항원 은 발현 시 생체 내 에서 바 이오티 닐 화 되 었 다 . 하 기 프로토콜 에 따라 용액 중 에서 선별 을 수행 하 였 다 : ( i ) 총 1 ㎖ 의 부피 로 라이브러리 DP 88 - 3 의 약 1012 개 파지 미드 입자 와 100 nM 의 바 이오티 닐 화 된 인간 TNC A 2 를 0 . 5 시간 동안 결합 시키 는 단계 ; ( ii ) 5 . 4 x 107 개 의 스 트 렙 타비 딘 - 코팅 된 자기 입자 를 첨가 하 여 바 이오티 닐 화 된 인간 TNC A 2 및 부착 된 파지 를 10 분 동안 포획 하 는 단계 ; ( iii ) 1 ㎖ 의 PBS / 트윈 ( Tween ) - 20 을 5 회 사용 하 고 1 ㎖ 의 PBS 를 5 회 사용 하 여 비드 를 세척 하 는 단계 ; ( iv ) 1 ㎖ 의 100 mM TEA ( 트라이 에틸아민 ) 를 첨가 하 여 10 분 동안 파지 입자 를 용출 하 고 500 ㎕ 의 1 M 트라이스 / HCl ( pH 7 . 4 ) 을 첨가 하 여 중화 시키 는 단계 ; 및 ( v ) 대 수기 ( log - phase ) 에스 케 리키아 콜라 이 TG 1 세포 를 재감염 시키 고 , 헬퍼 파지 VCSM 13 으로 감염 시킨 후 , 후속 선별 라운드 에서 사용 될 파지 미드 입자 의 PEG / NaCl 침전 을 수행 하 는 단계 .