화합물 102 를 시험 하 여 골격 α - 액틴 프로모터 분석 을 사용 하 여 사람 골격 α - 액틴 을 활성 화 시키 는 이 의 능력 을 측정 하 였 다 . 마우스 근육 세포주 ( C 2 C 12 ) 는 사람 AR 발현 플라스미드 ; 및 루시퍼 라 제 cDNA 의 α - 액틴 프로모터 상류 를 함유 하 는 루시퍼 라 제 리포터 로 일시 적 으로 형질 감염 시켰 다 . C 2 C 12 세포 ( 5 x 105 의 농도 에서 ) 를 T 25 플라스크 에 씨 딩 하 고 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 당해 세포 는 트립신 을 사용 하 여 수거 하 고 96 웰 프렐 이 트 에 웰 당 6000 개 세포 로 씨 딩 하 였 다 . 동일 한 날 에 , 비 - 리포 좀 성 제형 인 FuGENE 6 시약 ( Roche , Indianapolis , IN ) 을 세포 의 형질 감염 을 위해 사용 하 였 다 . 각각 의 웰 에 45 . 5 ng 의 골격 α - 액틴 - LUC 리포터 플라스미드 , 캐리어 DNA 로서 4 . 55 ng pRShAR 및 5 ng pRS - BG 를 첨가 하 였 다 . 형질 감염 24 시간 후 , 상이 한 농도 의 용매 화 된 화합물 ( 10 - 10 내지 10 - 6 M ) 을 당해 세포 에 3 회 첨가 하 고 당해 세포 를 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 당해 배지 를 흡인 제거 하 고 세포 를 세제 함유 완충액 으로 용해 시켰 다 . 각각 의 웰 에 루시퍼 라 제 분석 완충액 을 첨가 한 후 , 세포 를 발광 측정기 를 사용 하 여 루시퍼 라 제 활성 에 대해 분석 하 여 전사 적 활성 화 수준 을 측정 하 였 다 . 최대 반응 ( EC 50 ) 의 50 % 를 나타내 는 유효 농도 는 농도 반응 곡선 의 중간 점 을 가로지르 는 2 개 의 농도 사이 에 외 삽 함 에 의해 화합물 에 대한 농도 반응 곡선 으로부터 측정 하 였 다 . 시험 화합물 에 대한 효능 제 효능 은 표준 효능 제 DHT 에 의한 최대 루시퍼 라 제 반응 과 비교 하 여 루시퍼 라 제 반응 의 % 로서 계산 하 였 다 .