상기 된 변이 마우스 중쇄 유전자좌 에 14 개 의 부가 적 인 사람 V κ 유전자 절편 의 도입 을 위해 제 3 표적 화 벡터 를 조작 하 였 다 ( 참조 : 도 2 , 표적 화 벡터 3 ) . 15 개 연속 사람 V κ 유전자 절편 을 함유 한 160 , 579 bp 사람 게놈 단편 을 마우스 중쇄 유전자좌 의 마우스 게놈 서열 5 ' 을 함유 한 5 ' 상동 암 과 사람 게놈 κ 서열 을 함유 한 3 ' 상동 암 과 함께 조작 하 였 다 . 사람 V κ 2 - 30 유전자 절편 으로부터 의 상류 ( 5 ') 는 이전 의 표적 화 벡터 2 개 의 작 제 에 사용 된 5 ' 상동 암 과 동일 한 5 ' 마우스 상동 암 의 개시 전 의 부가 적 인 14 , 687 bp 사람 κ 서열 이 다 ( 참조 : 도 2 ) . 5 ' 상동 암 과 사람 κ 서열 의 개시 사이 에 재조합 효소 인식 부위 사이 에 연결 된 네오마이신 카세트 이 다 . 3 ' 상동 암 은 표적 화 벡터 2 의 사람 게놈 κ 서열 의 약 140 kb 의 균 등 5 ' 말단 에 상응 하 는 사람 게놈 κ 서열 의 21 , 275 bp 중복 서열 을 포함 하 였 다 ( 도 2 ) . 14 개 의 부가 적 인 사람 V κ 유전자 절편 의 삽입 을 위한 최종 표적 화 벡터 는 5 ' 부터 3 ' 으로 마우스 중쇄 유전자좌 의 마우스 게놈 서열 5 ' 약 20 kb 를 함유 한 5 ' 상동 암 , 일 차 재조합 효소 인식 부위 ( R 1 ) , 네오마이신 카세트 , 이 차 재조합 효소 인식 부위 ( R 2 ) 및 15 개 의 사람 V κ 유전자 절편 을 함유 하 는 약 161 kb 의 사람 게놈 κ 서열 ( 이 의 약 21 kb 는 표적 화 벡터 2 의 사람 κ 서열 의 5 ' 말단 과 중첩 하 고 이 표적 화 작 제물 을 위한 3 ' 상동 암 으로서 작용 한다 ) 을 포함 한다 . 이 표적 화 벡터 와 의 상동 재조합 은 재조합 시 키메라 κ 중쇄 의 형성 을 유도 하 는 마우스 중쇄 불변 유전자 에 작동 적 으로 연결 된 30 개 사람 V κ 유전자 절편 과 5 개 사람 J κ 유전자 절편 을 함유 한 변이 마우스 중쇄 유전자좌 를 형성 하 였 다 .