첨부 된 메뉴 열 에 따라 , 열 사이클 처리 를 행한 각 반응 액 에 DpnI 를 1 ㎕ 첨가 하 여 , 37 ℃ 에서 1 시간 인 큐 베이 션 했 다 . DpnI 처리 액 을 사용 하 여 , 실시 예 2 ( 1 ) 과 같이 대장균 의 형질전환 을 했 다 . 한 천 배 지상 에 생육 한 형질전환 체 콜로니 복수 개 를 1 . 5 ㎖ 의 LB Amp 배지 ( 암피실린 100 mg / L 를 함유 하 는 LB 배지 ) 에서 37 ℃ 로 하룻밤 배양 했 다 . 얻 어 진 배양액 을 각각 집 균 한 후 , Flexi Prep ( GE 헬스 케 어 바이오 사이언스 ) 을 사용 하 여 재조합 플라스미드 를 회수 했 다 . 캐 필러 리 DNA 시 퀀서 CEQ 2000 ( 베크만 ? 코울터 ) 을 사용 하 여 , 첨부 된 메뉴 얼 에 따라 , 3 종 의 플라스미드 중 에 클로닝 되 어 있 는 PCR 증폭 산물 의 염기 서열 을 해석 하 여 , PCR 반응 에서 의 에러 변이 가 생기 지 않 은 것 을 확인 했 다 . 계열 1 의 PCR 증폭 산물 유래 DNA 단편 이 클로닝 된 플라스미드 를 pJHB 057 - T 141 A 로 , 계열 2 의 PCR 증폭 산물 유래 DNA 단편 이 클로닝 된 플라스미드 를 pJHB 057 - F 144 S 로 , 계열 3 의 PCR 증폭 산물 유래 DNA 단편 이 클로닝 된 플라스미드 를 pJHB 057 - D 207 H 로 명명 하 고 , 또한 그 들 플라스미드 를 포함 하 는 대장균 JM 109 주 형질전환 체 를 , JM 109 / pJHB 057 - T 141 A , JM 109 / pJHB 057 - F 144 S 및 JM 109 / pJHB 057 - D 207 H 로 각각 명명 했 다 ( 상기 아미노산 잔기 의 위치 를 나타내 는 숫자 는 , HheB ( 1 st ) ( 서열 번호 1 ) 에 있 어서 의 아미노산 잔기 의 위치 를 나타내 는 숫자 로 하 고 있 음 ) .