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Antecedentes: Os peptídeos de ligação à fosfatidilserina (PS) radiomarcados representam uma estratégia inovadora para imagens moleculares de apoptose e trombo. O hexapeptídeo PGDLSR foi descrito como um ligante seletivo e de alta afinidade para PS. Neste trabalho, sintetizamos e avaliamos um peptídeo PGDLSR marcado com gálio como um radiofármaco potencial e seletivo para imagens nucleares. PGDLSR-β-alanina-NODAGA (P04087) foi preparado usando síntese baseada em Fmoc e depois quelado com gálio frio, 68Ga e 67Ga. A afinidade de Ga-P04087 para PS foi avaliada por um ensaio de ligação competitiva utilizando Anexina V biotinilada. A estabilidade in vitro do radiotraçador foi verificada à temperatura ambiente e após incubação em soro humano a 37°C com e sem inibidor de metaloprotease. A ligação in vivo de 67Ga-P04087 à fosfatidilserina foi avaliada num modelo de endocardite infecciosa em ratos. Resultados: O PGDLSR foi preparado com sucesso com um rendimento de 31%. O P04087 foi obtido com rendimento de 28% e alta pureza química (>95%). As purezas radioquímicas de 67Ga-P04087 e 68Ga-P04087 excederam 98% em todos os casos. IC50 de P04087 e Ga-P04087 estavam na mesma ordem de grandeza (10−7M). O produto radiomarcado foi estável durante 24 horas à temperatura ambiente, mas foi degradado muito rapidamente no soro humano na ausência de um inibidor de protease, que teve um efeito estabilizador. Nenhuma captação focal pôde ser detectada visualmente na área cardíaca nas imagens SPECT. Na autorradiografia, no entanto, estava presente uma captação focal de 67Ga-P04087 na área valvar e os cortes histológicos demonstraram a localização da ligação do peptídeo na camada periférica das vegetações. Conclusão: Apesar da preservação da afinidade do peptídeo ao PS após sua conjugação ao quelante NODAGA, e da presença de captação de 67Ga-P04087 na autorradiografia, a ausência de focos detectáveis ​​in vivo na área valvar pode ser atribuída tanto ao baixa intensidade do sinal e presença de atividade de fundo originada do acúmulo de sangue e tecidos circundantes nos animais vivos. Modificações adicionais são necessárias para projetar um peptídeo radiomarcado com maiores potências de ligação ao PS, ao mesmo tempo que possui maior estabilidade metabólica in vivo.
Ben Azzouna, R., Guez, A., Benali, K., Al-Shoukr, F., Gonzalez, W., Karoyan, P.,… Le Guludec, D. (2017). Síntese, marcação de gálio e caracterização de P04087, um peptídeo funcionalizado de ligação à fosfatidilserina. EJNMMI Radiofarmácia e Química, 2(1). https://doi.org/10.1186/s41181-016-0021-5