20 시간 의 인 큐 베이 션 의 종결 무렵 에 , 샘플 을 형광 - 프로브 - 표지 된 항체 ( 15 μ l PE 쥐 항 - 인간 CD 20 , BD 파마 겐 ( Pharmingen ) , # 555623 , 및 / 또는 20 μ l APC 쥐 항 - 인간 CD 69 , BD 파마 겐 # 555533 ) 와 함께 30 분 동안 , 37 C , 5 % CO 2 , 100 % 습도 에서 인 큐 베이 션 한다 . 보상 조정 및 초기 전압 설정 을 위한 단일 염색물 , 비 염색물 및 유도 된 대 조군 이 포함 되 어 있 다 . 이어서 , 샘플 을 1 ml 의 1 X 파마 겐 라이즈 완충제 ( BD 파마 겐 # 555899 ) 에 의해 용해 시키 고 , 플레이트 를 1800 rpm 에서 5 분 동안 원심 분리 한다 . 상청 액 을 흡입 에 의해 제거 하 고 , 잔여 펠릿 을 또 다른 1 ml 의 1 X 파마 겐 라이즈 완충제 로 다시 용해 시키 고 , 플레이트 를 상기 와 같이 회전 시킨다 . 상청 액 을 뽑아내 고 , 잔여 펠릿 을 FACs 완충제 ( PBS + 1 % FBS ) 로 세척 한다 . 최종 회전 후 , 상청 액 을 제거 하 고 , 펠릿 을 180 μ l 의 FACs 완충제 에서 재현 탁 시킨다 . 샘플 을 BD LSR II 유세포 분석기 ( flow cytometer ) 의 HTS 96 웰 시스템 상 에서 실시 되 기 에 적합 한 96 웰 플레이트 로 이동 시킨다 .