실시간 ( Real - time ) PCR 을 수행 하 기 위한 반응 액 조성 은 2 X LeGene SB - Green qPCR Master mix ( LeGene Biosciences , San Diego , CA , USA ) 와 종 특이 프라이머 , 락 토 바실 러스 표준 균주 DNA 이 다 . 실시간 PCR 은 7500 Real - time PCR system ( Applied Biosystems , Foster City , CA , USA ) 장비 를 사용 하 였 고 , 반응 조건 은 95 ° C 에서 2 분 동안 변성 한 후 95 ° C 에서 5 초 , 60 ° C 에서 30 초 반응 을 30 회 반복 수행 하 였 다 . 멜 트 커브 ( Melt curve ) 데이터 를 얻 기 위해 95 ° C 에서 15 초 , 60 ° C 에서 1 분 , 95 ° C 에서 30 초 , 60 ° C 에서 15 초 반응 을 수행 하 였 다 . 실시간 PCR 의 정확 성 을 평가 하 기 위해 , 50 ~ 0 . 005 ng 로 연속 희석 ( serial dilution ) 한 각 락 토 바실 러스 표준 균주 DNA 와 종 특이 프라이머 를 사용 하 여 표준 곡선 ( standard curve ) 을 그렸 다 . 37 개 락 토 바실 러스 표준 균주 DNA 를 사용 하 여 내재 프라이머 로 는 균주 의 유무 를 확인 하 였 고 , 종 특이 프라이머 는 특이 도 를 각각 확인 하 였 다 . 실시간 PCR 실험 결과 는 7500 software V 2 . 3 을 이용 하 여 확인 하 였 다 .