pBS Kudzu # 2 로 지정 된 플라스미드 ( 도 52 및 12 ) 를 서열 분석 으로 바로잡 고 , BG 3594 comK , 바실 러스 서브 틸리스 숙주 균주 에 형질 전환 시켰 다 . LA 및 5 클로람페니콜 플레이트 상 에서 선별 하 였 다 . 형질전환 체 를 LA 및 5 클로람페니콜 상 에서 선택 하 고 단일 콜로니 를 분리 한 후 , 1 . 5 의 OD 600 이 될 때 까지 LB 및 5 클로람페니콜 에서 성장 시켰 다 . 글리세롤 의 존재 하 에 - 80 ℃ 에서 바이알 내 에 동결 보관 하 였 다 . 생성 된 균주 를 CF 443 으로 지정 하 였 다 .