정제 된 항체 는 SDS - PAGE / 쿠마시 , 크기 - 배제 고압 액체 - 크로마토그래피 ( SE - HPLC ) 및 액체 - 크로마토그래피 질량 분광 분석 ( LC - MS ) 분석 을 사용 하 여 그 특성 을 분석 하 였 다 . SDS - PAGE / 쿠마시 분석 은 NuPage 4 ~ 12 % 비스 - 트리스 겔 ( Invitrogen , 카탈로그 번호 NP 0321 BOX ) 을 사용 하 여 수행 하 였 다 . 여기 서 , 모든 항체 는 예상 대로 의 경쇄 및 중쇄 성분 을 나타냈 다 . 무손 상 분자 질량 의 결정 은 Agilent 6210 장비 상 의 액체 크로마토그래피 전기 분무 이온 화 체공 시간 질량 분광 분석법 ( Liquid Chromatography Electrospray Ionisation Time - of - Flight Mass Spectrometry method ) 장비 와 탈염 칼럼 ( desalting column ) MassPREP ( Waters , 카탈로그 번호 USRM 10008656 ) 를 사용 해 수행 하 였 다 . 사용 된 완충액 시스템 은 LC - MS 등급 H 2 O 중 의 0 . 1 % 포름산 으로 이루어진 평형 완충액 및 LC - MS 등급 ACN 중 의 0 . 1 % 포름산 으로 이루어진 용리 완충액 이 었 다 . 분석 은 N - 글리코시다아제 F ( Roche Diagnostics , 카탈로그 번호 11365177001 ) 및 환원제 ( 메르 캅 토 에탄올 또는 DTT ) 를 사용 하 여 수행 하 였 다 . 모든 항체 는 예상 대로 서열 및 하나 의 중쇄 N - 글리 칸 에 따른 온전 한 분자 질량 을 나타냈 다 . 순도 는 SE - HPLC 에 기초 하 여 결정 하 였 다 . 최종 단백질 순도 는 , Agilent LC 1100 / 1200 시스템 상의 SE - HPLC 방법 장비 에 기초 하 여 , BIOSep - SEC - S 3000 300 ? 7 . 8 mm 칼럼 ( Phenomenex , 카탈로그 번호 00 H - 2146 - K 0 ) , 및 200 mM 인산나트륨 ( pH 6 . 9 ) , 300 mM 염화칼슘 및 10 % 이소프로판올 로 구성 된 런닝 완충액 을 사용 해 분석 하 였 다 . 검출 을 위해 UV 280 및 형광 ( Ex 280 nm / Em 354 nm ) 검출기 를 사용 하 였 다 . 항체 는 항체 의 크기 를 반영 하 는 보유 시간 에 단일 대칭 피크 로서 용리 되 었 다 . 순도 추정 치는 상이 한 항체 에 대해 모두 95 ~ 99 % 사이 에 있 었 다 . 최종 단백질 농도 를 측정 하 기 위해 , NanoDrop 분광 광도계 ( Thermo Scientific ) 를 각각 의 항체 에 대한 특이 적 소광 계수 와 함께 사용 하 였 다 .