロトコルの下で他の計画された実験作業のために実験室で犠牲にされました。これらの研究では、目は実験用に必要とされなかったため、このプロトコルに使用されました。Resultsガラスの金型の設計は革新的で独創的なアイデアであり、その使用により、汚染に関する問題を最小限に抑えて一貫した方法でモデルを設定することができました。金型は、設計に基づいてシェフィールド大学のガラスブロワーによって製造されました(図1A)。vitroモデルを新しい抗菌剤を開発する研究者に提供することです。disclose.Acknowledgements著者らは、チェスターフィールドのエリオット・アバトワールが豚の目を提供してくれたことに感謝したいと考えています。ガラスリングは、シェフィールド大学化学科のガラスブロワーダンジャクソンによって私たちのデザインに基づいて作られました。著者らは、医学研究評議会(MR/S004688/1)の資金調達に感謝したいと考えています。著者らはまた、角膜の準備に関する技術的な助けをしてくれたシャナリ・ディクウェラ夫人に感謝したいと考えています。著者たちは、写真の書式設定に協力してくれたジョナサン・エメリー氏に感謝したいと考えています。reserved×-1::1。