성장 의 덜 융합 된 단계 ( subconfluent phase ) 에서 72 시간 후 에 , 배지 를 제거 하 고 세포 를 시험 화합물 ( 20 ㎕, 삼중 으로 적어도 5 개 농도 ) 의 존재 또는 부 재하 에 180 ㎕ 의 배양 배지 ( neurobasal medium ) + 2 mM 1 - 글루타민 ( 제조원 ; Life Techonologies ) 속 에서 37 ℃ 에서 24 시간 동안 배양 하 였 다 .