인간 화 된 항 - 트립 타제 항체 에 의한 인간 트립 타제 활성 의 억제 는 재조합 트립 타제 활성 검정 을 사용 하 여 측정 되 었 다 . hu 31 a . v 11 IgG 4 및 hu 31 a . v 11 IgG 1 은 PBS , pH 7 . 4 에서 0 . 05 내지 100 μ g / ml ( 0 . 30 내지 667 nM ) 희석 되 었 고 , huE 104 . v 2 IgG 4 및 huE 104 . v 2 IgG 1 은 PBS pH 7 . 4 에서 0 . 02 내지 50 μ g / ml ( 0 . 15 내지 333 nM ) 희석 되 었 다 . 재조합 인간 트립 타제 베타 1 사량 체 활성 효소 는 TNH 완충액 ( 200 mM Tris , 150 mM NaCl , 0 . 1 mg / mL 헤파린 , 0 . 01 % TRITON ™ X - 100 , pH 8 . 0 ) 에서 0 . 75 nM 로 희석 되 었 고 , 흑색 384 - 웰 플레이트 ( ViewPlate - 384 F , Black , Clear - Bottom , Perkin Elmer , 카탈로그 번호 6007470 ) 에서 항 - 트립 타제 항체 와 1 : 1 조합 되 었 다 . 플레이트 는 1 시간 동안 주위 온도 에서 온화 한 진탕 과 함께 인 큐 베이 션 되 었 다 . 비색계 기질 S - 2288 ( Chromogenix , 부품 번호 82 - 0852 - 39 ) 는 TNH 완충액 에서 1200 μ M 로 희석 되 었 고 플레이트 에 첨가 되 었 다 . 최종 인 - 웰 농도 는 400 μ M S - 2288 , 0 . 25 nM 재조합 인간 트립 타제 베타 1 사량 체 , 66 μ g / mL 헤파린 , 그리고 hu 31 A . v 11 에 대하 여 0 . 10 내지 222 nM 항 - 트립 타제 항체 및 huE 104 . v 2 에 대하 여 0 . 05 내지 111 nM 이 었 다 . 플레이트 는 40 분 동안 주위 온도 에서 온화 한 진탕 과 함께 인 큐 베이 션 되 었 고 그 다음 A 405 에서 판독 되 었 다 . 항 - 트립 타제 항체 의 IC 50 은 그 들 의 각 곡선 의 4 - 파라미터 적합 으로부터 결정 되 었 다 .