간단히 설명 하 면 , 세포 를 트립신 처리 하 여 대 수기 배 양물 로부터 수거 하 고 , 계수 한 후 , 세포주 에 의존 적 인 세포 밀도 ( 5 내지 10 . 000 개 생존 세포 / 웰 ) 로 96 - 웰 평저 미세 역가 플레이트 에 도말 하 였 다 . 세포 를 대 수기 성장 으로 회복 시키 는 24 시간 후 , 0 . 010 mL 의 배양 배지 ( 6 개 의 대조 웰 / 플레이트 ) 또는 막베 신 을 포함 하 는 배양 배지 를 웰 에 가하 였 다 . 각각 의 농축물 을 삼중 으로 도말 한다 . 화합물 을 2 개 의 농도 ( 0 . 001 mM 및 0 . 01 mM ) 로 적용 하 였 다 . 연속 노출 4 일 후 , 시험 화합물 존재 또는 부재 하의 세포 배양 배지 를 0 . 2 mL 의 피로 피디 움 요오 다 이드 ( PI ) 용액 ( 7 mg / L ) 으로 대체 하 였 다 . 생존 새 포 의 비율 을 측정 하 기 위해서 , 플레이트 를 냉동 시킴 으로써 세포 를 침투 처리 하 였 다 . 플레이트 를 해동 시킨 후 , Cytofluor 4000 마이크 로 플레이트 판독기 ( 여기 530 nm , 방사 620 nm ) 를 사용 하 여 형광 을 측정 하 였으며 , 생존 세포 의 전체 수 에 대해 직접 적 인 관계 를 나타내 었 다 .