항체 는 상기 의 하이브리도마 상청 으로부터 Protein G 어피 니티 크로마토그래피 ( 4 내지 6 ℃ 하 ) 1 단계 공정 으로 정제 하 였 다 . Protein G 어피 니티 크로마토그래피 정제 후 의 버퍼 치환 공정 은 4 내지 6 ℃ 하 에서 실시 하 였 다 . 먼저 , PBS 로 평형 화 한 Protein G ( GE Healthcare Bioscience 사 ) 가 충전 된 컬럼 에 하이브리도마 의 배양 상청 을 어 플라이 하 였 다 . 배양 상청 액 이 컬 럼 에 모두 들어간 후 , 컬럼 용량 2 배 이상 의 PBS 로 컬 럼 을 세정 하 였 다 . 다음 으로 0 . 1 M 글라이신 / 염산 수용액 ( pH 2 . 7 ) 으로 용출 시켜 , 항체 가 포함 되 는 획 분 을 모았 다 . 모은 획 분 에 1 M Tris - HCl ( pH 9 . 0 ) 을 첨가 하 여 pH 7 . 0 내지 7 . 5 로 조제 한 후 에 , Centrifugal UF Filter Device VIVASPIN 20 ( 분획 분자량 UF 30 K , Sartorius 사 , 4 내지 6 ℃ 하 ) 으로 HBSor ( 25 mM 히스티딘 / 5 % 소르비톨 , pH 6 . 0 ) 로 의 버퍼 치환 을 행함 과 함께 농축 을 행하 여 , 항체 농도 를 1 mg / ml 이상 으로 조제 하 였 다 . 마지막 으로 Minisart - Plus filter ( Sartorius 사 ) 로 여과 하 여 , 정제 샘플 로 하 였 다 .