실시 예 1 에서 분리 된 개 로타바이러스 GC / KS 05 를 MA 104 세포 에 접종 하 여 5 회 계대 배양 하 였 다 . 계대 배양 은 10 % FBS 가 보충 된 α - MEM 배지 로 37 ℃ 에서 12 시간 배양 한 MA 104 세포 를 멸균 한 PBS 로 3 회 세척 한 후 , 개 로타바이러스 GC / KS 05 를 접종 하 고 1 시간 동안 흡착 시키 고 , 그 후 5 ㎍/ ml 의 트립신 이 함유 된 α - MEM 배지 를 첨가 하 여 3 내지 4 일 간 배양 시켰 다 . 게놈 dsRNA 를 TRIzol 시약 ( Invitrogen ) 을 이용 하 여 감염 된 MA 104 세포 들 및 배설물 시료 로부터 총 RNA 를 추출 하 였 다 . 추출 된 RNA 를 30 ㎕ 의 디 에 틸 피로 카르보 네이트 ( DEPC ) - 처리 된 탈 이 온수 에 재현 탁 시키 고 , - 70 ℃ 에 보관 하 였 다 .