12 Well plate 의 각 well 이 90 % confluency 에 도달 하 였을 때 분화 배지 ( 2 % HS ( Horse Serum ) 및 1 % Penicillin 이 첨가 된 HyClone ™ DMEM / HIGH GLUCOSE 배양액 ) 를 처리 하 였 다 . 분화 배지 는 2 일 마다 교체 하 였으며 , 총 6 일 간 처리 하 였 다 . 이어서 , 충분히 분화 가 유도 된 C 2 C 12 myotubes 는 24 시간 동안 HyClone ™ 에 1 % Penicillin 을 첨가 한 배지 를 처리 한 후 이하 실험 에 이용 하 였 다 .