배양액 의 OD 600 이 0 . 6 내지 0 . 8 일 때 , IPTG 를 1 mM 의 최종 농도 까지 첨가 하 여 글 리코 실트 랜스 퍼라 제 유전자 의 발현 을 유도 하 였 다 . 이어서 , 인 큐 베이 션 을 밤새 ( 적어도 16 시간 ) 계속 하 였 다 . 세포 를 원심 분리 ( 5000 rpm , 15 분 , 4 ℃) 에 의해 수집 하 고 , 상청 액 을 버렸 다 . 세포 펠 렛 을 표준 이 . 콜라 이 용해 설정 으로 , 2 부피 의 25 mM 트리 에탄올아민 완충제 , pH 7 . 5 에 재현 탁 시키 고 , MICROFLUIDIZER ® 고압 균질 화기 ( Microfluidics ) 를 통과 시키 고 , 4 ℃ 에 유지 시켰 다 . 세포 잔해 를 원심 분리 ( 10 , 000 rpm , 45 분 , 4 ℃) 에 의해 제거 하 였 다 . 맑 아 진 용해 물 상청 액 을 수집 하 고 , - 80 ℃ 에서 동결 시킨 다음 , His - 친화도 정제 및 투석 을 실시 하 여 정제 된 단백질 을 생성 하 거나 또는 동결 건조 하 여 조질 폴리펩티드 의 건조 한 진탕 플라스크 분말 을 생성 하 였 다 .