이 를 위해 , 구체 적 으로 , 10 % FBS , 1 % 항생제 , rmSCF 20 ng / ml 및 rmIL - 3 10 ng / ml 을 포함 하 는 RPMI 배지 가 담겨진 96 웰 플레이트 에 골수 유래 비 만 세포 ( BMMC ) 를 1 x 104 cells / 50 μ l / well 이 되 도록 분주 하 고 , 단량체 성 IL - 10 변이체 단백질 을 포함 하 는 융합 단백질 ( NTIG - IL - 10 Vm ) 와 실시 예의 융합 단백질 ( PG 110 - 1 ) 을 농도 에 맞 게 희석 한 다음 , 항 - DNP IgE 를 1 μ g / mL 로 희석 한 후 96 웰 플레이트 에 50 μ l 씩 첨가 하 고 , 37 ℃ 및 5 % CO 2 조건 에서 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 이 어 , DNP - BSA ( Antigen ) 을 100 ng / mL 이 되 도록 희석 하 여 96 웰 플레이트 에 50 μ l 씩 첨가 한 후 , 37 ℃ 및 5 % CO 2 조건 에서 밤새 반응 시켰 다 . 그런 다음 4 ℃ 에서 1 , 500 rpm 의 속도 로 5 분 간 원심 분리 를 한 후 , 새로운 96 웰 플레이트 에 회수 된 상등 액 150 μ l 를 분주 한 후 TNF - α ELISA 키트 ( BioLegend , USA ) 를 이용 하 여 TNF - α 의 농도 를 측정 하 였 다 .