본 발명 에 사용 된 프라이머 는 주형 상 의 영역 에서 혼성 화 되 거나 또는 어닐링 되 어 이중 - 가닥 구조 를 형성 한다 . 이러 한 이중 - 가닥 구조 를 형성 하 기 위한 안전 한 핵산 혼성 화 조건 은 Joseph Sambrook , et al . , Molecular Cloning , A Laboratory Manual , Cold Spring Harbor Laboratory Press , Cold Spring Harbor , N . Y . ( 2001 ) 및 Haymes , B . D . , et al . , Nucleic Acid Hybridization , A Practical Approach , IRL Press , Washington , D . C . ( 1985 ) 에 개시 되 어 있 다 . 다양 한 DNA 중합효소 가 본 발명 의 방법 의 증폭 단계 에 사용 될 수 있 는데 , 이 는 열 에 안정 한 DNA 중합효소 인 E . coli DNA 중합효소 I 의 “ Klenow ” 단편 , 및 박테리오파지 T 7 DNA 중합효소 를 포함 한다 . 바람직 하 게 는 상기 중합효소 는 써 머스 아쿠아 티 쿠스 ( Thermus aquaticus , Taq ) , 써 머스 써 모필 러스 ( Thermus thermophilus , Tth ) , 써 머스 필리포 르 미스 ( Thermus filiformis ) , 써 미스 플라 부스 ( Thermis flavus ) , 써 모코 커스 리터 랄 리스 ( Thermococcus literalis ) , 및 피로 코 커스 푸리오 수스 ( Pyrococcus furiosus , Pfu ) 를 포함 하 여 , 다양 한 박테리아 종 으로부터 얻 을 수 있 는 것 으로 열 에 안정 한 DNA 중합효소 이 다 .