자유 티 올기 는 반응 성 이 높 아 산화 ( Rigo A et al . , Interaction of copper with cysteine : stability of cuprous complexes and catalytic role of cupric ions in anaerobic thiol oxidation , J Inorg Biochem . 2004 , 98 ( 9 ) , 1495 - 501 ) 뿐 아니 라 disulfide bond ( 이황화 결합 ) 를 쉽 게 생성 하 여 , 화학 적 수식 을 위하 여 단백질 표면 에 도입 할 경우 분자 간 디 설파이드 ( disuldise ) 결합 을 생성 하 여 부차 적 인 침전 을 유발 하 거나 산화 되 어 수식 ( modification ) 이 불 가능 하 게 되 기 쉽 다 ( Crow MK , et . al . , Protein aggregation mediated by cysteine oxidation during the stacking phase of discontinuous buffer SDS - PAGE , Biotechniques 2001 , 30 ( 2 ) , 311 - 6 ) . 그리고 이러 한 현상 은 도입 - 시스테인 ( cysteine ) 의 위치 가 외부 에 노출 될수록 정도 가 심해 지 는 것 은 당연 하 다 . 따라서 , 선택 적 화학 수식 ( specific chemical modification ) 을 위한 시스테인 - 도입 위치 를 선정 시 , 구조 적 인 정보 ( structural information ) 에 만 의존 하 여 시스테인 도입 위치 를 선정 할 경우 , 대부분 상당 한 오류 , 즉 자유 시스테인 에 의한 단백질 불안정성 에 봉착 하 게 된다 ( Grzegorz Bulaj , Formation of disulfide bonds in proteins and peptides , Biotechnology Advances 23 ( 2005 ) 87 - 92 ) .