본 발명 의 핵산 을 제조 하 는 방법 으로서 는 , 특별히 한정 되 지 않 고 , 공지 의 화학 합성 을 이용 하 는 방법 , 또는 , 효소 적 전사법 등 을 들 수 있 다 . 공지 의 화학 합성 을 이용 하 는 방법 으로서 , 포스 포 로 아미 다 이트 법 , 포스 포로 티오 에이트 법 , 포스 포트리 에스테르 법 , CEM 법 [ Nucleic Acid Research , 35 , 3287 ( 2007 ) ] 등 을 들 수 있 고 , 예컨대 , ABI 3900 하이 스루풋 핵산 합 성기 ( 어 플 라이드 바이오 시스템스 사 제조 ) 에 의해 합성 할 수 있 다 . 합성 이 종료 한 후 는 , 고상 으로부터 의 이탈 , 보호기 의 탈 보호 및 목적물 의 정제 등 을 행한다 . 정제 에 의해 , 순도 90 % 이상 , 바람직 하 게 는 95 % 이상 의 핵산 을 얻 는 것 이 바람직 하 다 . 2 본 쇄 핵산 의 경우 에 는 , 합성 및 정제 한 센스 쇄 , 안티 센스 쇄 를 적당 한 비율 , 예컨대 , 안티 센스 쇄 1 당량 에 대하 여 , 센스 쇄 0 . 1 ∼ 10 당량 , 바람직 하 게 는 0 . 5 ∼ 2 당량 , 보다 바람직 하 게 는 0 . 9 ∼ 1 . 1 당량 , 더욱 바람직 하 게 는 등 몰 량 으로 혼합 한 후 , 어닐링 을 행하 여 이용 하 여도 좋 고 , 또는 , 혼합 한 것 을 어닐링 하 는 공정 을 생략 하 고 직접 이용 하 여도 좋 다 . 어닐링 은 , 2 본 쇄 핵산 을 형성 할 수 있 는 조건 이 면 어떠 한 조건 으로 행하 여도 좋 지만 , 통상 , 센스 쇄 , 안티 센스 쇄 를 거의 등 몰 량 으로 혼합 한 후 , 94 ℃ 정도 에서 5 분 정도 가열 한 후 , 실온 까지 서 냉 함 으로써 행해진다 . 본 발명 의 핵산 을 제조 하 는 효소 적 전사법 으로서 는 , 원 하 는 염기 서열 을 갖 는 플라스미드 또는 DNA 를 주형 으로서 파지 RNA 폴리 메라 아제 , 예컨대 , T 7 , T 3 , 또는 SP 6 RNA 폴리 메라 아제 를 이용 한 전사 에 의한 방법 을 들 수 있 다 .