유방암 의 성장 에 대한 BLT 2 길항제 인 LY 255283 과 BLT 1 길항제 인 U 75302 의 영향 을 조사 하 기 위해 , 본 발명자 들 은 유방암 세포주 T 47 D ( ER +), MDA - MB - 468 ( ER -), MDA - MB - 453 ( ER -) 및 정상 IMR - 90 세포 들 을 사용 하 였 다 . 세포 들 에 LY 255283 과 U 75302 를 농도 의존 적 으로 처리 하 고 , 트립 판 블 루 색소 배제 방법 ( trypan blue dye exclusion method ) 을 이용 하 여 세포 수 를 분석 하 였 다 . 세포 를 12 - 웰 플레이트 에 0 . 5 × 105 또는 5 × 105 cells / well 의 밀도 로 배양 하 였 다 . 24 시간 후 , 세포 들 을 0 . 5 % 혈청 이 함유 된 배지 에서 3 시간 동안 배양 하 였 다 . 그 후 , 세포 들 에 U 75302 ( 0 . 5 , 1 μ M ) , LY 255283 ( 5 , 10 μ M ) 을 처리 하 고 , 37 ℃ 에서 24 , 48 , 72 시간 동안 배양 하 였 다 . 세포 의 성장 을 측정 하 기 위해 , 처리 된 세포 들 을 각 시간 때 에 트립신 을 처리 하 고 , 트립 판 - 블 루 배제 방법 으로 계산 하 였 다 .