분석 은 모두 플레이트 : 비젼 ( Plate : Vision ) ( 퍼킨 엘머 ( Perkin Elmer ) ) 형광 판독기 를 사용 하 여 투명 하 고 평평 한 바닥 을 갖 는 코닝 ( Corning ) 384 - 웰 흑색 폴리스티렌 비 - 결합 표면 마이크 로 티 터 플레이트 에서 수행 되 었 다 . 분석 을 수행 하 기 위하 여 , BACE 2 의 80 nM 용액 을 분석 완충제 ( 분석 완충제 는 100 mM Na - 아세테이트 ; 20 mM EDTA ; 0 . 05 % BSA ; pH 4 . 5 이 다 ) 중 에서 제조 하 고 , 실온 에서 1 시간 동안 인 큐 베이 팅 하 여 효소 를 활성 화 시켰 다 . 39 ㎕ 의 활성 화 된 BACE 2 를 각각 의 분석 웰 에 위치 시키 고 , 이어서 1 ㎕ 의 시험 화합물 을 100 % DMSO 중 적절 한 농도 로 위치 시켰 다 . 이어서 , 플레이트 를 혼합 하 고 , 실온 에서 10 분 동안 인 큐 베이 팅 하 였 다 . 분석 을 개시 하 기 위하 여 , 분석 완충제 중 1 . 5 μ M 용액 형광 성 펩티드 10 ㎕ 를 첨가 하 고 , 분석 혼합물 내 의 형광 강도 를 30 분 동안 630 nm 의 여기 파장 을 사용 하 여 695 nm 에서 측정 하 였 다 .