1 - 2 주 후 , 세포 를 HAT 가 HT 로 교체 된 배지 에서 배양 하 였 다 . 세포 를 플 레이팅 하 고 나 서 약 10 - 14 일 후 , 개별 적 인 웰 들 로부터 의 상등 액 을 인간 감마 , 카파 항체 의 존재 에 대해 스크리닝 하 였 다 . 그 후 , 인간 감마 , 카파 에 대해 양성 으로 채점 된 상등 액 을 ELISA 및 FACS ( 상기 기술 된 프로토콜 을 사용 함 ) 에 의해 인간 OX 40 R 모노클 로 날 IgG 항체 에 대해 스크리닝 하 였 다 . 항체 를 분비 하 는 하이브리도마 를 24 웰 플레이트 로 옮기 고 , 다시 스크리닝 하 고 , 인간 OX 40 R IgG 모노클 로 날 항체 에 대해 양성 으로 확인 되 면 , 한계 희석 에 의해 2 회 이상 서브 클로닝 하 였 다 . 그 후 , 안정 적 인 서브 클론 을 시험관 내 에서 배양 하 여 , 추가 적 인 특성 화 를 위한 조직 배양 배지 내 의 소량 의 항체 가 생성 되 었 다 .