앞서 실험 에 사용 한 세포 들 을 대상 으로 Anti - mouse TNF - α 로 precoating 된 96 well 에 배양액 또는 표준 시료 와 TNF - α conj μ gate 를 각각 50 ul 씩 첨가 하 여 실온 에서 2 시간 반응 시켰 다 . 세 척 버퍼 로 4 회 세척 한 후 기질 용액 100 μ l 를 첨가 하 여 30 분 간 빛 을 차단 한 조건 하 에서 반응 시킨 다음 , 정지 용액 100 μ l 를 처리 하 고 microplate reader 를 이용 하 여 450 nm 에서 흡광도 를 측정 하 였 다 . IL - 6 의 경우 도 상기 방법 과 동일 하 게 실험 에 적용 하 였 다 .