본 발명자 들 은 그 이후 항 - 인간 유래 XO 40 단일 클론 항체 가 T 세포 에 직접 적 으로 작용 하 여 nTreg 의 억제 기능 을 방해 할 수 있 는지 확인 하 고자 하 였 다 . 신선 하 게 분류 한 CD 4 + T 작용기 세포 나 nTreg 를 항 - CD 3 로 오버 나 잇 미리 활성 화 시킨 다음 , 항 - 인간 유래 OX 40 단일 클론 항체 를 4 시간 동안 첨가 해 주 었 다 . 이후 T 효과기 세포 들 을 세 척하 고 , 동일 한 숫자 의 CD 14 + 단핵 백혈구 와 항 - CD 3 의 존재 하 에 nTregs 를 함께 배양 하 였 다 . 유사 하 게 , 미리 자극 한 nTregs 를 세 척하 고 전처리 하 지 않 은 CFSE - 표지 한 T 효과기 세포 와 배양 하 였 다 .