E 430 G 치환 을 갖 거나 갖 지 않 는 IgG - CONA - C 49 W 변이체 에 의 C 1 q 결합 에 대한 K 326 W , E 333 S 또는 K 326 W / E 333 S 치환 도입 의 효과 를 평가 하 기 위해 C 1 q 결합 ELISA 를 수행 하 였 다 . IgG - 2 F 8 - I 253 D / K 322 A 를 C 1 q 결합 에 대한 음성 대 조군 으로서 사용 하 였 다 . 실시 예 4 에 기재 된 바 와 같이 상이 한 농도 의 정제 된 C 1 q ( 3 배 희석 으로 범위 0 . 010 - 30 μ g / mL ) 의 결합 에 대해 시험 된 , 1 μ g / mL 항체 로 코팅 된 96 - 웰 플레이트 에서 ELISA 실험 을 수행 하 였 다 . 405 nm 에서 흡광도 를 측정 하 고 , 그래프 패드 프리즘 소프트웨어 를 사용 하 여 가변 기울기 를 갖 는 S 자형 용량 - 반응 곡선 에 피팅 함 으로써 log - 변환 된 데이터 를 분석 하 였 다 . 도 11 A , B 는 K 326 W , E 333 S 또는 K 326 W / E 333 S 치환 의 도입 이 모두 항 - DR 5 항체 IgG 1 - CONA - C 49 W 및 E 430 G Fc - Fc 상호 작용 증진 및 육량 체화 - 증진 돌연변이 를 갖 는 그 의 변이체 IgG 1 - CONA - C 49 W - E 430 G 둘 다의 경우 무작위 로 고정 화 된 항체 에 대한 증가 된 C 1 q 결합 을 유발 하 였 다는 것 을 보여준다 . IgG 1 - CONA - C 49 W - K 326 W / E 333 S / E 430 G 는 모든 시험 된 항체 변이체 의 가장 높 은 겉보기 C 1 q 결합 친화도 를 나타냈 다 .