d ) 크로마틴 면역 침전 실험 은 아세틸화 히스톤 H 3 및 아세틸화 히스톤 H 4 와 Il 1 b 유전자 프로모터 영역 의 결합 을 검출 한다 : 100 mm 패트리 접시 에 BV 2 세포 를 접종 하 고 24 시간 정치 한 후 , DMSO 또는 로니 다민 으로 1 시간 예비 처리 한 후 6 시간 동안 저 산소 처리 한다 . 저 산소 처리 완료 후 , 세포 배지 에 포름알데히드 용액 ( Sigma ， F 8775 ) 을 추가 하 여 최종 농도 를 1 % 로 하 고 , 10 분 동안 가교 한다 . 세포 를 수집 하 여 , 초음파 파쇄기 로 DNA 가 100 - 1000 bp 로 단절 되게 파쇄 한다 . 샘플 을 희석 시키 고 , 10 % 를 취하 여 input 로 한다 . 나머지 샘플 에 아세틸화 히스톤 H 3 또는 아세틸화 히스톤 H 4 항체 를 추가 하 여 4 ℃ 에서 밤새 부화 시킨다 . 동시 에 , 정상 토끼 에서 추출 한 동등 한 양 의 IgG 를 음성 대 조군 으로 한다 . 다음 날 , 단백질 G - 아가로스 를 2 시간 동안 첨가 하 였 다 . 이후 세척액 으로 샘플 을 세 척하 고 , 0 . 2 M NaCl 용액 에서 65 ℃ 로 4 시간 부화 시켜 가 교 결합 을 해제 하 였 다 . 페놀 - 클로로포름 법 에 의해 DNA 를 추출 한 후 후속 정량 PCR 반응 시켜 Il 1 b 의 결합 량 을 검출 한다 . Il 1 b 프로모터 영역 의 프라이머 서열 은 아래 와 같 다 :