상기 추출 한 RNA 1 μ g 을 대상 으로 5 x iScript Reaction Mix 및 iScript Reverse Transcriptase 역전사 효소 ( Bio - Rad , USA ) 를 사용 하 여 25 ℃ 에서 5 분 간 priming , 46 ℃ 에서 20 분 간 reverse transcription , 95 ℃ 에서 1 분 간 incubation 진행 하 여 cDNA 를 합성 하 였 다 .