추가 로 , PD - L 1 을 발현 하 는 뮤 린 종양 세포주 에 결합 하 는 , aPD - L 1 표지 된 적혈구 세포 의 능력 을 평가 하 였 다 . 먼저 CT - 26 , B 16 F . 10 및 A 20 의 3 가지 세포주 에서 24 시간 동안 IFNg 자극 ( 이 는 종양 세포 상 에서 PD - L 1 발현 을 유도 함 ) 의 존재 또는 부재 하 에서 PD - L 1 발현 을 평가 하 였 다 . PD - L 1 의 발현 을 아 이소 타입 대조 항체 와 비교 하 여 aPD - L 1 항체 를 사용 한 염색 에 의해 평가 하 였 다 . aPD - L 1 로 클릭 된 적혈구 세포 의 PD - L 1 발현 세포 로 의 결합 은 , 세포 추적 파 레드 ( cell trace Far red ) 로 사전 표지 된 암세포 및 적혈구 세포 를 4 ℃ 에서 2 시간 동안 인 큐 베이 션 함 으로써 평가 하 였 다 . 세포 현탁액 을 항 - 카파 사슬 항체 로 염색 하 고 , 유동 세포 분석기 로 평가 하 였 다 . 파 레드 및 카파 에 대해 이중 양성 인 집단 은 적혈구 세포 가 종양 세포 에 결합 되 어 있 음 을 나타낸다 . 이 실험 은 IFNg 사전 인 큐 베이 션 이 존재 하 거나 부재 하 는 조건 을 평가 하 고 , aPD - L 1 클릭 된 적혈구 세포 를 아 이소 타입 대조 항체 로 클릭 된 세포 와 비교 하 였 다 . aPD - L 1 마우스 적혈구 세포 에 결합 된 종양 세포 의 백분율 은 종양 세포주 에서 의 PD - L 1 발현 수준 에 따라 60 내지 99 % 범위 였 다 ( 도 3 ) . 아이 소 타입 대조 클릭 된 마우스 적혈구 세포 에 결합 된 종양 세포 의 백분율 은 예상 된 바 와 같이 PD - L 1 발현 수준 과 상호 관련 되 지 않 았 다 . 전반 적 으로 , aPD - L 1 마우스 적혈구 세포 의 종양 세포 로 의 결합 은 PD - L 1 발현 이 증가 함 에 따라 유의 하 게 향상 되 었 다 . aPD - L 1 을 발현 하 는 적혈구 세포 의 재조합 PD - L 1 및 PD - L 1 을 발현 하 는 종양 세포 로 의 결합 은 항 - PD - L 1 이 세포 상 에 존재 할 뿐 만 아니 라 그 결합 부위 가 기능 적 이 며 결합 을 허용 하 도록 배향 되 어 있 음 을 나타낸다 .