상기 에서 합성 된 각 쌍 의 단일 가닥 올리 고 뉴클레오타이드 를 각각 500 ㎍ 의 양 으로 혼합 한 후 , 약 90 ℃ 에서 10 분 간 가열 하 고 상온 으로 냉각 함 으로써 , 상보 적 인 단일 가닥 올리 고 뉴클레오타이드 들 사이 에 수소 결합 을 형성 시켜 한 단위 의 이중 가닥 올리 고 뉴클레오타이드 를 제조 하 였 다 . 이때 각 단위 의 이중 가닥 올리 고 뉴클레오타이드 는 5 ' 말단 및 3 ' 말단 의 서열 이 각각 제한 효소 Xba I 및 Nhe I 절단 부위 에 연결 되 었 을 때 각 제한 효소 인지 부위 가 생성 되 도록 고안 되 었 다 .