본 실험 은 뮤 라인 멜라 노마 ( murine melanoma ) ( B - 16 F 10 ) 세포 ( 한국 세포주 은행 ) 를 10 % 의 우태 아 혈청 ( fetal bovine serum ) ( FBS ) 이 함유 된 DMEM 배지 로 6 - 웰 플레이트 에 웰 당 1 x 105 개 로 접종 하 고 5 % CO 2 및 37 ℃ 하 에서 세포 가 웰 바닥 에 약 80 % 이상 부착 될 때 까지 배양 하 였 다 . 이어 배지 를 제거 하 고 시료 를 적당 농도 로 희석 된 배지 에 교체 하 고 , 5 % CO 2 및 37 ℃ 하 에서 3 일 동안 배양 하 였 다 . 이 소람 네 틴 의 농도 범위 는 세포독성 이 없 는 1 ppm , 10 ppm 및 100 ppm 으로 결정 하 였 다 . 배지 를 제거 한 세포 를 PBS ( phosphate buffered saline ) 로 세척 하 고 , 이 를 트립신 으로 처리 하 여 세포 를 회수 하 였 다 . 회수 된 세포 는 헤 마토 사이토 미터 ( hematocytometer ) ( Tiefe Depth Profondeur 0 . 100 mm , Paul Marienfeld GmbH & Co . KG , 독일 ) 를 이용 하 여 세 포수 를 측정 하 고 , 5 , 000 내지 10 , 000 rpm 으로 10 분 동안 원심 분리 한 다음 상층 액 을 제거 하 여 펠릿 을 얻 었 다 . 이 세포 펠릿 을 60 ℃ 에서 건조 시키 고 10 % DMSO 가 함유 된 1 M 수산화 나트륨 액 100 ml 를 넣 어 60 ℃ 항온조 에서 세포내 멜라닌 을 얻 었 다 . 이 를 마이크 로 플레이트 리더 ( microplate reader ) ( Bio - Tek ELx 8081 U , 미합중국 ) 로 490 nm 에서 흡광도 를 측정 하 여 세포 일정 수당 멜라닌 양 을 구하 였 다 . 그 결과 를 하 기 표 4 에 나타내 었 다 .