상기 에서 설명 된 해당 집 적 과정 에 의해 분리 된 단핵 세포 는 6 일 간 가습 배양기 내 에서 37 ℃, 2 % 사람 AB 혈장 ( pooled ) 이 보충 된 AIM - V 배지 도 는 CellGro 배지 에서 1 x 106 단핵 세포 / ㎠ 밀도 로 배양 되 었 다 . 배양 배지 에 는 1000 U / ml 인간 GM - CSF 및 300 U / ml 인간 IL - 4 ( 둘 다 CellGenix , Freiburg , Germany 의 것 을 이용 ) 이 보충 되 었 고 , 3 일 째 동량 의 AIM - V / 2 % OP 또는 CellGro + GM - CSF 및 IL - 4 으로 대체 되 었 다 . on day 3 . 반 - 성숙 ( sm ) DC 를 생성 하 기 위하 여 , 50 ng / ml IFN - γ ( Boehringer Ingelheim , Vienna , Austria ) 및 1 - 1000 ng / ml 의 리포 폴리 사카 라이드 ( LPS , E . coli strain O 111 : B 4 , Calbiochem , San Diego , CA , USA ) 를 배 양물 에 6 시간 동안 첨가 하 여 성숙 을 실행 하 였 고 , 연속 적 으로 냉동 시켰 다 ; 환자 의 DC 백신 은 임상용 등급 의 LPS ( US Pharmacopeia , Bethesda , MD ) 로 제조 하 였 다 .