10 주령 의 Balb / C 수컷 마우스 를 도살 하 여 비장 을 채취 했 다 . 비장 을 배 양접 시 내 에서 잘 게 자르 고 , 주 사통 으로 작 게 으깨 고 , 메시 를 통과 시킴 으로써 , 비장 세포 를 분리 했 다 . 분리 한 비장 세포 를 RPMI 1640 배지 에 10 % 가 되 도록 우태 아 혈청 을 첨가 한 배지 ( 10 % FCS / RPMI 1640 ) 에서 2 시간 배양 한 후 , 동 배지 에서 2 회 씻 음 으로써 , 접착 한 대식세포 를 단리 했 다 . 단리 한 비장 대식세포 에 실시 예 1 의 강글리오시드 GD 3 을 10 μ g / ml 가 되 도록 첨가 한 10 % FCS / RPMI 1640 배지 , 또는 아무것 도 첨가 하 지 않 은 RPMI 1640 배지 ( 대조 ) 를 가하 고 , 2 시간 배양 했 다 . 그 후 LPS 를 1 μ g / ml 가 되 도록 첨가 하 고 , 3 시간 더 배양 했 다 . 배양 종료 후 , 배지 를 채취 함 과 아울러 , 세포 를 0 . 1 % SDS 용액 으로 가용화 했 다 . 채 취한 배지 중 의 TNF - α 농도 는 L 929 마우스 섬유 아 세포 를 사용 한 바 이 오 어 세 이법 에 의해 측정 했 다 . 가용화 한 세포 내 의 DNA 량 을 DAPI 에 의한 형 광광 도 법 으로 측정 하 고 , DNA 량당 의 TNF - α 분비 를 구했 다 . 결과 를 도 1 에 나타낸다 .