PCR 과 관련 하 여 , 모든 PCR 은 퓨전 ( Phusion ) 효소 ( NEB ) 를 사용 하 여 수행 하 였 다 . Ad 5 로부터 아데노바이러스 유전자 모듈 을 수득 하 기 위해 1 x HF 버퍼 , 200 μ M 의 각 dNTP , 0 . 5 μ M 의 각 프라이머 , 및 10 ng 의 주형 을 이용 하 여 PCR 을 수행 하 였 다 . E 2 - L 2 모듈 의 경우 , 3 % DMSO 도 또한 첨가 하 였 다 . 주형 은 플라스미드 pAd / PL - DEST ( 인비 트로겐 ; E 2 - L 2 , L 3 - L 4 , 및 E 4 모듈 인 경우 ) 또는 Ad 5 게놈 DNA ( E 1 및 E 3 모듈 인 경우 ) 였 다 . PCR 조건 은 하 기 와 같 았 다 . E 2 - L 2 및 L 3 - L 4 : 98 ℃ 에서 30 초 - 98 ℃ 에서 10 초 , 65 ℃ 에서 30 초 ( 매 2 사이클 마다 온도 를 1 ℃ 씩 강하 시킴 ) , 72 ℃ 에서 7 분 인 것 으로 10 사이클 - 98 ℃ 에서 10 초 , 60 ℃ 에서 30 초 , 72 ℃ 에서 8 분 인 것 으로 29 사이클 - 72 ℃ 에서 10 분 - 4 ℃ 에서 유지 . E 3 : 98 ℃ 에서 30 초 - 98 ℃ 에서 10 초 , 70 ℃ 에서 30 초 ( 매 사이클 마다 온도 를 0 . 5 ℃ 씩 강하 시킴 ) , 72 ℃ 에서 2 분 30 초 인 것 으로 10 사이클 - 98 ℃ 에서 10 초 , 68 ℃ 에서 30 초 , 72 ℃ 에서 2 분 30 초 인 것 으로 25 사이클 - 72 ℃ 에서 10 분 - 4 ℃ 에서 유지 . E 4 : 98 ℃ 에서 30 초 - 98 ℃ 에서 10 초 , 63 ℃ 에서 30 초 ( 매 사이클 마다 온도 를 0 . 5 ℃ 씩 강하 시킴 ) , 72 ℃ 에서 2 분 인 것 으로 6 사이클 - 98 ℃ 에서 10 초 , 60 ℃ 에서 30 초 , 72 ℃ 에서 2 분 인 것 으로 29 사이클 - 72 ℃ 에서 5 분 - 4 ℃ 에서 유지 .