올리 고 삽입 - 기초 검정 법 ( 예 를 들 어 문헌 [ Tsai et al . , Nature Biotechnology . 33 , 187 - 197 ; 2015 ] 참조 ) 을 사용 하 여 , HBG 1 및 / 또는 HBG 2 를 표적 화 하 는 Cas 9 에 의해 절단 된 잠재 적 인 표적 - 외 게놈 부위 를 결정 하 였 다 . 이 들 실험 에서 , Cas 9 GFP - 발현 HEK 293 세포 ( HEK - 293 _ Cas 9 GFP ) 를 Lipofectamine ® RNAiMAX 를 사용 하 여 gRNA ( 15 nM crRNA : tracr ) 및 삽입 올리 고 ( 10 nM ) 로 형질 감염 시켰 다 . 검정 법 은 게놈 내 의 이중 가닥 절 단부 내 에 혼입 된 올리고 의 식별 에 의존 하 며 , 이 는 Cas 9 에 의한 절단 으로 인한 것 일 수 있 거나 그렇 지 않 을 수 있 다 .