시스테인 - 도입 G - CSF 변이체 가 과다 발현 된 균체 를 원심 분리 하 여 Tris 20 mM , 150 mM NaCl 에 현 탁 후 , sonicator 로 균체 를 파쇄 하 였 다 . 세포 파쇄 물 을 원심 분리 후 2 %( w / v ) sodium deoxycholate 로 세척 하 여 봉입체 ( inclusionbody ) 를 회수 하 였 다 . 시스테인 - 도입 변이체 의 봉입체 ( inclusion body ) 를 7 M urea , 20 mM Tris , 100 mM NaCl , pH 8 . 8 에 녹인 후 , 3 . 3 M urea , 5 mM Tris , 2 mM reduced glutathione , 0 . 2 M oxidized glutathione , pH 8 . 8 에 10 배 희석 하 여 18 시간 동안 4 ℃ 에서 교반 하 면서 리폴 딩 ( refolding ) 과정 을 수행 하 였 다 .