화학식 1 의 화합물 에 대한 선택 적 인 T 세포 억제 효능 이 세포 사멸 ( apoptosis ) 유도 에 의한 것 인지 확인 하 기 위하 여 하 기 와 같 은 실험 을 수행 하 였 다 . 상기 실험 예 1 에서 배양 된 세포 를 회수 하 여 0 . 1 ml 의 팩스 완충 용액 에 재현 탁 시키 고 0 . 5 ㎍ 의 홍조소 - 부착 항 - 인간 CD 3 단 클론 항체 를 처리 한 다음 , 4 ℃ 에서 30 분 간 염색 하 였 다 . 염색 후 세포 를 1 ml 의 팩스 완충 용액 으로 세척 하 고 , 0 . 1 ml 의 팩스 완충 용액 에 재현 탁한 다음 , 7 - 아미노 - 악티노마이신 D ( 7 - amino - actinomycin D , 7 AAD ) 를 처리 하 여 실온 에서 10 분 간 염색 하 였 다 . 염색 후 세포 에 0 . 3 ml 의 팩스 완충 용액 을 추가 하 고 현 탁 시킨 후 유세포 분석기 로 측정 하 였 다 . 세포 사멸 은 동종 항원 에 반응 하 여 활성 화 된 T 세포 분획 ( CFSElow CD 3 + T 세포 ) 과 비활성 T 세포 ( CFSEhigh CD 3 + T 세포 ) 에서 7 - 아미노 - 악티노마이신 D ( 7 - AAD ) 가 염색 된 세포 의 % 값 을 구하 였 다 .