C 57 BL / 6 생쥐 T 세포 가 음성 선별 ( Stem Cell Technologies 19851 A ) 에 의해 비장 으로부터 > 99 % 순도 까지 단리 되 었 다 . 이 들 세포 는 TIGIT 를 상향 조절 하 기 위해 , 평판 결합 된 항 - CD 3 클론 145 - 2 C 11 ( BioLegend 100302 ) 로 24 시간 동안 활성 화 되 었 다 . 200 , 000 개 의 세포 가 8 - 포인트 , 3 - 배 적정 ( 30 내지 0 . 014 μ g / mL ) 의 각 항 - TIGIT 항체 로 4 ℃ 에서 30 분 동안 염색 되 었 다 . 이 들 항 - TIGIT 항체 는 PE 에 접합 된 다중 클론 염소 항 인간 IgG ( Jackson ImmunoResearch 109 - 116 - 098 ) 로 검출 되 었 다 . 표본 은 FACSCalibur 유세포 분석기 에서 분석 되 었 다 . FSC / SSC 게이팅 된 림프구 개체군 의 중앙 형광 강도 가 각 항체 에 대해 결정 되 었 다 . 로그 ( X ) 변환 된 데이터 의 비 선형 회귀 가 GraphPad Prism 6 에서 EC 50 값 을 산출 하 는 데 이용 되 었 다 . 도 4 는 활성 화 된 생쥐 비장 T 세포 에 항 - TIGIT 클론 13 과 25 의 결합 의 결합 적정 및 EC 50 을 보여준다 .