절편 을 실온 에서 30 분 간 1 μ M PIB 의 존재 또는 부재 하 에 50 mM Tris HCl ( pH 7 . 4 ) 중 에서 사전 인 큐 베이 션 하 였 다 . 절편 을 삼중수소 - 표지 된 화합물 ( 1 nM ) 을 함유 하 는 완충액 ( PIB ( 1 μ M ) 를 함유 하 거나 함유 하 지 않 음 ) 에 옮기 고 , 실온 에서 30 분 간 인 큐 베이 션 하 였 다 . 완충액 ( 1 ℃) 중 에서 의 3 회 연속 10 분 세정 및 이어서 증류수 ( 1 ℃) 중 에서 의 급속 세정 에 의해 인 큐 베이 션 을 종결 시켰 다 . 절편 을 팬 앞 에 놓 고 공기 건조 시켰 다 . 건조 된 절편 및 플라스틱 ( plastic ) 삼중수소 표준물 ( 아머샴 ( Amersham ) 마이크 로 스케일즈 ( microscales ) - 3 H ) 을 카세트 의 인광 영상 플레이트 ( 후지 ( Fuji ) ) 와 나란히 놓 고 , 밤새 노출 시켰 다 . 다음 날 아침 , 영상 플레이트 를 후지 인광 영상 화기 ( BAS 2500 ) 상 에서 BAS 판독기 소프트웨어 를 이용 하 여 처리 하 였 다 . 생성 된 영상 을 아이다 ( Aida ) 소프트웨어 를 이용 하 여 TIF 방식 으로 변환 하 고 , 어도비 ( Adobe ) 포토샵 ( Photoshop ) ( v 8 . 0 ) 으로 최적 화 시키 고 , 이미지 ( Image ) - J ( NIH ) 를 이용 하 여 정량 하 였 다 . 엑셀 ( Excel ) 을 이용 하 여 데 이타 를 통계 적 으로 분석 하 였 다 .