원 하 는 광학 밀도 에 도달 할 때 까지 BHI 에서 Aa 를 혐기 적 으로 성장 시켰 다 . 박테리아 배양 상청 액 은 4 ℃ 에서 15 분 동안 6000 g 에서 원심 분리 하 여 수집 하 였으며 , 수집 된 상청 액 을 0 . 22 mm 기공 필터 ( MilliporeSigma ) 를 통해 여과 하 여 남 은 박테리아 를 제거 한 후 , 이어서 MasterFlex L / S 완전 펌프 시스템 ( Cole - Parmer , VernonHills , IL , USA ) 및 Pellicon 2 mini 한외 여과 모듈 ( MilliporeSigma ) 로 한외 여과 를 수행 하 였 다 . OMV 는 제조사 의 프로토콜 에 따라 ExoBacteria OMV Isolation Kits ( SBI , PaloAlto , CA , USA ) 를 사용 하 여 여과 및 농축 된 상청 액 으로부터 수득 하 였 다 . 단리 된 OMV ( 50 μ l ) 를 1 μ l 의 RNaseA ( 1 U / μ l ; Thermo Fisher Scientific , Waltham , MA , USA ) 및 DNase I ( 2 U / μ l ; ThermoFisher Scientific ) 로 1 ml 의 OMV 로 처리 하 고 37 ℃ 에서 25 분 동안 배양 하 였 다 . ExoBacteria OMV 분리 키트 를 사용 하 여 OMV 를 다시 정제 하 였 다 .