항생제 가 포함 된 BHIA 에 얼려 진 WT - ETBF 균 액 을 스트리킹 ( streaking ) 해 준 다음 에 혐기성 챔버 ( Anaerobic chamber ) 에 넣 었 다 . 혐기성 팩 ( Anaerobic pack ) ( Mitsubishi ) 봉지 를 뜯 어 챔버 에 넣 어 상태 에서 뚜껑 을 닫 고 , 배양기 ( 37 ℃) 에 넣 어 준 후 2 일 동안 기다렸 다 . 2 일 의 배양 기간 이 끝난 뒤 , 배양기 에 균 을 접종 한 BHIA 를 꺼내 서 단일 콜로니 ( mono - colony ) 를 형성 한 것 을 확인 한 후 , 플라스틱 루프 ( plastic loop ) 를 이용 하 여 단일 콜로니 를 취한 후 에 , BHIB ( Brain heart infusion broth ) 에 접종 시켰 다 . BHIB 는 BHIB 1 L 를 기준 으로 BHI 배지 ( media ) 37 g , 효모 추출물 ( Yeast extract ) 5 g , 시스테인 ( Cysteine ) 0 . 5 g , 헤 민 ( Hemin ) 1 ml ( final 농도 : 5 μ g / ml ) 와 항생제 ( Gentamicin sulfate , 50 mg / ml ; Clindamycin , 6 mg / ml ) 로 구성 된다 .