또한 , 안정 화제 를 사용 하 는 경우 상기 42 ~ 55 ℃ 단계 를 42 ~ 50 ℃ 미만 단계 와 50 ~ 55 ℃ 단계 를 순차 적 으로 수행 함 으로써 RNA 에서 cDNA 로 전환 되 는 효율 을 더욱 증가 시킬 수 있 다 . 이 는 RNA 의존 DNA 폴리머 라 제 의 열 안정 성 을 안정 화제 에 의해 보완 하 였으나 유전 적 으로 내열 성 을 갖 는 효소 가 아니 므로 고온 에서 바로 반응 시키 는 것 보다 는 중간 단계 인 42 ℃~ 50 ℃ 미만 에서 역전사 반응 을 거치 게 하 는 것 이 바람직 하 기 때문 이 다 . 상기 방법 에서 , 한 주기 는 10 ~ 40 ℃ 단계 10 초 ~ 5 분 , 42 ℃~ 50 ℃ 미만 단계 10 초 ~ 5 분 및 50 ~ 55 ℃ 단계 10 초 ~ 5 분 을 한 주기 로 하 여 1 ~ 20 회 로 순환 하 는 것 이 보다 바람직 하 다 .