LNCaP 세포 를 2 mM L - 글루타민 ( Invitrogen 코드 번호 25030 - 024 ) 및 1 %( v / v ) 페니실린 / 스트렙토마이신 [ 페니실린 G ( 나트륨 염 ) 및 스트렙토마이신 황산염 을 사용 하 여 10000 단위 / ml 의 페니실린 및 10000 ㎍/ ml 의 스트렙토마이신 : 표준 염수 에서 제조 , Invitrogen 코드 번호 15140122 ) 및 10 %( v / v ) 의 우태 혈청 ( FBS ) ] 을 함유 하 는 성장 배지 ( 페놀 레드 불 포함 Roswell Park Memorial Institute ( RPMI ) 1640 ( Invitrogen 코드 번호 11835 - 063 ) 에서 37 ℃ 에서 5 % CO 2 공기 항온 처리 기 에서 배양 하 였 다 . 분석 할 세포 를 PBS ( 인산염 완충 염수 , pH 7 . 4 ) ( Invitrogen 코드 번호 14190 - 094 ) 에서 1 회 세정 하 여 T 175 스톡 플라스크 로부터 수확 하 고 , PBS 용액 에 희석 시킨 5 ml 의 1 x 트립신 / 에틸아민 디아민 테트라 아세트산 ( EDTA ) ( 10 x 트립신 - EDTA , 5 . 0 g / L 의 트립신 , 2 . 0 g / L 의 EDTA ㆍ 4 Na 및 8 . 5 g / L 의 NaCl , 페놀 레드 불 포함 , " Invitrogen 코드 번호 15400 - 054 ) 을 사용 하 여 수확 하 였 다 . 5 ml 부피 의 성장 배지 를 각 플라스크 [ 5 %( v / v ) 차콜 제거 FBS ( HyClone 코드 번호 SH 30068 . 03 ) 를 10 % ( v / v ) FBS 대신 포함 시킨 것 을 제외 하 고 상기 와 같 음 ] 에 첨가 하 였 다 . 세포 를 무균 18 G x 1 . 5 ""( 1 . 2 x 40 mm ) 광범위 게이지 바늘 을 사용 하 여 2 회 이상 주입 하 고 혈구계 를 사용 하 여 세포 밀도 를 측정 하 였 다 . 세포 를 성장 배지 플러스 5 %( v / v ) 차콜 제거 FBS 에서 더 희석 하 고 투과성 블랙 조직 배 양물 로 처리 된 96 웰 플레이트 ( Packard 번호 6005182 ) 로 웰 ( 90 ul ) 당 6 . 5 x 103 세포 의 밀도 로 파종 하 였 다 . "