항원 상 의 에 피토프 는 하나 이상 의 핫 - 스팟 잔기 ( hot - spot residues ) , 즉 동족 항체 와 의 상호 작용 에 특히 중요 한 잔기 를 포함 할 수 있 고 , 이 경우 상기 핫 - 스팟 잔기 의 측쇄 에 의해 매개 되 는 상호 작용 은 항체 / 항원 상호 작용 을 위한 결합 에너지 에 상당히 기여 한다 ( Peng 등 의 PNAS 111 , E 2656 - E 2665 ( 2014 ) 참조 ) . 핫 - 스팟 잔기 는 항원 의 변이체 ( 여기 서 는 FIX / FIXa 및 FX ) 를 시험 함 으로써 식별 될 수 있 는데 , 여기 서 단일 에 피토프 잔기 는 동족 항체 에 결합 하 기 위해 , 예 를 들 어 , 알라닌 으로 치환 된 것 이 다 . 알라닌 으로 에 피토프 잔기 를 치환 하 는 것 이 항체 에 대한 결합 에 강한 영향 을 미치 는 경우 , 상기 에 피토프 잔기 는 핫 - 스팟 잔기 로 간주 되 고 , 따라서 항원 에 대한 항체 의 결합 에 특히 중요 한 것 으로 간주 된다 .