알파 아드 레노 수용체 블로커 활성 을 평가 하 기 위하 여 , binding of [ H 3 ] 프라조신 의 결합 을 Catret M 등 1998 ( Catret M . , Anselmi E . , Ivorra M . D . , Elloriaga M . , Tur R . , D ' Ocon M . P . 알파 - adrenoceptor interaction of tetrandrine and isotetrandrine in the rat : functional and binding assay . J Pharm Pharmacol . 1998 D Nov ; 50 ( 11 ) : 1267 - 73 ) 에 따라서 , EDTA ( 0 . 5 mM ) 및 [ H 3 ] 프라조신 ( 4 nM ) 을 함유 하 는 트리스 - HCl 완충액 ( 50 mM , Ph 7 . 4 ) 에서 몇 가지 지정 농도 의 물질 존재 하 또는 부 지하 에서 배양 된 희석 막 의 샘플 중 에서 측정 하 였 다 . 배양 부피 는 200 ㎕ ( 150 ㎍ 단백질 / 튜브 ) 였 다 . 에세이 튜브 를 25 ℃ 에서 90 분 간 배양 하 고 또 결합 반응 은 섬유 - 유리 필터 를 이용 하 여 필터 매니폴드 를 이용 한 신속 진공 여과 에 의해 중지 시켰 다 . 여액 을 빙 냉 트리스 - HCl - EDTA 완충액 ( 50 mM ) , pH 7 . 4 에서 Tween - 80 ( 0 . 1 %, 20 ml ) 의 부가 에 의해 세척 하 였 다 . 필터 에 결합 된 방사성 활성 은 액체 - 섬광 계수기 에 의해 측정 하 였 다 . 비 - 특이 적 결합 은 펜톨아민 ( 10 μ M ) 의 존재 하 에서 결합 으로 정의 하 였 다 . 억제 는 IC 50 으로 정의 하 였 다 .