본 분석 은 근본 적 으로 Winter et al Rao et al ( J . Pharmacol . Exp . Ther . 269 , 917 ( 1994 ) ) 에 기술 된 방법 에 따라 수행 한다 . ( 다른 마우스 균주 도 사용 할 수 있 음 ) 테스트 약물 ( 들 ) ( 서 플라 타스 트 와 스타 틴 ( 피타 바스타 틴 , 플 루 바스타 틴 , 로바스타틴 , 프라 바스타 틴 또는 바람직 하 게 는 심바 스타 틴 , 로수 바스타 틴 또는 아토 르 바스타 틴 ) 의 조합 , 서 플라 타스 트 단독 및 스타 틴 단독 ) 을 0 . 03 - 50 mg / kg 의 용량 으로 2 - 24 시간 마다 피하 , 정맥 내 , 복막 내 또는 경구 투여 한다 ( 비교 를 위해 , 일부 실험 은 약물 없이 수행 함 ) . 투여 하 기 전 에 , 약물 의 스톡 용액 ( 상기 실시 예 1 참조 ) 을 예컨대 수 ( 경구 처리 ) 또는 염수 ( 비경구 투 여용 ) 중 의 0 . 5 % 또는 1 % 메틸셀룰로스 에 필요 한 만큼 희석 한다 . 다른 비 히 클 도 사용 할 수 있 다 . 1 차 약물 투약 후 1 분 내지 24 시간 에 , 0 . 5 - 1 mL 멸균 PBS 중 의 0 . 5 - 2 mg 자이 모산 A ( Sigma , cat . no . Z 4250 ) 를 복막 내 주사 한다 ( 자이 모산 A 를 이용 하 는 대신 , 복막 염증 은 또한 항 - 마우스 - IgE ( ( 마우스 IgE 를 이용 한 1 - 3 일 간 복막 전처리 와 함께 전처리 하 지 않 고 ) , 콘카 나 발린 A , 카라 기난 , 프로테 오 세 펩톤 , LPS , PMA , 티오 글리콜 레이트 , 아라키돈산 , fMLP , TNF , IL - 1 β 와 같 은 그 외 잘 확립 되 어 있 는 전 - 염증 성 자 극체 를 전 - 염증 성 농도 로 복막 내 주사 하 여 유도 할 수 도 있 음 ) . 또한 , 테스트 약물 ( 들 ) 은 다른 전 - 염증 성 자극 또는 자 이모 산 의 복막 내 주사 와 동시 에 투여 할 수 있 음 ) . 자 이 모산 ( 또는 그 외 전 - 염증 성 자극 한 가지 이상 ) 주사 후 2 - 24 시간 에 , 동물 을 죽였 다 . 복강 을 세척 완충액 ( 3 - 5 mM EDTA 또는 5 - 10 units / ml 헤파린 이 첨가 또는 무 첨가 된 빙 냉한 PBS ) 1 - 3 mL 으로 헹군다 . 세척액 내 총 및 분화 백혈구 수 를 헤 모사 이토 미터 와 이후 의 터크 용액 을 이용 한 염색 을 이용 하 거나 및 / 또는 May - Grunwald Giemsa 또는 변형 된 Wright ' s ( Diff - Quik ) 염료 각각 으로 염색 한 사이토 스핀 조 제물 중 에서 광 현미경 으로 표준 형태 기준 을 이용 하 여 측정 한다 . 또한 총 및 분화 백혈구 수 측정 을 위한 다른 확립 된 방법 도 이용 할 수 있 다 . 나머지 세척액 을 원심 분리 ( 300 - 3000 x g , 4 ℃, 3 - 10 min ) 하 고 , 세포 가 없 는 세척액 상층 물 은 염증 매 개체 LTB 4 , PGE 2 , TXB 2 및 / 또는 마우스 사이토카인 / 케모 카인 ( 예 , IL - 4 , IL - 6 , TNF , IL - 1 β , KC , MCP - 1 , IL - 10 , IL - 12 p 70 , IFN γ ) 의 양 을 상기 실시 예 1 내지 47 에 기술 된 바 와 같이 분석 하 기 전 까지 냉동 ( - 20 ℃ 내지 - 80 ℃) 저장 한다 . 세척액 상층 물 내 히스타민 의 함량 은 , 상업 적 으로 시판 되 는 히스타민 효소 면역 - 분석 키트 ( EIA / ELISA 키트 ) 를 이용 하 여 제조사 의 설명서 에 따라 결정 한다 . 또한 , 염증 성 복막 세포 활성 화 를 , 실시 예 3 에 기술 된 β - 헥소스 아미니 다제 를 이용 한 세척액 내 β - 헥소스 아미니 다제 활성 측정 에 의해 조사 할 수 있 다 . 세척액 의 세포 펠 렛 은 0 . 1 - 1 . 0 mL 0 . 05 M KHPO 4 pH 6 . 0 + 0 . 5 % HTAB 에 재현 탁하 고 , Rao et al ( J . Pharmacol . Exp . Ther . 269 , 917 - 25 ( 1994 ) ) 에 기술 된 바 와 같이 마 이엘 로 페록시다제 ( MPO ) 를 분석 하 기 전 까지 냉동 ( - 20 ℃ 내지 - 80 ℃) 저장 한다 . 각 동물 유래 의 동일 한 세포 펠 렛 은 마이크 로 어레이 실험 을 위해 추가 적 으로 가공 할 때 까지 RLT 완충액 ( QIAGEN , Valencia , CA ) 중 에 동결 ( - 80 ℃) 저장 한다 ( 하 기 실시 예 12 참조 ) . 세 척 완충액 으로 복강 을 세정 하 는 시기 에 , 염증 이 발생 한 복막강 으로부터 조직 ( 복막 벽 , 장 및 / 또는 그 외 복막 내 또는 후 복막 장기 / 조직 ) 생검 을 취하 여 , 중량 을 측정 하 고 , ( 마이크로 어레이 분석 용 샘플 은 - 80 ℃ 에서 TRIzol ( Invitrogen , Carlsbad , CA ) 중 에 동결 됨 ) 에서 동결 저장 하 며 , 실시 예 12 에 기술 된 바 와 같이 , 마이크 로 어레이 기법 을 이용 한 조직 유전자 발현 에 대해 분석 한다 . 무 처리 동물 의 염증 이 발생 하 지 않 은 복강 을 이용 하 여 MPO , 염증 매개체 , 사이토카인 / 케모 카인 및 유전자 발현 의 베이스 라인 수치 로 제공 한다 . 또한 , 조직 염증 은 통상 의 조직 및 면역 조직 화학 기법 을 이용 하 여 조사 할 수 있 다 .