Morris water maze test 종료 후 적출 한 마우스 뇌 일정량 에 10 volume 의 lysis buffer 를 넣 고 Glass - Col homogenizer 로 균질 화 한 후 12 , 000 rpm 에서 30 분 간 원심 분리 하 였 고 , 그 상등 액 을 효소 실험 을 위하 여 사용 하 였 다 . 모든 추출 공정 은 4 ℃ 에서 수행 하 였으며 , Quant - iT ™ protein assay kit ( Invitrogen Co . , Carlsbad , CA , USA ) 를 이용 하 여 추출 한 효소 액 의 단백질 함량 을 측정 하 였 다 . 효소 5 μ L 에 50 mM sodium phosphate buffer 65 μ L 를 넣 고 37 ℃ 에서 15 분 간 preincubation 시킨 후 , 반응 혼합물 에 250 mM substrate solution 70 μ L 를 첨가 하 고 10 분 간 incubation 하 고 microplate reader ( Bio - rad , Hercules , CA , USA ) 로 405 nm 에서 흡광도 를 측정 하 였 다 . 마우스 뇌 조직 중 의 AChE 활성 은 control group 대비 % 활성 으로 나타내 었 다 . 그 결과 는 도 5 에 나타내 었 다 .