상기 와 같이 제조 된 랜덤 프라이머 를 함유 하 는 역전사 반응 건조물 과 dT 프라이머 를 함유 하 는 역전사 반응 건조물 에 각각 HeLa 세포 에서 ( 주 ) 바이오 니아 의 아 큐 프 렙 티슈 RNA 프 렙 메이트 ( AccuPrep Tissue RNA Prepmate ) 로 분리 정제 한 총 RNA 900 ng 를 가하 고 , 0 . 1 % DEPC ( diethylpyrocarbonate ) 처리 한 증류수 를 가하 여 총 부피 20 ㎕ 가 되 도록 재수 화 하 여 역전사 반응 액 을 제조 하 였 다 . 제조 된 역전사 반응 액 을 이용 하 여 기존 의 반응 조건 42 ℃ 30 분 및 고 온 반응 55 ℃ 30 분 , 37 ℃ 2 분 , 50 ℃ 3 분 을 한 주기 로 하 여 6 회 순환 반응 , 37 ℃ 1 분 , 47 ℃ 3 분 , 55 ℃ 1 분 을 한 주기 로 하 여 6 회 순환 반응 으로 역전사 반응 을 수행 하 였 다 . 상기 역전사 반응 으로 생성 된 cDNA 3 ㎕ 를 주형 으로 PCR 반응 을 수행 하 여 길 이 별 트랜스페린 수용체 유전자 ( 800 bp , 1 . 5 kb , 2 . 0 kb , 2 . 6 kb ) 를 증폭 하 였 다 . 이때 사용 한 프라이머 서열 은 다음 과 같 다 .