폴리 라이신 및 6 x His - 태그 상류 에 클로닝 된 인간 또는 뮤 린 섬유 모세포 활성 화 단백질 ( FAP ) 의 엑 토 도메인 에 대한 선별 을 수행 하 였 다 . 서열 번호 317 및 서열 번호 319 를 참조 한다 . 선별 전 , 항원 을 선별 의 라운드 에 따라 10 ㎍/㎖ 또는 5 ㎍/㎖ 의 농도 로 면역 튜브 내 에 코팅 하 였 다 . 하 기 프로토콜 에 따라 선별 을 수행 하 였 다 : ( i ) 라이브러리 DP 47 - 3 의 약 1012 개 의 파지 미드 입자 를 고정 된 인간 또는 뮤 린 FAP 에 2 시간 동안 결합 시키 는 단계 ; ( ii ) 5 ㎖ 의 PBS / 트윈 20 을 5 회 사용 하 고 5 ㎖ 의 PBS 를 5 회 사용 하 여 면역 튜브 를 세척 하 는 단계 ; ( iii ) 1 ㎖ 의 100 mM TEA ( 트라이 에틸아민 ) 을 첨가 하 여 파지 입자 를 10 분 동안 용출 하 고 , 500 ㎕ 1 M 트리스 / HCl ( pH 7 . 4 ) 을 첨가 하 여 중화 시키 는 단계 ; 및 ( iv ) 대 수기 에스 케 리키아 콜라 이 TG 1 세포 를 재감염 시키 고 헬퍼 파지 VCSM 13 으로 감염 시킨 후 , 후속 선별 라운드 에서 사용 될 파지 미드 입자 의 PEG / NaCl 침전 을 수행 하 는 단계 .