종양 스페로이드 의 제조 : 액체 오버레이 플레이트 ( liquid overlay plates ) 를 원형 바닥 96 - 웰 플레이트 ( 50 ul / 웰 ) 에 첨가 된 DMEM 중 녹 은 1 % 아가로스 를 이용 해 만든 다 . 예비 - 컨 플 루 언 트 단층 ( pre - confluent monolayer ) 으로 배양 된 암 세포 를 트립신 처리 하 고 250 , 000 개 종양 세포 / ml 의 최종 부피 로 희석 시킨다 . 생존 능력 ( viability ) 을 트립 판 블루 ( Trypan blue ) 를 이용 해 결정 한다 . 세포 를 100 ㎕/ 웰 로 아가로스 가 코팅 된 플레이트 에 플 레이팅 한다 . 48 시간 후 세포 는 스페로이드 를 형성 하 고 , 이 를 마우스 체임버 내 로 이식 하 기 전 에 피 킹 ( pick ) 하 고 무 혈청 배지 에서 세척 한다 . 생존 능력 을 트립 판 블루 를 이용 해 결정 한다 . 이 식 된 스페로이드 의 크기 는 동물 간 에 변화 를 최소 화 하 기 위해 정확 하 게 결정 할 수 있 다 .