상이 한 펩티드 유사 체 들 ( 최종 농도 2 ㎛) 을 0 , 2 , 4 , 6 , 12 및 24 시간 동안 DPP IV ( 1 : 25 mU ) 또는 혼주 인간 혈장 ( pooled human plasma ) ( 7 . 5 ㎕) 또는 가장 위액 ( pH 1 . 5 ; HCl , NaCl 및 펩신 조성물 ) 또는 가장 장액 ( pH 7 . 5 ) 또는 인간 간 미세 소체 와 인 큐 베이 션 시켰 다 ( 37 ℃; 50 mM 트리 에탄올아민 - HCl 버퍼 ; pH 7 . 8 ) . DPP IV 효소 / 인간 혈장 / 가장 위액 / 가장 장액 / 인간 간 미세 소체 의 농도 는 2 - 4 시간 안 에 약 50 % 의 엑 세 딘 의 분해 를 제공 하 도록 미리 행해진 실험 에서 선택 되 어 , 24 시간 에 걸쳐 시간 - 의존 분해 를 볼 수 있 도록 하 였 다 . 반응 을 TFA / H 2 O ( 15 mL , 10 % ( v / v ) ) 의 첨가 에 의해 종료 시켰 다 . 그 후 , 반응 생성물 을 Vydac C 18 분석 컬럼 ( 4 . 6 x 250 - mm ) 에 적용 하 고 주요 분해 조각 을 손상 되 지 않 은 ( intact ) 펩티드 유사 체로 부터 분리 하 였 다 . 컬 럼 을 TFA / H 2 O 로 , 1 mL / 분 의 유속 으로 평형 화 시켰 다 . 70 % 아 세토 니트릴 / H 2 O 중 의 0 . 1 % ( v / v ) TFA 를 사용 하 여 용리 용매 중 의 아 세토 니트릴 이 농도 를 10 분 에 걸쳐 0 % 에서 28 % 까지 증가 시키 고 , 30 분 에 걸쳐 28 % 에서 42 % 까지 증가 시켰 다 . UV 검출기 를 사용 하 여 206 nm 에서 흡광도 를 모니터링 하 고 ESI - MS 분석 에 앞서 피크 ( peak ) 를 안내서 에 따라 ( manually ) 모았 다 . 시험 펩티드 유사 체 및 그 의 대 사체 에 대한 커브 아래 의 면적 ( area under the curve ) 을 측정 하 고 24 시간 에 걸쳐 각 시점 에 분해 비율 을 계산 하 였 다 . DPP IV 효소 , 인간 혈장 , 가장 위액 , 장액 및 간 미세 소체 ( 인 비트로 ) 에 대한 선택 된 펩티드 유사 체의 안정 성 연구 결과 가 표 6 에 나열 된다 .