배 양물 들 중 일부 에서 , VII 기를 18 일 까지 확장 시켰 다 . 샘플 들 을 V 기 , VI 기에 , 그리고 실시간 PCR 분석 , 면역 형광 ( immune fluorescence ; IF ) 염색 및 FACS 분석 을 위하 여 수집 하 였 다 . FACS 및 면역 형광 ( IF ) 염색 둘 모두 에 있 어서 , NKX 6 . 1 항체 를 유니 버시 티 오브 아이오 와 하이브리도마 은행 ( University of Iowa hybridoma bank ; 카탈로그 번호 : F 55 A 12 ) 으로부터 획득 하 고 , CDX 2 항체 를 압 캄 ( Abcam ; 카탈로그 번호 : ab 76541 , 미국 매사추세츠주 캠 브리지 소재 ) 으로부터 획득 하 고 , PDX - 1 항체 를 압 캄 ( 카탈로그 번호 : ab 47267 ) 으로부터 구매 하 였 다 . 도 3 에서 는 다양 한 시기 의 분화 에서 의 배 양물 들 의 형태 가 강조 되 어 있 다 . II 기 이후 , 배 양물 들 은 III 기 내지 VI 기 전체 에 걸쳐 균질 한 형태 를 나타냈 다 . 도 4 에 는 다양 한 시기 의 분화 에 있 어서 FACS 에 의해 측정 한 NKX 6 . 1 의 발현 이 도시 되 어 있 다 . 이 도면 에서 는 실시 예 3 에서 개시 한 프로토콜 이 후기 의 분화 내내 NKX 6 . 1 의 높 은 발현 을 유지 할 수 있 음 이 강조 되 어 있 다 . 도 5 는 상기 프로토콜 의 V 기 및 VII 기에 있 어서 의 PDX 1 , NKX 6 . 1 , 및 CDX 2 발현 에 대한 IF 염색 을 나타낸다 . NKX 6 . 1 양성 세포 중 90 % 초과 가 또한 PDX 1 양성 인 반면 , 상기 세포 중 10 % 미만 은 CDX 2 에 대하 여 양성 으로 염색 되 었 다 .