다음 으로 , 금방 용해 한 10 mg / ml 의 EDC ( 31 , 1 - 에틸 - 3 -[ 디메틸아미노 프로필 ] - 카르 보디 이미드 하이포 클로라이드 , Pierce , Rockford IL ) 1 . 5 ㎕ 를 각 튜브 에 넣 고 , 바로 볼 텍 싱 한 다음 실온 의 어두운 곳 ( 루미 넥스 비드 의 형광 암호 를 유지 하 기 위함 ) 에서 30 분 간 인 큐 베이 션 하 였 다 . 15 분 에 다시 재 혼합 하 였 다 . EDC 첨가 , 인 큐 베이 션 및 재 혼합 을 2 번 째 에 도 반복 하 였 다 .