10 % 극 저 ( Ultra Low ) IgG FCS ( 송아지 태아 혈청 , Gibco ) , 2 mM L - 글루타민 ( Gibco ) , 및 250 ㎍/ ml 제 네 티 신 ( Geneticin ) ( Gibco ) 이 보충 된 DMEM ( 둘 베코 개질 이 글 배지 : Dulbecco ' s modified Eagle ' s medium , Gibco ) 에서 배양 된 , 점착 성장 하 는 HEK 293 - EBNA 세포 ( 엡스테인 - 바 - 바이러스 ( Epstein - Barr - Virus ) 핵 항원 을 발현 하 는 인간 배아 신장 세포주 293 ; 미국 미생물 보존 센터 ( American type culture collection ) 수탁 번호 ATCC # CRL - 10852 , 롯 트 . 959 218 ) 에서 각각 의 발현 플라스미드 ( 예 를 들 어 , 중쇄 및 개질 된 중쇄 뿐 아니 라 , 상응 하 는 경쇄 및 개질 된 경쇄 를 인코딩 하 는 ) 의 일시 적 공동 - 트 렌 스펙 션 에 의해 이중 특이 적 항체 를 발현 시켰 다 . 트랜스펙션 을 위해 , FuGENETM 6 트랜스펙션 시약 ( Roche Molecular Biochemicals ) 을 4 : 1 ( 3 : 1 내지 6 : 1 의 범위 ) 의 FuGENETM 시약 ( ㎕) 대 DNA ( ㎍) 의 비율 로 사용 하 였 다 . 단백질 을 , 각각 1 : 2 내지 2 : 1 범위 의 1 : 1 ( 등 몰 ) 의 ( 개질 형 및 야생형 ) 경쇄 대 중쇄 인코딩 플라스미드 의 몰 비율 로 사용 하 여 각각 의 플라스미드 로부터 발현 시켰 다 . 합하 여 4 mM 이 되 는 L - 글루타민 , 글루코오스 [ Sigma ] 및 NAA [ Gibco ] 를 3 일 에 세포 에 공급 하 였 다 . 이중 특이 적 항체 를 함유 하 는 세포 배양 상청 액 을 트랜스펙션 5 일 내지 11 일 후 에 원심 분리 로 채취 하 고 , - 20 ℃ 에서 보관 하 였 다 . 예 를 들 어 HEK 293 세포 에서 의 인간 면역 글로불린 의 재조합 발현 에 관한 일반 적 인 정보 가 하 기 에 주어진다 : Meissner , P . 등 . , Biotechnol . Bioeng . 75 ( 2001 ) 197 - 203 .