본 발명 에서 상기 유전자 를 숙주 세포 의 염색체 상 에 삽입 하 는 방법 으로 는 통상 적 으로 알려진 유전자 조작 방법 을 사용 할 수 있 으며 , 비 바이러스 전달 방법 은 전지 천 공법 , 리포 펙 션 , 미세 주사 , 탄도 법 , 비로 솜 , 리포솜 , 면역 리포솜 , 다 가 양 이온 또는 지질 : 핵산 접합체 , 네이키드 DNA , 인공 바이론 및 화학 물질 촉진 DNA 유입 을 포함 한다 . 소소 노 포레이 션 , 예 를 들 어 Sonitron 2000 시스템 ( Rich - Mar ) 을 이용 한 방법 도 핵산 의 전달 에 사용 할 수 있 으며 , 다른 대표 적 인 핵산 전달 시스템 은 Amaxa Biosystems ( Cologne , Germany ) , Maxcyte , Inc . ( Rockville , Maryland ) 및 BTX Molesular Syetem ( Holliston , MA ) 의 방법 을 포함 한다 . 리포 펙 션 방법 은 미국 특허 제 5 , 049 , 386 호 , 미국 특허 제 4 , 946 , 787 호 및 미국 특허 제 4 , 897 , 355 호 에 명시 되 어 있 으며 리포 펙 션 시약 은 상업 적 으로 시판 되 고 있 으며 , 예 를 들 어 , TransfectamTM 및 LipofectinTM 이 있 다 . 폴리뉴클레오티드 의 효과 적 인 리 셉 터 - 인식 리포 펙 션 에 적당 한 양이온 또는 중성 지질 은 Felgner 의 지질 을 포함 하 며 ( WO 91 / 17424 및 WO 91 / 16024 ) , 생체 외 도입 을 통해 세포 로 , 생체 내 도입 을 통해 표적 조직 으로 전달 할 수 있 다 . 면역 지질 복합체 등 표적 리포솜 을 포함 하 는 지질 : 핵산 복합체 의 제조 방법 은 당해 업계 에 잘 알려져 있 다 ( Crystal , Science . , 270 : 404 - 410 , 1995 ; Blaese et al . , Cancer Gene Ther . , 2 : 291 - 297 , 1995 ; Behr et al . , Bioconjugate Chem . , 5 : 382389 , 1994 ; Remy et al . , Bioconjugate Chem . , 5 : 647 - 654 , 1994 ; Gao et al . , Gene Therapy . , 2 : 710 - 722 , 1995 ; Ahmad et al . , Cancer Res . , 52 : 4817 - 4820 , 1992 ; 미국 특허 제 4 , 186 , 183 호 ; 미국 특허 제 4 , 217 , 344 호 ; 미국 특허 제 4 , 235 , 871 호 ; 미국 특허 제 4 , 261 , 975 호 ; 미국 특허 제 4 , 485 , 054 호 ; 미국 특허 제 4 , 501 , 728 호 ; 미국 특허 제 4 , 774 , 085 호 ; 미국 특허 제 4 , 837 , 028 호 ; 미국 특허 제 4 , 946 , 787 호 ) .