구체 적 으로 , TRAIL 및 CD 유전자 를 포함 하 는 렌 티 바이러스 가 감염 된 세포 를 FACS 튜브 당 5 x 105 개 가 되 도록 분주 하 고 , 이 를 4 ℃ 에서 , 1 , 500 rpm 의 조건 으로 5 분 동안 원심 분리 하 여 상층 액 을 제거 하 였 다 . 여기 에 1 ㎖ 의 FACS 완충액 ( 2 % 우태 아 혈청 이 포함 된 PBS ) 을 첨가 하 여 세포 를 재현 탁하 고 , 동일 한 조건 으로 원심 분리 하 여 상층 액 을 제거 하 였 다 . 상기 의 세 척 과정 을 1 회 더 수행 한 뒤 , 1 ㎖ 의 FACS 완충액 에 세포 를 재현 탁하 였 다 . 재현 탁한 세포 에 200 ㎕ 의 FACS 완충액 에 0 . 3 ㎕ 의 LIVE / DEAD ® Fixable Near - IR Dead Cell Stain ( Life Technologies - Molecular Probes , 미국 ) 및 5 ㎕ 의 항 - TRAIL 항체 인 APC anti - human CD 253 항체 ( BioLegend , Cat #. 308210 , 미국 ) 를 첨가 한 혼합물 을 첨가 하 여 , 4 ℃ 에서 30 분 간 반응 시켰 다 . 반응 후 , 상기 와 같 은 방법 으로 세포 를 2 회 세척 하 였 고 , 상층 액 을 제거 하 였 다 . 세척 된 세포 에 300 ㎕ 의 고정 완충액 ( fixing buffer ) ( 2 % 포름알데히드 및 1 % 우태 아 혈청 이 포함 된 PBS ) 을 첨가 하 고 , 4 ℃ 에서 최소 15 분 동안 방치 하 였 다 . 상기 세포 를 FACS ( LSRFortessa , BD biosciences , 미국 ) 기기 로 분석 하 여 , TRAIL 을 발현 하 는 세포 를 선별 하 고 콜로니 를 형성 하 도록 배양 하 였 다 .