다른 양상 에서 , 본 발명 은 IVT 방법 에 의해 mRNA 암 백신 을 제조 하 는 방법 에 관한 것 이 다 . 시험관 내 전사 ( IVT ) 방법 은 대부분 의 임의 의 서열 의 RNA 분자 의 주형 - 관련 합성 을 허용 한다 . IVT 방법 을 이용 하 여 합성 될 수 있 는 RNA 분자 의 크기 는 짧 은 올리 고 뉴클레오타이드 로부터 수천 개 염기 의 긴 핵산 중합체 까지 의 범위 이 다 . IVT 방법 은 다량 의 RNA 전사체 의 합성 을 허용 한다 ( 예 를 들 어 , 마이크로그램 내지 밀리그램 의 양 ) ( Beckert et al . , Synthesis of RNA by in vitro transcriptio , Methods Mol Biol . 703 : 29 - 41 ( 2011 ) ; Rio et al . RNA : A Laboratory Manual . Cold Spring Harbor : Cold Spring Harbor Laboratory Press , 2011 , 205 - 220 . ; Cooper , Geoffery M . The Cell : A Molecular Approach . 4 th ed . Washington D . C . : ASM Press , 2007 . 262 - 299 ) . 일반 적 으로 , IVT 는 관심 대상 의 서열 상류 의 프로모터 서열 을 특징 으로 하 는 DNA 주형 을 이용 한다 . 프로모터 서열 은 가장 흔하 게 는 박테리오파지 유래 ( 예 를 들 어 , T 7 , T 3 또는 SP 6 프로모터 서열 ) 이 지만 , 드노 보로 설계 된 것 을 포함 하 는 다수 의 다른 프로모터 서열 이 용인 될 수 있 다 . DNA 주형 의 전사 는 전형 적 으로 특정 박테리오파지 프로모터 서열 에 대응 하 는 RNA 중합효소 를 이용 함 으로써 가장 잘 달성 된다 . 예 시 적 인 RNA 중합효소 는 특히 T 7 RNA 중합효소 , T 3 RNA 중합효소 또는 SP 6 RNA 중합효소 를 포함 하 지만 , 이 들 로 제한 되 지 않 는다 . IVT 는 일반 적 으로 dsDNA 에서 개시 되 지만 , 단일 가닥 상 에서 진행 될 수 있 다 .