먼저 , 2 μ L 의 정제 된 단백질 을 1 mM 레바 우디 오시드 D ( ChromaDex , > 93 % 순도 ) 및 2 mM ADP - 글루코스 와 함께 100 μ L 의 총 반응 부피 의 50 mM 트리스 - HCl 완충제 , pH 7 . 5 , 3 mM MgCl 2 로 희석 하 였 다 . 반응 은 1 - 18 시간 동안 300 RPM 으로 진탕 하 면서 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 30 ℃ 에서 수행 하 였 다 . 상기 설명 한 반응 을 0 . 2 % 포름산 을 갖 는 0 . 5 % 부피 / 부피 아세 토니 트릴 로 켄 칭 하 고 , 원심 분리 에 의해 침전 시켰 다 .