이후 , 각각 놉 SEQ ID NO : 16 및 야생 형 경쇄 LC SEQ ID NO : 14 를 갖 는 < VEGF > G 6 - 31 중쇄 HC , 및 홀 SEQ ID NO : 15 및 개질 된 경쇄 * LC * ( SEQ ID NO : 8 ) 를 갖 는 개질 된 VL - VH / CL - CH 1 교환 < ANGPT > 중쇄 * HC * 를 코딩 하 는 4 개 의 플라스미드 를 Quad 발효기 에서 2 . 6 L 규모 로 , 상기 기재 된 바 와 같이 HEK 293 - F 시스템 에서 일시 적 트랜스펙션 에 의해 등 몰 비율 로 공동 - 발현 시켰 다 . HiTrap MabSelect 컬럼 ( GE ) , 이후 상기 기재 된 바 와 같이 HiLoad Superdex 200 26 / 60 컬럼 ( GE ) 상 에서 의 크기 배제 크로마토그래피 를 통해 항체 를 정제 하 였 다 . SEC 후 의 수율 은 2 L 일시 적 발현 으로부터 약 38 mg 의 정제 된 항체 분획 의 범위 내 에 있 었 다 . 도 26 은 정제 동안 수득 된 크기 배제 분획 의 환원 및 비 환원 된 SDS - PAGE 를 나타낸다 . 환원 된 SDS - PAGE 에서 는 각각 의 야생 형 및 개질 된 중쇄 및 경쇄 가 균질 하 게 합성 되 고 정제 되 었 다는 것 을 관찰 할 수 있 었 다 . 그러나 , 비 환원 된 SDS - PAGE 에서 는 여전히 여러 항체 종류 가 존재 한다는 것 이 명백 하 였 다 .