상기 한국 에서 채취 된 S 1 내지 S 6 의 샘플 시료 는 RNAiso Plus 시약 ( Takara , Japan ) 을 사용 하 여 상기 SBV 감염 된 성인 꿀벌 의 RNA 를 추출 하 였 고 , 제 조사 의 지시 에 따라 절차 를 진행 했 다 . 침전물 과 건조 된 RNA 를 RNase 가 없 는 물 100 μ l 에 녹였 다 . 추출 된 RNA 의 농도 는 Biophotometer ( Eppendorf , Germany ) 를 사용 하 여 측정 하 였 고 , 100 ng / μ l 로 희석 하 여 RT - PCR 로 SBV 검출 에 사용 하 였 다 . 이때 시료 에서 추출 한 total RNA 를 All SBV genotypes 범용 프라이머 쌍 ( SBVD - F 1 / SBVD - R 1 ) 을 사용 하 여 50 ℃ 에서 5 분 간 RT - PCR 을 통해 cDNA 를 합성 하 였 다 . 상기 표 2 에 도시 된 프라이머 쌍 을 사용 하 여 genotyping PCR 을 하 기 표 3 과 같 은 조건 으로 수행 하 였 다 .