6 - 웰 플레이트 내 에서 트로포 겔 TM 을 가하 거나 가하 지 않 고 자란 세포 를 수확 한 다음 , 이지 블루 키트 ( iNtRON , South Korea ) 를 이용 하 여 총 RNA 를 추출 하 였 다 . 총 RNA 1 ㎍ 으로부터 역전사 - 중합효소 연쇄 반응 ( RT - PCR ) 키트 ( BIONEER , South Korea ) 를 이용 하 여 제조자 의 프로토콜 에 따라 cDNA 를 합성 하 였 다 . Oct - 4 에 특이 적 인 올리고머 를 사용 하 여 cDNA 를 증폭 시켰 다 . 증폭 반응 에 사용 한 서열 과 사이즈 는 다음 과 같 다 . Oct - 4 ( 218 bp ) 센스 서열 : gacaacaatgaaaatcttca - 3 ', 안티 센스 서열 : ttctggcgccggttacagaa - 3 ', GAPDH ( 403 bp , 대 조군 ) 센스 서열 : gagcttgacaaagtggtcgt - 3 ' 및 안티 센스 서열 : cccaagtccatgccatgccatcact - 3 '. 증폭 반응 에 사용 한 온도 조건 은 다음 과 같 다 [ 분리 ( denaturation ) - 94 ℃, 1 분 , 혼 성 ( annealing ) - 50 ℃, 1 분 , 연장 ( elongation ) - 72 ℃, 1 분 ] . 이 를 총 40 회 반복 해서 증폭 반응 을 실시 하 여 2 % 아가로스 겔 에서 전기영동 ( electrophoresis ) 하 고 Oct - 4 의 발현 을 UV 하 에서 확인 하 였 다 . 결과 는 도 3 에 나타내 었 다 .