불활성 조건 하 에서 , 4 , 5 - 디 하이드로 - 11 - O - 데 메틸 - 15 - 데메 톡 시 - 18 , 21 - 디 데 하이드로 - 21 - 데 옥소 막베 신 ( 260 mg , 0 . 517 mmol , 1 당량 ) 을 디 클로로메탄 ( 20 ml ) 중 에 용해 시켰 다 . 4 - 니트 로 페닐 클로 로 포르 메이트 ( 130 mg , 0 . 646 mmol , 1 . 25 당량 ) 를 디 클로로메탄 ( 1 ml ) 중 에 용해 시키 고 , 21 - 데스 옥소 안사 마이신 용액 에 첨가 하 였 다 . 반응물 을 환류 하 에 가열 하 고 , 2 , 6 - 루티 딘 ( 0 . 078 ml , 0 . 672 mmol , 1 . 30 당량 ) 을 가하 였 다 . 환류 하의 3 시간 가열 후 , 반응물 을 추가 의 디 클로로메탄 으로 50 ml 로 희석 시키 고 , 1 M HCl aq . ( 2 x 50 ml ) 및 물 ( 2 x 50 ml ) 로 세척 한 후 , 유기물 을 황산나트륨 상 에서 건조 시키 고 , 진공 하 에 감소 시켜 회백색 고체 ( 420 mg ) 을 수득 하 였 다 . 이 물질 을 Sephadex LH 20 컬럼 상 에서 정제 하 였 다 . Sephadex LH 20 을 메탄올 / 디 클로로메탄 ( 1 : 1 ) 중 에서 밤새 팽창 시키 고 , 컬럼 을 제조 하 였 다 ( 3 cm 직경 x 90 cm ) . 이 물질 을 메탄올 / 디 클로로메탄 ( 1 : 1 ) 에서 컬럼 으로부터 용출 시키 고 , 3 ml 분획 물 을 수집 하 였 다 . 분획 물 60 내지 69 가 목적 하 는 생성물 을 포함 하 였으며 , 이 를 모아 건조 시켰 다 ( 188 mg , 회백색 고체 ) . 이 를 3 개 의 분리 된 주 입물 로 분취 용 ( preparative ) HPLC 에 의해 더욱 정제 하 였 다 . 배합 한 분획 물 을 모은 후 , 진공 하 에 건조 시켜 목적 하 는 화합물 ( 93 . 3 mg , 회백색 고체 , 1 . 39 x 10 - 4 mol , 27 %) 을 수득 하 였 다 .