먼저 , 완충액 ( 50 mM Tris , pH 7 . 4 ; 120 mM NaCl , 5 mM KCl ) 중 4 ℃ 에서 hSERT 및 방사능 리간드 ( 방사능 표지 된 - 시험 화합물 ) 를 발현 하 는 막 표본 의 30 분 인 큐 베이 션 동안 방사능 리간드 / hSERT 복합체 가 형성 된다 . 방사능 리간드 는 방사능 리간드 에 대한 Kd 값 의 대략 10 배 의 농도 에서 존재 한다 ( Kd 값 은 동일 한 완충액 에서 미리 측정 되 었 음 ) .