BL 21 star ( 입 수처 : Novagen ) 박테리아 세포 에 42 ℃ 로 45 초 동안 열 충격 을 가해 세포 내 로 실시 예 1 에서 제작 한 DNA 구성체 들 을 전달 하 고 고체 배지 ( 입 수처 : Difco , 명칭 : LB plate ) 에 도말 했 다 . 14 ~ 16 시간 동안 37 ℃ 에서 배양 하 여 콜로니 ( colony ) 가 형성 되 면 액체 배지 ( 입 수처 : Difco , 명칭 : LB broth ) 에 콜로니 를 접종 하 고 후 37 ℃ 에서 배양 했 다 . 14 ~ 16 시간 후 보다 더 많 은 용량 의 배지 ( 입 수처 : Difco , 명칭 : LB broth ) 로 옮긴 후 흡광도 가 0 . 5 ~ 0 . 6 O . D . 일 때 1 M IPTG ( isopropyl - beta - D - thiogalactopyranoside ) 를 총 배지 양 의 1 / 1000 정도 첨가 하 였 다 . 다음 , 25 ℃ 에서 24 시간 동안 배양기 내 에서 단백질 을 발현 시켰 다 . 모든 단백질 들 이 정상 적 인 형태 ( soluble ) 로서 세포 내 에서 발현 되 었 음 을 확인 하 였 다 .