또한 , 두 변이 가 동시 에 도입 되 었 을 때 영향 성 을 보 기 위해 두 변이 가 도입 된 벡터 를 제작 하 였 다 . 제작 된 pDZ - purA ( c 143 t ) 를 백본 ( backbone ) 으로 하 여 위치 선택 적 돌연변이 ( Site - directed mutagenesis ) 를 수행 하 였 다 . 구체 적 으로 는 , 서열 번호 24 과 서열 번호 25 의 프라이머 를 이용 하 여 PCR 을 수행 하 였 고 , 이때 94 ℃ 에서 30 초 의 변성 ( denaturation ) , 55 ℃ 에서 30 초 의 어닐링 ( annealing ) , 및 68 ℃ 에서 12 분 의 연장 ( extension ) 과정 을 포함 하 며 , 상기 과정 들 은 18 회 반복 수행 되 었 다 . 그 결과 얻 어 진 산물 을 DpnI 처리 후 , DH 5 α 에 형질 전환 하 여 pDZ - PpurA ( c 143 t , a 189 t ) - purA 벡터 를 획득 하 였 다 .