단가 CH 3 C 폴리펩티드 의 결합 은 상기 에서 기술 된 과정 의 변형 을 이용 하 여 ELISA 에서 측정 되 었 다 . 스 트 렙 타비 딘 은 96 - 웰 ELISA 플레이트 상 에서 PBS 에서 1 μ g / mL 으로 피복 되 었 다 . 세 척 후 , 상기 플레이트 는 1 % BSA / PBS 로 차단 시키 고 , 그 다음 바 이오티 닐 화 된 인간 또는 cyno TfR 은 1 μ g / mL 로 추가 되 었 으며 , 30 분 동안 항온 처리 되 었 다 . 추가 세척 후 , 폴리펩티드 는 일련 의 희석 으로 이 플레이트 에 추가 되 었 고 , 1 시간 동안 항온 처리 되 었 다 . 상기 플레이트 들 은 세척 되 었 으며 , 2 차 항체 ( 가령 , 항 - 카파 - HRP , 1 : 5 , 000 ) 가 30 분 동안 추가 되 었 고 , 이 들 플레이트 는 다시 세척 되 었 다 . 이 들 플레이트 는 TMB 기질 로 발달시키 고 , 2 N H 2 SO 4 로 ? 칭 되 었 고 , 그 다음 450 nm 에서 BioTek ® 플레이트 판독기 상 에서 흡수도 를 판독 하 였 다 . 결과 는 도 24 에 나타내 며 , 이 는 표준 ( 가령 , 이 가 TfR - 결합 ) 및 단가 TfR - 결합 폴리펩티드 를 직접 적 으로 비교 한다 . Ab 204 는 고친 화력 항 - TfR 대 조군 항체 다 .