mRNA 가 출발 물질 로 이용 되 는 경우 , 역전사 단계 가 증폭 전 에 필요 로 하 며 , 역전사 단계 의 상세 한 내용 은 Joseph Sambrook , 등 , Molecular Cloning , A Laboratory Manual , Cold Spring Harbor Laboratory Press , Cold Spring Harbor , N . Y . ( 2001 ) 및 Noonan , K . F . et al . , Nucleic Acids Res . 16 : 10366 ( 1988 ) 에 개시 되 어 있 다 . 역전사 단계 에서 , mRNA 의 폴리 A 테일 에 혼성 화 되 는 올리 고 뉴클레오타이드 dT 프라이머 가 이용 된다 . 올리 고 뉴클레오타이드 dT 프라이머 는 dTMPs 로 이루어져 있 고 , dT 프라이머 가 프라이머 로서 작용 할 수 있 는 한도 내 에서 dTMPs 중 하나 또는 그 이상 은 다른 dNMPs 로 대체 될 수 있 다 . 역전사 단계 는 RNase H 활성 을 갖 는 역전사 효소 에 의해 이루어질 수 있 다 . RNase H 활성 을 갖 는 효소 를 이용 하 는 경우 , 반응 조건 을 주의 하 여 선택 하 면 개별 적 인 RNase H 절단 과정 을 피할 수 있 다 .