클로스 트리 디 움 셀 룰 로 보란 스 의 gDNA 로 부 터 엔 도 - 베타 - 1 , 4 - 글 루 칸 아제 - 비 유전자 의 도커 린 부분 의 염기 서열 을 참고 로 하 여 정 방향 프라이머 ( 서열 번호 30 ) 의 5 ' 말단 영역 에 는 조벨 리아 속 균주 의 지노 믹 디엔에이 로부터 3 , 6 - 안 하이드로 - L - 갈 락 토시 데이즈 AhgA 유전자 의 C - terminal 부분 의 10 bp 크기 의 서열 이 , 역방향 프라이머 ( 서열 번호 31 ) 의 5 ' 말단 영역 에 는 제한 효소 Hind III 인식 서열 이 삽입 되 도록 프라이머 를 디자인 하 여 합성 하 였 다 . 이후 상기 합성 된 프라이머 를 이용 하 여 PCR 을 실시 하 였 다 . PCR 반응 은 95 ℃ 5 min 반응 후 95 ℃ 에서 1 분 , 52 ℃ 에서 1 분 , 72 ℃ 에서 2 분 씩 30 Cycle 반응 을 수행 한 후 , 마지막 으로 72 ℃ 에서 5 분 반응 시킨다 . 그 결과 211 bp 의 엔 도 - 베타 - 1 , 4 - 글 루 칸 아제 - 비 유전자 의 도커 린 부분 의 유전자 ( 서열 번호 32 ) 가 포함 되 어 있 는 PCR 밴드 를 확인 하 였 다 .