hNC 4 의 PCR 생성물 은 제한 효소 로 소화 시키 고 , 다양 한 클로닝 부위 Xho I 및 Bgl II 에서 pKLAC 1 발현 벡터 에 결찰 하 였 다 ( 도 1 ) . 양성 삽입 된 재조 합체 의 서열 을 분석 하 여 , NC 4 유전자 삽입 이 올바른지 확인 하 였 다 . 올바른 재조 합체 는 제한 효소 Sac II 로 소화 시키 고 , 수용성 있 는 ( competent ) K . 락 티스 GG 799 세포 로 형질 전환 시켰 다 . 질소원 으로 5 mM 아세트아미드 를 포함 하 는 효모 탄소 염기 ( YCB ) 매질 을 선택 적 인 매질 로 사용 하 였 다 .