" 랜덤 화 를 위해 대응 하 는 위치 에 "" NNK "" 트리코 돈 을 함유 하 는 프라이머 가 생성 되 었 고 ", 이때 N 은 임의 의 DNA 염기 ( 가령 , A , C , G , 또는 T ) 이 며 , K 는 G 또는 T 이 다 . 대안 으로 , " "" 소프트 ( soft ) "" 랜덤 화 를 위한 프라이머 가 사용 되 었 고 ", 여기 서 70 % 야생 형 염기 및 다른 3 개 의 염기 각각 의 10 % 에 상응 하 는 염기 의 혼합 이 각 무작위 위치 에 사용 되 었 다 . 랜덤 화 영역 에 해당 하 는 Fc 영역 의 단편 의 PCR 증폭 을 수행 하 여 라이브러리 를 생성 하 였 고 , SfiI 제한 부위 를 함유 하 는 말단 프라이머 를 이용 하 여 어셈블리 되 었 고 , 그 다음 SfiI 로 절단 되 었 고 , 그리고 상기 파지 미드 벡터 안 으로 결찰 되 었 다 . 대안 으로 , 이 프라이머 를 사용 하 여 Kunkel 돌연변이 유발 을 수행 하 였 다 . Kunkel 돌연변이 유발 을 실행 하 는 방법 은 당업자 에게 공지 될 것 이 다 . 상기 결찰 된 생성물 또는 Kunkel 생성물 을 전기 적 격성 ( electrocompetent ) 대장균 ( E . coli ) 균주 TG 1 의 세포 ( Lucigen ® 에서 구함 ) 로 형질 변환 시켰 다 . 상기 대장균 세포 를 회수 및 밤새 성장 시킨 후 , M 13 K 07 헬퍼 파 아지 로 감염 시키 고 , 그 다음 라이브러리 파 아지 를 5 % PEG / NaCl 로 침전 시키 고 , PBS 에서 15 % 글리세롤 에 재현 탁 시키 고 , 사용 전 까지 동결 시켰 다 . 전형 적 인 라이브러리 크기 는 약 109 내지 약 1011 개 의 형질전환 체의 범위 였 다 . pIII - 융합 된 Fc 와 pIII 에 부착 되 지 않 은 가용성 Fc ( 후자 는 pIII 전 엠버 ( amber ) 정지 코돈 으로 인하 여 생성 된 것 이 다 ) 사이 의 페어링 을 통해 , 파 아지 상 에 Fc - 이량체 가 표시 되 었 다 .