1 . 5 ㎍ pSBT / lox . RSV - GFlp . IoxP 257 ( 또는 pSBT / PGK - puro ) 를 1 . 5 ㎍ pCMV - SB ( 또는 음성 대 조군 으로서 1 . 5 ㎍ pCMV - mSB ) 으로 코 트랜스펙션 ( Roche 제 Fugene - 6 를 사용 ) 하 여 SBT / PGK - puro 또는 표적 트랜스포존 SBT / loxP . RSV - GFlp . loxP 257 중 하나 인 SB 트랜스포존 벡터 를 돼지 섬유 아 세포 의 게놈 에 삽입 한다 . pCMV - SB ( 미국 미네소타주 미네소타 유니 버시 티 , Perry Hackett 에 의해 보유 된 권리 ) 는 송어 ( salmoid fish ) 의 화석 DNA 전위 요소 로부터 재조합 된 슬 리핑 뷰티 유전자 전위 효소 ( Sleeping Beauty transposase ) 를 암호 화 한다 . pCMV - SB , pCMV - mSB , 및 과 활성 변이체 pCMV - HSB 3 를 미국 스탠포드 유니 버시 티 , Mark Kay 로부터 얻 었 다 . SB - 표지 된 세포 클론 은 퓨 로 마이신 ( 0 . 5 ㎍/㎖) 으로 트랜스펙션 된 세포 를 선택 한 결과 로서 나타났 다 . 콜로니 들 을 고정 시키 고 메탄올 에서 메틸렌 블루 로 염색 하 고 이어서 계수 하 였 다 .