종 교차 - 반응 성 연구 는 치료 길 항체 개발 전략 을 위한 특이 성 을 증명 하 기 위해 중요 할 수 있 다 . 본원 에서 설명 된 항 - 사람 IL - 21 결합 및 중화 실체 가 쥐 또는 게 잡이 원숭이 IL - 21 에 교차 반응 하 고 결합 하 는지 를 측정 하 기 위해 ( 따라서 게 잡이 원숭이 또는 마우스 를 생존 시험 종 으로서 판단 하 기 위해 ) , 다양 한 분석 포맷 으로 재조합 사람 , 쥐 및 게 잡이 원숭이 IL - 21 에 대한 항체 의 비교 할 만 한 결합 을 증명 하 는 것 이 필요 하 였 다 . 단 클론 성 항체 의 결합 을 시험 하 기 위한 방법 들 중 하나 는 면역 블롯 ( 웨스턴 블롯 ) 분석 에서 의 항체 의 성능 에 의한 것 이 다 . 오브알부민 , 또는 무관 한 대조 사이토 킨 , 재조합 사람 IFN - λ ( ZymoGenetics ) 에 포합 된 재조합 사람 IL - 21 ( SEQ ID NO : 2 ) , 재조합 쥐 IL - 21 ( SEQ ID NO : 11 ) , 재조합 게 잡이 원숭이 IL - 21 ( SEQ ID NO : 9 ) , 사람 IL - 21 서열 유도 된 합성 펩티드 : 펩티드 # 1 pyr 30 - K 50 ( Seq ID 3 ) , 펩티드 # 2 N 54 - C 71 ( Seq ID NO : 4 ) , 펩티드 # 3 N 97 - C 122 ( Seq ID NO : 5 ) , 펩티드 # 4 C 125 - S 153 ( Seq ID NO : 6 ) 을 4 내지 12 % 의 BisTris 폴리 아크릴아미드 겔 ( Invitrogen , Inc . ) 을 사용 하 여 도데 실 황산나트륨 - 폴리 아크릴아미드 겔 전기영동 ( SDS - PAGE ) 을 수행 하 고 , 표준 방법 및 25 mM Tris , 186 mM 글리신 및 40 % 메탄올 을 함유 하 는 완충액 을 사용 하 여 니트로셀룰로오스 막 에 옮겼 다 .