인간 GPRC 5 D 를 발현 하 고 있 지 않 는 다발 성 골수종 세포주 KMS - 11 ( JCRB 세포 뱅크 ) 을 10 % FBS 함유 RPMI 1640 배지 를 사용 하 여 3 . 7 × 105 세포 / mL 의 농도 로 75 cm 2 플라스크 에 파종 하 고 , pcDNA 3 . 1 - DEST - cGPRC 5 D 를 KMS - 11 세포 에 Lipofectamine 2000 ( Thermo Fisher Scientific 사 ) 을 이용 하 여 도입 하 고 , 37 ℃, 5 % CO 2 의 조건 하 에서 2 일 간 배양 하 였 다 . 배양 한 발현 벡터 도입 KMS - 11 세포 를 , 1 mg / mL 의 제 네 티 신 ( Thermo Fisher Scientific 사 ) 함유 10 % FBS 함유 RPMI 1640 배지 에서 1 × 106 세포 / mL 의 농도 로 배양 하 여 약제 스크리닝 을 행하 였 다 . 벌크 세포 를 1 mg / mL 의 제 네 티 신 ( Thermo Fisher Scientific 사 ) 함유 ClonaCell - HY Selection Medium E 배지 ( StemCell Technologies 사 ) 를 사용 하 여 한계 희석법 으로 싱글 클론 화 하 여 , 사이 노 몰 거스 원숭이 GPRC 5 D 발현 다발 성 골수종 세포주 KMS - 11 _ cGPRC 5 D 를 수립 하 였 다 .