7 주령 의 Balb / c 마우스 ( 한국 , 대전 화학 연구소 ) 를 경추 탈골 해서 희생 시키 고 비장 을 무균 상태 에서 회수 한 다음 100 U / ㎖ 의 페니실린 - 스트렙토마이신 만 이 첨가 된 차가운 불완전 RPMI - 1640 배지 ( 미국 Gibco 사 제품 ) 로 2 회 세척 한 후 , 다시 차가운 불완전 RPMI - 1640 배지 를 주입 하 여 Daunce 세포 균질기 ( 미국 Wheaton 사 제품 ) 를 사용 하 여 각각 하나 의 세포 를 만들 고 얼음물 에서 10 분 동안 배양 하 였 다 . 배양 이 끝난 다음 세포 상층 액 만 을 수집 하 여 원심 분리 ( 1 , 000 g , 5 분 , 4 ℃) 하고 다시 상층 액 을 따라 버리 고 세포 를 얻 었 다 . 비장 세포 는 96 - 웰 플레이트 에 1 . 5 × 105 세포 / 웰 농도 로 분주 하 여 100 U / ㎖ 의 페니실린 - 스트렙토마이신 과 10 % 우태 아 혈청 이 첨가 된 완전 RPMI - 1640 배지 ( 미국 Gibco 사 제품 ) 로 배양 하 였 다 . 그 다음 각 웰 에 탄닌 함유 목천료 자 추출물 을 농도 별 로 첨가 하 고 2 일 동안 배양 하 여 MTT 분석 을 수행 하 였 다 .