도 5 . 리 툭 시 맵 , CD 20 및 Fc γ RIIb 는 함께 리소좀 으로 내재 화 된다 . A ) CLL 세포 를 Tosit - 488 또는 Ritux - 488 과 함께 2 시간 동안 배양 한 다음 , 항 - CD 19 - APC 및 AT 10 - PE 로 염색 하 였 다 . 데이터 는 미처리 ( n + 6 CLL 시료 ) 의 % 로서 Fc γ RIIb 발현 에 대한 평균 +/ 1 SD 를 나타낸다 . Ritux - 488 이후 의 Fc γ RIIb 발현 은 Tosit - 488 이후 에 비해 현저히 낮 았 다 ( * p < 0 . 05 ) . B ) CLL 세포 를 세정 하 고 , 고정 하 고 , 그리고 투과 가능 하 게 한 다음 , AT 10 - 647 ( 블루 ) 로 염색 하 고 , 세정 하 고 , 그리고 공 초점 현미경 으로 분석 하 였 다 . 이 이미지 는 자극 되 지 않 은 세포 에서 Fc γ RIIb 염색 패턴 을 나타낸다 . C ) 동일 한 CLL 시료 를 Ritux - 488 과 함께 30 분 간 배양 한 다음 , 5 b 에서 와 같이 처리 하 였 다 . 이 시점 에서 의 세포 들 은 Ritux - 488 ( 그린 ) 과 AT 10 - 647 ( 블루 ) 사이 에 분명 한 공 - 편재화 ( co - localization ) 를 나타내 었 다 . D ) CLL 세포 들 을 Tosit - 488 과 함께 6 시간 동안 배양 한 다음 , 5 B 에서 와 같이 현미경 분석 을 위해 준비 되 었 다 . 또한 , 세포 들 을 바 이오티 닐 화 LAMP - 1 및 스 트 렙 타비 딘 - 546 ( 레드 ) 로 염색 하 여 리소좀 을 염색 하 였 다 . Tosit - 488 은 표면 상 에 균일 하 게 유지 되 었 고 , AT 10 - 647 염색 은 5 B 에 나타낸 바 와 같이 기준 으로부터 변하 지 않 았 다 . LAMP - 1 으로 는 공 - 편재화 가 없 었 다 . E ) CLL 세포 들 을 Ritux - 488 로 6 시간 동안 처리 하 고 , 5 D ) 에서 와 같이 평가 하 였 다 . 2 개 의 대표 적 인 세포 들 을 본 명세서 에 나타내 었 다 . 상부 세포 는 Ritux - 488 과 AT 10 - 647 사이 에 분명 한 공 - 편재화 를 나타내 었 으나 , LAMP - 1 으로 는 공 - 편재화 를 나타내 지 않 았 다 . 하부 세포 는 3 가지 모든 형광 색소 의 공 - 편재화 를 나타내 었 다 . 각 경우 에 , 명 시야 ( BF ) 이미지 를 동일 한 세포 로부터 나타내 었 다 . 스케일 바 는 5 μ m 를 나타낸다 .