관심 표적 을 발현 하 는 인간 암 세포주 를 배 양물 로부터 수확 하 였 고 , 세포 를 PBS 로 세척 하 고 , BATDA 시약 ( 퍼킨 엘머 AD 0116 ) 에 의해 표지 화 를 위해 성장 배지 중 에서 106 / mL 로 재현 탁 시켰 다 . 표적 세포 의 표지 화 를 위해 제조자 의 지침 을 따랐 다 . 표지 화 후 에 , 세포 를 PBS 로 3 회 세척 하 고 , 배양 배지 중 에서 0 . 5 - 1 . 0 x 105 / mL 로 재현 탁 시켰 다 . 백그라운드 웰 을 제조 하 기 위해 , 분취 량 의 표지 화 된 세포 를 따로 두 고 , 세포 를 배지 로부터 회전 시켰 다 . 100 μ l 의 배지 를 주의 해서 웰 에 삼중 으로 첨가 하 여 , 펠 렛 화 된 세포 의 교란 을 피하 였 다 . 100 μ l 의 BATDA 표지 화 된 세포 를 96 - 웰 플레이트 의 각각 의 웰 에 첨가 하 였 다 . 표적 세포 로부터 자발 적 방출 을 위해 웰 을 저장 하 고 , 1 % 트리톤 - X 를 첨가 함 으로써 표적 세포 의 최대 용해 를 위해 웰 을 준비 하 였 다 . 관심 종양 표적 에 대한 모노클 로 날 항체 또는 TriNKET 를 배양 배지 에서 희석 하 고 , 50 μ l 의 희석 된 mAb 또는 TriNKET 를 각각 의 웰 에 첨가 하 였 다 . 휴지 된 및 / 또는 활성 화 된 NK 세포 를 배 양물 로부터 수확 하 였 고 , 세포 를 세 척하 고 , 배양 배지 중 에서 원 하 는 E : T 비 에 따라 105 - 2 . 0 x 106 / mL 로 재현 탁 시켰 다 . 50 μ l 의 NK 세포 를 플레이트 의 각각 의 웰 에 첨가 하 여 , 총 200 μ l 배 양물 부피 를 제조 하 였 다 . 검정 을 진행 하 기 전 에 , 플레이트 를 37 ℃ 에서 5 % CO 2 하 에 2 - 3 시간 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 .