실시 예 1 에서 설명 된 바 와 같이 폴리펩티드 서열 번호 232 의 단백질 정제 를 위해 250 mL 진탕 플라스크 배 양물 을 성장 시켰 다 . 이어서 , 2 . 4 mL 의 50 % 글리세롤 원액 을 50 mM 트리스 - HCl 완충제 , pH 7 . 5 , 3 mM MgCl 2 , 2 mM ADP - 글루코스 및 1 mL 레바 우디 오시드 D ( ChromaDex , > 93 % 순도 ) 로 250 mL 배 플 플라스크 에서 60 mL 의 총 반응 부피 로 희석 하 였 다 . 반응 은 2 시간 동안 250 RPM 진탕 하 에 이 노바 ( Innova ) ® 진탕 인큐베이터 에서 30 ℃ 에서 수행 하 고 , 0 . 12 mL 포름산 으로 pH < 4 로 켄 칭 하 였 다 . 반응물 을 10 , 000 RPM 에서 4 ℃ 에서 10 분 동안 원심 분리 하 여 침전 시켰 다 . 6 g 의 XAD - 4 수지 ( Sigma ) 를 상청 액 에 첨가 하 고 , 진탕 플라스크 에서 2 시간 동안 인 큐 베이 팅 하 였 다 . 수지 를 여과 하 고 , 4 시간 동안 인 큐 베이 팅 하 고 재 여과 함 으로써 16 . 3 mL 의 50 : 24 : 26 의 물 : ACN : EtOH 로 용리 시켰 다 . 10 mL 의 50 : 50 의 물 : EtOH 로 제 2 용리 를 수행 하 고 , 이 를 여과 하 고 , 제 1 용리 액 과 합하 였 다 . 용리 액 을 회전 증발 에 의해 약 6 mL 로 농축 하 고 , WHATMAN ® UNIPREP ® 시린지 리스 ( syringeless ) 필터 를 통해 여과 하 고 , 표 7 . 1 에 설명 된 기기 및 파라미터 를 사용 하 여 HPLC 에 의해 분획 화 하 였 다 . C 18 컬럼 으로부터 , 분획 을 체류 시간 5 . 8 - 6 . 2 m 에서 수동 으로 수집 하 였 다 . 분획 을 모으 고 , 회전 증발 에 의해 농축 하 고 , 동결 건조 시켰 다 . 그 후 , 샘플 을 1 . 5 mL 에탄올 에 재현 탁하 고 80 ℃ 에서 2 시간 동안 교반 플레이트 에서 인 큐 베 이 팅 하 고 , 회전 증발 에 의해 농축 한 다음 , 40 ℃ 에서 14 시간 동안 진공 하 에 건조 시켰 다 . 샘플 을 피리딘 - d 5 에 재현 탁하 고 , Acorn NMR 에 의해 수행 된 1 H , COSY 및 HSQC NMR 스펙트럼 획득 을 위해 사용 하 였 다 .