또한 , 재 확인 을 위하 여 실시 예 1 . 3 과 동일 한 방법 으로 제조 된 HLA DR 이 결실 된 섬 유아 세포 의 세 개 클론 을 이용 하 여 웨스턴 블롯 팅 을 실시 하 였 다 . 보다 자세 하 게 는 , HLA DR 이 결실 된 섬 유아 세포 ( DR KO ) 또는 정상 섬유 아 세포 ( DR WT ) 에 0 , 50 , 또는 200 ng / mL 의 인터페론 감마 를 처리 하 고 4 일 동안 배양 한 후 에 , 차가운 인산염 완충 용액 을 이용 하 여 세척 하 였 다 . 그리고 RIPA 버퍼 를 이용 하 여 세포 를 용해 시킨 후 에 , 용해 물 을 10 % SDS - PAGE 를 이용 하 여 크기 별 로 분리 하 고 , 분리 된 단백질 을 PVDF 멤 브레인 으로 이동 시켰 다 . 그리고 멤 브레인 은 블로킹 용액 ( 2 . 5 % skim milk ) 에 침지 시켜 1 시간 동안 반응 시킨 후 에 , 1 : 1 , 000 의 농도 로 희석 된 anti - HLA DR antibody ( Abcam ) 또는 1 : 20 , 000 의 농도 로 희석 된 anti - α - tubulin antibody ( Abcam ) 을 첨가 한 후 4 ℃ 에서 16 시간 동안 반응 시켰 다 . 그리고 1 : 5 , 000 의 농도 로 희석 된 secondary anti - rabbit IgG HRP ( Santa Cruz ) 를 처리 하 고 1 시간 동안 실온 에서 반응 시킨 후 에 , ECL 용액 을 이용 하 여 관찰 하 였 다 . 그 결과 는 도 7 에 나타내 었 다 .