소혈 청단 백질 ( BSA ) 와 KLH ( Keyhole limpet hemocyanin ) 단백질 의 농도 는 마이크 로 BCA 키트 ( micro BCA kit ; Pierce , Rockford , IL , USA ) 를 사용 하 여 정량 하 였 다 . 그리고 BSA 와 KLH 의 전기영동 은 4 ~ 12 % NuPAGE ( Invitrogen , Madison , WI , USA ) 구배 겔 을 이용 하 여 수행 하 였으며 , BSA 는 각 웰 당 0 . 125 μ g , 0 . 25 μ g 또는 0 . 5 μ g 씩 가하 였으며 , KLH 는 각 웰 당 0 . 25 μ g , 0 . 5 μ g 또는 1 μ g 씩 가하 여 전기영동 하 였 다 . 전기영동 후 Immobilon - P ( Millipore corpoation , Bredford , MA , USA ) 막 에 전기 전이 시켰으며 3 % 무 지방 탈지유 ( NonFat skim milk ) 용액 으로 블로킹 ( blocking ) 한 다음 , 각각 의 희석 시킨 항혈청 과 반응 시켰 다 . 그 후 양 고추냉이 과산화 효소 - 결합 된 토끼 항 - 쥐 ( horseradish peroxidase - conjugated rabbit anti - mouse ) IgG 항체 를 처리 한 다음 ECL 웨스턴 블 럿팅 감지 시스템 ( Western blotting detection system ; Amersham , Arlington Heights , IL , USA ) 을 이용 하 여 가시 화 하 였 다 .