ID do papel: 13
CULTURA IN VITRO DE CÉLULAS DE FIBROBLASTOS DE EMBRIÃO DE FRANGO PELUNG E SUA POTENCIAL APLICAÇÃO
Elisa Herawati1, *, Harlina Wulandari1, Shanti Listyawati1, Nita Etikawati1
Programa de Estudos de Biologia, Faculdade de Matemática e Ciências Naturais, Universitas Sebelas Maret, Surakarta
A disponibilidade de cultura de células in vitro derivadas de espécies locais oferece oportunidade para resolver problemas relacionados com a preservação dos seus materiais genéticos e pode potencialmente ser aplicada para estudos baseados em vitro a jusante. Aqui, estabelecemos cultura primária de células de fibroblastos de frango local da Indonésia, frango Pelung, e então exploramos suas características de crescimento e usos potenciais para ensaios de cicatrização de feridas e testes de citotoxicidade de compostos bioativos medicinais. Células fibroblásticas foram isoladas de tecido embrionário da pele usando técnica de explante. As células foram mantidas em meio DMEM-FBS a 37°C. O ensaio de cicatrização de feridas in vitro foi realizado criando um “arranhão” em uma monocamada celular, seguido pela captura de imagens de células em migração em intervalos regulares. A viabilidade celular foi medida usando ensaio de exclusão de corante azul de tripano em várias doses de extratos de folhas de Centella asiatica. O crescimento de células do explante de pele revelou morfologia típica de células semelhantes a fibroblastos, mostrando células fusiformes formando uma monocamada que aderiu firmemente ao substrato. A passagem precoce das células de fibroblastos Pelung atingiu o crescimento máximo de 7,95×104 células/cm2 após 5 dias com tempo de duplicação da população (PDT) de 184 h. Com a passagem contínua, a população de células tornou-se mais homogênea e a PDT foi maior. No ensaio de cicatrização de feridas, as células fibroblásticas de Pelung migraram em direção à área da ferida e após 24 horas fecharam toda a área, sugerindo sua capacidade de responder normalmente a estímulos mecânicos. No teste de citotoxicidade, a viabilidade das células correspondeu, de forma dependente da dose, à quantidade de extrato de Centella asiatica testada na cultura.