탈 보호 된 oxHES 알데히드 를 rh - Met - G - CSF 용액 [ 반응 완충액 0 . 1 M 나트륨 아세테이트 완충제 , pH 5 중 의 5 mg / ml ; 시판 용 Neupogen ® ( 공급 처 : Amgen , Munchen , D ) 와 동일 한 아미노산 서열 과 거의 동일 한 특징 으로 지니 고 있 는 , 이 . 콜라 이 에 의해 발현 된 G - CSF ] 과 합하 였 다 . OxHES 알데히드 를 G - CSF 농도 와 비교 해서 30 배 몰 과량 ( Mn 를 기준 으로 함 ) 으로 가하 였 다 . 이 로써 생성 된 반응 혼합물 중 의 G - CSF 농도 는 1 . 9 mg / ml 였 고 , oxHES 알데히드 농도 는 20 % ( w / v ) 였 다 . 반응 완충액 에서 구성 된 0 . 5 M NaCNBH 3 용액 을 가함 으로써 환원 적 아민 화 반응 을 시작 하 여 최종 농도 가 20 mM 인 환원제 를 수득 하 였 다 . 철저히 혼합 한 후 , 상기 반응물 을 0 ℃ 하 에 밤새 항온 배양 하 였 다 .