세포독성 시험 은 , 51 Cr 유리 세포독성 시험 에 의해 수행 하 였 다 . 51 Cr 유리 세포독성 시험 은 아래 와 같이 수행 되 었 다 . 우선 , 표적 세포 ( 1 × 107 개 / mL ) 을 100 μ L 의 51 Cr ( 비활성 ( specific activity ) 1 mCi / ml ) 과 함께 , RPMI 1640 ( 니혼 제약사 제 ) + 10 % 소 태아 혈청 배지 중 에서 37 ℃ 에서 1 . 5 시간 동안 배양 하 여 표적 세포 를 51 Cr 으로 라벨 링 하 였 다 . 이후 , 51 Cr 으로 라벨 링 된 표적 세포 를 다양 한 수의 ( 3 ) 에서 얻 어 진 CTLs ( 100 μ L 의 분석 배지 에 현 탁한 것 ) 을 포함 하 는 웰 ( 둥근 바닥 의 96 웰 플레이트 ( 96 round - bottom well plate ) ) 에 첨가 하 고 , 혼합 하 고 , 37 ℃ 에서 4 시간 동안 배양 하 였 다 . CTLs 와 표적 세포 로 는 CTLs 를 「 E 」 로 하 고 , 51 Cr 으로 라벨 링 한 표적 세포 를 「 T 」 로 하 여 , E / T ( 세포 수 ) 비 가 1 : 1 , 5 : 1 , 20 : 1 또는 25 : 1 이 되 도록 혼합 하 였 다 . 배양 후 , 100 μ L 상청 액 ( supernatant ) 을 각 웰 로부터 모았 다 . 표지 된 세포 로부터 유리 및 방출 된 51 Cr 을 측정 하 고 , 51 Cr 의 특이 적 용해 ( %) 을 산출 하 였 다 . 특이 적 용해 ( %) 는 이하 의 방법 으로 산출 하 였 다 .