또한 , 상기 일반식 Ⅱ 의 NVS 프라이머 에서 , 뉴클레오타이드 변이 에 해당 하 는 또는 상보 적 인 뉴클레오타이드 는 Vr 의 가운데 에 위치 해 있 다 . 예 를 들 어 , Vr 이 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 및 13 개 의 뉴클레오타이드 잔기 로 이루어져 있 는 경우 , 뉴클레오타이드 변이 에 해당 하 는 또는 상보 적 인 뉴클레오타이드 는 Vr 의 3 ‘- 말단 으로부터 각각 3 - 4 , 3 - 5 , 4 - 5 , 4 - 6 , 5 - 6 , 5 - 7 , 6 - 7 및 6 - 8 뉴클레오타이드 에 위치 해 있 는 것 이 바람직 하 다 .