예 를 들 면 , 인간 안구 세포주 에서 내생 적 표적 유전자 발현 의 녹다운 수준 을 위한 간섭 RNA 의 능력 은 , 예 를 들 면 , 하 기 와 같이 시험관 내 에서 평가 될 수 있 다 . 형질 전환 된 인간 세포 를 표준 성장 배지 ( 예 : 10 % 우태 아 혈청 이 보충 된 DMEM ) 에서 트랜스펙션 하 기 24 시간 전 에 평판 배양 하 였 다 . 트랜스펙션 은 제조자 의 지시 에 따라 Dharmafect 1 ( Dharmacon , Lafayette , CO ) 을 사용 하 여 , 0 . 1 nM - 100 nM 범위 의 간섭 RNA 농도 에서 수행 하 였 다 . 비 - 표적 대조 siRNA 및 라민 A / C siRNA ( Dharmacon ) 를 대조 로서 사용 하 였 다 . 표적 mRNA 수준 은 , 예 를 들 어 , TAQMAN ® 정 방향 및 역방향 프라이머 및 프로브 세트 를 사용 하 여 트랜스펙션 24 시간 후 qPCR 로 평가 되 었 다 ( Applied Biosystems , Foster City , CA ) . 표적 단백질 수준 은 , 트랜스펙션 약 72 시간 후 ( 실제 시간 은 단백질 전환 비율 에 좌우 됨 ) , 예 를 들 어 , 웨스턴 블랏 으로 평가 될 수 있 다 . 배양 세포 로부터 의 RNA 및 / 또는 단백질 분리 를 위한 표준 기술 은 당업자 에게 공지 되 어 있 다 . 비 - 특이 적 인 기회 , 오프 표적 효과 를 감소 시키 기 위하 여 , 가능 한 가장 작 은 간섭 RNA 농도 가 표적 유전자 발현 에서 원 하 는 녹다운 의 수준 생산 을 위하 여 사용 되 어야 한다 .