재조합 태그 부착 된 HER 3 단백질 ( 예 를 들 어 , 태그 - HER 3 ) 은 세포 배양 상청 액 을 수집 하 고 , 10 kDa 컷 오프 필터 ( 프레 제니 우스 ( Fresenius ) ) 로 의 교차 - 흐름 여과 에 의해 10 배 농축 시켜 정제 하 였 다 . 항 - 태그 칼럼 은 항 - 태그 모노클 로 날 항체 를 CNBr 활성 화 세파 로스 4 B 에 수지 mL 당 10 mg 항체 의 최종 비 로 커플링 시켜 제조 하 였 다 . 농축 된 상청 액 을 35 ml 항 - 태그 칼럼 에 1 - 2 mL / 분 의 유량 으로 적용 하 였 다 . PBS 로 의 기준선 세척 후 에 , 결합 된 물질 을 100 mM 글리신 ( pH 2 . 7 ) 으로 용리 하 고 , 중화 시키 고 , 멸균 여과 하 였 다 . 단백질 농도 는 280 nm 에서 의 흡광도 를 측정 하 고 , 0 . 66 AU / mg 의 이론 적 인자 를 이용 하 여 전환 시킴 으로써 결정 하 였 다 . 정제 된 단백질 을 최종 적 으로 SDS - PAGE , N - 말단 서열 분석 및 LC - MS 에 의해 특성 화 하 였 다 .