실시 형태 에서 , Cas 9 분자 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 Cas 9 분자 ) 는 N - 말단 NLS 및 C - 말단 NLS 를 포함 ( 예 를 들 어 N - 말단 에서 C - 말단 으로 NLS - Cas 9 - NLS 를 포함 ) 하 며 , 예 를 들 어 각각 의 NLS 는 SV 40 NLS ( PKKKRKV ( SEQ ID NO : 206 ) ) 이 다 . 실시 형태 에서 , Cas 9 분자 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 Cas 9 분자 ) 는 N - 말단 NLS , C - 말단 NLS 및 C - 말단 His 6 태그 ( SEQ ID NO : 247 ) 를 포함 ( 예 를 들 어 N - 말단 에서 C - 말단 으로 NLS - Cas 9 - NLS - His 태그 를 포함 ) 하 며 , 예 를 들 어 각 NLS 는 SV 40 NLS ( PKKKRKV ( SEQ ID NO : 206 ) ) 이 다 . 실시 형태 에서 , Cas 9 분자 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 Cas 9 분자 ) 는 N - 말단 His 태그 ( 예 를 들 어 His 6 태그 ( SEQ ID NO : 247 ) ) , N - 말단 NLS 및 C - 말단 NLS 를 포함 ( 예 를 들 어 N - 말단 에서 C - 말단 으로 His 태그 - NLS - Cas 9 - NLS 를 포함 ) 하 며 , 예 를 들 어 각 NLS 는 SV 40 NLS ( PKKKRKV ( SEQ ID NO : 206 ) ) 이 다 . 실시 형태 에서 , Cas 9 분자 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 Cas 9 분자 ) 는 N - 말단 NLS 및 C - 말단 His 태그 ( 예 를 들 어 His 6 태그 ( SEQ ID NO : 247 ) ) 를 포함 ( 예 를 들 어 N - 말단 에서 C - 말단 으로 His 태그 - Cas 9 - NLS 를 포함 ) 하 며 , NLS 는 SV 40 NLS ( PKKKRKV ( SEQ ID NO : 206 ) ) 이 다 . 실시 형태 에서 , Cas 9 분자 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 Cas 9 분자 ) 는 N - 말단 NLS 및 C - 말단 His 태그 ( 예 를 들 어 His 6 태그 ( SEQ ID NO : 247 ) ) 를 포함 ( 예 를 들 어 N - 말단 에서 C - 말단 으로 NLS - Cas 9 - His 태그 를 포함 ) 하 며 , 예 를 들 어 NLS 는 SV 40 NLS ( PKKKRKV ( SEQ ID NO : 206 ) ) 이 다 . 실시 형태 에서 , Cas 9 분자 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 Cas 9 분자 ) 는 N - 말단 His 태그 ( 예 를 들 어 His 8 태그 ( SEQ ID NO : 248 ) ) , N - 말단 절단 도메인 ( 예 를 들 어 담배 식각 바이러스 ( TEV ) 절단 도메인 ( 예 를 들 어 서열 ENLYFQG ( SEQ ID NO : 230 ) 를 포함 ) ) , N - 말단 NLS ( 예 를 들 어 SV 40 NLS ; SEQ ID NO : 206 ) , 및 C - 말단 NLS ( 예 를 들 어 SV 40 NLS ; SEQ ID NO : 206 ) 를 포함 ( 예 를 들 어 N - 말단 에서 C - 말단 으로 His 태그 - TEV - NLS - Cas 9 - NLS 를 포함 ) 한다 . 임의 의 상기 실시 형태 에서 , Cas 9 는 SEQ ID NO : 205 의 서열 을 갖 는다 . 대안 적 으로 , 임의 의 상기 실시 형태 에서 , Cas 9 는 , 예 를 들 어 본원 에 기재 된 , SEQ ID NO : 205 의 Cas 9 변이체 의 서열 을 갖 는다 . 임의 의 상기 실시 형태 에서 , Cas 9 분자 는 His 태그 와 분자 의 또 다른 부분 사이 에 링커 , " 예 를 들 어 GGS 링커 를 포함 한다 . 상기 기재 된 예시 적 인 Cas 9 분자 의 아미노산 서열 이 아래 에 제공 된다 . "" iProt "" 식별자 는 도 6 에서 의 것 과 매치 된다 . "