인 비트로 ( In vitro ) 세포 배양기 를 이용 하 여 , 3 D 프린팅 된 하이드로젤 , 복합체 1 및 2 의 표면 에 골 아 세포 ( MC 3 T 3 ) 를 접종 및 증식 시키 는 연구 를 통해 하이드로젤 및 복합체 의 세포독성 및 생체 적 합성 을 평가 했 다 . 먼저 , 3 D 프린팅 된 샘플 을 5 일 간 실온 에서 멸 균수 로 헹군 뒤 , 사용 된 용액 은 매일 새로운 용액 으로 교체 하 여 미 반응물 을 샘플 로부터 제거 하 였 다 . 이후 , 준비 한 시료 를 121 ℃ 에서 고온 - 고압 으로 15 분 간 멸균 하 였 다 . 세포 증식 시험 을 수행 하 기 위해 24 웰 플레이트 에 놓인 시료 표면 에 마우스 ( MC 3 T 3 , Sigma Aldrich ) 유래 2 x 106 개 의 조골세포 를 접종 한 뒤 , 37 ℃, 5 % 의 CO 2 분위기 하 에서 2 일 간 배양 하 여 세포 를 사용 하 였 다 . 10 % 의 소 태아 혈청 과 1 % 의 페니실린 - 스트렙토마이신 ( penicillin - streptomycin ) 이 포함 된 α - MEM 배지 1 ㎖ 를 샘플 이 포함 된 각 웰 플레이트 에 넣 고 5 일 간 인 비트로 ( in vitro ) 배양 하 였 다 . 세포 접종 이후 에 는 , 24 시간 마다 배양 배지 를 교체 하 고 , 1 , 3 , 5 일 차 마다 세포 증식 정도 를 CCK - 8 분석 을 통해 세포 수 를 측정 하 였 다 . 세포 의 생존 확인 을 위해 공지 된 염색법 ( ethidium homodimer - 1 / calcein AM live & dead assay ) 을 이용 하 였 다 . 하이드로젤 필름 상의 MC 3 T 3 세포 의 이미지 는 형광 현미경 ( Leica DMLB , Wetzlar , Germany ) 을 이용 하 여 촬영 하 였 다 .