분화 5 일 째 에 96 웰 플레이트 의 배지 를 제거 하 고 4 % PFA 를 넣 어 상온 에서 1 시간 동안 고정 한다 . 고정 후 에 는 4 % PFA 를 제거 하 고 준비 한 TRAP 염색 용액 을 넣 어 상온 에서 1 시간 동안 반응 시킨다 . 염색 이 완료 되 면 증류수 로 1 회 씻 어 내 고 상온 에서 건조 시킨다 . DMSO 로 염색 된 염료 를 녹여 내 고 540 nm 에서 흡광도 를 측정 하 여 혼합 중량 비 에 따른 TRAP 활성 ( 파골 세포 분화 정도 ) 을 비교 한다 .