DU 145 를 10 % FBS ( MOREGATE ) , 2 m ㏖/ L L - glutamine ( Invitrogen ) , 1 m ㏖/ L sodium pyruvate ( SIGMA ) 를 포함 하 는 MEM 배지 ( Invitrogen ) 에서 2 . 5 × 105 cells / mL 가 되 도록 조제 하 고 , 48 well - plate ( CORNING ) 의 각 well 에 200 μ L 씩 분주 하 여 , 37 ℃, 5 % CO 2 조건 하 , 하룻밤 배양 하 였 다 . 정제 한 키메라 NS 22 ( 인간 γ 1 , κ ) 를 100 ㎍/ mL 가 되 도록 10 % FBS , 2 m ㏖/ L L - glutamine , sodium pyruvate 를 포함 하 는 MEM 배지 에 희석 하 고 , 이 용액 을 사용 하 여 희석 공비 5 , 합계 6 계열 의 희석 액 을 조제 하 여 , 각각 을 100 ng / mL 의 human interleukin - 31 ( R & D systems ) 과 1 : 1 로 혼합 하 여 , 각 well 에 50 μ L 씩 첨가 하 였 다 . 37 ℃, 5 % CO 2 조 건하 에서 2 일 간 배양 한 후 의 배양 상청 중 IL - 6 농도 를 DuoSet ELISA Development kit ( R & D systems ) 를 사용 하 여 측정 하 였 다 . NS 22 의 중화 활성 은 저해 율 ( %) 로서 평가 하 였 다 . 즉 , IL - 31 비존재 하 에서 의 IL - 6 농도 ( A ) 를 최대 저해 활성 ( 100 % 저해 ) , IL - 31 첨가 하 및 NS 22 비첨 가하 에서 의 IL - 6 농도 ( B ) 를 저해 활성 없 음 ( 0 % 저해 ) 으로 하 여 , IL - 31 첨가 하 및 NS 22 첨 가하 의 IL - 6 농도 ( C ) 를 , 다음 식 에 의해 산출 하 였 다 .