화합물 89 를 메탄올 ( 5 μ l , 1 mM ) 에 용해 시키 고 10 mM NADPH 50 μ l 존재 하 에서 마우스 , 랫 트 또는 사람 간 마이크로솜 ( 50 μ l , 10 mg / ml ) 과 배양 하 였 다 . 포타슘 포스 페이트 완충액 ( 0 . 1 M , pH 7 . 4 ) 을 첨가 하 여 부피 를 500 μ l 로 만들 고 , 5 , 10 , 15 , 30 , 45 , 60 , 90 또는 120 분 간 배양 하 였으며 , 상기 시간 마다 반응 을 종료 시키 기 위해 20 μ l 분취 량 을 50 ng / ml 텔 미사 르 탄 ( 내부 표준 ( IS ) ) 이 함유 된 아 세토 나이트릴 80 μ l 에 옮겨 담 았 다 . 시료 를 13 , 000 g 에서 10 분 간 원심 분리 하 고 LC - MS / MS 분석 을 위해 상층 액 의 200 μ l 분취 액 을 바이알 로 옮겼 다 .