본 발명 의 약독 화 된 보르데 텔라 브론 키 셉 티 카 균주 는 하 기 와 같이 제조 되 었 다 . 돼지 호흡기 질병 인 위축 성 비염 의 원인 병원체 인 보르데 텔라 브론 키 셉 티 카 의 중요 한 대사 과정 에 관여 하 는 유전자 인 aroA 유전자 부위 중 에서 N - 말단 약 300 mer 와 C - 말단 약 300 mer 를 클로닝 하 고 , 선택 마커 유전자 로 는 카나마이신 내성 유전자 ( KanR ) 서열 을 pKD 13 헬퍼 플라스미드 로부터 PCR 로 증폭 하 여 클로닝 하 고 , 마지막 으로 PCV 2 의 캡시드 유전자 를 PCR 로 증폭 , 클로닝 하 여 상기 4 개 의 유전자 조각 을 서로 연결 시켜 하나 로 만든 후 , 이것 을 상동 재조합 용 인서 트 로 사용 하 여 원래 의 aroA 유전자좌 에 치환 을 시킴 으로써 이종 항원 단백질 인 PCV 2 의 캡시드 단백질 을 발현 시키 는 이종 항원 단백질 발현 시스템 을 개발 하 였 다 .