본원 에 기술 된 중화 항 - IL - 21 단 클론 성 항체 를 사람 면역 글 로 불린 유전자 를 발현 하 고 재조합 사람 IL - 21 로 면역 된 유전자 도입 마우스 로부터 생성 되 었 다 ( 실시 예 1 참조 ) . IL - 21 mAb 클론 362 . 78 . 1 . 44 는 IL - 21 의 재조합 형태 외 에 고유 한 사람 IL - 21 에 결합 하 고 , 그것 을 중화 하 는 것 을 확인 하 는 것 이 중요 하 였 다 . 또한 임상전 독물학 연구 를 지지 하 기 위하 여 , 다양 한 종 에 고유 한 IL - 21 에 IL - 21 mAb 클론 362 . 78 . 1 . 44 의 결합 용량 을 이해 하 는 것 이 도움 이 될 것 이 다 . 이것 을 시험 하 기 위한 한 접근 법 은 IL - 21 mAb 클론 362 . 78 . 1 . 44 를 형광 염료 로 표지 하 고 , 그것 을 유세포 분석 에 의해 활성 화 된 T 세포 에서 세포내 IL - 21 을 검출 하 기 위해 사용 하 는 것 이 다 . 이 연구 에서 , 새롭 게 분리 된 사람 및 게 잡이 원숭이 말초 혈 백혈구 와 쥐 및 마우스 비장 세포 를 시험관 내 에서 PMA 와 이 오노 마이신 을 사용 하 여 24 시간 동안 활성 화 시켜서 IL - 21 생성 을 유도 하 였 다 . 세포 를 수득 하 고 , 고정 시키 고 , 투과 시킨 후 ALEXA FLUOR - 647 ( AF - 647 ) 로 표지 된 IL - 21 mAb 클론 362 . 78 . 1 . 44 를 사용 하 여 CD 3 또는 CD 4 의 발현 ( 헬퍼 T 세포 집단 을 규정 하 기 위하 여 ) 및 IL - 21 의 발현 을 위해 염색 하 고 , 이소 타입 - 매치 된 대조 항체 에 의해 유도 된 염색 세기 와 비교 하 였 다 . 이 분석 에서 이소 타입 대조 mAb 에 대해 관찰 된 것 보다 높 은 포지티브 신호 는 특이 한 IL - 21 mAb 클론 362 . 78 . 1 . 44 가 , 비록 그것 이 IL - 21 중화 활성 의 표시 제 가 아니 더라도 시험 종 의 내인성 IL - 21 에 결합 하 는 것 을 증명 한다 . 항 - 사람 IL - 21 mAb 클론 362 . 78 . 1 . 44 와 결합 하 는 IL - 21 에 대한 포지티브 를 시험 하 는 종 에서 IL - 21 중화 를 증명 하 기 위해 추가 의 연구 가 필요 하 다 ( 실시 예 20 참조 ) .