그 후 , 상기 준비 한 시료 20 ㎕ 를 비 만 세포 에 첨가 한 후 37 ℃ 온도 에서 30 분 간 5 % CO 2 배양기 에서 배양 하 였 다 . 이후 인간 항 - IgE 항체 ( Biolegend , Cat No . 325502 , 0 . 5 ㎍/㎖) 를 20 ㎕ 첨가 한 후 , 다시 37 ℃ 온도 에서 30 분 간 5 % CO 2 배양기 에서 배양 하 였 다 . 이후 1 , 500 rpm 및 4 ℃ 온도 조건 에서 원심 분리 를 한 후 , 상층 액 30 ㎕ 를 분리 하 였 다 . 분리 한 상층 액 30 ㎕ 와 기질 ( 4 - Nitrophenyl N - acetyl - β - glucosaminide , 5 . 84 mM ) 30 ㎕ 를 잘 혼합 한 후 , 37 ℃ 온도 에서 25 분 간 5 % CO 2 배양기 에서 배양 하 였 다 . 그 후 , 0 . 1 M 소디 움 카보 네이트 버퍼 ( sodium carbonate buffer , pH 10 ) 140 ㎕ 를 넣 고 반응 을 종결 시켰 다 . 이후 , 405 nm 파장 에서 흡광도 를 측정 하 여 , 분비 된 베타 - 헥 소사 미니 다제 ( β - hexosaminidase ) 의 상대 량 을 비교 하 여 각 시료 의 농도 에 따른 비 만 세포 억제 효과 를 확인 하 였 다 . 그 결과 는 도 8 에 나타내 었 다 .