림프종 세포주 A 4 / Fuk 세포 ( JCRB 세포 뱅크 ) 를 5 % FBS 함유 PBS 로 적당 한 농도 로 조제 하 고 , LIVE / DEAD Fixable Near - IR Dead Cell Stain Kit 를 첨가 하 고 , 4 ℃ 에서 30 분 정치 하 였 다 . 5 % FBS 함유 PBS 로 2 회 세정 후 , 5 % FBS 함유 PBS 로 1 × 106 세포 / mL 의 농도 로 조제 하 고 , 100 μ L / well 로 96 - well U 바닥 마이크 로 플레이트 에 파종 하 고 , 원심 후 상청 을 제거 하 였 다 . 5 % FBS 함유 PBS 로 희석 한 , 실시 예 12 에서 조제 한 항 - GPRC 5 D - 항 - CD 3 이중 특이 성 분자 C 2037 - C 3 E - 7034 내지 C 3022 - C 3 E - 7036 을 100 μ L / well 첨가 하 고 , 4 ℃ 에서 60 분 정치 하 였 다 . 5 % FBS 함유 PBS 로 2 회 세정 후 , 5 % FBS 함유 PBS 로 희석 한 Penta - His Alexa Fluor 488 을 30 μ L / well 첨가 하 고 , 4 ℃ 에서 30 분 정치 하 였 다 . 5 % FBS 함유 PBS 로 2 회 세정 후 , 5 % FBS 함유 PBS 로 재현 탁 시키 고 , 플로 사이토 미터 ( FACSCanto ( 상표 ) II ) 로 검출 을 행하 였 다 . 데이터 해석 은 Flowjo 로 행하 고 , 사 세포 를 제거 한 획 분 의 Alexa Fluor 488 의 평균 형광 강도 ( MFI ) 를 산출 하 고 , 항체 첨가 샘플 의 MFI 값 으로부터 항체 미첨 가 샘플 의 MFI 값 을 빼 서 MFI 값 의 상대 치 ( rFMI ) 를 계산 하 였 다 . 도 196 에 나타내 는 바 와 같이 , 항 - GPRC 5 D - 항 - CD 3 이중 특이 성 분자 는 내인성 인간 GPRC 5 D 발현 세포 에 결합 하 는 것 이 나타났 다 .