Vero cell 을 각 웰 당 1 . 2 × 104 세포 를 4 mM L - Glutamine 및 1ⅹ Antibiotic - Antimycotic 가 포함 된 Opti - PRO ™ SFM 에 담 아 블랙 , 384 - 웰 , 마이크 로 클리어 플레이트 ( Clear plates , Greiner bio - one , Kremsmunster , Austria ) 에 분주 하 였 다 . 24 시간 후 , 저 분자 화합물 을 바이러스 감염 전 에 automated liquid handling system ( Apricot Designs , Covina , CA ) 을 사용 하 여 각 웰 에 첨가 하 였 다 . 실험 화합물 의 최종 농도 에서 용매 DMSO 의 농도 는 0 . 5 % 로 유지 하 였 다 . 화합물 이 처리 된 BL - 3 봉쇄 실 로 옮겨진 후 0 . 0625 MOI 의 MERS - CoV 에 감염 되 었 다 . 감염 후 24 시간 에 PFA 를 사용 ( 최종 PAF 농도 = 4 %) 하 여 감염 을 고정 하 였 다 . 항 - MERS - CoV spike 항체 를 고정 된 세포 에 처리 한 후 Alexa Fluor 488 goat anti - rabbit IgG 및 Hoechst 33342 를 사용 하 여 염색 하 였 다 . 감염 된 세포 의 고정 및 염색 후 20 × 배율 의 형광 이미 징 시스템 ( Perkin Elmer Operetta , 20 × , Waltham , MA ) 상 에서 이미지 화 하 였 다 . 저 분자 화합물 이 처리 된 세포 의 MERS - CoV 에 대한 감염 률 은 각 플레이트 상 에 있 는 음성 대 조군 ( 0 % 감염 억제 율 ) 및 양성 대 조군 ( 100 % 감염 억제 율 ) 으로 하 여 환산 되 었 다 .