OA 항체 의 자극 활성 은 , 분석 완충액 ( 50 mM HEPES , 100 mM NaCl , 5 mM CaCl 2 , 0 . 1 % ( w / v ) PEG 8000 , pH 7 . 3 + 1 mg / ml BSA ) 중 에서 , 고정 된 농도 의 포스파티딜 세린 ( PS ) 과 포스파티딜 콜린 ( PC ) 으로 이루어진 인지질 소포체 ( 최종 농도 500 μ M ; Haematologic Technologies Inc , 미국 ) 및 혈장 유래 FIXa ( 최종 농도 0 . 17 , 0 . 5 또는 1 nM ; Haematologic Technologies Inc , 미국 ) 로 측정 하 였 다 . FIXa 의 농도 는 기질 FX 의 15 % 미만 이 FXa 로 변환 되 도록 선택 하 였 다 . 1 가 OA 항체 ( 표 1 에 열거 된 최종 농도 ) 가 존재 하 는 가운데 사전 - 배양 한 후 , 150 nM 혈장 유래 FX 를 첨가 하 여 50 μ l 부피 의 최종 반응물 을 수득 하 였 고 , 실온 에서 20 분 동안 활성 화 시켰 다 . 이어서 , 반응물 에 25 μ l 의 ? 치 완충액 ( 50 mM HEPES , 100 mM NaCl , 60 mM EDTA , 0 . 1 % PEG 8000 , pH 7 . 3 + 1 mg / ml BSA ) 을 첨가 하 여 ? 칭하 였 고 , 생성 된 FXa 의 양 은 25 μ l 2 mM S - 2765 발색 기질 ( Chromogenix , 스웨덴 ) 을 첨가 하 여 결정 하 였 고 , 발색 기질 변환 의 측정 값 은 마이크 로 플레이트 판독기 에서 405 nm (