리조 포스 오 라 이제 배양액 50 ml 를 4 ℃ 에서 10 , 000 rpm 으로 15 분 원심 분리 하 여 세포 를 제거 하 였 다 . 리파아제 가 포함 되 어 있 는 상등 에 4 ℃ 에서 6 시간 동안 60 % ( g / v ) 의 암모늄 설 페이트 ( ammonium sulfate ) 을 가하 여 리파아제 를 침전 시켰 다 . 이 를 4 ℃ 에서 10 , 000 rpm 으로 15 분 원심 분리 하 여 상등 액 을 제거 하 였 다 . 침전 된 리파아제 를 다시 0 . 05 M 인산염 완충액 ( phosphate buffer , pH 7 . 0 ) 10 ml 에 녹여 리파아제 수용액 을 제조 하 였 다 . 한외 여과 ( Ultrafiltration ) 를 이용 하 여 이 용액 에 염 을 포함 한 단백질 이외 의 물질 을 제거 하 여 리파아제 가 부분 정제 된 용액 을 수득 하 였 다 .