이 를 위하 여 , 구체 적 인 실시 에 있 어 본 발명자 는 , 먼저 에세 리키아 콜리 K 12 로부터 유래 된 5 '- 크 산 틸 산 아미 나 아제 를 코딩 하 는 1578 bp 의 유전자 ( 서열 번호 1 ) 를 포함 하 는 벡터 를 제조 한 후 , 이 를 주형 으로 하 여 돌연변이 유발 형 중합효소 연쇄 반응 ( error - prone PCR ) 을 수행 하 였 다 . 이 로부터 무작위 적 으로 돌연변이 가 도입 된 5 '- 크 산 틸 산 아미나 아제 변이체 DNA 들 을 수득 하 였 다 . 그 후 5 '- 크 산 틸 산 아미나 아제 변이체 를 발현 시키 기 적합 한 발현 벡터 에 상기 변이체 DNA 들 을 접합 시킨 후 , 이 를 이용 하 여 5 '- 크 산 틸 산 아미 나 아제 유전자 가 결핍 된 에세 리키아 콜리 를 형질 전환 시켜 돌연변이 라이브러리 를 제작 하 였 다 .