10 l 스테인리스 스틸 용기 내 에서 냉동 세포 페이스트 에 2 l 의 세포 현 탁 완충액 을 가하 고 ( 뱃 치 1 에서 는 120 g / l , 뱃 치 2 에서 는 150 g / l 의 최종 농도 ) , 현탁액 에 응 집물 이 없 는 것 으로 보일 때 까지 스테인리스 스틸 주걱 을 사용 하 여 수작업 으로 혼합 하 였 다 . 뱃 치 1 은 3 분 간 , 뱃 치 2 는 10 분 간 , 4 l 의 용해 용액 ( 20 - 22 ℃ 에서 0 . 155 M NaOH , 1 % SDS ) 과 혼합 함 으로써 세포 를 용해 시켰 다 . 천천히 교반 하 는 중 에 2 l 의 중화 용액 ( pH 5 . 5 에서 10 mM EDTA 를 함유 하 는 3 M 포타슘 아세테이트 ) 을 용해 물 에 가하 였 다 . 500 ㎛ 메 쉬 백 필터 ( L 1 NM 500 BBSS , Plastok , UK ) 및 호칭 50 ㎛, 5 ㎛ 및 0 . 3 ㎛ 심층 여 과 방식 필터 ( depth filter ) ( KR 50 A 05 HH 1 , KR 05 A 05 HH 1 및 KRK 3 A 05 TT 1 , Millipore , UK ) 를 사용 하 여 침전 된 세포 찌꺼기 ( cell debris ) 를 제거 하 였 다 .