인간 MCP - 1 의 N - 말단 변이체 를 발현 시키 기 위하 여 HEK 293 세포 를 콜라겐 I 코팅 된 6 - 웰 디쉬 에서 배양 하 고 , 80 % 포화 상태 가 될 때 까지 성장 시키 고 , 제조자 의 매뉴얼 에 따라 Lipofectamin 2000 ( Invitrogen ) 을 사용 하 여 형질 감염 시키 고 , 5 시간 동안 형질 감염 용액 에서 배양 하 였 다 . 그 후 , 세포 를 정상 적 인 성장 배지 에서 밤새 회복 되 도록 하 였 다 . 다음 날 , 세포 를 성장 배지 에서 24 시간 더 배양 하 였 다 . QC - 저해 효율 을 분석 하 기 위해 세포 를 특이 적 저해제 의 부재 또는 존재 하 에 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 24 시간 후 , 인간 MCP - 1 변이체 를 포함 하 는 배지 를 회수 하 여 주화성 효능 을 이동 어 세이로 조사 하 였 다 . 또한 , 세포 배양 상등 액 의 분취 액 을 - 80 ℃ 에 저장 하 고 인간 MCP - 1 - ELISA ( Pierce ) 를 사용 하 여 인간 MCP - 1 농도 를 정량 하 였 다 .