최종 면역 화 5 일 후 , 비장 세포 ( 5 x 106 / ml ) 를 10 % FBS , 2 mM 글루타민 , 2 OmM HEPES 완충제 , 100 단위 / ml 페니실린 , lOO ㎍/ ml - 1 스트렙토마이신 및 10 - 5 M 2 - 머 캅 토 에탄올 을 포함 하 는 2 ml 의 RPMI - 1644 중 24 - 웰 플레이트 , 37 ℃ 에서 동계 ( syngeneic ) 의 , 조사 된 ( 20 Gy ) , 펩타이드 - 펄스 리포 폴리 사카 라이드 ( LPS ) 블라스트 ( 0 . 5 내지 1 x 106 세포 / ml ) 와 함께 배양 하 였 다 . LPS 블라스트 를 비장 세포 ( 1 . 5 x 106 세포 / ml ) 를 25 ㎍/ ml LPS ( Sigma ) 및 7 ㎍/ ml 덱스트란 설 페이트 ( Pharmacia , Milton Keynes , UK ) 로 3 일 간 37 ℃ 에서 활성 화 함 으로써 수득 하 였 다 . 사용 전 에 , 2 x 107 LPS 블라스트 를 100 ㎍/ ml 합성 펩타이드 와 1 시간 동안 배양 하 였 다 . 배양액 을 51 Cr - 방출 분석법 으로 6 일 째 에 세포독성 활성 에 대하 여 분석 하 였 다 .