벼 의 종자 를 상기 실시 예 1 과 동일 한 방법 으로 발아 시키 고 이 로부터 자엽 절편 을 얻 었 다 . 식물 바이너리 ( binary ) 벡터 인 pRD 400 을 접합 ( conjugation ) 또는 형질전환 에 의하 여 Ti 플라스미드 가 내재 되 어 있 는 아그로박테리움 튜 머 페이 션 스 GV 3101 ( Mp 90 ) 에 도입 하 였 다 ( Plant - cell - rep . , 15 ( 11 ) : 799 - 803 ( 1996 ) ) . 아그로박테리움 튜 머 페이 션 스 GV 3101 ( Mp 90 ) ( Hamid et al . , Plant Cell Reports 15 ( 11 ) : 799 - 803 , 1996 ) 을 수퍼 브로스 ( super broth : 37 g / ℓ Brain heart infusion broth ( Difco ) , 0 . 2 % 수크로스 , pH 5 . 6 ) 에서 18 시간 동안 배양 한 다음 , 이 배양액 에 상기 자엽 절편 을 침지 시켜 10 분 간 혼합 하 였 다 . 그런 다음 , 2 일 동안 25 ℃ 에서 암 배양 조건 으로 공동 배양 배지 [ BAP ( 6 - benzylaminopurine ) 2 mg / ℓ 가 함유 된 MSB 5 ( Murashige & Skoog medium including Gamborg B 5 vitamins ) ] 에서 3 일 동안 아그로박테리움 튜 머 페이 션 스 및 자엽 을 공동 배양 하 였 다 . 그리고 나 서 , 세균 을 제거 하 는 클린업 단계 를 거쳐 자엽 을 MSB 5 , MES 0 . 5 g / ℓ, 3 % 수크로스 및 0 . 4 % 피타 겔 을 기본 으로 하 는 배지 에 BA 2 mg / ℓ 와 카르 베 니 실린 500 mg / ℓ, 그리고 카나마이신 을 농도 별 로 추가 하 여 4 주 동안 25 ± 1 ℃ 및 8 , 000 룩스 , 16 시간 / 8 시간 ( day / night ) 의 조건 에서 배양 하 였 다 .