인간 암 세포 상 에서 발현 된 내인성 인간 항원 에 대한 항체 의 결합 을 FACS 에 의해 평가 하 였 다 . 항체 EC 50 값 을 결정 하 기 위해 SK - Br - 3 세포 를 아쿠 타제 로 수확 하 고 , FACS 완충제 ( PBS / 3 % FBS / 0 . 2 % NaN 3 ) 에서 1 x 106 개 세포 / mL 로 희석 하 였 다 . 1 x 105 개 세포 / 웰 을 96 - 웰 플레이트 ( 눈 크 ) 의 각 웰 에 첨가 하 고 , 210 g 에서 5 분 동안 4 ℃ 에서 원심 분리 한 후 에 상청 액 을 제거 하 였 다 . 시험 항체 의 일련 의 희석 액 ( FACS 완충제 를 사용 하 여 1 : 4 희석 단계 로 희석 됨 ) 을 펠릿 화 된 세포 에 첨가 하 고 , 얼음 상 에서 1 시간 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 세포 를 세 척하 고 , 100 μ L FACS 완충제 로 3 회 펠릿 화 하 였 다 . FACS 완충제 로 1 / 200 희석 된 PE 접합 된 염소 항 - 인간 IgG ( 잭슨 이 뮤 노리 서치 ) 를 세포 에 첨가 하 고 , 얼음 상 에서 1 시간 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 추가 의 세 척 단계 를 100 μ L FACS 완충제 로 3 회 수행 한 후 에 210 g 에서 5 분 동안 4 ℃ 에서 원심 분리 단계 를 수행 하 였 다 . 최종 적 으로 , 세포 를 200 μ L FACS 완충제 에 재현 탁 시키 고 , 형광 값 을 FACSArray ( BD 바이오 사이언 시즈 ( BD Biosciences ) ) 로 측정 하 였 다 . 세포 표면 결합 된 항 - HER 3 항체 의 양 을 평균 채널 형광 측정 에 의해 평가 하 였 다 .