मैरी का जन्म 8 दिसंबर 1542 को स्कॉटलैंड के लिनलिथगो पैलेस में राजा जेम्स पंचम और उनकी फ्रांसीसी दूसरी पत्नी मैरी ऑफ गुइज़ के घर हुआ था। ऐसा कहा जाता है कि उसका जन्म समय से पहले हुआ था और वह जेम्स की जीवित रहने वाली एकमात्र वैध संतान थी। वह इंग्लैंड के राजा हेनरी अष्टम की परपोती थीं, क्योंकि उनकी दादी, मार्गरेट ट्यूडर, हेनरी अष्टम की बहन थीं। 14 दिसंबर को, अपने जन्म के छह दिन बाद, वह स्कॉटलैंड की रानी बनीं जब उनके पिता की मृत्यु हो गई, शायद सोलवे मॉस की लड़ाई के बाद घबराहट के प्रभाव से या अभियान के दौरान दूषित पानी पीने से। एक लोकप्रिय कहानी, पहली बार रिकॉर्ड की गई जॉन नॉक्स का कहना है कि जब जेम्स ने अपनी मृत्यु शय्या पर सुना कि उसकी पत्नी ने एक बेटी को जन्म दिया है, तो उसने दुःखी होकर कहा, "यह एक लड़की के साथ काम करता है और यह एक लड़की के साथ गिरोह करेगा!" उनके स्टुअर्ट हाउस ने रॉबर्ट द ब्रूस की बेटी मार्जोरी ब्रूस की स्कॉटलैंड के छठे हाई स्टीवर्ड, वाल्टर स्टीवर्ट से शादी के माध्यम से स्कॉटलैंड की गद्दी हासिल की थी। मुकुट एक महिला के माध्यम से उनके परिवार में आया था, और एक महिला के माध्यम से उनके परिवार से खो जाएगा। यह पौराणिक कथन बहुत बाद में सच हुआ - मैरी के माध्यम से नहीं, बल्कि उसकी वंशज ऐनी, ग्रेट ब्रिटेन की रानी के माध्यम से। मैरी को उसके जन्म के तुरंत बाद पास के सेंट माइकल चर्च में बपतिस्मा दिया गया था। अफवाहें फैल गईं कि वह कमजोर और कमजोर थी, लेकिन एक अंग्रेजी राजनयिक, राल्फ सैडलर ने मार्च 1543 में लिनलिथगो पैलेस में शिशु को देखा, उसकी नर्स ने उसे खुला रखा था, और लिखा, "यह उतना ही अच्छा बच्चा है जितना मैंने उसकी उम्र में देखा है।" और जीना पसंद है।" चूंकि मैरी एक शिशु थी जब उसे राजगद्दी मिली, उसके वयस्क होने तक स्कॉटलैंड पर रीजेंट्स का शासन था। शुरू से ही, रीजेंसी के लिए दो दावे थे: एक कैथोलिक कार्डिनल बीटन की ओर से, और दूसरा प्रोटेस्टेंट अर्ल ऑफ अरन की ओर से, जो सिंहासन के कतार में अगला था। बीटन का दावा राजा की वसीयत के एक संस्करण पर आधारित था जिसे उनके विरोधियों ने जालसाजी के रूप में खारिज कर दिया था। अरन, अपने दोस्तों और संबंधों के समर्थन से, 1554 तक रीजेंट बन गया जब मैरी की मां उसे हटाने और उत्तराधिकारी बनने में कामयाब रही।
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मैरी का जन्म 8 दिसंबर 1542 को स्कॉटलैंड के लिनलिथगो पैलेस में राजा जेम्स पंचम और उनकी फ्रांसीसी दूसरी पत्नी मैरी ऑफ गुइज़ के घर हुआ था। ऐसा कहा जाता है कि उसका जन्म समय से पहले हुआ था और वह जेम्स की जीवित रहने वाली एकमात्र वैध संतान थी। वह इंग्लैंड के राजा हेनरी अष्टम की परपोती थीं, क्योंकि उनकी दादी, मार्गरेट ट्यूडर, हेनरी अष्टम की बहन थीं। 14 दिसंबर को, अपने जन्म के छह दिन बाद, वह स्कॉटलैंड की रानी बनीं जब उनके पिता की मृत्यु हो गई, शायद सोलवे मॉस की लड़ाई के बाद घबराहट के प्रभाव से या अभियान के दौरान दूषित पानी पीने से। एक लोकप्रिय कहानी, पहली बार रिकॉर्ड की गई जॉन नॉक्स का कहना है कि जब जेम्स ने अपनी मृत्यु शय्या पर सुना कि उसकी पत्नी ने एक बेटी को जन्म दिया है, तो उसने दुःखी होकर कहा, "यह एक लड़की के साथ काम करता है और यह एक लड़की के साथ गिरोह करेगा!" उनके स्टुअर्ट हाउस ने रॉबर्ट द ब्रूस की बेटी मार्जोरी ब्रूस की स्कॉटलैंड के छठे हाई स्टीवर्ड, वाल्टर स्टीवर्ट से शादी के माध्यम से स्कॉटलैंड की गद्दी हासिल की थी। मुकुट एक महिला के माध्यम से उनके परिवार में आया था, और एक महिला के माध्यम से उनके परिवार से खो जाएगा। यह पौराणिक कथन बहुत बाद में सच हुआ - मैरी के माध्यम से नहीं, बल्कि उसकी वंशज ऐनी, ग्रेट ब्रिटेन की रानी के माध्यम से। मैरी को उसके जन्म के तुरंत बाद पास के सेंट माइकल चर्च में बपतिस्मा दिया गया था। अफवाहें फैल गईं कि वह कमजोर और कमजोर थी, लेकिन एक अंग्रेजी राजनयिक, राल्फ सैडलर ने मार्च 1543 में लिनलिथगो पैलेस में शिशु को देखा, उसकी नर्स ने उसे खुला रखा था, और लिखा, "यह उतना ही अच्छा बच्चा है जितना मैंने उसकी उम्र में देखा है।" और जीना पसंद है।" चूंकि मैरी एक शिशु थी जब उसे राजगद्दी मिली, उसके वयस्क होने तक स्कॉटलैंड पर रीजेंट्स का शासन था। शुरू से ही, रीजेंसी के लिए दो दावे थे: एक कैथोलिक कार्डिनल बीटन की ओर से, और दूसरा प्रोटेस्टेंट अर्ल ऑफ अरन की ओर से, जो सिंहासन के कतार में अगला था। बीटन का दावा राजा की वसीयत के एक संस्करण पर आधारित था जिसे उनके विरोधियों ने जालसाजी के रूप में खारिज कर दिया था। अरन, अपने दोस्तों और संबंधों के समर्थन से, 1554 तक रीजेंट बन गया जब मैरी की मां उसे हटाने और उत्तराधिकारी बनने में कामयाब रही।