ACTR 또는 모의 T - 세포 ( 이펙터 ; E ) 및 표적 세포 ( 표적 ; T ) 를 4 : 1 E : T 비 로 , 증가 하 는 농도 의 항 - BCMA ( hSG 16 . 17 SEA ) 또는 항 - HER 2 ( 트라 스투 주 맙 ) 표적 화 항체 의 존재 하 에 인 큐 베이 션 하 였 다 . 이 들 실험 을 위해 , BCMA + HER 2 - NCI - H 929 및 BCMA - HER 2 + SKBR 3 표적 세포 를 사용 하 였 다 . 세포 상청 액 을 37 ℃/ 5 % CO 2 인큐베이터 에서 24 - 시간 인 큐 베이 션 후 에 수집 하 였 다 . 후속 해서 , 메소 스케일 디스커버리 V - 플렉스 인간 IFN - γ 키트 ( K 151 QOD - 4 ) 를 사용 하 여 상청 액 을 IFN γ 에 대해 분석 하 였 다 . 간략 하 게 , 제조 업체 의 프로토콜 에 따라 염증 유발 보정 인자 블 렌 드 , 검출 항체 용액 , 및 판독 완충제 를 제조 하 였 다 . 공동 - 배양 상청 액 을 얼음 상 에서 해동 시키 고 , 10 % 태아 소 혈청 이 보충 된 RPMI 1640 배지 에서 적절 하 게 희석 하 였 다 . 50 μ L 의 희석 된 샘플 또는 보정 인자 를 MSD 플레이트 에 첨가 하 고 , 플레이트 를 밀봉 하 고 , 암실 에서 2 시간 동안 600 x g 의 진탕기 상 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 이어서 , 플레이트 를 0 . 05 % 트윈 - 20 을 함유 하 는 150 μ L PBS 로 3 회 세척 하 였 다 . 검출 항체 용액 25 μ L 를 플레이트 에 첨가 하 고 , 플레이트 를 밀봉 하 고 , 암실 에서 2 시간 동안 600 x g 의 진탕기 상 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 플레이트 를 0 . 05 % 트윈 - 20 을 함유 하 는 150 μ L 포스 페이트 완충 염수 로 3 회 세척 하 였 다 . 판독 완충제 ( 150 μ L ) 를 플레이트 에 첨가 하 고 , 플레이트 를 MSD 퀵 플렉스 SQ 120 상 에서 실행 시켰 다 .