3 일 간 배양 한 골수 유래 일차 대식세포 를 트립신 으로 떼 어 낸 후 12 - 웰 플레이트 에 웰 당 5 x 105 개 의 세포 가 들어가 도록 넣 는다 . 이때 MEM - α 배지 에 는 30 ng / ml 농도 의 M - CSF 를 첨가 하 고 , 분화 유도 를 위해서 는 20 ng / ml 농도 의 RANKL 을 추가 로 첨가 한다 . 호장근 과 계심 의 1 : 1 복합 추출물 은 0 , 10 , 20 , 및 50 ㎍/ ml 농도 로 각각 처리 후 ( 최종 DMSO 농도 는 0 . 1 %) 37 ℃, 5 % CO 2 조건 에서 3 일 간 배양 하 며 48 시간 째 에 배지 를 새롭 게 교체 한다 .