벡터 pYLA ( KZ 1 ) , pYLI ( KZ 1 ) , pYLA ( MAP 29 ) 및 pYLI ( MAP 29 ) 를 SacII 로 소화 시키 고 , 우리 딘 원영 양성 ( prototrophy ) 에 대한 표준 리튬 아세테이트 / 폴리에틸렌 글리콜 절차 에 의해 균주 Y . 리포 리티 카 CLIB 122 를 형질 전환 하 는 데 사용 하 였 다 . 간략 하 게 는 , YEPD ( 1 % 효모 추출물 , 2 % 펩톤 , 2 % 글루코오스 ) 에서 하룻밤 동안 성장 시킨 효모 세포 를 원심 분리 ( 4000 rpm , 10 분 ) 로 수집 하 고 , 멸 균수 로 1 회 세척 하 고 0 . 1 M 리튬 아세테이트 ( pH 6 . 0 ) 에 현 탁 하 였 다 . 세포 현탁액 의 200 ㎕ 분취 액 을 선형화 플라스미드 DNA 용액 ( 10 ~ 20 ㎍) 과 혼합 하 고 , 실온 에서 10 분 동안 인 큐 베이 션 하 고 , 동일 한 완충액 에서 의 50 % PEG 4000 1 ㎖ 과 혼합 하 였 다 . 현탁액 을 실온 에서 1 시간 동안 추가 로 인 큐 베이 션 한 후 42 ℃ 에서 2 분 열 충격 을 주 었 다 . 이후 세포 를 SC his leu 플레이트 ( 0 . 67 % 효모 질소 베이스 , 2 % 글루코오스 , 류신 및 히스티딘 각각 100 mg / L ) 상 에서 플 레이팅 하 였 다 . 30 ℃ 에서 3 ~ 4 일 인 큐 베이 션 한 후 형질전환 체 가 나타났 다 .