Fatty acid methyl esters 분리 를 위해 시료 1 g 에 0 . 7 mL 의 10 N KOH 와 6 . 3 mL 의 methanol 을 섞 어서 물 의 온도 가 55 ℃ 인 항온 수조 에 넣 은 후 가열 시켰 다 . 1 시간 30 분 동안 가열 하 면서 , 30 분 에 한 번 씩 강하 게 흔들 어 섞 어 준 다음 , 미리 준비 된 찬물 에 1 ∼ 2 분 간 냉각 후 0 . 58 mL 의 24 N H 2 SO 4 를 넣 었 다 . 그 후 다시 55 ℃ 의 항온 수조 에서 1 시간 30 분 동안 가열 하 면서 , 또 다시 30 분 마다 한 번 씩 강하 게 흔들 어 주 었 다 . 가열 이 끝나 면 준비 된 찬물 에 냉각 후 hexane 을 3 mL 를 첨가 하 여 5 분 간 3 , 000 rpm 에서 원심 분리 ( HANIL Combi - 514 R , Inchon , Korea ) 하 였 다 . Pasteur pipette 을 이용 하 여 vial 에 담 은 후 gas chromatograph - flame ionization detector ( Agil - ent 7890 series , Wilmington , USA ) 를 사용 하 여 지방산 분석 을 다음 과 같 은 조건 으로 실험 하 였 다 . Injector 는 split ratio 를 25 : 1 로 한 split mode 로서 온도 를 250 ℃ 로 하 였 고 , detector 는 flame ionization detector 로써 온도 는 250 ℃ 이 었 다 . Carrier gas 로 는 고순 도 air , H 2 , He 을 사용 하 였으며 , flow rate 는 H 2 는 40 mL / min , air 는 400 mL / min 으로 하 였 다 . 분석 을 위한 column 은 HP - 88 ( 60 m × 250 μ m × 0 . 2 mm ) 을 사용 하 였 다 .