횡단 해마 슬라이스 ( 400 ㎛) 를 , 동일 한 완충액 중 진동 블레이드 마이크로톰 ( vibrating blade microtome ) ( VT 1200 S ; 스위스 헤 에르 브루그 소재 라이카 마이크 로 시스템스 ( 슈 바이즈 ) 아 게 ( Leica Microsystems ( Schweiz ) AG ) ) 을 이용 하 여 준비 하 였 다 . 해마 슬라이스 를 막 삽 입물 ( 밀리 셀 컬쳐 플레이트 인서 츠 ( Millicell Culture Plate Inserts ) , 0 . 4 ㎛) 상 에 개별 적 으로 배치 하 고 , 25 % 열 - 불 활성 화 된 말 혈청 , 1 x 글 루타 맥스 ( GlutaMAX ) , 1 x 페니실린 / 스트렙토마이신 , 0 . 6 % 글루코스 및 1 mM 키 누 렌 산 을 함유 하 는 , BME 및 MEM ( 둘 다 인비 트로겐 으로부터 입수 함 ) 의 1 : 1 혼합물 을 함유 하 는 배지 중 에서 35 ℃, 5 % CO 2 및 95 % 습도 에서 배양 하 였 다 ( 문헌 [ Stoppini 1991 J . Neurosci . Methods , 37 ( 2 ) , 173 - 82 ] ) .