Aggregatibacter actinomycetemcomitans [ Aa , American Type Culture Collection ( ATCC ) 33384 ; Manassas , VA , USA ) 를 혐기성 인큐베이터 에서 뇌 심장 주입 ( BHI ; Becton Dickinson , San Diego , CA , USA ) 한 천 플레이트 에 접종 하 였 다 . 24 시간 후 , 콜로니 를 골라 BHI 배지 에서 48 시간 동안 배양 하 고 , 혐기성 인큐베이터 를 5 % CO 2 , 5 % H 2 및 90 % N 2 에서 37 ℃ 로 유지 시켰 다 . OMV 정제 를 위해 상청 액 을 수집 하 고 , RNA 분리 및 순도 평가 를 위해 박테리아 펠 렛 을 수집 하 였 다 .