섬유상 파지 M 13 을 기반 으로 하 는 파지 미드 벡터 에 클로닝 된 나이브 인간 단 쇄 Fv ( scFv ) 파지 디스플레이 라이브러리 를 선별 을 위해 사용 하 였 다 ( Vaughan et al . Nature Biotechnology 14 ( 3 ) : 309 - 314 , 1996 ; Hutchings , C . Generation of Naive Human Antibody Libraries , in Antibody Engineering , R . Kontermann and S . Dubel , Editors . 2001 , Springer Laboratory Manuals , Berlin . p . 93 ) . 구체 적 으로 Vaughan 등 ( Vaughan , TJ . et al . Nature Biotechnology 14 ( 3 ) : 309 - 14 , 1996 ) 및 Hawkins et al . Journal of Molecular Biology 226 : 889 - 896 , 1992 ) 이 기술 한 바 와 같이 재조합 인간 IL - 4 R α Fc ( R & D Systems ) 에 대한 일련 의 선별 사이클 을 사용 하 여 파지 디스플레이 라이브러리 로부터 항 - IL - 4 R α 특이 적 scFv 항체 를 단리 하 였 다 . 간략 하 게 , 패닝 선별 을 위해 , PBS ( 둘 베코 PBS , pH 7 . 4 ) 중 인간 IL - 4 R α Fc 를 밤새 4 ℃ 에서 Immobilizer ™ 마이크 로타 이터 플레이트 ( Nunc ) 의 벽 에 흡착 시켰 다 . 웰 을 PBS 로 세척 한 후 1 시간 동안 PBS - Marvel ( 3 % w / v ) 로 블로킹 하 였 다 . 무 관련 된 Fc 태 깅된 단백질 을 10 배 과량 함유 하 는 , PBS - Marvel ( 3 % w / v ) 중 정제 된 파지 를 웰 에 부가 하 고 1 시간 동안 코팅 된 항원 과 결합 하 도록 두 었 다 . 비 결합 된 파지 는 PBS - Tween ( 0 . 1 % v / v ) 및 PBS 를 사용 하 여 일련 의 세 척 사이클 을 통해 제거 하 였 다 . 결합 된 파지 입자 를 용리 하 고 , 이 . 콜라 이 TG 1 박테리아 를 감염 시키 고 , 다음 선별 라운드 를 위해 구제 하 였 다 ( Vaughan et al . Nature Biotechnology 14 ( 3 ) : 309 - 314 , 1996 ) .