293 T 세포 는 형질 감 염시 90 - 95 % 컨 플루언스 ( confluence ) 로 배양 되 었 다 . 0 일 에 , 세포 를 2 ml / 웰 ( 플레이트 당 6 웰 ) 내 에서 1 × 10 e 6 으로 접종 하 고 , 하룻밤 동안 배양 하 였 다 . 세포 는 1 일 에 ~ 90 % 컨 플루언스 에 도달 하 였 다 . 중쇄 및 경쇄 를 암호 화 하 는 벡터 DNA 를 형질 감염 시약 과 혼합 하 였 다 . 1 일 에 , 150 ㎕ 의 무 혈청 OptiMEMtm ( Gibco ) 을 10 ㎕ 의 리포 펙 타민 2000 tm ( Invitrogen ) 과 혼합 하 고 , 5 분 동안 실온 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 ( 파트 A ) . 또 다른 튜브 에서 , 2 . 5 ㎍ 의 각각 의 벡터 DNA ( 중쇄 및 경쇄 ) 를 혼합 하 고 ( 파트 B ) 그 후 150 ㎕ 의 무 혈청 OptiMEMtm 이 첨가 되 었 다 . 파트 A 및 파트 B 를 이후 부드럽 게 혼합 하 고 , 실온 에서 20 분 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 형질 감염 시약 을 이후 2 ml 세포 배양 배지 내 에 세포 와 함께 웰 내 에 직접 첨가 하 였 다 . 세포 배양 상등 액 을 48 시간 후 수확 하 였 다 .