75 ± 1 . 0 ℃ 의 항온 수욕 조 에서 10 분 간 정치 시킨 5 개 의 나선식 마개 가 있 는 시험관 을 즉시 20 ℃ 전후 로 냉각 한 다음 미리 준비 한 2 배 농후 DRCM 배지 를 각각 10 ㎖ 씩 넣 는다 . 　 그리고 기포 가 생기 지 않 도록 검수 와 배지 를 혼합 한 후 미리 멸균 한 액체 파라핀 을 2 ～ 3 ㎖ 씩 무균 적 으로 배지 표면 에 넣 고 마개 를 단단히 닫 는다 . 그리고 35 ± 0 . 5 ℃ 로 48 ± 3 시간 배양 한다 . 배양 후 배지 가 검 게 변하 게 되 면 아황산 이 환원 된 것 으로 아황산 환원 혐기성 포자 형성 균 양성 으로 판정 하 며 5 개 의 시험관 중 1 개 라도 양성 인 경우 검출 되 었 다고 판정 한다 .