정제 된 C 1 q 를 함유 하 는 무 혈청 배지 내 WIL 2 - S SF 세포 에 대한 생존 율 검정 에서 C 1 q 구상 헤드 영역 에 대해 지시 된 항 - C 1 q 중화 항체 를 사용 함 으로써 , C 1 q 결합 을 위한 K 326 W / E 333 S 치환 과 조합 하 여 E 430 G Fc - Fc 증진 치환 을 함유 하 는 효능 작용 항 - DR 5 IgG 1 - hDR 5 - 01 - G 56 T - K 326 W / E 333 S / E 430 G 의 효능 에 대한 C 1 q 의 요건 을 시험 하 였 다 . 유사 하 게 , 이 중 에 피토프 표적 화 항체 조합 IgG 1 - hDR 5 - 01 - G 56 T - E 430 G + IgG 1 - hDR 5 - 05 - E 430 G 에 대해 동일 한 세팅 에서 중화 C 1 q 의 효과 를 또한 시험 하 였 다 . 생존 율 검정 을 본질 적 으로 실시 예 8 에 기재 된 바 와 같이 수행 하 였 다 . 간략 하 게 , WIL 2 - S SF 세포 를 0 . 67 x 106 개 세포 / mL 의 농도 로 무 혈청 배양 배지 에 재현 탁 시켰 다 . 75 μ L 의 단세포 현탁액 ( 웰 당 50 , 000 개 세포 ) 을 폴리스티렌 96 - 웰 편평 - 바닥 플레이트 내 무 혈청 배양 배지 에 시 딩 하 였 다 . 이어서 , 25 μ L 항 - DR 5 항체 샘플 ( 2 . 5 μ g / mL 최종 농도 ) , 25 μ L 의 정제 된 C 1 q ( 0 . 01 μ g / mL 최종 농도 ) 및 25 μ L 항 - C 1 q 항체 샘플 ( 산 퀸 ( Sanquin ) , CLB / C 1 q - 85 카탈로그 번호 MW 1828 ; 10 μ g / mL 최종 농도 ) 을 첨가 하 고 , 37 ℃ 에서 1 일 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 세포 생존 율 을 실시 예 8 에 기재 된 바 와 같이 TO - PRO - 3 염색 에 의해 결정 하 였 다 .