총 RNA 는 TRIzol RNA Isolation Reagents ( QIAGEN ) 를 이용 하 여 추출 하 였 다 . 총 RNA 0 . 5 μ g 은 iScript cDNA synthesis kit ( Bio - Rad ) 를 사용 하 여 제조 회사 의 프로토콜 에 따라 역전사 반응 을 이용 한 이중 나선 cDNA 를 합성 하 였 다 . 이 중 나선 cDNA 0 . 0125 μ g 으로 PCR 을 수행 하 였 다 . 유전자 증폭 을 위한 프라이머 염기 서열 은 하 기 표 2 와 같 다 . 대 조군 으로 는 항 존 유전자 ( housekeeping gene ) 인 GAPDH ( glyceraldehyde - 3 - phosphate dehydrogenase ) 를 사용 하 였 다 . PCR 은 95 ℃, 5 분 에서 DNA 를 변성 시킨 후 , 94 ℃, 1 분 ; 65 ℃, 2 분 ; 및 70 ℃, 1 분 간 반응 시키 는 사이클 을 30 회 반복 하 였 다 . PCR 최종 산물 은 1 % 아가로오스 겔 에서 전기영동 하 였 고 , EtBr ( ethidium bromide ) 로 염색 하 여 확인 하 였 다 . 각 시료 의 필라 그린 의 PCR 산물 은 GAPDH 양 을 표준 화 하 여 대 조군 을 100 % 로 하 고 이 에 대한 상대 적 인 양 을 환산 하 였 다 . GAPDH 와 필라 그린 의 PCR 밴드 는 ImageJ 프로그램 ( National Institutes of Health , 미국 ) 을 이용 하 여 정량 하 였 다 .