트라 스투 주 맙 scFv - 항 - Id scFv 융합 단백질 은 시토 카인 방출 및 세포독성 검정 을 사용 하 여 CAR T 세포 활성 을 유도 하 는 것 으로 확인 된다 . 트라 스투 주 맙 scFv - 항 - Id scFv 융합 단백질 을 BT 474 세포 , 또는 HER 2 - 양성 인 다른 인간 종양 세포 또는 세포주 와 함께 인 큐 베이 션 한다 . 트라 스투 주 맙 scFv - 항 - Id scFv 융합 단백질 은 정제 된 가용성 단백질 의 형태 이 거나 , 세포 배양 상등 액 상태 이 거나 , 배 양물 중 의 세포 , 예 를 들 어 FMC 63 - 기반 CAR 도메인 을 갖 는 CAR T 세포 로부터 분비 된다 . FMC 63 - 기반 CAR T 세포 가 아직 존재 하 지 않 는다면 이것 을 배 양물 에 첨가 한다 . 공배 양물 은 , 예 를 들 어 4 시간 내지 72 시간 인 큐 베이 션 될 수 있 게 한다 . 최적 의 시점 에서 , 예 를 들 어 IL - 2 및 IFN - 감마 에 대한 ELISA 분석 을 위하 여 상등 액 을 수집 한다 . 최적 의 시점 에서 , 세포독성 검정 , 예 를 들 어 XTT 검정 을 사용 하 여 세포 를 분석 한다 . 이 들 검정 은 트라 스투 주 맙 scFv - 항 - Id scFv 융합 단백질 이 표적 HER 2 - 양성 종양 세포 를 용해 시켜 세포독성 을 야기 하 도록 FMC 63 - 기반 CAR T 세포 를 재 유도 함 을 입증 한다 .