이 에 따라 , 본 발명 의 방법 은 DNA 를 DNA 분자 내 의 표적 부위 에 부위 - 특이 적 뉴클레아제 를 표적 화 하 기 위한 가이드 서열 을 포함 하 는 가이드 RNA 에 접촉 시키 는 단계 를 추가 로 포함 할 수 있 다 . 바람직 하 게 DNA 와 접촉 하 는 가이드 RNA 는 뉴클레아제 도메인 ( 들 ) 과 동시 에 상호 작용 한다 . 당업자 는 CRISPR - 뉴클레아제 를 포함 하 는 CRISPR - CAS 시스템 의 상이 한 구성 요소 를 제조 하 는 방법 을 알 고 있 다 . 종래 기술 에서 , 이 의 디자인 및 사용 에 관한 수 많 은 보고서 가 이용 가능 하 다 . 참조 예 . 가이드 RNA 의 디자인 및 이 의 CAS - 단백질 ( S . pyogenes 로부터 본래 얻 어 짐 ) 과 병 용 사용 에 대한 Haeussler 등 에 의한 최신 리뷰 ( J Genet Genomics . ( 2016 ) 43 ( 5 ) : 239 - 50 . doi : 10 . 1016 / j . jgg . 2016 . 04 . 008 . ) , 또는 Lee 등 에 의한 최신 리뷰 ( Plant Biotechnology Journal ( 2016 ) 14 ( 2 ) 448 - 462 ) . 이것 들 은 모두 본원 에 참 고 문헌 으로 포함 된다 . 따라서 , 당업자 는 촉매 적 으로 활성 적 인 CRISPR - 뉴클레아제 와 조합 될 때 DNA 분자 의 미리 정의 된 부위 에 스트랜드 브레이크 가 도입 되 는 방식 으로 가이드 RNA 를 설계 하 는 방법 에 대해 잘 알 고 있 다 .