상기 실시 예 2 에서 얻 은 메탄올 조추 출물 에 1 L 의 증류수 를 가하 여 용해 시키 고 에틸 아세테이트 1 L 를 가하 여 에틸 아세테이트 층 과 물 층 으로 분리 하 였 다 . 활성 물질 이 포함 된 에틸 아세테이트 층 을 모아 감압 하 에서 농축 하 고 순상 실리카 크로마토그래피 컬럼 ( Merck , Kiesegel 60 , 230 ~ 400 mesh ) 에 흡착 시킨 후 , 헥산 과 클로로포름 ( 8 : 2 ~ 2 : 8 ) 및 클로로포름 과 에틸 아세테이트 ( 8 : 2 ~ 2 : 8 ) 의 비율 을 변화 시키 면서 용출 되 는 분획 을 각각 모은 후 , 항 진균 활성 을 조사 하 였 다 . 활성 이 확인 된 분획 들 ( 헥산 : 클로로포름 = 6 : 4 ~ 클로로포름 : 에틸 아세테이트 = 6 : 4 ) 만 을 모아서 농축 시킨 후 , 2 차 순상 실리카 크로마토그래피 컬럼 ( Merck , Kiesegel 60 , 230 ∼ 400 mesh ) 을 이용 하 여 헥산 과 에틸 아세테이트 5 : 5 의 용매 비율 로 용출 시켜 부분 정제 된 활성 분획 을 얻 었 으며 , 이 분획 을 다시 100 % 메탄올 을 용매 로 하 는 겔 필터 크로마토그래피 ( Sephadex LH - 20 ) 를 실시 하 여 가장 높 은 항 진균 활성 을 나타내 는 분획 을 분리 하 였 다 . 이 활성 분획 을 이용 하 여 최종 적 으로 재결정 방법 및 고속 액체 크로마토그래피 ( HPLC ) 를 통해 650 . 4 mg 의 순수 한 단일 화합물 을 정제 하 였 다 . 이때 사용 한 HPLC 컬럼 은 Daiso 사 의 Watchers ODS - 4103 AP ( 5 μ , 4 . 6 × 250 mm ) 컬럼 을 사용 하 였 다 .