HDPSCs 에 Ixerin M ( 50 μ g / ml ) 와 dexametasone ( 10 nM ) 단독 으로 처리 하 고 , Ixerin M ( 50 μ g / ml ) 와 dexametasone ( 10 nM ) 을 동시 에 처리 하 였을 때 ALP 의 발현 수준 의 시너지 효과 를 연구 하 고자 HDPSCs 에 7 일 과 14 일 동안 처리 하 였 다 . HDPSCs 에 RIPA Buffer 완충액 ( 20 mM Tris - HCl ( pH 7 . 5 ) , 150 mM NaCl , 1 mM Na 2 EDTA , 1 mM EGTA , 1 % NP - 40 , 1 % sodium deoxycholate , 2 . 5 mM sodium pyrophosphate , 1 mM β - glycerophosphate , 1 mM Na 3 VO 4 ) 에 단백질 분해 효소 억제제 ( P 3100 - 001 , GenDEPOT ) 를 처리 하 여 단백질 을 추출 하 였 다 . 각 시료 를 완충액 과 섞 어 5 분 간 끓인 후 Sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide 겔 ( 0227 , AMRESCO ) 에서 전기영동 하 여 단백질 은 크기 별로 분리 한 후 차단 완충액 ( blocking buffer ( REF 232100 , BD Difco ) 으로 차단 하 고 소포체 스트레스 관련 항체 의 발현 을 확인 하 고자 4 ℃ 에서 하 룻 밤 동안 반응 시킨 후 , 이 차 항체 로 상온 에서 1 시간 반응 시켰 다 . ECL 용액 ( Dae Myung Science Co . , Ltd , Korea ) 를 사용 하 여 단백질 발현 을 확인 하 였 다 . Membrane 을 actin 항체 와 다시 반응 시켜 일정 한 양 의 단백질 을 사용 하 였 는지 확인 하 였 다 . 그 결과 Ixerin M 와 dexametasone 단독 처리 한 군 에 비해 Ixerin M 와 dexametasone 을 동시 에 처리 하 였을 때 ALP 발현 이 증가 하 는 것 을 확인 하 였 다 ( 도 5 ) .