반응 용액 이 들 어 있 는 웰 ( well ) 에 150 mM NaCl , 0 . 1 % PEG - 8000 이 함유 되 어 있 는 100 mM 트리스 완충 용액 ( pH 7 . 8 ) 에 13 nM 로 용해 시킨 인자 Xa 20 uL 를 각각 가하 여 효소 에 의한 가수 분해 반응 을 개시 하 였 다 . 이 반응 의 반응 속도 론 적 ( kinetic ) 분석 은 반응 속도 론 적 플레이트 판독기 ( Molecular Devices , Spectramax 190 ) 을 37 ℃ 에서 20 분 간 수 행하 였 다 . S - 2765 발색 성 기질 을 가한 후 5 분 동안 의 반응 에 의해 생성 되 는 파라 - 니트 로 아닐리드 의 양 을 405 nm 에서 흡광도 의 변화 로 모니터 하 였 다 .