웨스턴 블롯 방법 은 다음 과 같이 수행 되 었 다 . Mini - PROTEAN ® TGXTM Precast Gels 에 15 ㎕/ well 을 넣 어 전기영동 을 진행 ( 85 V 에서 10 분 , 110 V 에서 50 분 ) 한 뒤 , 단백질 을 PVDF membrane 으로 transfer 하 였 다 ( 35 V , 18 시간 ) . Membrane 은 5 % skim milk 로 blocking ( 상온 , 1 시간 ) 한 다음 1 차 항체 ( p - LRRK 2 , LRRK 2 , GAPDH ) 에 넣 어 반응 시켰 다 ( 4 ℃, 18 시간 ) . 1 차 항체 를 TBST buffer 로 세척 하 고 , 2 차 항체 ( Goat anti - rabbit IgG - HRP ) 에 넣 어 반응 시킨 후 ( 상온 , 2 시간 ) TBST buffer 로 세척 하 였 다 . Membrane 을 SuperSignalTM West Pico Chemiluminescent Substrate 에 반응 시킨 다음 LAS 4000 으로 검출 하 였 다 .