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 JoVE Neuroscience 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부 
 Cite this Article : 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부 
 Abstract : 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부 
 청력 손실 및 밸런스 교란 은 주로 내이 ( 内 耳 ) 의 수용체 세포 가 mechanosensory 세포 의 죽음 으로 인해 발생 합니다 . 만족 스럽 게 포유 동물 세포 를 대표 하 는 어떤 세포 라인 이 없 기 때문 에 , 세포 에 대한 연구 는 주요 장기 배양 에 의존 합니다 . 성인 쥐 ( 그림 1 ) 1 - 6 에서 utricles 의 장기 문화 를 활용 하 여 성숙 한 포유 동물 세포 의 체외 모델 시스템 에서 최고 의 특성 화 . utricle 은 vestibular 기관 이 며 , utricle 의 세포 는 청각 기관 , Corti 의 기관 에 있 는 세포 의 구조 와 기능 모두 에서 비슷 합니다 . 성인 마우스 utricle 준비 는 생존 , 항상성 , 이 들 세포 의 죽음 을 조절 분자 신호 의 연구 에 대한 성숙 한 감각 상피 를 나타냅니다 . 포유 동물 달팽이 세포 는 불치병 에 차별 하 고 그 들 이 길 잃 었 을 때 다시 생성 되 지 않 습니다 . 비 이맘 에서 malian 척추 동물 , 청각 혹은 vestibular 머리카락 세포 사망 은 청력 과 균형 기능 을 7 , 8 을 복원 강력 한 재생 이 옵니다 . 모발 세포 재생 은 감각 상피 9 , 10 세포 의 basolateral 표면 에 문의 glia 같 은 지원 세포 에 의해 매개 된다 . 지원 세포 는 머리카락 세포 의 생존 과 사망 11 중요 한 중재자 입니다 . 우리 는 최근 아데 노 바이러스 를 사용 하 여 교양 utricles 에 세포 를 지원 하 는 감염 기법 을 개발 했 습니다 . CMV 프로 모터 의 제 어하 에 GFP 를 포함 하 는 transgene 을 전달 하 기 위해 아데 노 바이러스 타입 5 ( dE 1 / E 3 ) 를 사용 , 우리 는 구체 적 으로 그 아데 노 바이러스 를 찾 아 효율 적 으로 지원 하 는 세포 를 감 염 . 세포 감염 효율 을 지원 하 는 것 은 약 25 - 50 % 이 며 , 세포 는 ( 그림 2 ) 감염 되 지 않 습니다 . 중요 한 것 은 우리 가 세포 를 지원 하 는 adenoviral 감염 세포 또는 지원 하 는 세포 에 독성 을 초래 하 지 않 는 것 을 발견 , 같 은 광고 - GFP INF 에 있 는 셀 카운트 ected utricles 가 아닌 감염 된 utricles ( 그림 3 ) 에 있 는 것 과 같 습니다 . 따라서 교양 utricles 셀 을 지원 아데 노 바이러스 - 매개 유전자 표현 이 머리 세포 생존 , 죽음 , 그리고 중생 의 중재자 로서 세포 를 지원 하 는 역할 을 연구 하 는 강력 한 도구 를 제공 합니다 . Protocol : 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부 
 감각 세포 는 노화 , 소음 외상 , 그리고 aminoglycoside 의 항생제 와 antineoplastic 에이전트 cisplatin 을 포함 ototoxic 약물 에 대한 노출 을 포함 하 여 스트레스 의 다양 한 의한 죽음 에 감염 될 수 있 습니다 . 영구 적 인 청력 손실 및 / 또는 균형 장애 의 포유 동물 털 세포 사망 결과 입니다 . 체외 모델 시스템 에서 세포 와 분자 메커니즘 밑 에 있 는 머리 세포 죽음 뿐 만 아니 라 , 머리카락 세포 사망 을 방지 하 거나 반대 를 대상 으로 이러 한 결정 을 목표 로 연구 를 위한 중요 한 도구 입니다 . 성인 포유 류 에서 달팽이 세포 와 는 달리 , utricle 의 세포 는 문화 에 잘 남 아 있 다 . Utricle 머리 전지 는 노출 에서 달팽이 세포 에 독성 이 있 는 동일 한 치료 약물 및 ototoxic 헤어 세포 죽음 과 생존 utricular 와 달팽이 모두 세포 12 - 18 위 한 유사 근간 세포 의 메커니즘 에 대한 죽음 에 민감 합니다 . 또한 , 언제 utricle 모델 시스템 에서 얻 어 진 데이터 를 처리 할 수 있 습니다 생체 내 에서 도 전혀 두려움 을 모르 는 강인 한 , utricle 준비 가 성숙 달팽이관 12 , 18 - 21 의 머리 세포 생존 과 죽음 의 신뢰 성 예측 것 으로 입증 되 었 습니다 . 마우스 utricle 준비 는 또한 우리 가 유전자 변형 과 녹아웃 동물 로부터 utricles 을 이용 하 여 특정 단백질 의 효과 를 조사 할 수 있 습니다 . 스트레스 밑 에 감각 세포 의 생존 과 죽음 을 중재 신호 저조 한 인식 됩니다 . 그러나 신흥 증거 는 내이 ( 内 耳 ) 에 있 는 다른 세포 유형 의 스트레스 하 에서 세포 가 궁극 적 으로 살 또는 11 , 22 , 23 죽 을지 결정 하 는 데 중요 한 역할 을 수 있 습니다 제안 합니다 . utricle 모델 시스템 은 성숙 한 포유 류 의 감각 상피 에서 이러 한 중요 한 세포 - 세포 상호 작용 을 조사 하 는 데 사용 할 수 있 습니다 . Adenoviral 감염 따라서 헤어 세포 생존 , 사망 , phagocytosis , 그리고 중생 에게 에서 세포 를 지원 하 는 역할 ( 들 ) 의 연구 를 촉진 , 지원 하 는 세포 에서 유전자 발현 을 변경 하 는 방법 을 제공 합니다 . Subscription Required . Please recommend JoVE to your librarian . 	 Disclosures : 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부 
 관심 의 어떠 한 충돌 선언 없 습니다 . Acknowledgements : 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부 
 이 작품 은 난청 과 기타 통신 장애 의 국립 연구소 의 교내 연구 부문 에 의해 지원 되 었 다 . 추가 지원 이 NIDCD 5 R 01 DC 007613 에 의해 제공 되 었 다 . Materials : 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부 
 * Note : Ad - GFP is normally provided by Vector Biolabs at a stock titer of 1 x 1010 PFU / ml . We requested a custom amplification in order to provide the stock virus at a titer of 1 . 2 × 1011 PFU / ml . References : 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부 
 Erratum : 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부 
 Carlene Brandon , Christina Voelkel - Johnson , Lindsey May , Lisa Cunningham Ask the Author : 성인 마우스 Utricle 및 아데 노 바이러스 - 매개 지원 하 는 세포 감염 의 해부