상기 조직 에서 접착성 근막 을 제거 하 고 이 를 동일 한 크기 의 스트립 [ 각 스트립 에서 대략 4 - 5 개 의 기관 링 ] 으로 자른다 . 조심 스럽 게 문질러서 상피 조직 을 제거 하 고 , 평활근 에 손상 을 최소 로 한다 . 평활근 밴드 를 갖 는 중간 - 배면 표면 을 따라 기관 을 개방 하 고 상기 는 완전 하 게 가로 로 절단 되 지 않 도록 선택 측면 으로부터 일련 의 횡 근 으로 자른다 . 자른 고리 의 반대쪽 말단 을 실 을 사용 하 여 묶 는다 . 10 ml 의 크 렙 스 헨셀 레이트 완충액 을 포함 하 는 분리 된 조직 배스 에 상기 조직 을 넣 고 37 ℃ 에서 유지 하 고 , 1 g 의 기부 장력 에서 카르 보겐 으로 거품 이 생기 도록 한다 . 약 1 시간 동안 4 - 5 번 완충액 을 바꾼다 . 안정 화 를 위해서 1 시간 동안 조직 을 평형 화 시킨다 . 1 시간 이후 에 , 조직 을 1 μ M 카르바 콜로 면역성 검사 한다 . 2 개 의 유사 한 연속 반응 이 수득 될 때 까지 매 2 - 3 회 세 척 을 반복 한다 . 안정 화 종반 에 , 상기 조직 을 30 분 동안 세척 한 후 에 조직 을 1 μ M 카르바 콜로 수축 시키 기 이전 에 20 분 동안 MRA / 부형제 ( Vehicle ) 의 적정 량 이하 투여 하 여 배양 하 고 , 연이 어 안정 성 발전 장력 / 반응 에 있 어서 PDE - IV 저해제 [ 10 - 9 M 내지 10 - 4 M ] 의 상대 활성 을 평가 한다 . Powerlab data acquisition system 또는 Grass polygraph ( Model 7 ) 상 에서 조직 의 수축 반응 을 기록 한다 . 최대 카르 바콜 반응 의 비율 로서 이완 ( relaxation ) 을 나타낸다 . 평균 ± s . e . 로서 데이터 를 표현 하 며 이 는 n 번 관찰 한 평균 이 다 . 1 μ M 카르 바콜 에 대한 최대 이완 의 50 % 를 생성 하 는 농도 로서 EC 50 을 계산 한다 . 비 ( 非 ) 파라미터 언페어 드 t - 테스트 를 사용 하 여 처리 된 조직 과 대 조군 조직 사이 의 이완 비율 을 비교 한다 . p 값 < 0 . 05 는 통계 적 으로 중요 한 것 으로 사료 된다 .