구체 적 으로 DiPKSG 1516 D , G 1518 A 및 DiPKSG 1516 R 이외 에 , C - Met 전체 또는 C - Met 의 전체 활성 부위 를 차단 또는 제거 하 기 위해 DiPKS 로 다른 변형 이 도입 된다 : ( a ) 모티프 1 의 GGGSGGGSG 로 의 치환 , ( b ) 모티프 1 에서 Gly 1516 Arg 치환 및 모티프 2 의 GGGSGGGS 로 의 치환 , ( c ) C - Met 도메인 의 활성 부위 에서 3 차 구조 를 차단 하 고 모티프 3 외측 에 있 는 Glu 1634 Ala , 및 ( d ) His 1608 Gln 치환 에 의해 C - Met 도메인 에서 활성 부위 의 차단 . ( a ) 내지 ( d ) 각각 에 대해 코돈 최적 화 된 서열 을 DiPKSG 1516 D , G 1518 A 및 DiPKSG 1516 R 의 발현 과 마찬가지 로 발현 플라스미드 상 의 효모 에 , 베이스 균주 HB 100 으로 도입 했 다 . 각각 의 경우 에 , 올리베 톨 의 생산 이 관측 되 지 않 았 다 . 모티프 1 또는 모티프 2 의 GGGSGGGS 로 의 치환 은 메틸 - 올리베 톨 의 생산 을 제거 했 다 . DiPKSG 1634 A 변이체 를 발현 하 는 효모 의 배양액 이 하나 의 예시 적 인 배치 에서 배양액 의 l 당 2 . 67 mg 의 메틸 - 올리베 톨 을 제공 했 다 . DiPKSH 1608 N 변이체 를 발현 하 는 효모 의 배양액 이 하나 의 예시 적 인 배치 에서 배양액 의 l 당 3 . 19 mg 의 메틸 - 올리베 톨 을 제공 했 다 .