HMC 과정 의 기본 단계 는 본원 의 다른 곳 에서 기술 하 였 다 . 간단히 말 해서 , 난구 세포 가 없 는 난모 세포 를 20 초 동안 T 33 ( T 는 Hepes - 완충 된 TCM 199 배지 ; 숫자 는 CS 보충 제 의 퍼센트 [ v / v ] 를 의미 한다 , 여기 서 는 33 %) 에 용해 된 3 . 3 mg / ㎖ 프로 나제 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 투명대 의 부분 적 인 용해 와 난모 세포 의 약한 변형 이 일어날 때 , 이 를 집어내 었 고 , T 2 및 T 20 방울 로 재빨리 세척 하 였 다 . 9 개 의 난모 세포 를 2 . 5 ㎍/㎖ 시토 칼라 신 B ( CB ) 로 보충 된 T 2 방울 에서 정렬 시켰 다 . 정교 하 게 당겨 지 고 불로 연마 된 유리 피펫 을 사용 함 으로써 , 난모 세포 를 회전 시켜 표면 상 에서 빛 배출 원뿔 및 / 또는 강 하 게 부착 된 극체 를 찾 고 , 방향 성 을 갖 는 이등 분체 를 마이크 로 블레이드 로 입체 현미경 조 절하 에서 수작업 으로 수행 하 였 다 ( AB Technology , Pullman , WA , USA ) . 세포질 ( 배출 또는 PB 와 유사 ) 의 반 이하 를 남 아 있 는 부분 으로부터 분리 하 였 다 ( 도 8 ) . 방울 내 의 모든 9 개 의 난모 세포 의 이등분 후 , 더 큰 부분 과 더 작 은 부분 ( 배출 또는 부착 된 PB ) 을 수집 하 였 고 , 각각 T 2 의 방울 내 로 이동 시켰 다 .