비장 수지상 세포 활성 화 는 공동 자극 인자 ( CD 40 , CD 86 및 MHCII ) FACS Aria II ( Becton Dickinson , Franklin Lakes , NJ , USA ) 를 이용 하 여 결정 하 였 다 . 이 를 위해 세포 를 0 . 5 % BSA 를 함유 하 는 인산 완충 식염수 ( PBS ) 로 세척 하 고 , 표지 되 지 않 은 이 소형 대 조군 Ab 로 15 분 간 예비 배양 한 다음 , PBS 로 세척 한 후 30 분 동안 얼음 배양 하 여 형광 물질 접합 된 항체 로 표지 하 였 다 . 전방 및 측면 산란 시 게이트 를 사용 하 여 죽 은 세포 파편 을 제거 했 다 . 생존 성 게이트 를 위해 7 - amino actinomycin D ( 7 AAD ) 염색 을 사용 하 였 다 . 이어서 7 AAD 음성 집단 을 FACS Aria II 를 사용 하 여 분석 하 고 FlowJo 8 . 6 소프트웨어 를 사용 하 여 분석 하 였 다 .