실험 군 은 100 mm 플레이트 에 컨 플 루 언 트 하 게 배양 된 B 16 F 10 세포 에 200 nM α - MSH 를 24 시간 동안 처리 한 후 천마 추출물 을 첨가 하 여 72 시간 동안 배양 하 였 다 . 배양 된 세포 는 RNA extraction kit ( RNase Mini kit , Qiagen , Hilden , Germany ) 를 사용 하 여 RNA 를 추출 하 였 다 . 출 된 RNA 는 Reverse transcription 5 X master premix ( ELPIS ) 를 사용 하 여 cDNA 를 합성 하 였 다 . 합성 된 cDNA 는 프라이머 ( Tyrosinase , TRP - 1 , TRP - 2 ) , 2 X SYBR green supermix 를 이용 하 여 real time - PCR ( LightCycler 96 ; Roche , Indianapolis , IN , USA ) 를 수행 하 였 다 . real time - PCR 수행 결과 를 GAPDH 의 값 으로 보정 하 여 MITF , Tyrosinase , Trp 1 , Trp 2 의 mRNA 발 현량 을 계산 하 였 다 .