총 RNA 는 Easy - blue RNA 추출 시약 ( Intron , Korea ) 을 이용 하 여 폐 샘플 에서 추출 하 였 다 . 상기 추출 된 RNA ( 1 μ g ) 는 42 ℃ 에서 1 시간 동안 역전사 하 고 다음 의 프라이 머들 을 이용 하 여 PCR 로 증폭 하 였 다 : 마우스 에 대한 BLT 2 , 5 '- CAGCATGTACGCCAGCGTGC - 3 ' ( 센스 ) 및 5 '- CGATGGCGCTCACCAGACG - 3 ' ( 안티 센스 ) ; 및 마우스 에 대한 BLT 1 , 5 '- GCATGTCCCTGTCTCTGTTG - 3 ' ( 센스 ) 및 5 '- CGGGCAAAGGCCTTAGTACG - 3 ' ( 안티 센스 ) . 전사 의 반정량 적 분석 을 위해 , 본 발명자 들 은 먼저 GAPDH ( glyceraldehyde - 3 - phosphate dehydrogenase ) 의 선형 증폭 ( linear amplification ) 에 의해 최적 PCR 조건 을 결정 하 였 다 . 그 후 에 , 28 사이클 이 BLT 증폭 에 사용 되 었 으며 선형 범위 ( linear range ) 에 있 는 것 으로 확인 하 였 다 . 상기 증폭 된 PCR 산물 은 1 . 2 % 아가 로즈 겔 상 에서 분리 하 여 에티듐 브로마이드 ( ethidium bromide ) 로 염색 하 였 다 .