과정 : 디 메틸 술 폭사 이드 중 의 DM 4 ( 1 . 0 당량 ) 를 실온 에서 1 시간 동안 2 -( 피리딘 - 2 - 일 디 설판 일 ) 에 탄 - 1 - 아민 ( 1 . 0 당량 ) 및 디 이소프로필 에틸아민 ( 3 . 0 당량 ) 과 반응 시켰 다 . 이어서 , 생성 된 미 정제 생성물 을 FITC ( 1 . 0 당량 ) 와 반응 시키 고 , 반응 혼합물 을 1 시간 동안 교반 하 였 다 . 최종 FITC - DM 4 접합체 를 UV 검출기 ( 파장 280 nm 에서 모니터링 함 ) 를 사용 하 여 분취 용 역상 HPLC 상 에서 정제 한 후 단리 하 였 다 . 미 정제 생성물 을 Xterra RP 18 분 취용 HPLC 컬럼 ( Waters ) 에 로딩 하 고 , 95 % 5 mM 인산 나트륨 ( 이동상 A , pH 7 . 4 ) 및 5 % 아 세토 니트릴 ( 이동상 B ) 로 시작 하 여 12 mL / 분 의 유속 으로 10 분 에 0 % A 및 100 % B 에 도달 하 는 구배 조건 으로 용리 시켰 다 . 7 분 분석 용 HPLC - MS 분석 에서 구배 ( 0 ~ 100 % B ) 동안 생성물 피크 의 체류 시간 = 4 . 23 분 . ESI m / z = 1244 . 8 . 약어 : FITC = 플루오레세인 이소 티오시 아 네이트 ; HPLC = 고 성능 액체 크로마토그래피 .