IVF 실험 을 3 개 의 동일 한 복제물 에서 시험관 내 에서 성숙 시킨 난모 세포 로 수행 하 였 다 . 성숙 후 , COCs 를 2 mM 카페인 ( mTBMfert ) 을 함유 하 는 mTBM 으로 두 번 세척 하 였 고 , 50 내지 400 ㎕ mTBMfert 의 군 에 이식 하 였 다 . 새로 사정 된 정액 을 앞서 기술 한 바 와 같이 처리 하 였 다 ( Booth , et al . , in press ) . 38 . 5 ℃ 에서 및 5 % CO 2 가습 공기 에서 수정능 획득 ( capacitation ) 2 시간 후 에 , 정액 을 1 x 105 정액 / ㎖ 의 조절 된 최종 농도 로 난모 세포 에 첨가 하 였 다 . 수정 을 38 . 5 ℃ 에서 , 및 5 % CO 2 가습 공기 로 , SIS 내 에서 3 시간 동안 수행 하 였 다 . 수정 후 추정 접합체 를 , IVC 배지 에서 세척 하 고 배양 접시 에 놓 기 전 에 난구 세포 를 제거 하 기 위해 mTBMfert 에서 볼 텍 싱하 였 다 ( 배아 배양 및 평가 를 참조 )