이 를 위해 우선 본 발명자 들 은 Dip and ReadTM Amine Reactive 2 nd Generation ( AR 2 G ) Reagent Kit ( forteBio , Cat No . 18 - 5092 ) 를 이용 하 여 96 플레이트 에 IL - 10 R His - tag 단백질 을 부착 시켰 다 . 구체 적 으로 , 96 웰 플레이트 에 D . W . 200 μ l 를 분주 한 후 , 상기 키트 에 포함 된 amine biosensor 를 꽂 아 10 분 동안 수화 시켰 다 . 이 어 , D . W . 200 μ l 를 추가 로 분주 한 후 , 필요 한 시료 양 의 1 / 20 로 EDC : NHS 를 1 : 1 로 혼합 한 후 , D . W . 에 희석 하 여 96 웰 플레이트 에 200 μ l 씩 분주 하 였 다 . 이 어 , IL - 10 R His - tag 단백질 을 10 mM acetate pH 5 . 0 용액 에 10 μ g / ml 이 되 도록 희석 한 후 상기 96 웰 플레이트 에 200 μ l 씩 첨가 하 였 다 . 이후 , 1 M 에탄올아민 을 200 μ l 씩 96 웰 플레이트 에 첨가 한 후 , Biosensor 플레이트 와 샘플 플레이트 를 Octet 　 K 2 기기 에 넣 고 측정 하 였 다 . 측정 이 끝난 후 샘플 플레이트 에 1 x Kinetics 완충액 을 200 μ l 를 첨가 한 후 , 기저 값 ( baseline ) 을 정하 였 다 . 이후 , 본 발명 의 일 실시 예 에 따라 제조 된 융합 단백질 ( Fc ε RI α - NTIG - IL - 10 Vm ) , 그리고 대 조군 으로 사용 된 NTIG - IL - 10 V 및 NTIG - IL - 10 Vm 융합 단백질 을 각각 다양 한 농도 ( 0 , 62 . 5 , 125 , 250 , 500 및 1 , 000 nM ) 로 1 x Kinetic 완충액 에 희석 한 후 샘플 플레이트 에 200 μ l 로 분주 한 후 , Octet 　 K 2 기기 로 BLI 분석 을 수행 하 여 결합력 을 측정 하 였 다 .