또한 멜 란 - 에 이 세포주 를 confocal dish 에 2 x 104 cells / ml plating 하 여 24 시간 동안 세포 를 증식 시킨 후 PBS 로 세척 하 여 세포 에 있 는 FBS 을 완전히 제거 하 고 4 % paraformaldehyde 로 15 분 간 고정 한 후 0 . 1 % Triton X - 100 을 이용 하 여 5 분 간 permeabilization 을 수행 하 였 다 . 이어서 1 % BSA 를 이용 하 여 30 분 간 상온 에서 blocking 을 수행 한 후 4 ℃ 에서 1 차 antibody 용액 에 인 큐 베이 션 ( incubation ) 한 상태 로 하룻밤 을 수행 하 였 다 . Fluorescence - conjugated 2 차 antibody 를 상온 에서 2 시간 인 큐 베이 션 한 후 에 DAPI ( 0 . 5 μ g / ml ) 를 반대 염색 을 시켜 준 후 콘 포 칼 현미경 을 이용 하 여 이미지 를 촬영 하 였 다 . 그 결과 는 도 3 에 기재 되 어 있 다 . 작두콩 추출물 로부터 분리 동정 된 카페 오일 말 릭 산 20 , 40 , 60 μ M 처리 에 따라 농도 의존 적 으로 MyosinVa 단백질 발현 이 감소 되 는 것 을 확인 하 였 다 .