파 아지 를 세포 배양 상청 액 으로부터 수확 하 고 , 1 % BSA 를 함유 하 는 PBS 에 현 탁 시켰 다 . 상기 파 아지 라이브러리 를 실온 에서 비오티 닐 화 된 Tau 와 함께 항온 처리 하 였 고 , 그 다음 이 어서 바이오틴 - r - Tau 에 결합 된 파 아지 를 Dynabeads M - 280 스 트 렙 타 비딘 에서 5 분 동안 포획 하 였 다 . 0 . 05 % Tween 20 을 함유 하 는 PBS ( PBST ) 로 비드 를 광범위 하 게 세척 하 였 고 , 결합 된 파 아 지 는 웰 을 100 mM 글리신 ( pH 2 . 7 ) 과 15 분 동안 항온 처리 함 으로써 용리 시켰 다 . 용리 된 파 아지 를 1 . 5 M Tris , pH 8 . 8 로 중화 시키 고 , TG 1 세포 및 M 13 / KO 7 헬퍼 파 아지 를 사용 하 여 증폭 시키 고 , 그리고 2 YT , 50 μ g / mL 카르 베나 실린 , 및 50 μ g / mL 카나마이신 에서 하룻밤 동안 37 ℃ 에서 성장 시켰 다 . 항원 고정 된 비드로 부터 용출 된 파 아지 의 역가 를 항원 없이 비드로 부터 회수 된 파 아지 역가 와 비교 하 여 , 농축 ( enrichment ) 을 평가 하 였 다 . 결합 동안 바이오틴 - r - Tau 의 농도 를 감소 시키 고 ( 10 nM 에서 0 . 1 nM 로 ) , 용액 중 1 μ M 의 라벨 되 지 않 은 r - Tau 와 의 경쟁 시간 ( 실온 에서 0 내지 2 시간 으로 ) 을 증가 시킴 으로써 , 선별 엄격 도 ( stringency ) 를 증가 시켰 다 .