D - 아미노산 산화 효소 유전자 ( CbDAO ) 는 상기 합성 된 cDNA 를 주형 으로 하 여 서열 번호 3 의 정 방향 프라이머 ( 5 '- ACAAAATGGGTGATCAAATTGTTG - 3 ') 및 서열 번호 4 의 역 방향 프라이머 ( 5 '- C ATCAATCTAAAGTTTAGCTTTAACT - 3 ') 를 사용 하 여 PCR 에 의해 증폭 하 였 다 . PCR 증폭 은 94 ℃ 에서 3 분 간 전변 성 ( pre - denaturation ) , 94 ℃ 에서 45 초 , 57 ℃ 에서 45 초 , 72 ℃ 에서 1 분 30 초 를 1 싸이클 로 하 여 30 싸이클 및 72 ℃ 에서 5 분 간 최종 연장 반응 ( final extension ) 에 의해 수행 되 었 다 . 증폭 된 PCR 산물 은 pGEM - T Easy 벡터 ( Promega , 미국 ) 에 클로닝 한 후 염기 서열 을 분석 하 였 다 .