기질 액 의 온도 는 효소 반응 을 가능 하 게 하 는 범위 에서 적절히 설정 할 수 있 다 . 기질 액 의 온도 가 지나치 게 낮 으면 효소 반응 이 진행 되 지 않 고 , 또한 온도 가 너무 높 으면 효소 가 디 엑 티 베이 션 ( deactivation ) 하 여 버린다 . 이러 한 관점 에서 , 기질 액 의 농도 는 통상 1 ℃~ 40 ℃ 이 다 . 형광 또는 발광 레벨 측정 후 의 조직 을 계속 해서 평가 시험 에 이용 하 는 경우 에 는 , 조직 의 보존 조건 을 양호 하 게 유지 하 기 위해 , 비교 적 저온 ( 예컨대 약 1 ℃~ 10 ℃, 바람직 하 게 는 1 ℃~ 6 ℃) 으로 형광 또는 발광 레벨 을 측정 하 는 것 이 바람직 하 다 . 따라서 이 경우 , 표지 유전자 로서 , 이러 한 저온 조건 에서 도 충분 한 발광 또는 형광 을 발생 하 는 것 을 선택 할 필요 가 있 다 . 루시페라아제 는 상기 저온 조건 에서 도 , 루시페린 과 반응 하 여 , 충분 한 발광 을 발생 할 수 있 다 .