마우스 의 복강 으로부터 대식 세포 를 추출 하 기 위하 여 사육 된 6 ∼ 10 주령 의 Balb / c 마우스 에 2 개월 이상 배양 된 티오 글리콜 레이트 배지 ( thioglycollate medium ; 미국 Gibco 사 제품 ) 을 투여 한 다음 , 투여 4 일 후 마우스 를 경추 탈골 시켜 희생 시켰 다 . 희생 시킨 마우스 의 복강 에 100 U / ㎖ 페니실린 - 스트렙토마이신 이 첨가 된 불완전 RPMI - 1640 배지 ( 미국 Gibco 사 제품 ) 를 주입 하 여 복강 내 에 있 던 대식세포 를 추출 하 고 원심 분리 한 후 , 6 웰 플레이트 에 3 × 106 세포 / 웰 농도 로 분주 하 였 다 . 이것 을 약 1 시간 가량 CO 2 항온기 에서 배양 한 후 , 플레이트 에 부착 하 지 않 은 세포 와 다른 부유물 들 을 불 완전 RPMI - 1640 배지 를 사용 하 여 2 회 세척 한 다음 1 . 5 ㎖/ 웰 양 의 100 U / ㎖ 페니실린 - 스트렙토마이신 과 10 % 우태 아 혈청 ( fetal bovine serum ) 이 첨가 된 완전 RPMI - 1640 배지 를 주입 하 고 3 일 간 CO 2 항온기 ( 100 % 습도 , 37 ℃, 5 % CO 2 ) 에서 배양 하 였 다 .