특정 성분 들 에 대한 돌연변이 유발 성 검색 을 위해서 균주 ( Salmonella typhimurium ) TA 98 , TA 100 , TA 1535 , TA 1537 균주 를 사용 하 였 다 . 시험 물질 의 처리 는 대사 활성 효소 계 ( S - 9 mix ) 가 적용 또는 미 적용 된 직접 플레이트 삽입 ( direct plate incorporation ) 방법 으로 하 였 다 . 복귀 돌연변이 시험 에 사용 한 Salmonella typhimurium TA 98 균주 는 Molecular Toxicology Inc . ( USA ) 에서 구입 하 였 다 . 균주 는 냉동 보관 되 어 있 는 시험 균주 용액 50 μ L 를 25 mL 의 액체 배지 ( 2 . 5 % Oxoid Nutrient broth No . 2 ) 에 접종 해 진탕 배양기 ( shaking incubator , VS - 8480 SFN , ( 주 ) 비젼 과학 ) 를 이용 하 여 37 ℃ 에서 약 10 시간 배양 한 후 사용 하 였 다 . 최소 배지 ( minimal glucose agar plate ) 는 1 . 5 % Bacto agar ( 214010 , BD Difco ) 와 Vogel - Bonner medium E 및 2 % glucose 를 함유 해서 만들 었 고 톱 아가 ( top agar ) 는 0 . 6 % agar 와 0 . 5 % NaCl 로 조제 하 였으며 , 톱 아가 ( top agar ) 에 는 0 . 05 mM 의 histidine ( 43011 , Fluka ) - biotin ( 47868 , Supelco ) 을 첨가 하 였 다 .