인간 전혈 ( HWB ) 을 다음 과 같 은 제한 조건 을 가진 건강 한 자원자 로부터 얻 는다 : 24 시간 약물 복용 하 지 않 는 비흡연자 . 혈액 을 나트륨 헤파린 으로 응고 방지 된 배 큐 테 이너 ( Vacutainer ) 튜브 로 정맥 천자 에 의해 채혈 한다 . 시험 화합물 을 목적 하 는 출발 약물 농도 의 10 배 까지 PBS ( 20 x ) 로 희석 한 다음 , PBS 중 의 10 % DMSO 로 3 배 단계 희석 하 여 9 점 용량 반응 곡선 을 생성 시킨다 . 5 . 5 μ l 의 각 화합물 희석 물 을 2 세트 로 하 여 2 ml 96 - 웰 V 바닥 플레이트 ( Analytical Sales and Services , # 59623 - 23 ) 에 첨가 하 고 , 5 . 5 μ l 의 PBS 중 의 10 % DMSO 를 대 조군 및 비 자극 웰 에 첨가 한다 . HWB ( 100 μ l ) 를 각 웰 에 첨가 하 고 , 혼합 한 후 플레이트 를 37 ℃, 5 % CO 2 , 100 % 습도 에서 30 분 동안 인 큐 베이 션 한다 . 염소 F ( ab ') 2 항 - 인간 IgM ( 사우 전 바이오 테크 ( Southern Biotech ) , # 2022 - 14 ) ( 10 μ l 의 500 μ g / ml 용액 , 50 μ g / ml 최종 농도 ) 를 각 웰 ( 비 자극 웰 제외 ) 에 혼합 하 면서 첨가 하 고 , 그 플레이트 를 추가 20 시간 동안 인 큐 베이 션 한다 .