면역 관련 유전자 에 대한 유전자 특이 적 프라이머 는 NCBI 데이터베이스 의 이용 가능 한 서열 에 기초 한 Primer 3 Plus 를 사용 하 여 디자인 하 였 다 ( 표 1 ) . 넙치 β - 액틴 을 하우스 키핑 유전자 로 선택 하 고 유전자 발현 에 사용 된 모든 프라이머 를 표 1 에 열거 하 였 다 . 유전자 발현 분석 을 위해 , ExicyclerTM 96 Real - Time Quantitative Thermal Block ( Bioneer , 한국 ) 에서 SYBR Green AccuPower ® PCR PreMix ( Bioneer ) 를 사용 하 여 PCR 을 수행 하 였 다 . 각 유전자 의 상대 적 인 정량화 를 위해 , 실험 군 과 비 실험 군 의 신장 , 피부 및 장 조직 으로부터 합성 된 cDNA 를 주형 으로 사용 하 였 다 . 반응 은 94 ℃ 에서 10 분 간 의 초기 변성 , 20 초 변성 ( 94 ℃), 어닐링 ( 온도 는 표 1 에 주어진다 ) 및 스캐닝 을 35 사이클 수행 한 20 ㎕ 의 최종 반응 부피 에서 ( 2 회 반복 ) 수행 하 였 다 . 임계 주기 ( Ct ) 값 은 Bioneer ExicyclerTM 96 Real - Time PCR 시스템 의 자동 설정 을 사용 하 여 결정 되 었 다 . 면역 반응 의 상대 적 인 정량화 는 2 - ΔΔ Ct 방법 을 사용 하 여 평가 하 였 고 , 바이러스 mRNA 는 정량 화 하 였 다 .