이 를 위해 pBBR 1 GfbrAfbrEfbr 벡터 구축 하 였 다 . 이 를 위하 여 , 먼저 RBS - metA fbr ( MetAR 27 C , I 296 S , P 298 L 암호 함 ) 를 서열 번호 38 과 서열 번호 39 로 증폭 시킨 후 이 를 HindIII 및 PstI 로 절단 된 벡터 pBBR 1 Gfbr 에 삽입 하 여 벡터 pBBR 1 GfbrAfbr 를 제조 하 였 다 . 다음 , RBS - cysE fbr ( CysEV 95 R , D 96 P 암호 함 ) 를 서열 번호 40 과 서열 번호 41 로 증폭 시킨 후 이 를 BamHI 로 절단 된 벡터 pBBR 1 GfbrAfbr 에 삽입 하 여 벡터 pBBR 1 GfbrAfbrEfbr 를 제조 하 였 다 . 또한 , RBS - metK 를 서열 번호 42 와 서열 번호 43 로 E . coli W 3110 유전체 로부터 증폭 시킨 후 , 이 를 SphI 로 전달 된 pTacT 벡터 에 Gibson assembly 로 삽입 하 여 pTacTK 벡터 를 제조 하 였 다 .