유리 아미노산 의 분석 은 시료 일정량 을 칭량 한 후 증류수 를 용매 로 사용 하 여 60 ℃ 에서 30 분 간 초음파 추출 을 실시 한다 . 추 출액 은 0 . 2 ㎛ syringe filter 로 여과 한 후 분석 시료 로 사용 하 였으며 , [ 표 1 ] 과 같 은 농도 의 아미노산 표준 품 을 이용 하 여 정량 분석 을 실시 한다 . 아미노산 분석 을 위해 positive electrospray ionization ( ( +) ESI ) mode 로 설정 된 LC - MS / MS 를 이용 하 였 다 . 분석 용 column 으로 는 GL Science ( Japan ) 의 Inertsil ODS ( 150 × 4 . 6 mm , 5 ㎛) 를 사용 하 였 다 . Nebulizer 압력 , N 2 gas 유속 및 온도 는 각각 35 psi , 10 L / min , 320 ℃ 로 설정 하 였으며 , capillary voltage 는 4 kV 를 유지 하 였 다 . 이동상 으로서 A 용액 은 5 mM ammonium acetate 가 혼합 된 0 . 1 % formic acid 수용액 이 었 고 B 용액 은 0 . 1 % formic acid 가 함유 된 acetonitrile 을 사용 하 였으며 , 0 . 5 mL / min 의 유속 으로 0 % B 로 시작 하 여 15 분 까지 순차 적 으로 100 % B 로 올려 준 후 다시 0 % B 로 낮춰서 총 30 분 동안 분석 을 실시 하 였 다 . 시료 주 입량 은 5 ㎕ 로 하 였으며 , 각 성분 별 로 [ 표 1 ] 과 같 은 selected ion monitoring ( SIM ) 조건 에서 분석 을 실시 하 였 다 .