siNA 를 25 mM 시트 레이트 완충제 ( pH 4 . 0 ) 중 에 0 . 8 mg / mL 의 농도 로 용해 시켜 siNA 용액 을 제조 하 였 다 . 71 . 9 : 20 . 2 : 7 . 9 비율 의 2 S - 옥 틸 - ClinDMA , 콜레스테롤 및 PEG - DMG 의 혼합물 을 무수 에탄올 중 에 약 10 mg / mL 의 농도 로 용해 시켜 지질 용액 을 제조 하 였 다 . 2 개 의 시린지 펌프 를 이용 하 여 동일 한 부피 의 siNA 및 지질 용액 을 같 은 유량 으로 혼합 T 연결 장치 로 전달 하 였 다 . 생성 된 유백색 혼합물 을 멸균 병 에 수집 하 였 다 . 이어서 , 동일 한 부피 의 시트 레이트 완충제 를 이용 하 여 상기 혼합물 을 천천히 희석 시키 고 , 크기 배제 중공 섬유 카트리지 를 통해 여과 시켜 혼합물 중 의 임의 의 유리 siNA 를 제거 하 였 다 . 시트 레이트 완충제 ( pH 4 . 0 ) 에 대한 한외 여과 를 사용 하 여 에탄올 을 제거 하 고 ( ALCO 스크린 으로부터 테스트 스틱 ) , PBS ( pH 7 . 4 ) 에 대한 한외 여과 를 사용 하 여 완충제 를 교환 하 였 다 . 원 하 는 부피 까지 농축 시켜 최종 LNP 를 수득 하 고 , 0 . 2 mm 필터 를 통해 멸균 여과 시켰 다 . 수득 된 LNP 를 입 자 크기 , 알콜 함량 , 총 지질 함량 , 핵산 캡슐 화 , 및 총 핵산 농도 에 관하 여 특징 을 규명 하 였 다 .