야생 형 인간 국소 이성화 효소 I ( hTOP 1 ) 및 돌연변이 된 국소 이성화 효소 I 을 클로닝 하 는 데 사용 된 사카 로 마이 세스 세레비 지아 에 균주 는 문헌 [ Bjornsti et al 1989 Cancer Res . 49 , 6318 - 6323 ] 에 개시 된 바 와 같 은 EKY 2 ( MAT α , ura 3 - 52 , his 3 Δ 200 , leu 2 Δ 1 , trp 1 Δα 63 , top 1 : : TPR 1 ) 이 었 다 . 상기 야생 형 완전 길 이 인간 국소 이성화 효소 I ( YCpGAL 1 hTOP 1 ) 을 갖 는 효모 를 형질 전환 시키 는 데 사용 되 는 플라스미드 는 문헌 [ Bjornsti et al 1989 Cancer Res . 49 , 6318 - 6323 ] 에 개시 되 었 고 돌연변이 된 국소 이성화 효소 I YCpGAL 1 htop 1 K 720 E 는 문헌 [ Fiorani et al . 1998 , J . Biol . Chem . 14 , 8425 - 8433 ] 에 개시 된 방법 을 사용 하 여 올리 고 뉴클레오타이드 - 지시 된 돌연변이 에 의해 생성 시켰으며 : 상기 두 플라스미드 모두 에서 국소 이성화 효소 발현 은 상기 효모 GAL 1 의 갈락토스 - 유도성 프로모터 의 조절 하 에 있 었 다 .