S . 세레비 지에 S 288 C 로부터 의 염색체 DNA 를 ATCC ( ATCC 204508 D ) 에서 수득 하 였 다 . 제 조사 의 지시 사항 에 따라 PfuTurbo 를 사용 하 여 프라이머 MVKF ( 5 '- A G G A G G T A A A A A A A C A TGTCATTACCGTTCTTAACTTCTGC , SEQ ID NO : 21 ) 및 MVK - PstI - R ( 5 '- A T G G C T G C A G G C C T A T C G C A A A T T A G C TTATGAAGTCCATGGTAAATTCGTG , SEQ ID NO : 22 ) 을 사용 하 여 S . 세레비 지에 의 염색체 로부터 MVK 유전자 를 증폭 하 였 다 . 1 . 2 % E - 겔 ( Invitrogen ) 을 통한 전기영동 으로 올바른 크기 의 PCR 생성물 ( 1370 bp ) 을 확인 하 고 pZeroBLUNT TOPO 내 에 클로닝 하 였 다 . 생성 된 플라스미드 를 pMVK 1 로 지정 하 였 다 . 플라스미드 pMVK 1 을 SacI 및 Taq 1 제한 엔 도 뉴클레아제 로 소화 시키 고 절편 을 겔 정제 하 고 , SacI 및 BstBI 으로 소화 된 pTrcHis 2 B 에 라 이게 이 션 하 였 다 . 생성 된 플라스미드 를 pTrcMVK 1 로 지칭 하 였 다 .