먼저 , 81 passage 의 HaCaT 세포 를 5 × 105 / well 의 세포 밀도 로 6 - well plate 에 seeding 후 16 시간 동안 free media 로 배양 한 다음 , 본 발명 의 펩타이드 를 각각 10 , 50 , 100 μ M 의 농도 로 1 시간 동안 처리 하 였 다 . PBS 로 세척 하 고 PBS 를 채운 후 다시 20 mJ / cm 2 의 UVB 를 1 시간 전 조사 하 였 다 . 그리고 다시 본 발명 의 펩타이드 를 각각 상기 의 농도 로 4 시간 동안 처리 하 였 다 . positive control 은 상기 펩타이드 대신 에 NaC 2 . 5 mM 및 Quercetin 50 μ M 를 처리 한 것 으로 하 였 다 . 세포 를 상기 펩타이드 와 4 시간 동안 반응 시킨 후 세포 로부터 상기 실험 예 2 에서 와 동일 한 방법 을 통해 RNA 를 분리 한 다음 , 분리 된 RNA 를 cDNA 로 역전사 시켜 SIRT 1 의 프라이머 ( 표 2 ) 및 AQP 3 의 프라이머 ( 표 5 ) 를 이용 하 여 RT - PCR 을 수행 하 였 다 ( cDNA 중합 키트 및 PCR pre - mix : Intron , Korea ) . 각 처리 군 의 전체 RNA 량 비교 를 위해 사용 된 GAPDH 의 프라이머 는 상기 표 2 의 서열 을 가진 것 을 이용 하 였 다 .