다음 에 , 당해 PCR 튜브 를 95 ℃ 로 10 분 간 가열 하 고 , 70 ℃ 까지 급속 하 게 냉각 하 여 , 그 온도 로 10 분 간 보온 하 였 다 . 또한 , 이것 을 50 ℃ 까지 냉각 하 여 10 분 간 보온 하 고 , 다음 에 37 ℃ 로 10 분 간 보온 한 후 , 실온 으로 되돌림 으로써 , 5 ’ 말단 비오틴 표식 올리 고 뉴클레오티드 와 올리 고 뉴클레오티드 의 결합체 의 형성 을 촉진 하 였 다 .