체외 수정 을 위하 여 , 2 에서 제조 한 500 μ l 액상 정액 을 취하 여 실온 의 TL - HEPES - PVA 5 ml 를 넣 고 잘 섞 은 후 800 xg 에서 3 분 간 원심 분리 하 였 다 . 상층 액 만 을 버린 뒤 TL - HEPES - PVA 를 넣 고 섞 은 뒤 다시 원심 분리 하 고 상층 액 을 버린 뒤 실온 의 체외 수정 배지 mTBM 로 희석 하 여 잘 섞 었 다 . 위 에서 제조 한 체 외수 정배지 에 있 는 난자 에 정자 의 농도 가 1 × 106 sperm / ml 가 되 도록 넣 은 뒤 38 . 5 oC , 5 % CO 2 의 항온기 에서 6 시간 동안 공배 양하 였 다 .