pcDNA 3 . 1 ( +) 을 Gateway Vector Convension System ( Thermo Fisher Scientific 사 ) 에 의해 Destination Vector 로 개변 한 pcDNA 3 . 1 - DEST 를 제작 하 였 다 . Gataway LR Clonase Enzyme mix ( Life Technologies 사 ) 를 이용 하 여 , 인간 GPRC 5 D 단백질 ( NP _ 061124 . 1 ) 을 코딩 하 는 cDNA 를 pcDNA 3 . 1 - DEST 벡터 에 클로닝 하 여 인간 GPRC 5 D 발현 벡터 pcDNA 3 . 1 - DEST - hGPRC 5 D 를 구축 하 였 다 . 인간 GPRC 5 D 발현 벡터 의 대량 조제 에 는 , Endofree Plasmid Giga Kit ( QIAGEN 사 ) 를 이용 하 였 다 .